棉蚜啶虫脒不同品系解毒酶活性测定和增效剂作用的研究

[目的]通过棉蚜啶虫脒抗性、敏感品系解毒酶活性测定和增效剂试验,明确与抗药性产生密切相关的解毒酶.[方法]采用室内生物测定和生化分析方法,研究棉蚜啶虫脒品系解毒酶活性变化和增效剂的增效作用.[结果]棉蚜啶虫脒抗性品系羧酸酯酶、谷胱甘肽-S-转移酶、细胞色素P450s O-脱乙基比活力都高于敏感品系,其中抗感品系中羧酸酯酶、细胞色素P450s O-脱乙基比活力差异都达到了显著水平(P＜0.05).啶虫脒抗性品系三种解毒酶活性分别为敏感品系的2.91、1.04和1.69倍.增效剂磷酸三苯酯(TPP)、增效醚(PBO)、顺丁烯二酸二乙酯(DEM),在啶虫脒敏感棉蚜品系中的增效比为1.02、1.03、1.02,在啶虫脒抗性棉蚜品系中的增效比为1.77、1.61、1.04.[结论]酯酶和多功能氧化酶在棉蚜对啶虫脒的抗性产生中起到了重要的作用.     

灰飞虱对氟虫腈的抗性及其机制研究

通过室内抗性品系筛选、现实遗传力分析、离体酶活力测定,对灰飞虱对氟虫腈抗性及其机制进行了研究.结果 发现:灰飞虱对氟虫腈的抗性发展较慢,利用田间低抗种群(RR 6.9倍)进行室内筛选,24代后抗性仅增加到21.2倍,其抗性现实遗传力较小,仅为0.041.利用室内筛选的氟虫腈抗性和敏感性品系进行解毒酶活力的对比研究发现:抗性灰飞虱体内的酯酶和谷胱甘肽转移酶活力与敏感品系没有显著差异,但P450单加氧酶活力是敏感品系的1.58倍.增效试验表明:在敏感品系中3种增效剂对氟虫腈均没有明显增效,但在抗性品系中,PBO对氟虫腈的增效比达到13.68,TPP和DEM的增效比仅分别为1.39和1.35.表明:灰飞虱对氟虫腈的抗性主要是由多功能氧化酶活力升高所致.     

不同剂量吡虫啉处理对麦长管蚜酯酶活性的影响

研究不同剂量吡虫啉处理对麦长管蚜[Sitobion avenae (Fabricius)]酯酶活性的影响.结果表明,不同剂量吡虫啉处理麦长管蚜后,诱导麦长管蚜酯酶活力增强,蛋白质含量增加.其中,LC25和LC75剂量处理组酯酶活性分别是对照组的1.75和1.72倍,蛋白质含量分别是对照组的1.66和1.41倍;与对照组相比,不同剂量吡虫啉处理未对麦长管蚜酯酶的米氏常数值产生明显影响,但不同处理组的最大反应速度值均极显著升高.表明不同剂量吡虫啉处理麦长管蚜后,并未改变酯酶与底物的亲和力,但均极显著增强了处理组麦长管蚜酯酶的最大反应速度.     

不同地理种群棉蚜三种关键性酶活差异及其与抗性相关性

【目的】研究新疆不同地理种群棉蚜3种酶的活性及抗药性的差异。【方法】测定新疆库尔勒、五家渠、石河子、奎屯、哈密地区棉蚜和实验室敏感种群羧酸酯酶、谷胱甘肽-S-转移酶、乙酰胆碱酯酶活性,并分析3种酶活性与吡虫啉抗性之间的关系。【结果】库尔勒、五家渠、石河子、奎屯和哈密地区乙酰胆碱酯酶和谷胱甘肽-S-转移酶的比活力比值分别为4.2、2.7、2.3、2.5、2.1倍和2.3、1.5、1.3、2.5、2.1倍,差异显著（P<0.05）;羧酸酯酶比活力比值为6.5、4.2、3.4、2.7、1.2倍,除哈密地区相对接近外,其余地区均明显高于1.0,差异显著（P<0.05）,2种棉蚜关键解毒酶和1种神经传导关键性酶与抗药性之间存在一定相关性。【结论】各地理种群棉蚜3种酶活性均显著高于敏感种群（P<0.05）,且彼此之间存在差异性,羧酸酯酶在棉蚜感受到吡虫啉杀虫剂胁迫时极有可能起到重要作用。     

德国小蠊的抗药性及多功能氧化酶在抗性中的作用

通过敏感性测定、增效作用试验和酶活力测定,分析了德国小蠊对拟除虫菊酯类药剂的抗经性以及多功能氧化酶在抗药性中的作用,结果表明采自杭州的德国小蠊品地二氯苯醚菊酯、溴氰菊酯和氯氰菊酯的抗性系数分别是敏感品系的６７．１倍,１８．１倍和１１．８倍,利用多功能氧化酶的抑制剂－－氧化胡椒基下和为增效剂测定抗性品系对二氯苯醚菊酯的增效作用,增效３．６９倍,离体酶活力测定的结果表明,抗性品系中多功能氧化酶活力明显     

河北邢台和江苏南京地区棉蚜对丁硫克百威和吡虫啉的抗性

【目的】对河北邢台和江苏南京地区棉蚜（Aphis gossypii Glover）进行抗性监测,了解棉蚜对丁硫克百威和吡虫啉的抗性发展情况,为抗性治理提供理论依据。【方法】以用药水平最低的新疆南疆种群作为相对敏感种群,通过室内毒力测定、离体酶活力测定、相对表达量分析,研究新疆南疆、河北邢台及江苏南京3个地区棉蚜对丁硫克百威和吡虫啉潜在的代谢抗性机制。【结果】河北邢台和江苏南京地区的棉蚜对丁硫克百威仍处于敏感阶段;但对吡虫啉的抗性已有所发展,抗性水平分别为4.87和8.72倍,为低水平抗性阶段。解毒代谢酶活力对比研究发现,3个地区田间种群之间多功能氧化酶、酯酶及谷胱甘肽转移酶的活力均存在显著差异,江苏南京种群的酯酶活力显著高于新疆南疆种群。定量PCR分析表明,河北邢台地区棉蚜的羧酸酯酶表达量较高,是新疆种群棉蚜的3.28倍。【结论】田间棉蚜已对吡虫啉产生了低水平的抗性,酯酶活力升高在棉蚜对吡虫啉低水平抗性形成中发挥作用。     

高氯吡虫啉亚致死剂量下麦长管蚜解毒酶活性的研究

试验采用室内毒力测定方法测定高氯吡虫啉对有翅麦长管蚜的室内毒力。以有翅麦长管蚜为供试昆虫,利用SPSS16.0分析试验数据,得到亚致死剂量LC10=1.066 mg/L。试验结果表明,高氯吡虫啉对麦长管蚜有较强的防治效果。本试验通过对高氯吡虫啉的室内毒力效果进行有效评价,拟确定高氯吡虫啉的合理使用剂量,以亚致死剂量处理蚜虫,吸光值增大,酶比活力增大,从而为麦长管蚜的田间有效防治提供了有效的数据参考。     

抗性选育对小菜蛾体内解毒酶和消化酶活性的影响

测定小菜蛾Cry1Ac抗性品系(Cry1Ac–R)、Cry1Ac敏感品系(Cry1Ac–S)3种解毒酶的活性。结果表明,小菜蛾抗性品系的谷胱甘肽转移酶活性高于敏感品系;敏感品系的羧酸酯酶和乙酰胆碱酯酶的活性高于抗性品系,但2品系的解毒酶活性无显著差异。测定小菜蛾Cry1Ac抗性品系、敏感品系及Bt抗性品系(Bt–T2)消化酶活性,结果小菜蛾敏感品系海藻糖酶、蔗糖酶活性均最高,Bt抗性品系最低,但各品系的2种消化酶活性之间差异不显著;小菜蛾敏感品系蛋白酶活性最高,抗性品系最低,各品系的蛋白酶活性差异极显著。     

异迟眼蕈蚊对溴氰菊酯的抗性风险及解毒酶活力分析

为了探讨异迟眼蕈蚊对溴氰菊酯的抗性风险和抗性生化机理,在室内采用溴氰菊酯对异迟眼蕈蚊进行抗性选育,对其抗性现实遗传力和解毒酶活力进行分析。结果表明:采用个体选育法和群体选育法分别对敏感品系和抗性品系进行选育,抗性选育24代后,抗性倍数达到11.36倍,现实遗传力h~2为0.077 1。当致死率为80%～90%时,预计异迟眼蕈蚊对溴氰菊酯的抗性增长10倍需要11～14代。增效剂对溴氰菊酯的增效结果表明,抗性品系中增效醚和磷酸三苯酯对溴氰菊酯的增效作用显著(P0.05)。解毒酶活性分析表明,随着抗性选育代数的增加,多功能氧化酶O-脱甲基和羧酸酯酶的活性显著增加(P0.05)。说明异迟眼蕈蚊对溴氰菊酯的抗性风险较小,但在食用菌生产中也要尽量降低溴氰菊酯的使用浓度;多功能氧化酶和羧酸酯酶活性的增强是异迟眼蕈蚊对溴氰菊酯产生代谢抗性的主要原因。     

桃蚜的抗性选育及其两种解毒酶活性研究

于室内对桃蚜进行高效氯氰菊酯抗药性筛选，选育至10代后抗性倍数增长到49．86倍。生化分析表明，抗性品系酯酶(Est)、谷胱甘肽S-转移酶(GSTs)活性均显著高于敏感品系。比较两个品系酯酶与谷胱甘肽-S-转移酶活性个体频率分布发现，抗性品系的桃蚜有更多的个体向酶活性高的区域分布。酶动力学测定结果显示，抗性桃蚜酯酶对底物α-NA的Km和Vmax都显著大于敏感品系；而谷胱甘肽S-转移酶对底物DTNB的Km则显著小于敏感品系，但两个品系的Vmax差异不显著。酯酶同工酶电泳表明，与敏感品系相比，抗性品系缺失E3酶带，但其酯酶同工酶染色较深。