鸡胚制活病毒疫苗中霉形体污染的研究

对32个鸡胚,80组(每20个鸡胚液混合物为一组)未加抗生素的新城疫疫苗半成品和14批成品疫苗(其中冻干苗12批和液体苗2批)的样品进行了霉形体污染的检查。结果从一个接种了新城疫病毒 LaSota 弱毒株的鸡胚中,9批半成品疫苗中和10批成品疫苗的样品中分离出了霉形体。共20个分离物,对其中12个进行了种属鉴定,12个分离物中有4个含有两种霉形体,因此共含有16株霉形体,即鸡毒霉形体8株,滑液霉形体7株和一株不属于这两种的霉形体。随机选出3个分离物进行了链霉素敏感性测定。测定结果表明这些菌株的抗药性大为增强,链霉素的最小抑制量为对照株的几十百倍,因而能抵抗疫苗中链霉素的作用而污染了疫苗。建议在产品检验中增加霉形体检测项目。在未能使用 SPF 鸡胚生产疫苗以前应尽速进行消灭污染的研究。     

一例鸡毒霉形体病的诊断与体会

岱岳区某规模化鸡场发现疑似毒霉形体病鸡，通过病原分离获得鸡毒霉形体（支原体），体外抑菌试验结果发现鸡毒霉形体对泰乐菌素、红霉素和北里霉素高度敏感。本研究为该鸡场临床准确用药提供科学指导，对鸡毒霉形体病的准确诊断以及治疗提供一定的理论依据。     

鸡胚源疫苗中污染霉形体的对策——Ⅲ.热力清除制苗用鸡蛋中霉形体防止活毒疫苗中霉形体污染在工厂化生产中的应用

在工厂生产条件下,对于准备用于生产鸡新城疫弱毒疫苗的8批鸡蛋次第随机分别取其半数左右先行以45℃经14小时预处理,而后再与另一半未处理的鸡蛋同时入孵,接种病毒(LaSota或Ⅱ系)和制造疫苗,共计处理鸡蛋3936枚,未处理对照组4549枚,结果证明,处理组与未处理的对照组的受精蛋制苗利用率平均值分别为84.25%和83.62%,预处理未降低鸡蛋的利用率。制成的疫苗对鸡胚半数感染量平均值分别为8.27和8.22,达到疫苗规定效力要求,预处理不影响疫苗的效力。八批疫苗中除一批因意外事故未完成霉形体检查外,7批处理组的疫苗皆未检出霉形体,而对照组7批中有5批检出了霉形体。说明预处理已消灭了鸡蛋中污染的霉形体。这种方法可以用于疫苗工厂制造无霉形体污染的疫苗。     

牛霉形体的药物敏感性

从1980年12月到1983年10月的送检标本中分离出了牛霉形体。其分离14株,用10种抗生素,进行了最小抑制浓度检查,并用泰乐霉素治疗以观察临床效果和牛鼻汁中的牛霉形体的消长。     

鸡霉形体的分离与药敏试验

选择鸡毒霉形体的敏感药物,为临床防治用药提供理论依据。从鸡场分别取疑似患霉形体病的鸡进行血清学反应、病原分离培养和体外抑菌试验。经分离获得鸡毒霉形体12株,研究鸡毒霉形体对甲磺酸左旋氧氟沙星、阿齐霉素等12种抗生素的抗药性。结果表明,各种药物对毒霉形体的敏感程度不同。     

抗菌药物联合应用对霉形体的药效学研究

本研究采用试管肉汤稀释法和棋盘法测定了１７种抗菌药物单独或几种药联合对鸡败血霉形体Ｓ＿６株（ＭＧＳ＿６）的最低抑菌和最低杀菌浓度．结果表明，ＭＧＳ＿６对北里霉素、四环素、红霉素、氟哌酸等高度敏感；四环素类与ＴＭＰ联合呈现协同作用。对实验性感染ＭＧＳ＿６的病鸡进行联合用药治疗试验，初步筛选出几个有良好治疗作用的联合用药配方。本研究是对联合应用抗菌药物治疗实验性鸡败血霉形体病进行的初步探讨，对防治本病具有一定的理论与实践意义。     

罗红霉素对鸡败血霉形体病的疗效试验

为验证罗红霉素对鸡败血霉形体引起的鸡呼吸道疾病的疗效 ,选取了鸡败血霉形体S6株 (MGS6)进行了鸡体内及体外抑菌试验。结果表明 :罗红霉素及红霉素对鸡败血霉形体S6株的体外最小抑菌浓度分别为 0 1 2 5μg/mL和 0 5μg/mL ,且一定剂量的罗红霉素对人工诱发鸡败血霉形体病有较好的疗效。可显著降低病鸡的死亡率 ,提高增重 ,降低气囊损伤 ,其疗效优于同类抗生素红霉素     

斑点免疫结合试验在霉形体研究中的应用

本文报道了将斑点免疫结合试验(DIBA)用于霉形体种的鉴定,细胞培养中霉形体感染的检测和鸡胚实验感染霉形体的检测,都取得了满意的结果。应用DIBA对11种霉形体培养物和36个自感染细胞和污染疫苗中分离的霉形体的培养物进行了鉴定,结果与直接分离培养物用生长抑制试验,间接免疫荧光检测的结果完全一致。应用口腔霉形体、猪鼻霉形体、精氨酸霉形体和莱氏无胆甾体等4种霉形体的抗血清以DIBA对36株细胞培养物进行检测的结果,证明其中15株感染口腔霉形体,1株感染莱氏无胆甾体,1株为口腔霉形体和莱氏无胆甾体的混合感染,与对照用的分离培养方法结果一致,还有1株用分离培养方法和DNA荧光染色证明有霉形体感染,经鉴定此株霉形体不属于此4种霉形体,故用DIBA未检出。以鸡毒霉形体和滑液霉形体实验感染鸡胚各18枚,以DIBA从这些鸡胚的卵黄液及尿囊液中可检出各自感染的霉形体种。结果说明,在霉形体研究中DIBA为一种快速、简便和特异的血清学方法。     

国内火鸡体内霉形体的分离与鉴定

从北京和呼和浩特市4个火鸡场的95只火鸡、50只火鸡胚和42份精液样品中分离到15个分离物,用国际霉形体分类分会推荐的生化、遗传学和血清学方法证明其中有两个分离物是两种霉形体混合物,共17株霉形体。所有分离物在无抑菌剂的培养基上连续传代5次未出现细菌形态、对毛地黄皂苷敏感、不水解尿素、DNA的G C含量介于26-34mol％之间。生长抑制试验和间接表面免疫荧光技术的试验结果将其中的15个株分属于霉形体属的5个种,即鸡毒霉形体(Mycoplasma gallisepticum)4株、滑液霉形体(M.synoviae)2株、衣阿华霉形体(M.iowae)1株、鸡霉形体(M.gallinarum)和雏鸡霉形体(M.pullorum)各4株。其余2株也属霉形体属,但尚未鉴定到种。     

兽用疫苗中霉形体污染的套式PCR检测技术建立及初步应用

根据GenBank公布的鸡毒霉形体、猪肺炎霉形体、猪滑液霉形体和絮状霉形体的16s rRNA基因序列,利用引物设计软件DNAStar和Primer5.0自行设计3对特异性引物,以市场上常见的兽用疫苗为检测对象进行试验,优化反应体系,建立了兽用疫苗霉形体污染检测的套式PCR方法。同时,本试验还对市场上的兽用疫苗进行随机抽查检测,其检出率分别为24.2%(23/95)、21.1%(20/95)和14.7%(14/95)。     

细胞培养物污染的霉形体

来源和种类分离数 1262 739 240 197 60 23 20 .3九”︸nU ︼勺精氨酸霉形体莱氏无胆街原体霉形体株70一159无胆街原体sp.牛霉形体乏黄无胆街原体牛眼霉形体 眼无胆角原体啮齿类 关节炎霉形体 肺霉形体禽 鸡败血霉形体 鸡霉形体狗 狗霉形体 霉形体Sp.血清型689总计0 .03八bQ甘O口O乙叮自0。210‘140 .070 .030 .11 9 5 4 5 a 2 31比…1…0分45 268了20百0 .070 14口腔霉形体人型霉形体发酵霉形体唾液霉形体颊霉形体 1929832 63 28 4 ‘卜。日159033.229.5 2 .2 1 .0 0 .1左 0 .072 1 .12 1.022799100 文希震摘译自: CRC Handbook Selics…     

鸡胚源疫苗中污染霉形体的对策——Ⅱ.热力处理制苗用鸡蛋消除活疫苗中霉形体的污染

鸡毒霉形体新鲜培养物在43.5℃,44℃和45℃中经过12和14小时的处理后,霉形体完全死亡,实验感染鸡毒霉形体的鸡蛋或8日龄鸡胚,以45℃经14小时处理后,可以将95%以上的鸡胚内的霉形体消除,残存霉形体只出现于卵黄膜上,尿囊液内未出现。新城疫病毒LaSota株在这样处理过的鸡胚中发育良好,病毒血凝价比未处理过的鸡胚中高几倍,处理过的种蛋对鸡胚制苗利用率没有明显影响。     

蛋鸡霉形体病

<正> 世界上许多国家的种鸡群中都没有鸡毒霉形体(MG)和滑液囊霉形体存在,但在商品蛋鸡中霉形体仍然是个主要问题。鸡滑液囊霉形体病最普遍,许多鸡群受到感染,但影响不显著。不同的滑液囊霉形体分离株,其致病力也不一样。有的株不致病,有的因致滑液囊炎而引起跛行,还有一些可引起产蛋下降。但在大多数情况下,感染鸡毒霉形体的产蛋鸡遭受的损失比感染鸡滑液囊霉形体病严     

PCR检测鸡毒霉形体和鸡滑液囊霉形体的研究

根据禽霉形体16S rRNA的基因序列设计，合成了1对引物，用这对引物对鸡霉素形体（Mycoplasma gallisepticum,MG)和鸡滑液囊霉形体（Mycoplasma synoviae,MS)菌株DNA进行PCR扩增，得到了与预期大小相一致的580bp的PCR产物，而这对引物对其他畜病病原DNA或RNA模板的扩增结果为阴性，PCR方法对MG和MS的最小检出量分别为2pg和3pg，应用已建立的PCR方法检测MG人工感染样品和临床样品，从人工感染样品中均检测到MG，临床样品的MG阳性检出率为10．25％，高于常规分离培养的阳性检出率。     

四种抗生素药治疗猪霉形体肺炎对比试验

选择土霉素油剂、庆大霉素、红霉素、链霉素四种抗生素对150头发生气喘病的仔猪(每组30头)分别进行了药敏试验和治疗效果的比较试验。结果表明,土霉素油剂的治愈率达96.67%,最小抑菌浓度为0.037mg/L,最小杀菌浓度为0.0521 mg/L,均好于其它药物。说明土霉素油剂对猪气喘病治疗效果最好,可作为治疗猪霉形体肺炎的首选药。     

鸡霉形体的分离鉴定

从沈阳地区 2个鸡场的 6只病鸡取样 ,进行了霉形体的分离鉴定。通过培养特性、生化特性及血清学特性鉴定 ,分离出鸡败血霉形体 4株 ,分别命名为Sy1 株 ,Sy2 株 ,Sy4 株 ,Sy5株     

用药物纸片进行霉形体药敏试验

以常用的14种国产药物的纸片,对上海奶牛场分离到的5株牛霉形体、5株牛鼻霉形体和从组织培养及小牛血清中分离到的3株精氨酸霉形体,以及定型菌种牛鼻霉形体、猪肺炎霉形体和猪鼻霉形体进行了药敏试验,试验结果表示出影响菌体蛋白合成的呋喃类、氯霉素类、四环素类、氨基苷类药物对霉形体有抑菌作用,一般在同一霉形体种中,有相似的药物敏感范围,但这些药物对不同种霉形体的抑制作用有所差别.     

鸡马立克病活疫苗中污染禽网状内皮组织增生症病毒检测方法的建立

为建立鸡马立克病(MD)活疫苗中污染禽网状内皮组织增生症病毒(REV)的间接免疫荧光检测方法,本研究通过向MD活疫苗中添加不同剂量的REV,用拟定的方法对样品检测REV。结果表明,Ⅰ型MD活疫苗、火鸡疱疹病毒活疫苗(Fc-126株)和MD二价活疫苗(HVT+CVI988株)中污染REV的最低检出量分别为每500羽份疫苗中污染5TCID50、10TCID50和15TCID50的REV。应用建立的方法对国内10家企业生产的43批MD活疫苗进行了检验,结果显示,2个企业生产的4批疫苗REV检测阳性。随机选取了5批IFA检测阴性样品和4批IFA检测阳性样品,按鸡检查法进行外源病毒检验,结果两种方法对REV污染检验结果的符合率为100%。因此,本研究建立的IFA法可替代鸡检查法,用于疫苗中REV污染的检验。     

替米考星(Tilmicosin)对鸡败血霉形体感染的药效学

以试管二倍稀释法测定替米考星 (Tilmicosin)及对照药物强力霉素、红霉素、泰乐菌素对鸡败血霉形体的最小抑菌浓度分别为 0 .0 0 6 2 5、0 .0 2 5、0 .0 2 5、0 .1m g/ L ,进行了替米考星对鸡败血霉形体的体内药效学研究。结果 ,替米考星以 5 0、75、10 0 mg/ L 饮水给药 5 d,对实验性感染鸡败血霉形体有显著疗效 ,用药组增重均显著高于对照组 (P<0 .0 5或 P<0 .0 1) ,并能明显减少抗体阳性反应率 ,极显著地减少气囊损伤记分 (P<0 .0 1)     

四川地区鸡慢性呼吸道病的研究

从８０年代以来，我们对四川省鸡慢性呼吸病进行全面系统的流行病学调查，通过在不同地区采集的５３２６份鸡血清样品的血清凝集试验，ＭＧ的阳性率达６６．１９％，对从病鸡中采集的１０８份样品进行病原分离培养，生长抑制试验，理化特性鉴定和人工复制试验，证实有２７株霉形体为鸡毒霉形体，证明了鸡慢性呼吸道病在四川的流行。通过对ＭＧ的药物敏感试验，人工感染治疗试验和大面积的临床治疗试验，证实枝原净，北里霉素是防治鸡