利用羊抗鸡抗体检测鹅血浆中的抗体水平

利用商品供应的山羊抗鸡抗体ELISA检测鹅血液中抗体水平的可行性.在相同条件下,以羊抗鸡抗体作为第2抗体,在ELISA分析中检测利用同一抗原免疫后鸡和鹅血浆样品中抗体水平.经过相同倍数梯度稀释的鸡和鹅血浆样品中,所测到的鹅血样的D450 nm值曲线在处理组和对照组均与鸡的D450 nm值曲线变化趋势相同,只是随血样的稀释倍数上升,鹅血样D450 nm值的下降速度较慢.结果表明只要反应条件适当,抗鸡抗体可以作为第2抗体用于ELISA检测鹅血液中的抗体.通过抗原/血浆浓度梯度交叉试验,ELISA中抗原的最适包被质量浓度为100 μg/mL(150 μL/孔),血样最佳稀释比为1:12 800.ELISA测定所得鹅免疫试验中的抗体变化与理论预计结果一致,与在鸡上的变化也类似.     

应用ELISA方法检测犬狂犬病血清抗体试验

运用ELISA方法检测狂犬病抗体水平,试验结果表明:检测狂犬病抗体阳性率达92.5%,免疫效果基本满意。运用此方法较简单、操作方便、灵敏度高、特意性强,值得推广运用。同时,分析了免疫失效的原因。     

雏鸡新城疫母源抗体水平动态的监测

监测了具有高水平新城疫母源ＨＩ抗体的雏鸡在１－２８日龄期间，血清母源抗体水平变化动态。结果表明，随着日龄的增长，血清母源抗体水平逐渐降低，至２８日龄时已不再能出。免疫接种的临界日龄为１４日龄。     

用ELISA和TRUST法检测献血者血清梅毒抗体的效果比较

血站系统对献血者检测血清梅毒抗体的方法 ,主要有血浆反应素试验 (RPR)、血清反应素试验 (TRU ST)和酶联免疫试验 (EL ISA) ,其中 RPR法和 TRU ST法属于非特异性血清学试验 ,EL ISA属于特异性抗体检测试验。这些检测法的敏感性和特异性都有不同程度的差异 ,给判断结果带来一定的困难。笔者采用目前常用的 EL ISA法和 TRUST法检测血清梅素抗体 ,作了比较研究 ,现将结果报道如下 :1　资料和方法1.1　标本经 EL ISA法检测为阳性的献血者标本 33份 ,经临床确诊的梅毒患者标本 2 0份和室内质控血清 1份。1.2　试剂及仪器梅素 T…     

ELISA双抗体夹心法检测河蟹“颤抖病”病毒

用纯化的河蟹“颤抖病”（暂定名）病毒分别免疫家兔和山羊,制备高效价的抗血清。羊抗血清经硫酸铵盐析纯化。经方阵滴定,选择P／N＝2．95时作1：100稀释的血清为工作浓度,建立ELISA双抗体夹心法检测样本144份,包括来自长江水域的野生河蟹、人工感染发病的河蟹、1999年和2000年从江苏采集的自然发病的病蟹及市场购买河蟹。结果显示,病蟹和市场购买河蟹的阳性率为66．7％－100％,人工感染的病蟹和人工感染石蟹致病组阳性率均为100％,来自长江水域的健康河蟹及未接种病毒的对照石蟹阳性率均为0,表明建立的方法可以用于检测河蟹“颤抖病”的病原。     

应用ELISA检测鸭抗多杀性巴氏杆菌抗体的动态变化

应用ＥＬＩＳＡ间接法检测鸭抗多杀性巴氏杆菌抗体，具有快速及特异的优点。鸭免疫禽霍乱疫苗１周后，抗体滴度开始上升，４周后达到高峰。用巴氏杆菌Ｃ４８－１攻击不同抗体滴度的鸭只，抗体滴度为１：４００时，保护率为９０％，抗体滴度下降时，攻毒保护率也随即降低。     

应用PPA—ELISA检测系统控制猪瘟的持续感染

上海郊区某两猪场自１９９４年初起不断有少量仔猪死亡，经诊断为猪瘟持续感染（亚临床隐性感）。对发病舍的母猪和仔猪应用ＰＰＡ－ＥＬＩＳＡ检测系统重点检测其血清猪瘟抗体水平，表明８．３％的母猪和相当数量的仔猪抗体郊价处于低水平状态。普查表明，在１１５８头母猪中ＯＤ值小于０．５的有５７头，占４．９２％。用４头份的猪瘟疫苗对抗体水平低的母猪进行强化免疫，一个月后检测其抗体效价；再用６头份的猪瘟疫苗对抗体效价     

RT-PCR检测实验小鼠自然和实验感染鼠诺如病毒

为了解小鼠自然感染鼠诺如病毒(murine norovirus,MNV)的情况,采集80只实验小鼠的粪便样本,应用RT-PCR方法扩增粪便样本的MNV ORF2特异性基因(187 bp,MNVnt 5473-5659)片段.对PCR检测为阳性的粪便样本经10倍体积的PBS稀释后灌胃到4只ICR小鼠体内,1周后,将3只ICR小鼠与灌胃的小鼠同居饲养,观察小鼠是否出现异常症状,定期采集粪便做RT-PCR检测,研究小鼠实验感染MNV的情况.1个月后,处死小鼠,采集粪便、盲肠、十二指肠、脾、肝、大脑、肾、肺、心脏、胸腺、子宫、卵巢和唾液腺等器官做RT-PCR检测,研究MNV的主要感染部位.结果表明,自然感染的阳性率为13.75％(11/80);实验感染的小鼠外表健康、活泼、没有腹泻现象,阳性率为100％;主要的感染部位为小鼠的消化系统.本研究是首次在上海地区实验小鼠粪便中检测到MNV.     

His6免疫原的制备及免疫小鼠抗体效价检测

采用EDC一步法将His6多肽分别与匙孔血蓝蛋白(KLH)和牛血清白蛋白(BSA)偶联,制备两种人工结合抗原KLH-His6和BSA-His6。将制备的KLH-His6作为免疫原,皮下分5点注射免疫6只健康6周龄雌性Balb/c小鼠;首次免疫取KLH-His6(50μg/只)与氟氏完全佐剂(FCA)充分乳化,每只免疫200μL,以后每间隔两周,同法进行第2,3次免疫,用氟氏不完全佐剂(FIA)乳化。每次免疫8 d后尾部采血,以BSA-His6为包被抗原检测抗His6抗体。结果表明,成功制备了His6免疫原,并免疫了小鼠;间接ELISA检测不同时期小鼠抗体效价最高达到1∶8 000,免疫小鼠的抗体效价水平整体呈上升趋势,为His6单隆抗体的制备奠定了基础。     

猪场圆环病毒-2型血清抗体的调查

[目的]监测聊城周边地区猪圆环病毒病的感染和流行情况。[方法]以山东省聊城周边地区的7个养猪场的222份血清为材料,应用ELISA方法配合流行病学调查,检测猪圆环病毒抗体水平。[结果]检测发现7个养猪场的猪群都感染过猪圆环病毒,抗体阳性率在33.3%~83.3%。发病猪群都为5~10周龄的保育仔猪。猪群在断奶后1周左右,出现进行性消瘦,生长迟缓,采食量下降,被毛粗乱,精神差。剖检病变主要表现为发病猪和死亡猪全身淋巴结水肿,发黄,肾脏水肿,肺脏肿大,质地变硬。该疾病初步定为由PCV-2感染所致的猪断奶后多系统衰竭综合征（PMWS）。[结论]该研究为制定猪圆环病毒病的综合防制措施奠定了基础。     

间接ELISA检测雏鸡烟曲霉菌抗体的研究

以烟曲霉菌丝提取物作为包被抗原 ,建立了检测雏鸡血清中烟曲霉菌抗体的间接 ELISA方法。特异性试验和重复性试验证明该方法特异性高 ,重复性好 ,其抗原包被浓度为 1 2 4μg/ ml,血清最适稀释度为1∶ 1 6,抗原最佳包被时间为 4℃过夜 ,血清反应时间为 3 7℃作用 1 .5 h。对 1 2 0份人工感染烟曲霉菌的雏鸡血清试验发现 ,间接 ELISA检出时间比琼脂扩散试验早 7d以上 ,检出率高约 40 .8%。表明间接 ELISA试验是一种特异敏感的雏鸡血清烟曲霉菌抗体检测技术     

检测传染性支气管炎抗体NP-ELISA方法的建立

【研究目的】建立可在临床上检测鸡传染性支气管炎抗体的检测IBV抗体的间接ELISA方法;【方法】以表达的重组IBVNP蛋白为包被抗原,将之包被于聚苯乙烯酶标板上,以封闭液进行封闭,然后加待检血清在37℃作用1h,洗涤后加酶标兔抗鸡IgG抗体,在37℃作用1h,加底物显色,终止反应后测定OD值;【结果】抗原包被浓度为1.45μg/ml,待检血清最佳稀释度为1:40,酶标二抗最佳工作浓度为1:1000,确定阳性判定标准为OD450≥0.314。NP-ELISA与AIVH9、H5、H7、IBD、ND、EDS76的标准阳性血清不发生交叉反应,具有良好的特异性;【结论】NP-ELISA具有特异性强、灵敏度高、重复性好、方便快速的特点,可用于临床IB抗体的检测。     

应用酶联免疫吸附试验检测牛肺疫血清抗体的研究

本文用普通ELISA和BA--ELISA检测牛肺疫血清抗体并与间接血凝试验和补体结合试验作比较,结果表明阳性检出率BA--ELISA(86.7%,13/15)>普通ELISA(80%,12/15)>间接血凝(53.3%,8/15)>补反试验(40%,6/15)。8种类症鉴别血清中6种呈现ELISA阴性。故认为ELISA是一种特异、敏感、快速、简便的血清学检测牛肺疫的方法,适于在现地检验时应用。     

某种鸡场鸡白痢抗体检测分析

采用全血平板凝集试验,对漯河市某种鸡场2317只3月龄后备种鸡进行鸡白痢抗体检测,结果：阳性率为10．3％,其中A品系种公鸡阳性率为3．4％、种母鸡阳性率为1．2％,B品系种公鸡阳性率为18．4%、种母鸡阳性率为11．4％。试验说明该鸡场后备种鸡中沙门氏菌病感染严重;不同品系、不同性别后备种鸡感染程度差异较大。     

牛轮状病毒双抗体夹心ELISA检测方法的建立

用差速离心法纯化的牛轮状病毒(BRV)分别免疫鼠和兔,制备了鼠抗BRV和兔抗BRV超免疫血清,并用层析方法进行了纯化,建立了检测BRV的双抗体夹心ELISA方法.该双抗体夹心ELISA的最佳反应条件为:兔抗BRV IgG包被浓度为10μg·mL-1,鼠抗BRV IgG工作浓度为5 μg·mL-1,样品反应时间60 mi...     

青海省山羊支原体山羊肺炎亚种抗体检测(摘要)(英文)

[目的]调查山羊传染性胸膜肺炎在青海省的流行状况。[方法]利用山羊支原体山羊肺炎亚种抗体检测间接血凝试剂盒对青海各地区的208份山羊血清进行检测。[结果]山羊血清阳性率为16.3%,不同地区山羊的阳性率范围为6.7%～24.3%。[结论]青海地区的山羊支原体山羊肺炎亚种的感染率较高,应该加强对该病的防控。