不同品种猪生长激素基因的PCR-RFLPs分析

采用PCR-RFLPs技术,对香猪、上海白猪、大约克夏猪生长激素基因-119～＋715区域共834bp片段的扩增产物分别用ApaI、DraI、MspI三种限制性内切酶检测酶切位点的多态性。结果显示：ApaI酶切时．三个品种的猪都产生了3种基因型（AA、BB和AB）,BB基因型的频率以大约克夏猪最高．AB基因型的频率以香猪最高．三个猪种间基因型频率、等位基因频率的差异不显著（P〉0．05）;DraI酶切时．各品种猪均未呈现酶切位点的多态性;MspI酶切时,仅大约克夏猪表现出2种基因型（CC、CD）,香猪、上海白猪未产生酶切位点多态性。结论：AB基因型的频率以香猪为最高,它可能是小型猪的有利基因型;在香猪和上海白猪中DraI和Mspl酶切位点的多态性比较贫乏。     

滩羊生长激素基因PCR—RFLPs反应体系的优化

以宁夏滩羊基因组DNA为模板，研究影响滩羊PCR—RFLPs扩增的因素，实验结果表明：特异性引物的浓度、Mg^ 浓度、模板DNA的完整性，浓度、纯度、TaqDNA聚合酶、变性温度、退火温度和循环次数等诸多因素对PCR—RFLPs扩增影响较大。为此我们对PCR—RFLPs的反应体系和反应程序进行了研究和浓度梯度对比试验，建立了滩羊GH基因PCR—RFLPs扩增的反应体系和操作技术。     

猪GH基因全序列PCR-RFLPs研究

实验利用PCR-RFLPs技术分析了大约克猪和长白猪GH基因的BstⅪ和HhaⅠ两种内切酶酶切位点多态性。结果表明,在所检约克夏猪和长白猪两个品种中,pGH基因全序列内仅有1个BstⅪ酶切位点,未发现BstⅪ酶切位点多态性;pGH基因全序列中存在丰富的HhaⅠ酶切位点多态性,约克夏猪中有10种带型,长白猪中检出了8种带型,其中B带型频率最高,长白猪中为41 67%,约克夏猪中占31 11%,二者差异极显著(P<0 01)。其他各带型频率分布在两品种间差异不显著。     

宁夏滩羊FSHR基因多态性研究

[目的]研究宁夏滩羊卵泡刺激素受体（FSHR）基因的多态性,为其繁殖提供理论基础。[方法]采用聚合酶链式反应-限制性片段长度多态性方法（PCR-RFLP）,对该群体111只健康滩母羊FSHR基因多态性进行检测。[结果]扩增出306 bp目的片段,PCR产物被限制性内切酶AluI消化后表现出多态性,共检测到3种基因型：GG、CG和CC。其中GG型15个,基因型频率为0.135 1;CG型74个,基因型频率为0.666 7;CC型22个,基因型频率为0.198 2。等位基因G的基因频率为0.468 5,而等位基因C的基因频率为0.531 5。[结论]宁夏滩羊FSHR基因具有多态性。     

猪生长激素基因ApaⅠ酶切位点多态性分析

利用 PCR- RFL P技术 ,分析了大约克猪和长白猪 GH基因的 Apa 酶切位点多态性。结果表明 ,在p GH基因序列中共检测到 5种基因型和 4种等位基因 ;基因型频率和等位基因频率在 2个猪种间分布差异不显著。     

生长激素基因多态性与滩羊生长性状关联性研究

[目的]探讨生长激素基因多态性与滩羊生长性状关联性,以提高滩羊整体生长速度和经济效益。[方法]选取69只宁夏滩羊为研究对象,运用PCR-RFLP技术,对已证实控制绵羊生长速度的主效基因生长激素（GH）基因进行检测,统计各基因型与滩羊初生重、二毛重、3月龄及6月龄体重之间的关联性。[结果]共检测到2种GH基因型,即AB和BB型,基因型频率分别为0.3481和0.6519,A等位基因频率为0.1811,而B等位基因频率为0.8189。通过关联性统计分析,AB基因型与滩羊生长性状的关联性达到极显著水平（P〈0.01）。[结论]AB基因型是影响滩羊生长速度的优势基因型。     

林麝生长激素基因的克隆与生物信息学分析

了解林麝生长激素（GH）基因序列结构特点,为进一步研究GH基因的结构功能遗传变异规律及其与生长性能的关系提供科学依据。根据GenBank上已公布的绵羊全基因组GH基因序列设计合成4对特异性引物,以林麝基因组DNA为模板进行PCR扩增,将所获得的序列拼接,获得林麝GH基因CDS区序列,采用ExPASy等分子生物学工具对林麝GH蛋白的理化性质、二级结构、蛋白功能等进行预测。结果表明,林麝GH基因CDS区全长657 bp（GenBank登录序列号为KU296865）,编码218个氨基酸。α-螺旋结构和卷曲结构构成了林麝GH蛋白二级结构的骨架,为跨膜蛋白,同时第1~26位氨基酸为信号肽,第27~218位氨基酸残基为生长激素结构域。进化分析结果表明,林麝与羊的关系最为接近,在分子水平上符合物种进化理论。本研究成功克隆了林麝GH基因CDS区序列,其序列保守性强,为下一步林麝GH基因的表达调控、进化和多态性分析奠定了基础。     

马生长激素基因的PCR-RFLP分析

选取4个蒙古马地方品种、1个国内培育品种和1个国外引入品种共281匹马为研究对象,对马GH基因全序列进行了PCR-RFLP分析。扩增产物经BstxⅠ、H indⅢ、Sm aⅠ和StuⅠ4种内切酶酶切,结果显示:实验所检测群体中,没有发现BstⅪ、H indⅢ酶的酶切多态;Sm aⅠ和StuⅠ酶切后,均表现出多态性,并各自产生3种基因型:AA、BB、AB和CC、DD、CD。本研究为今后马的分子育种奠定必要基础。     

宁夏滩羊体大品系OB基因的RFLP检测

本研究运用了PCR－RFLPs方法，根据人和猪肥胖（ob）基因序列合成的特异性引物，对滩羊体大品系与普通品系的基因组进行多态性分析，表明其扩增产物的HinfⅠ酶切结果出现了一种T等位基因，而无C等位基因，说明滩羊两品系在Ob基因座位上无基因型差异。     

生长激素（GH）基因研究进展

本文简述生长激素（GH）基因的结构、功能,论述禽类（主要论述鸡）生长激素（GH）基因的研究进展。     

高加索三叶草ISSR-PCR反应体系的建立与优化

高加索三叶草(Trifolium ambiguum Bieb.)是许多干旱和寒冷地区可以种植并在各方面表现优良的三叶草种,建立适用于高加索三叶草的ISSR反应体系,将为ISSR标记技术在三叶草属品种资源研究中的应用提供参考.本试验通过优化影响高加索三叶草ISSR-PCR的主要参数,建立适于高加索三叶草的ISSR反应体系和扩增程序.在25μL体系中各反应物的最适含量为:20 ng模板DNA,0.2 mmol/L dNTP,0.8μmol/L ISSR引物,1.0 U TaqDNA聚合酶,2.5μL 10×PCR Buffer,2.0mmol/L MgC12.PCR扩增程序为:94℃预变性2 min,94℃变性30s,55℃退火45s,72℃延伸1 min,共30个循环;72℃延伸7min,4℃保温.     

宁夏滩羊体大品系OB基因的RFLP检测

本研究运用了PCR-RELPs方法,根据人和猪肥胖(ob)基因序列合成的特异性引物,对滩羊体大品系与普通品系的基因组进行多态性分析,表明其扩增产物的Hinfl酶切结果出现了一种T等位基因,而无C等位基因,说明滩羊两品系在Ob基因座位上无基因型差异.     

宁夏滩羊体大品系血清GH及IGF-1的测定分析研究

在宁夏滩羊体大品系的选育工作中,对宁夏滩羊裘皮系,体大品系及其杂交后代血清中GH及IGF-1进行了测定分析,结果显示①体大品系公羊(♂)血清GH水平高于裘皮系♂,差异不显著(P＞0.05);体大品系母羊(♀)中的体大群、快肥群GH水平高于裘皮系♀,差异不显著(P＞0.05);杂交后代中,♀血清GH水平高于裘皮系♀,差异极显著(P＜0.01),也高于体大品系♀.②体大品系成年♂血清IGF-1水平高于裘皮系♂差异极显著(P＜0.01),体大品系♀,血清IGF-1水平略高于裘皮系♀,其杂交后代♂、♀血清IGF-1水平均与裘皮系♂、♀没有明显差异(P＞0.05),作者认为,通过对畜禽血清GH,IGF-1水平的测定分析研究,对探讨动物生长发育规律有实践意义.血清GH,IGF-1水平可作为生理遗传标记,为畜禽的选育工作提供有科学价值的理论依据.     

蒙古绵羊HOX基因片段的克隆及序列分析

为探讨HOX在蒙古绵羊CO2的体轴发育与细胞分化中的特异性表达情况,选用已报道的HOX基因保守区序列设计简并引物,对蒙古绵羊CO2的基因组进行了PCR扩增,经克隆和DNA测序,得到的片段为117bp,编码39个氨基酸,Blast及DNAStar软件分析证明克隆到了3个Hox片段.     

黄花苜蓿SSR-PCR反应体系的优化

对黄花苜蓿SSR-PCR扩增体系的反应条件进行了优化,分析了Mg2+浓度、dNTP浓度、DNA模板浓度、引物浓度、TaqDNA聚合酶浓度对PCR扩增结果的影响.结果表明:在25μL的反应体系中,dNTPs的最佳浓度为0.2mmol/L,Mgcl2的最佳浓度为2.0mmol/L,DNA模版最适加入量80ng,引物的最佳浓度为0.16gmol/L,TaqDNA聚合酶的最佳用量为1U.     

蒙古羊BMPR-IB基因的克隆与序列分析

本研究以蒙古羊作为研究对象,对蒙古羊的BMPR-IB基因进行了克隆与序列分析.结果克隆得到蒙古羊BMPR-IB基因全长1 567bp,其开放阅读框(ORF)为1 509bp,共编码502个氨基酸;同源性比对发现与牛、猪、山羊、小鼠、人和斑马鱼的同源性分别为95.7%、92.6%、99.1%、87.6%、92.1%、68.2%;由进化树可以看出蒙古羊与牛的亲缘关系最近,与斑马鱼最远;采用SMART程序预测其结构功能域表明蒙古羊BMPR-IB蛋白质分别在氨基酸序列174到204和204到493有GS模序和STYKc两个结构功能域.     

绵羊血红蛋白基因对体重和剪毛量的影响

在对培育中凉山半细毛羊横交群研究发现，血红蛋白（ＨＢ）基因处于非遗传平衡状态。ＨＢ基因型间绵羊体重和产毛量存在显著或极显著差异，其中ＡＡ型或ＡＢ型绵羊比ＢＢ型绵羊的初生体重、断奶体重、育成体重、成年体重和成年剪毛量显著或极显著的高。     

绵羊BMP15基因三个位点核苷酸多态性研究

研究目的:采用PCR-SSCP技术分析绵羊BMP15基因exon 1、B2、B4位点在蒙古羊中的多态性,分析其多态性与群体繁殖性状之间的关系.研究意义:BMP15基因是与绵羊繁殖性状有关的基因,它的多态性与群体遗传之间的研究将对绵羊的育种与繁殖有重要意义.研究结果:结果表明在exon 1所扩增的片段中存在3种基因型(AA型、BB型、AB型),在B2位点所扩增的片段中不存在多态性,B4扩增的片段中存在2种基因型(++型、CC型).