菊花2个品种高效再生体系的建立

以地被菊花2个品种‘铺地金’和‘北林红’的叶片为外植体,以MS为基本培养基,以不同浓度配比的6-BA,NAA为生长调节物质进行离体培养,直接分化出不定芽获得再生植株.试验表明:‘铺地金’叶片外植体再生的最适培养基为MS 6-BA 2.0 mg/L NAA 1.0 mg/L,再生率高达96%,其叶柄在此培养基上的再生率为90%;‘北林红’再生的最适宜培养基为MS 6-BA 1 mg/L NAA 0.5 mg/L,再生率为96%,但其茎段和叶柄在此培养基上不能高效再生.‘铺地金’腋芽增殖的最佳培养基为MS 6-BA 0.5 mg/L NAA 0.01 mg/L,每腋芽外植体平均增殖不定芽数达到5.5个.‘北林红’腋芽增殖的最佳培养基为MS 6-BA 0.5 mg/L NAA 0.05mg/L和MS 6-BA 0.5mg/L NAA 0.01mg/L,腋芽外植体平均增殖不定芽数达到6.3个和5.6个,二者之间的差异不显著.     

开封菊花的部分品种的外植体再生体系的研究

以河南开封本地的菊花品种的叶片,茎段和茎尖为外植体,在配比不同浓度的生长调节素NAA和6-BA的MS基本培养基上诱导培养,通过外植体直接培养的途径获得再生植株,通过比较,获得了能够形成大量的,稳定的再生植株。通过不同品种的再生频率的比较,为基因转化建立了高效稳定的再生体系,为菊花基因工程奠定了基础。     

菊花9个品种叶片和茎段快速高效再生体系的建立

以9个菊花品种为试材，利用6种分化培养基和3种生根培养基，以叶片、茎段为外植体，研究不同基因型、激素组合以及附加不同浓度的AaNQ对高效、快速、经济的再生体系建立的影响。结果表明，最适分化培养基分别为：‘日本黄’：6—BAO．5mg／L NAA0．1mg/L或6—BA2．0mg/L NAA0．5mg/L;‘9718’、‘RH3’、‘寒紫’、‘寒黄’：6—BA2．0mg／L NAAO．5mg／L;‘日本白’：6—BAO．5mg/L NAA0．1mg/L；‘寒红’、‘抗白菊’：6-BA1．0mg/L NAA0.1mg／L;‘五九菊’：6-BA2．0mg/L NAA0．1mg/L。适宜生根培养基为1／2MS 0．1mg/L～0．2mg／L NAA、或0．2ng/L～0.4mg/LLAA、或0．4mg／L～0．6mg/LIBA。AgNO3对不定芽的分化有抑制作用。     

绿色棉花再生体系研究(摘要)(英文)

[目的]对农杆菌法介导的绿色棉花茎尖转化体系进行筛选优化,为基因工程辅助彩棉育种提供参考。[方法]以天然绿色棉花的茎尖作为受体,采用农杆菌介导的转化方法,筛选绿棉茎尖再生体系的最佳条件,包括茎尖外植体最佳苗龄的筛选,激动素(KT)最适浓度的筛选,卡那霉素(Kan)敏感浓度的筛选,农杆菌菌液最佳侵染浓度的筛选以及真空渗透条件的优化筛选。[结果]3日龄的绿棉茎尖为最佳转化外植体;在OD600值为0.5的农杆菌菌液中侵染10min,同时辅助真空渗透的侵染效果最佳;在茎尖最适培养基MS+lmg/LKT,pH值5.8上共培养24h,转至Kan浓度梯度为30、50、70mg/L的筛选培养基上选择培养,茎尖分化苗阳性率达34.6%,并获得了绿棉9804的Kan阳性苗。[结论]绿色棉花比白色棉花更有利于进行遗传转化。     

菊花外植体再生体系的研究

以不同小菊品种的叶片、茎段、花瓣及子房为外植体进行再生培养。实验结果表明：不同品种、不同外植体对相同激素水平的反应是不同的。以叶片为外植体时,品种Rm 27-2的分化率高于Rm6-4;Rm27-2最适培养基为MS BA0．5mg/L NAA0．5mg/L和MS BA2．0mg/L NAA0．2mg/L,而品种Rm6-4为MS BA6．0mg/L NAA0．4mg／L;茎段分化率高于叶片,叶片基部分化率高于中上部。子房培养较适宜的培养基为MS BA1．0mg/L十NAA1．0mg／L和MS BA2．0mg／L NAA2．0mg/L;MS BA20mg／L NAA0．2mg/L培养基可有效诱导花瓣产生愈伤组织及芽的分化。并对细胞分裂素、生长素在再生中的作用及适宜浓度作了探讨。     

菊花叶片离体高效再生体系的建立

本文报道了以菊花叶片为外植体，诱导植株再生，建立高效植株再生体系。获得诱导愈伤组织、芽和根的最佳培养基。在有6-BA、NAA的MS培养基上获得较高的愈伤组织诱导率，在有2，4-D的培养基上其愈伤组织诱导率很低。带有愈伤组织的外植体转移到有6-BA、NAA的MS培养基上催化芽的产生，并筛选出能直接诱导芽再生的培养基(MS 6-BA(3mg／L) NAA(1mg／L))。AgNO3可明显提高芽的再生率。茎段在1／2MS和有IBA或NAA的1／2MS培养基上诱导生根。生根的小苗在温室里生长良好。     

基于均匀设计优化牛皮杜鹃嫩叶直接再生芽苗及植株再生体系(英文)

[Objective] The experimental was aimed to screen the optimum regeneration shoot induction media and rooting media for tender leaves of Rhododendron chrysanthum Pall.[Method] The tender leaves of Rhododendron chrysanthum Pall were taken as explants to select the optimum bud induction media and rooting media through uniform design and the screening results were verified.[Result] The optimum media for regeneration shoot of Rhododendron chrysanthum Pall contained 1/4 MS,3.70 mg/L ZT, 0.02 mg/L IAA and 1.00 mg/L KT and its induction rate was 95.5% and the rooting media contained modified MS, 0.10 mg/L IAA and 0.07 mg/L NAA and its rooting rate was 98%. [Conclusion] Through this experiment, regeneration systems for regeneration shoot and regenerated plant from tender leaves of Rhododendron chrysanthum Pall were created successfully.     

菊花茎叶外植体再生体系的研究

以地被菊‘矮黄’、‘玉龙’和传统菊花‘金背大红’的叶盘和茎段为外植体进行再生培养 .实验结果表明 ,不同品种对相同激素水平的反应是不同的 :传统的大菊‘金背大红’的愈伤诱导率和分化率都远远低于两种地被菊 ;在相同条件下以茎段为外植体诱导愈伤率高于叶盘 ,但是叶盘的直接分化率高于茎段 .‘玉龙’和‘矮黄’的最适再生培养基组成为MS +NAA 0 .1mg/L + 6 BA 1mg/L和MS +NAA 0 .2mg/L + 6 BA 2mg/L ,‘金背大红’为MS +NAA 1mg/L + 6 BA 5mg/L     

草莓主栽品种高效再生体系的建立

以2个主栽草莓品种森嘎拉、戈雷拉为试材,研究影响草莓不定芽再生的各种因素,建立离体叶片高效再生系统,为草莓的遗传转化研究与应用奠定基础。试验结果表明：对某一特定的品种来说,外植体基因型和外源激素种类及其合适浓度是决定再生的主要因子。MS＋TDZ2．0mg／1＋2,4-D0．2mg／1最适合“森嘎拉”不定芽的分化,再生频率达74．1％MS＋TDZ2．0mg／1＋IBA0．1mg／l＋2,4-D0．1mg／l最适合“戈雷拉”不定芽的分化,再生频率迭21．8％。10-30d叶龄的叶片再生能力较强。     

两个一串红品种的高效再生体系研究初探

通过对一串红2个品种的多种外植体的组培研究,表明不同外植体在分化上存在很大差异,且愈伤组织的进一步分化难度较大。在不定芽分化中,以顶端生长点受到破坏的小茎尖的分化效果最好,两个品种均可获得较高的分化率和得到数量较多的不定芽;用子叶节进行培养,只有品种"幸运"能得到大量丛生芽,但分化率低,而品种"展望"则不分化。不同激素种类、品种类型对一串红壮苗效果存在显著差异。生根中以使用低浓度IBA、NAA混合物比用NAA、6-BA的混合物效果要好。蛭石与珍珠岩的不同比例混合物都可取得比较理想的炼苗效果,且以2份蛭石与1份珍珠岩的混合物炼苗效果最好。     

玉米自交系幼胚再生体系建立的研究(英文)

以玉米自交系幼胚为外植体,研究了不同2,4-D浓度对愈伤组织诱导、BA浓度对苗分化和IBA对试管苗生根的影响。结果表明:2,4-D对胚性率诱导有明显影响,其诱导最佳培养基为N6+2,4-D2mg/L+水解酪蛋白(CH)500mg/L+脯氨酸(Pro)500mg/L+AgNO310mg/L;苗分化适宜的培养基是N6+BA0.5mg/L+水解酪蛋白500mg/L;试管苗生根的最佳培养基为1/2MS+IBA0.5mg/L。     

菊花高效瞬时转化体系建立及稳定遗传植株再生

[目的]本试验的目的是通过瞬时转化解决菊花转基因中存在的两大难题:转化效率低和表达水平低。[方法]通过农杆菌注射渗透法将含有GUS基因(编码β-葡糖苷酸酶)的表达载体pORE R1-2×35S∷GUS转入菊花‘优香’叶片中,进行瞬时表达,并组织培养转化后的叶片,利用GUS化学染色法和RT-PCR进行转化植株鉴定。[结果]菊花‘优香’瞬时表达的转化效率高达76.7%,外源基因(GUS)的表达水平也较理想,尤以第4和第5片完全展开叶(从形态学上端向形态学下端数)表现最佳。经过3~4个月的组织培养和抗性筛选,瞬时转化的‘优香’叶片再生出稳定遗传的转基因株系,转化效率达38.9%。[结论]本试验提供的菊花瞬时表达的方法高效、简单,并能实现稳定遗传。     

菊花叶片不定芽再生体系的研究

以7个不同菊花品种的叶片为外植体，探讨了基因型、苗龄、叶片着生部位、Vc、活性炭、AgNO3以及不同生长调节剂组合等因素对菊花叶片不定芽再生的影响.试验结果表明，基因型是影响不定芽再生的重要因素；15～35d苗龄的无菌苗中、上部幼嫩叶片不定芽再生能力较高；高浓度NAA有利于提高‘紫妍’叶片外植体的再生能力和消除褐化现象；AgNO3未能促进叶片外植体的再生；适宜‘紫妍’再生的培养基是MS+6-BA 1mg/L+NAA 0.5mg/L和MS+6BA 2mg/L+NAA1mg/L；适宜‘L12M57’再生的培养基是MS+6BA 2mg/L+NAA 0.2mg/L和MS+6-BA 2 mg/L+NAA 0.1 mg/L      

菊花品种系统记载方案(草案)

菊花为我国传统名花,花色丰富,品类繁多,不仅国内人民爱好,而且风靡国际。由于近年对菊花的生理、育种与栽培等方面的研究趋于透彻,遂使在花期的控制、周年供花的安排、品种的应用分工与新品种的培育上都有显著的进展。我国菊花栽培的历史悠久,地域广大,品种名称的混乱与缺乏系统性自是必然。1982年11月中国菊花品种展览会在上海展出期间,中国花卉盆景协会举行了为期五天的关于菊花品种系统分类和品种名称统一问题的小型学术讨论会。会上草拟了一个以花型为主的菊花品种系统分类方案;统一了部分菊花品种的名称,并保留了今后不     

文心兰高效再生体系研究

以文心兰试管苗茎尖为外植体,对不同类型培养基诱导原球茎、增殖及分化成苗的效果进行了研究。结果表明,文心兰茎尖在MS+6-BA 6.00 mg/L+NAA 0.15 mg/L培养基上,1个月后就能诱导大量原球茎,培养基MS+6-BA 0.50 mg/L+NAA 0.15 mg/L+5%椰子水有利于芽的诱导,培养基1/2 MS+IBA 1.00 mg/L+10%椰子水有利于诱导生根。     

草莓主栽品种丰香高效离体再生体系的研究

以目前国内草莓主栽品种丰香为试材，研究影响不定芽再生的各种因素，以建立简单、快速、高效的叶片离体再生体系。结果表明，对某一特定的基因型来说，外植体类型和外源激家种类对其再生芽的发生频率和数量都有明显的影响。TDZ对芽再生的效果明显比BA强。丰香叶片在LS TDZ2.0mg/L 2,4-D0.1mg/L IBA0.2mg/L的分化培养基上再生频率可稳定在46％～52％，平均每叶片再生芽数为1．6～2．2，10～28天叶龄的叶片再生能力较高。     

两个茄子品种高效再生体系的建立

【目的】建立茄子高效再生体系,为遗传转化、种质创新研究奠定基础.【方法】以‘兰杂一号’和‘兰杂二号’两个茄子品种为试材,通过对不同质量浓度外源激素组合的筛选,研究基因型、外植体类型、苗龄、外源生长调节剂组合对不定芽分化与伸长的影响.【结果】‘兰杂二号’的不定芽分化率显著高于‘兰杂一号’;子叶的不定芽分化能力强于下胚轴和茎段;11~13d苗龄的外植体不定芽分化频率较高;‘兰杂一号’和‘兰杂二号’分别在6-BA/IBA为10∶1和30∶1的配比下,分化率达最高,分别为89.58%、94.97%;在6-BA/IBA为1∶2配比下有利于两个品种不定芽伸长,伸长率分别高达91.67%、96.88%.【结论】适宜‘兰杂一号’和‘兰杂二号’不定芽分化的培养基分别为MS+2.0mg/L 6-BA+0.2mg/L IAA和MS+3.0mg/L 6-BA+0.1mg/L IAA;适宜不定芽伸长的培养基为MS+0.1mg/L 6-BA+0.2mg/L IAA;最佳生根培养基为1/2 MS培养基.     

建立甜高粱(Sorghum bicolor)高频、高效再生体系的研究

【目的】建立能源植物甜高粱(Sorghum bicolor L.Moench)的高频、高效离体培养再生体系,为遗传转化奠定基础。【方法】以甜高粱品种凯勒的芽顶端分生组织为外植体,探讨在甜高粱直接诱导丛生芽的培养过程中,无菌实生苗的适合苗龄,适宜的激素组合与比例;并将获得的最佳培养方法应用于其它两个甜高粱品种:M-81E和意达利,以研究此途径的基因型依赖性。【结果】利用3d苗龄的芽顶端分生组织作为外植体容易获得较高的分生组织膨大率。甜高粱丛生芽诱导的适宜激素组合为4.0mg·L-16-苄基腺嘌呤+0.5mg·L-12,4-二氯苯氧乙酸+0.5mg·L-1噻重氮苯基脲,可获得91%的丛生芽诱导频率。适合甜高粱快速生根的激素配方为0.5mg·L-1萘乙酸。通过芽顶端分生组织直接诱导丛生芽途径,每个外植体可诱导出上百个芽,最终产生30—40株再生苗。M-81E和意达利具有与凯勒相似的丛生芽诱导频率及效率。【结论】本研究成功地建立了甜高粱的高频、高效离体培养再生体系,且具有外植体来源不受限制,基因型依赖性弱,遗传稳定性好的优点。     

菊花花器官再生体系的建立

菊花Dendranthema morifolium为菊科菊属的多年生宿根花卉,为我国十大传统名花之一,也是世界著名的切花种类。盆栽立菊因其花色丰富,一株多头,观赏性好,历受人们的青睐。通过基因工程来改良盆,栽立菊的花色、花型,进一步提高观赏价值,是非常重要的育种方向。作为基因转化受体系统,菊花必须具有高效稳定的再生能力、充足的外植体来源及较高的遗传稳定性。     

金耳原生质体制备与再生研究(英文)

[目的]对金耳原生质体制备与再生体系进行研究。[方法]采用正交试验法筛选金耳原生质体制备和再生体系中酶体系、菌龄、温度、时间、渗稳剂的最佳用法。[结果]金耳原生质体的释放方式有三种类型:酶解初期的顶端释放、侧位释放和后期的原位释放。其最佳制备条件为:液体静置培养3d的菌丝体,在1%纤维素酶+1%蜗牛酶+1%溶壁酶的混合酶液中,以0.6mol/L蔗糖为渗稳剂,36℃酶解4h,得到原生质体制备率达1.76×107个/ml;最佳再生条件为:液体静置培养5d的菌丝体,在1.5%溶壁酶的酶液中,以0.6mol/L蔗糖为渗稳剂,33℃酶解3h,得到原生质体再生率达0.22%。[结论]为金耳的原生质体融合、紫外线诱变育种、基因工程研究等提供了有益支持。