酸性丙酮法提取猪血红素的研究

为了合理利用动物血液,试验采用酸性丙酮法提取新鲜猪血液中的血红素。结果表明:提取血红素的最佳工艺为浓盐酸与丙酮的体积比为2∶100,pH值为4.0,乙酸钠添加量为滤液量的1.0%,抽提时间为30 min,提取的血红素含量为57.1%。     

藏羊血中血红素提取工艺研究

通过正交试验确定了藏羊血中提取血红素的最优工艺条件,即：溶血时添加蒸馏水1倍、氯仿5倍、分离血红素时加丙酮5倍、离心时间为20min,pH值为3。     

秦川牛血红素提取工艺的研究

以秦川牛血为原料提取血红素,选择影响提取的主要因素——氯仿加入量、酸性丙酮加入量、pH分别作为单因素进行梯度试验,确定其合适范围,进一步通过正交试验选取最佳提取条件。结果表明,提取血红素的最佳工艺为氯仿加入量为血溶体积的5倍,酸性丙酮加入量为血球蛋白滤液的5倍,调节pH4～5。     

牦牛血液氯化血红素的分离提纯及工艺优化研究

试验以新鲜牦牛血液为原料,采用血粉法、冰醋酸法及醋酸钠法,探索制备氯化血红素的最优工艺参数,并对不同方法制备的氯化血红素纯度及得量进行对比。结果显示,血粉法的最优工艺是超声处理时间40 min,酸性丙酮添加量为120 mL,抽提时间30 min,乙酸钠添加量为9 mL,氯化血红素纯度达到96%,得量为7.38 g/L。采用冰醋酸法制备氯化血红素,当冰醋酸添加量为红细胞量的3倍时,氯化血红素纯度达到80%,得量为6.10 g/L。采用醋酸钠法制备氯化血红素,当氯仿添加量为红细胞量的2倍时,氯化血红素纯度达到90%,得量为3.44 g/L。通过对比3种制备方法,氯化血红素纯度依次为血粉法 > 醋酸钠法 > 冰醋酸法;氯化血红素得量依次为血粉法 > 冰醋酸法 > 醋酸钠法,由此可知,3种方法中,选用血粉法制备氯化血红素的量更高且更加有利于工业化生产。     

血红素的应用与提取方法

血红素是血红蛋白、肌红蛋白等的辅基,具有重要的生理功能,在医药、食品等方面得到广泛应用。论文介绍了血红素的冰醋酸提取法,酸性丙酮提取法、羧甲基纤维素提取法、酶解提取法、血粉提取法、有机酸和有机碱混合提取法。     

藏羊IFN-γ基因的扩增、序列分析及蛋白结构预测

为了研究藏羊IFN-γ基因的功能,提取藏羊脾脏总RNA,通过RT-PCR扩增藏羊IFN-γ基因并测序,应用DNA Star软件进行序列分析及编码蛋白结构预测。结果表明,藏羊IFN-γ基因长度为429bp,其中腺嘌呤和胸腺嘧啶含量较高,该基因编码143个氨基酸,其中疏水性氨基酸和亲水性氨基酸的含量较高。藏羊IFN-γ基因与参考绵羊、山羊、藏羚羊和牛IFN-γ基因的核苷酸序列同源性依次为100%、99.3%、99.1%和97.2%,氨基酸序列同源性依次为100%、99.3%、99.3%和95.8%。IFN-γ蛋白主要由α螺旋组成,亲水性较高,含有5种蛋白质功能位点,分别为1个酪蛋白激酶Ⅱ磷酸化位点、1个酰胺化位点、2个N-糖基化位点、2个cAMP和cGMP依赖的蛋白激酶磷酸化位点和3个蛋白激酶C磷酸化位点。     

藏羊MSTN基因克隆、生物信息学及组织表达分析

【目的】对藏羊肌肉生长抑制素(myostatin, MSTN)基因进行克隆和生物信息学分析,检测其在藏羊不同组织中的表达,为探究MSTN基因在藏羊中的生物学功能提供参考。【方法】以藏羊背最长肌组织cDNA为模板,克隆藏羊MSTN基因完整CDS区序列并测序,用SeqMan程序对测序结果进行拼接,并用BLAST在线程序对组装后的序列进行分析鉴定。用生物信息学软件进行相似性比对、系统进化树构建及生物信息学分析,用实时荧光定量PCR检测MSTN基因在藏羊不同组织中的表达量。【结果】藏羊MSTN基因CDS全长为1 128 bp,编码375个氨基酸。藏羊MSTN基因氨基酸序列与绵羊、牦牛、牛、猪、恒河猴、人、黑猩猩、犬、鸡及斑马的相似性依次为100.0%、93.4%、93.4%、95.2%、94.4%、94.2%、94.4%、93.1%、87.8%和87.5%;系统进化树分析结果表明,藏羊与绵羊的亲缘关系最近,与斑马和鸡的亲缘关系最远。藏羊MSTN蛋白属于亲水性分泌蛋白,且具有不稳定性,不含跨膜结构,含1个信号肽,存在31个潜在的磷酸化位点、2个N-糖基化修饰位点,主要分布在线粒体和细胞质中;MS...     

利用联产工艺从动物血液中提取生物活性物质

向猪血中加入抗凝剂,将血浆和血细胞分离,从血浆中提取生物活性物质.首先用硫酸铵以"三阶段盐析法"分步从血浆中提取粗纤维连接蛋白(FN)、粗免疫球蛋白和血浆杂蛋白;然后用丙酮和醋酸钠等从血细胞中提取血红素,并用氯仿、吡啶和冰醋酸等进行有机萃取纯化;最后再从溶血过滤所得的初级残渣中提取超氧化物歧化酶(SOD),并用丙酮等进行有机萃取纯化.结果表明,从1 000 mL猪血中可提取粗FN、免疫球蛋白、血浆杂蛋白、血红素和SOD分别为100 mg、5.0 g,33.0 g,10.2 g和1 945.3 U,并证明免疫球蛋白具有与抗生素同样的抑菌作用.     

藏羊血液多肽制备的工艺研究

为了充分利用藏羊血液资源,试验采用抗凝、过滤、喷雾干燥等工艺制得血粉,通过酶解过活性炭进行藏羊血多肽的制备,测定藏羊血液多肽制备工艺的优化工艺参数。结果表明:优化后的工艺参数为粉末活性炭用量2.0%、p H值5.0、温度50℃、时间2.0 h。各因素对酶解液脱色率影响大小为粉末活性炭用量p H值温度时间;对酶解液多肽损失率影响大小为粉末活性炭用量p H值时间温度。在该最佳工艺条件下藏羊血粉酶解液多肽损失率相对平稳,制得的藏羊血液多肽为浅黄色、无异味、小颗粒的粉末状态。     

澳洲白羊、杜泊羊、萨福克羊与青海高原型藏羊杂交一代羔羊肉用性能与胴体品质测定

为探讨引进肉羊品种澳洲白羊、杜泊羊、萨福克羊对青海高原型藏羊屠宰性状和羊肉品质的影响,以直线育肥4月龄澳藏F_1、杜藏F_1、萨藏F_1公羊为试验组,相同饲养管理条件下同月龄藏羊公羊为对照组,进行屠宰性能、胴体分割和肉质多项指标测定。结果表明:杜泊羊、澳洲白羊、萨福克羊与藏羊杂交,杂交一代4月龄羔羊屠宰率51.88%～54.32%,高于藏羊8.30～10.74个百分点(P0.01),净肉率75.24%～77.00%,高于藏羊6.26～8.02个百分点(P0.01),肌肉pH值、熟肉率与藏羊无显著差异(P0.05),但失水率高于藏羊5.58～8.22个百分点(P0.01),眼肌面积大于藏羊3.30～3.95 cm~2(P0.01),骨肉比1∶3.04～1∶3.39,高于藏羊的1∶2.28,GR值除萨藏F_1与藏羊接近外,澳藏F_1、杜藏F_1分别高于藏羊5.07 mm(P0.01)和2.75 mm(P0.05),肉藏F_1羔羊肉保水性略低于藏羊肉,但肉质鲜美、柔嫩多汁,适口性好,营养更加丰富,即肉藏杂交对藏羊胴体品质的提升具有显著作用。     

藏羊脑动脉系统结构特征与高原适应性研究

藏羊对严酷的高原低氧环境适应性很强,是高寒牧区最适宜发展的畜种之一,开展藏羊与低海拔绵羊脑血管形态的比较研究,可为探讨藏羊的高原适应性机理奠定基础.研究以高原藏羊—欧拉型藏羊和生活在低海拔地区的滩羊脑为试验材料,采用管道铸型腐蚀技术,运用比较解剖学方法对二者脑动脉系统的结构特性开展研究.比较发现,藏羊和滩羊脑动脉系统的大体解剖结构相同,但藏羊的大脑后交通动脉、上颌动脉的管径显著比滩羊粗,其它脑动脉管径平均值也略大;藏羊脑硬膜外异网显著长于滩羊;藏羊主要脑动脉中的侧支更发达,伸展较长,细小分支更丰富.藏羊有相对发达的脑动脉系统,利于向脑组织有效供血,可能是藏羊适应高原环境的结构特征之—.     

青海省绵羊品种与引进品种先天性免疫研究

为研究青海本地绵羊品种与引进品种的先天性免疫水平和品种特性,本研究选取青海省不同海拔地区的2个本地品种（欧拉羊、白藏羊）和1个引进品种（无角道赛特羊）共186只绵羊,采集新鲜血样,进行血常规检测（白细胞数（WBC）、红细胞数（RBC）、平均红细胞血红蛋白（HGB）、红细胞压积（HCT）、平均红细胞体积（MCV）、平均红细胞血红蛋白浓度（MCH）、血红蛋白浓度（MCHC）、血小板（PLT）、红细胞分布宽度（RDW-CV）、淋巴细胞百分比（LYM%））;制备血清,用绵羊ELISA试剂盒测定白介素-1（IL-1）、白介素-2（IL-2）、白介素-6（IL-6）、白介素-18（IL-18）、γ-干扰素（IFN-γ）、免疫球蛋白G （IgG）和主要组织相容性复合体（MHC）等免疫指标;分别以品种和品种来源地为因变量对检测结果进行比较分析。结果发现,以品种为因变量,无角道赛特羊的免疫水平最高,白藏羊的抗病性稍高于欧拉羊;以品种来源地为因变量时,本地绵羊品种的先天性免疫水平低于引进绵羊品种,对疾病的抵抗力较弱,除MCH、MCHC和RDW-CV外,无角道赛特羊在血液生化水平上均高于青海本地品种,说明无角道赛特羊是具有高抗病能力的优良品种。本试验为不同绵羊品种机体先天性免疫水平的研究提供了参考数据,对青海藏羊的选育工作和品种改良具有指导意义。     

牦牛血液中高纯度血红素的提取试验研究

本实验以牦牛血为原料,采用单因素实验选取最佳工艺参数,实验结果表明：蒸馏水、氯仿、酸性丙酮添加量分别为血液体积的1倍、4倍和4倍时效果较好,牦牛血红素纯度达到99.42%,收率为8.18g/L（按血细胞计）。     

欧拉型藏羊杂交培育结果及其对比分析

为推广优良品种在高寒牧区成为优势种,我们选纯种欧拉型藏羊为父本,青海藏羊和小尾寒羊为母本,经A、B、C三组杂交、培育和试验结果表明：杂种羔羊出生重：A组为4.3 kg,B组为3.7 kg,C组为4.4 kg,对照组分别0.8、0.7和1.2 kg,A、B、C三组初生重与对照组间差异极显著（P＜0.01）,C组初生重最大;12月龄杂种羊的胴体重与对照组比,欧x寒藏组提高率达109%,欧x寒组提高率为88%,欧x藏组提高率为60%,与对照组比较均差异极显著（P＜0.01）;欧拉杂一代成年公羊体重比青海藏羊高9.5%、母羊高7.2%;比小尾寒羊公体重高4.2%、母羊高5.8%;肉质中高能量、高蛋白、低脂肪和低胆固醇等特性数值仍在上升,且氨基酸含量更为丰富。     

青海绵羊红细胞钾型的研究

采用火焰光度法对青海省8个品种绵羊的红细胞钾型多态性特征进行了调查研究。结果发现,被检的8个品种绵羊均有高钾(HK)和低钾(LK)两种表型而呈现多态性,其中欧拉羊、藏羊、小尾寒羊以HK型为优势表型,新疆细毛羊、青海细毛羊、青海半细毛羊以LK型为优势表型;绵羊的红细胞钾型没有性别差异;红细胞钾型与生产性状指标间没有显著性关系;在被检的15项血液指标中,除WBC,BK值和EK值差异显著(P<0.01)以外,其他血液指标没有型间差异(P>0.05);不同红细胞钾型绵羊的HB型分布非常相似(P>0.05)。     

青海3个生态类型藏绵羊血红蛋白多态性研究

采用聚丙烯酰胺凝胶电泳对青海3个生态类型共计216只藏绵羊血红蛋白(HB)多态性进行了分析,结果表明:欧拉型藏绵羊和山谷型藏绵羊HB位点受HBA和HBB2个等位基因控制,出现HBAA、HBAB和HBBB3种基因型;而高原型藏绵羊HB位点受HBA、HBB和HBC3个等位基因控制,出现HBAA、HBAB、HBBB和HBAC4种基因型。3个生态类型藏绵羊HB位点均分别以HBAA和HBA为优势基因型和优势等位基因,欧拉型藏绵羊、山谷型藏绵羊和高原型藏绵羊的HBAA基因型频率分别为0.6104、0.8143和0.8116,HBA等位基因频率分别为0.7990、0.9000和0.9060,且HBA等位基因频率随着海拔的升高而增加。经χ2检验,3个生态类型藏绵羊HB基因型分布均处于Hardy-Weinberg平衡状态(P>0.05)。     

鸡血中血红素的提取

用醋酸钠作沉淀剂，从鸡血中提取血红素的最佳操作条件为：抽提时ｐＨ３．０，沉淀时ｐＨ５．０，醋酸钠使用量１．２％，酸性丙酮、水和氯仿使用量分别为血液体积的３．０倍、１．２倍和３．０倍。     

湿热应激对藏绵羊和山羊生长性能、抗氧化能力以及免疫功能的影响

本试验旨在研究藏绵羊和山羊在相同营养及湿热应激条件下血清激素、抗氧化和免疫指标的变化规律,考察湿热应激对藏绵羊和山羊生长性能、抗氧化能力以及免疫功能影响的差异。选取年龄和体重[(45.83±3.54)kg]相近的藏绵羊与山羊(波尔山羊×本地黄羊)各6只,试验共进行135 d,其中预试期15 d,正试期120 d。每日测定温湿度指数(THI),每月测定藏绵羊和山羊的血清相关指标。结果表明:1)5—7月份,羊舍THI随月份的增加显著升高(P0.05),6—8月份羊舍THI均大于72,因此将6—8月份定为湿热应激期。2)7、8月份藏绵羊和山羊直肠温度和呼吸频率均显著高于5月份(P0.05),且湿热应激期内藏绵羊直肠温度和呼吸频率均显著高于山羊(P0.05)。3)正试期内,湿热应激使得藏绵羊和山羊的干物质采食量最大降幅分别为10.70%和10.44%,平均日增重(ADG)最大降幅分别为50.00%和47.82%。4)羊舍THI由71.17(5月份)升高到76.82(7月份),藏绵羊和山羊血清皮质醇和胰岛素浓度显著升高(P0.05),血清葡萄糖和三碘甲状腺原氨酸浓度显著降低(P0.05)。湿热应激下,藏绵羊血清中生长激素和甲状腺素浓度的最大降幅均大于山羊。5)除藏绵羊7月份和山羊8月份血清总抗氧化能力,藏绵羊和山羊7、8月份的血清超氧化物歧化酶、谷胱甘肽过氧化物酶活性和总抗氧化能力均显著低于5月份(P0.05)外,血清丙二醛浓度均显著高于5月份(P0.05)。湿热应激下,山羊血清超氧化物歧化酶活性、总抗氧化能力和丙二醛浓度变化幅度均大于藏绵羊。6)与5月份相比,藏绵羊和山羊8月份的血清免疫球蛋白A、免疫球蛋白M、免疫球蛋白G和白细胞介素-2浓度显著降低(P0.05),而血清肿瘤坏死因子-α浓度则显著升高(P0.05)。湿热应激下,藏绵羊血清免疫球蛋白、白细胞介素-2和肿瘤坏死因子-α浓度的变化幅度均大于山羊。综上所述,湿热应激状态下藏绵羊和山羊的呼吸频率和直肠温度升高,抗氧化能力和免疫功能降低,从而导致生长性能降低。藏绵羊生长性能和免疫功能受湿热应激影响较大,而山羊抗氧化能力受湿热应激影响较大。     

无角陶赛特羊与藏系羊的杂交试验

用引进的无角陶赛特羊与青海藏系羊进行杂交试验,结栗表明:陶藏F1具有初生重,生长发育快,产肉性能好的优点。陶藏F1初生重3、月龄、6月龄重分别比当地藏系羊提高1.14kg、5.59kg和10.08kg,陶藏F1日增重比藏系羊增加24.95g,体高、体长、胸围、管围明显高于藏系羊。