紫红笛鲷与红鳍笛鲷5种同工酶的比较研究

采用聚丙烯酰胺垂直平板梯度凝胶电泳的方法,对紫红笛鲷和红鳍笛鲷8种组织中的5种同工酶(EST,LDH,MDH,ME,POD)进行比较研究,对所研究的5种同工酶在两种鱼的组织分布、位点表达及活性作了分析和总结。试验结果表明:两种鱼的ME、MDH同工酶谱非常相似,只在活性上略有差异;EST、LDH、POD等的酶谱表达带型和活性不同,这些酶可作为紫红笛鲷和红鳍笛鲷的遗传鉴定标记,能够将亲缘关系很近的这两种鱼区分开来,从而为形态分类学提供生化依据。     

红鳍笛鲷的人工繁育

红鳍笛鲷属鲈形目、笛鲷科鱼类,又称红笛鲷,广东地方俗称红鱼、红鸡,福建地方俗称：红曹,台湾地方俗称：横笛鲷、赤海鸡、红鸡仔、红沙鱼等。     

间断性投喂三种复方中草药对施氏鲟生长及免疫功能的影响

以刺五加、藿香、党参和五味子组成中草药复方一(添加量0.4g/kg);茵陈、大黄、黄芩等组成复方二(0.75g/kg);贯众、大青叶、板蓝根、紫草根等组成复方三(1.86g/kg),水煎剂拌饲。在水温(15.5±1)℃下,将体质量(115±4)g的施氏鲟Acipenser schrencki Brandt饲养于室内半径为1m的圆形水泥池中2.5个月,饲养试验期间每月前15d投喂上述药饵,后15d投喂基础饲料,对照组全程投喂基础饲料,日投喂量为2%,并于试验第16d、46d和76d测定鱼体质量、血清、肝脏、脾脏及头肾中免疫酶的活性,探讨三个中药复方对施氏鲟生长及免疫功能的影响。结果表明:3组中草药均能促进施氏鲟生长,与对照组相比,复方Ⅱ组促进施氏鲟生长显著(P0.05)。实验第16d,复方Ⅰ和Ⅲ组中草药可显著提高施氏鲟头肾中溶菌酶(LZM)、碱性磷酸酶(AKP)和过氧化氢酶(CAT)的活性(P0.05),复方Ⅱ组和Ⅲ组施氏鲟脾脏中AKP及血清中CAT活性显著提高(P0.05);实验第46d,复方Ⅰ和Ⅲ组施氏鲟脾脏和头肾中LZM、AKP和CAT活性、血清中AKP活性及复方Ⅰ组肝脏中AKP活性显著提高(P0.05);实验第76d,复方Ⅰ和Ⅱ组施氏鲟肝脏中AKP活性和脾脏中LZM活性及复方Ⅱ组施氏鲟脾脏中CAT活性显著提高(P0.05)。综合比较,中草药复方Ⅱ在间断性给药方式下提高施氏鲟生长及免疫能力的效果较好。     

溶藻弧菌鞭毛蛋白flaC基因DNA疫苗对红笛鲷的免疫保护研究

为研究溶藻弧菌鞭毛蛋白flaC基因DNA疫苗对红笛鲷的免疫保护作用,实验构建了重组真核表达质粒pcDNA-flaC并将该质粒肌肉注射红笛鲷,采用PCR、RT-PCR、ELISA和攻毒试验等方法检测了该真核表达质粒在红笛鲷组织内的分布、表达和对红笛鲷的免疫保护.PCR结果显示,免疫接种7和28 d,注射点周围肌肉、鳃、肾脏、肝脏和脾脏都存在质粒分布;RT-PCR结果显示,免疫接种后第7天、14天和28天,红笛鲷不同组织内均有目的基因表达.ELISA结果表明,鱼血清内产生了抗FlaC蛋白的抗体,表明DNA疫苗免疫后鱼体表达了目的蛋白,并诱导产生了相应抗体.攻毒实验表明,免疫后的红笛鲷能较好地抵抗致病性溶藻弧菌的感染.结果表明,质粒pcDNA-flaC可能是抵抗溶藻弧菌感染的有效的疫苗候选物.     

红鳍笛鲷(♀)×千年笛鲷(♂)子一代杂种优势的微卫星标记分析

利用12对微卫星引物对红鳍笛鲷(♀)、千年笛鲷(♂)及其红鳍笛鲷(♀)×千年笛鲷(♂)子一代(F1)3个群体进行扩增,对3个群体的等位基因频率、群体多态信息含量、有效等位基因数、杂合度、Shannon信息指数及群体间遗传距离进行了遗传检测,共检测到29个等位基因,平均每个基因座位2.4167个等位基因。红鳍笛鲷、F1、千年笛鲷3个群体的多态信息含量分别为0.3484、0.5008、0.4097;有效等位基因数分别为1.9787、2.5074、2.1334;杂合度分别为0.6548、1.0000、0.7384;Shannon信息指数分别为0.6207、0.9240、0.6957。红鳍笛鲷(♀)-F1、F1-千年笛鲷(♂)、红鳍笛鲷(♀)-千年笛鲷(♂)的遗传距离分别为0.3116、0.2346、0.7813。多态信息含量、有效等位基因数、杂合度、Shannon信息指数均显示F1代有杂种优势。     

红鳍笛鲷人工繁殖及育苗技术研究

利用海水土池或网箱养殖3龄以上的红鳍笛鲷成鱼,于催产前二个月进行强化培育.在水温达到18～24℃时,用HCG和LRH-A2或LRH-A3进行催产,混合或单一使用,剂量视亲鱼成熟度而定.受精卵在盐度28～30.2,水温18～22℃,pH值8.2的环境中经15～16h孵化.开口仔鱼在土池水温26.5～30.2℃,盐度18～24,pH值7.8～8.8的条件下,经26～30d培育,完成变态发育进入幼鱼期.     

复方中草药对虹鳟生长和非特异性免疫功能的影响

将20∶1的红枣、黄芪和山药提取物等比例混合成复合物,按照质量分数分别为0％(对照组)、0.3％、0.6％和1.2％的比例加入到基础饲料中制成复合中草药饲料,投喂给饲养在冷水鱼循环系统中直径1 m×高1 m饲养缸中、体长7.6～8.9 cm的虹鳟Oncorhynchus mykiss,在水温11～15℃下,探讨复方中草...     

红鳍笛鲷(♀)与千年笛鲷(♂)杂交F1代及其亲本的核型研究

采用胸腔活体注射PHA及秋水仙素溶液,取头肾细胞,低渗处理,空气干燥法制片,对染色体进行Giemsa染色,研究红鳍笛鲷(♀)与千年笛鲷(♂)杂交F1代及其亲本的核型。结果表明,杂交F1代及其亲本(红鳍笛鲷和千年笛鲷)的核型相同,均为2 n=48 t,NF=48,符合遗传理论。     

红笛鲷和卵形鲳鳗鳃的扫描电镜观察与功能探讨

对两种鲈形目鱼类红笛鲷Lutjanus erythopterus和卵形鲳碜Trachinotus ovatus的鳃结构进行扫描电镜观察。结果表明，红笛鲷和卵形鲳够鳃的表面结构和微细结构与其他硬骨鱼类基本相似，鳃丝表面都具有规则或不规则分布的环形微嵴、沟、坑、孔等结构。红笛鲷的中部鳃丝表面一部分较为平坦，基部鳃丝表面则凹凸不平。红笛鲷的鳃小片高度要较卵形鲳够鳃小片高。红笛鲷和卵形鲳够鳃上皮的几种细胞的形态结构及数量分布存在细微的差异。红笛鲷鳃上的扁平上皮细胞界限清楚，而卵形鲳够鳃上扁平上皮细胞表面遍布不规则的微嵴，细胞界限模糊。红笛鲷鳃丝表面的氯细胞数量多于卵形鲳够，这可能与两种鱼对生活环境、生活习性的长期演变相关。     

饥饿和恢复投喂对红鳍笛鲷生化组成的影响

在水温23~26℃条件下,对红鳍笛鲷进行不同时间的饥饿处理后,再进行恢复投喂试验,研究其生化组成的变化。试验结果表明:饥饿过程中,红鳍笛鲷肌肉(白肌)和肝脏的水分含量增加;肌肉的蛋白、脂肪含量下降;而肝脏的蛋白含量先上升后下降,脂肪含量增加,糖原含量显著下降。恢复投喂结束后,各项生化指标含量均恢复到对照组水平。     

中草药饲料添加剂的免疫功能与应用前景

本文从具有免疫功能的中草药饲料添加剂种类、中草药饲料添加剂的免疫机理和影响中草药饲料添加剂免疫调节的因素三个方面探讨中草药的免疫功能，以期对生产实践中中草药饲料添加剂的开发利用有所指导。     

红笛鲷和卵形鲳鲹鳃的扫描电镜观察与功能探讨

对两种鲈形目鱼类红笛鲷Lutjanus erythopterus和卵形鲳(鱼参) Trachinotus ovatus的鳃结构进行扫描电镜观察。结果表明,红笛鲷和卵形鲳(鱼参)鳃的表面结构和微细结构与其他硬骨鱼类基本相似,鳃丝表面都具有规则或不规则分布的环形微嵴、沟、坑、孔等结构。红笛鲷的中部鳃丝表面一部分较为平坦,基部鳃丝表面则凹凸不平。红笛鲷的鳃小片高度要较卵形鲳(鱼参)鳃小片高。红笛鲷和卵形鲳(鱼参)鳃上皮的几种细胞的形态结构及数量分布存在细微的差异。红笛鲷鳃上的扁平上皮细胞界限清楚,而卵形鲳(鱼参)鳃上扁平上皮细胞表面遍布不规则的微嵴,细胞界限模糊。红笛鲷鳃丝表面的氯细胞数量多于卵形鲳(鱼参),这可能与两种鱼对生活环境、生活习性的长期演变相关。     

复方中草药对彭泽鲫促生长作用的研究

用0 5%、1 0%和1 5%3种质量分数的复方中草药添加于彭泽鲫的基础日粮中,以研究其促生长效能及其最佳添加量。结果表明:复方中草药以1 0%、1 5%配比能显著增强彭泽鲫的生长性能(P<0 05),试验组和对照组的相对增重率分别为106 39%、117 41%、113 73%和98 54%,饲料系数比对照组分别提高了5 29%、13 66%和12 33%。本复方中草药的最佳添加量为1 0%。     

红笛鲷头肾消减cDNA文库的构建与分析

应用抑制性消减杂交技术(SSH)构建红笛鲷(Lutjanus sanguineus)头肾消减cDNA文库,筛选红笛鲷免疫相关基因的EST.以哈氏弧菌(Vibrio harveyi)灭活疫苗体内诱导红笛鲷为实验组,以注射无菌生理盐水的红笛鲷为驱动组,通过SSH技术构建红笛鲷头肾消减.DNA文库.利用PCR技术和斑点杂交对文库进行筛选,从2 424个含插人片段的阳性克隆中筛选了680个克隆在上海生工进行了序列测定.使用BLASTx和BLASTn工具对获得的ESTs与GenBank数据库进行同源性比较并根据相似性序列的名称通过GO法对ESTs进行注释.结果获得了30个与红笛鲷免免疫防御相关基因的EST,如组织相容性抗原复合物基因(MHC I和MHCII),免疫球蛋白基因(IgH和IgL)、热休克蛋白基因(HSP10,HSP70和HSP90)等.本研究构建了哈氏弧菌灭活疫苗免疫后与正常组织差异表达的消减cDNA文库,并获得一批与红笛鲷免疫防御相关的ESTs,旨在为探讨红笛鲷分子免疫防御机制、筛选参与免疫防御调控相关的功能基因,揭示红笛鲷免疫抗病机制、提高机体抗病力、实现遗传改良奠定基础.     

红笛鲷肌肉中三种性腺激素残留的分析

采用放射免疫分析法测定了养殖红笛鲷与野生红笛鲷肌肉中雌二醇、孕酮、睾酮三种性腺激素残留量。结果表明,在养殖红笛鲷与野生红笛鲷肌肉中均检出三种激素,养殖红笛鲷肌肉中三种性腺激素的残留量分别是野生红笛鲷的5.39、2.43、4.40倍;野生红笛鲷中的激素残留量较低,但仍能被检出,可能与环境激素有关。实验结果提示,放射免疫分析法可作为水产品中激素残留量的有效检测手段。     

红鳍笛鲷网箱养殖风险防范对策及经济效益分析

本文从红鳍笛鲷的生态习性、病害防治及市场风险三方面提出其在福建省东南部、广东东北部海域进行网箱养殖的风险防范对策:准确把握市场供求信息,在红鳍笛鲷的适宜生长温度范围18.0～33.0℃投放一定数量体长5.0cm以上鱼苗,每日投喂2～3次,日投喂量为鱼体重的5.0～7.0%,养殖过程中严格日常管理,及时发现及防治病害.作者于2004～2006年在厦门浏五店海域开展试验,经170天养殖可达商品??(450g以上),成活率85.3～91.5%,利润率18.8～72.1%.     

千年笛鲷幼鱼的饥饿和补偿生长

研究了在22.5～31.9 ℃条件下,千年笛鲷幼鱼在不同饥饿时间（0、2、4、6、9、11 d）处理后再投喂的补偿生长。千年笛鲷幼鱼的体重在短时间（2～6 d）的饥饿后下降不大,9 d以上的饥饿可导致幼鱼的体重明显下降。经过饥饿11 d后,鱼体蛋白质含量明显下降,脂肪含量略有下降,灰分含量有所上升,水分含量明显上升,表明千年笛鲷幼鱼在饥饿过程中主要依靠消耗蛋白质作为能量来源。恢复投喂后,各组的鱼体生化组成均恢复到对照组水平。饥饿11 d组鱼在恢复投喂后全部死亡,半致死时间为10～11 d。结果表明：饥饿2 d组的千年笛鲷幼鱼在恢复生长过程中具有超补偿生长能力,该补偿现象通过提高食物转化率达到;饥饿4 d组幼鱼具有完全补偿生长能力;饥饿6 d组幼鱼仅有部分补偿生长能力;饥饿9 d组幼鱼不具有补偿生长能力;饥饿11 d组幼鱼为饥饿致死。图5表1参13     

饥饿与恢复投喂对红鳍笛鲷血液生化指标的影响

对红鳍笛鲷(Lutjanus erythopterus)进行不同时间的饥饿处理后恢复投喂，研究其血液生化指标的变化。结果表明饥饿4周后，血糖、血脂含量均下降，而血蛋白含量则维持较恒定的水平。其中，血糖含量在饥饿第1周后就显著降低，而血脂含量在饥饿第2周后显著下降，二者下降趋势均持续到饥饿第4周。恢复投喂8周后，血糖、血脂含量均上升，血蛋白含量仍保持较恒定的水平。其中，血糖、血脂分量在恢复投喂8周舌均恢复到对照组水平。     

果寡糖和糖萜素对中华鳖生长性能及免疫功能的影响

选用2龄平均体重150g左右的中华幼鳖54只，按2因素4水平的正交试验设计，随机分成9组，每组各接受1种处理。第9处理组（FOS=1000mg/kg，SHP=1000mg/kg）日增重量大（1.75g），第1处理组（FOS=200mg/kg，SHP=200mg/kg）最小；第9处理组饲料系数最低（1.80），第1处理组最高（2.13）。第8处理组（FOS=1000mg/kg,SHP=600mg/kg）胸腺最重（0.26g），第1处理组最低（0.21g）。脾脏的变化趋势与胸腺相似。第8处理组胸腺指数最大（1.13），第1处理组最低（0.98），而脾脏指数变化趋势与胸腺指数相似，果寡糖和糖萜素适宜添加量为600-1000mg/kg。     

复方中草药对青虾免疫功能的影响

将大黄、黄芩、党参、板蓝根等十余味中草药粉碎过筛后制成复方添加剂按1%、2%、3%的比例添加于基础饲料中制成颗粒药饵投喂青虾,测定青虾相关免疫指标的变化。结果表明,青虾血细胞吞噬百分比和吞噬指数、血清溶菌酶活力均显著提高。经嗜水气单胞菌攻毒后,各试验组的免疫保护率也明显提高。在各试验组中以2%的添加量的效果最好。试验证明,该添加剂可显著地提高青虾的免疫功能,能有效地预防嗜水气单胞菌的感染。