血管紧张素转换酶2在维持肠道稳态中的作用

血管紧张素转换酶2(ACE2)是首先克隆出的人类血管紧张素转换酶(ACE)的同源基因,是肾素-血管紧张素系统(RAS)的关键调节因子,其主要通过水解血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)生成血管紧张素1-7[Ang(1-7)]从而发挥舒张血管、抗炎、抗增殖等作用。近期研究发现,ACE2不仅对心血管和肾功能等具有明显的调控作用,对抑制肠道炎症、维持肠道稳态、保护肠道健康等同样具有积极的影响。当前对ACE2在肠道健康领域的研究较少。论文就ACE2通过影响肠道微生态对维持肠道稳态作用的研究进行综述,为发掘ACE2的新功能提供参考。     

血管紧张素转换酶及其与血压关系的研究进展

肾素-血管紧张素-醛固酮系统(RAS)是血压最重要的调节系统之一。血管紧张素转换酶(ACE)位于这个系统的中心,是RAS活性的限速酶,ACE基因被认为是高血压病的候选易感基因。近些年来,随着分子生物学技术的发展和对该酶的深入研究,ACE受到人们的广泛关注,被认为是调节RAS功能和血压的关键物质。1血管紧张素转换酶的生物化学研究ACE在全身组织中分布广泛,存在于心、脑、小肠、胃、肾、附睾、肺、肝、胰、脾动脉管壁上。目前认为约80%的ACE存在肺组织血管内皮细胞上,位于内皮官腔面的吞饮小泡或细胞膜中。它是一种含锌的单链多态酸性糖…     

血管紧张素转移系统(RAS)在肝脏纤维化形成中的作用机制

肝纤维化是多种致病因子导致细胞外基质(ECM)过度沉积的过程。肾素血管紧张素系统(RAS)是机体重要的体液调节系统,在调节血压和水、盐代谢中发挥重要作用。近年来发现RAS与肝纤维化的发生也有着密切联系。特别是RAS中新的关键因子ACE2的发现丰富了RAS的作用,证明其主要通过水解AngII生成Ang(1-7))对抗ACE-AngII-AT1/AT2通路从而抗纤维化。本文结合近年的研究结果,就RAS中各关键因子在肝脏纤维化生成中的作用及其机制作一简要综述。     

血管紧张素转化酶性质及胶原蛋白对其活性抑制效果的研究

血管紧张素转化酶(Angiotensin Converting Enzyme,ACE)与人和动物血压调节密切相关,为高血压疾病的药物靶标,筛选ACE抑制剂可为研制新型高血压疾病预防药物提供可靠的先导化合物。试验从猪肺中提取ACE,首先对其酶学性质进行了试验分析,继而考察了三个不同商品化的胶原蛋白肽对ACE抑制活性的影响。采用分光光度法,以马尿酰-组氨酸-亮氨酸(Hip-His-Leu,HHL)为底物测定血管紧张素转化酶的活力。结果表明:血管紧张素转化酶的最适pH为8.0;最适温度为40℃;350mmol/L氯离子存在的情况下,能够明显提高ACE的活性;金属离子对酶活的影响表现出促进或抑制的作用。通过比较,在低温条件下提取的自制胶原蛋白肽的ACE抑制活性要高于另外两种商品化胶原蛋白肽产品。     

肾素血管紧张素系统(RAS)两条轴相互负向调节与大鼠非酒精性脂肪肝病(NAFLD)肝损伤的关系研究

探讨了肾素血管紧张素系统(renin angiotensin system,RAS)两条轴对大鼠非酒精性脂肪肝病(non-alcoholic fatty liver disease,NAFLD)肝脏损伤的相互负向调节作用。30只雄性SD大鼠随机分为正常对照组、模型组和用药组。除正常对照组外,其余2组饲喂高脂饲料,用药组另外给伐他汀50 mg/kg·d。3周后,宰杀大鼠,测定血清中甘油三酯(TG)、谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)的含量;测定肝组织匀浆羟自由基(·OH)、一氧化氮合酶(NOS)、超氧化物歧化酶(SOD)、总抗氧化能力(T-AOC)酶活性;ELISA法测定组织匀浆中血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)、血管紧张素1-7(Ang1-7)及白细胞介素1β(IL-1β)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)含量;Western blot分析肝组织血管紧张素转化酶(ACE)、血管紧张素转化酶2(ACE2)、血管紧张素Ⅱ受体1亚型(AT1R)、Mas受体(MasR)蛋白水平。结果:与正常对照组相比,模型组大鼠血清TG、AST和ALT含量以及·OH和NOS活性均显著升高(P<0.05), T-AOC、SOD活性显著降低(P<0.05);IL-1β和TNF-α含量极显著升高(P<0.01);ACE、ACE2的蛋白表达水平与ACE/ACE2的比值均显著升高(P<0.05),AngⅡ、Ang1-7含量与AT1R表达升高(P<0.05),MasR表达有升高趋势(P>0.05)。结论:高脂饲料连续饲喂3周可诱导大鼠发生NAFLD,肝脏局部RAS两条轴均处于激活状态,ACE介导AngⅡ-AT1R经典轴促进肝损伤,而ACE2介导Ang1-7-MasR轴抵抗肝损伤;ACE2负性调节RAS作用,对大鼠NAFLD时肝脏氧化应激及炎性损伤有一定保护作用。     

κ-酪蛋白遗传多样性对血管紧张素Ⅰ转换酶抑制肽活性的影响

牛奶中蛋白质是生物活性肽的来源之一，这些肽在酪蛋白和乳清蛋白的消化过程中产生。因此，本试验主要研究牛奶中不同的κ-酪蛋白基因型A、B、C、E、F1、F2、G1、G2、H、I和J中活性肽对血管紧张素Ⅰ转换酶（ACE）抑制活性的影响。通过分析肛酪蛋白基因型的氨基酸序列来测定ACE抑制肽的活性。测定了已知的生物活性肽活力和其它一些κ-酪蛋白基因型巾其它肽的活性。结果表明，κ-酪蛋白基因型B和基因型C中的ASP（ACE抑制肽）的IC50（半数抑制浓度）值为242．3，     

牛磺酸对大鼠高血压的预防作用及其机理的研究

通过检测不同周龄大鼠血液中血管紧张素Ⅱ (ATⅡ) 含量和血管紧张素转换酶 (ACE) 活性变化和测定补充不同水平牛磺酸和 β- 丙氨酸 (牛磺酸转运抑制剂) 大鼠 ATⅡ含量和 ACE 活性变　化及与影响高血压发生的相关因素血清中总胆固醇 (TC)、甘油三脂 (TG)、低密度蛋白胆固醇 (LDL)　的含量,探讨牛磺酸对高血压发生的预防作用。试验结果证明,补充牛磺酸可使血液中 ATⅡ含量、ACE 活性降低 (P<0.05) 的同时,血液中 TC、TG、LDL 的含量也不同程度的降低 (P<0.05)。     

血管紧张素转化酶2研究进展

血管紧张素转化酶2(ACE2)是2000年发现的肾素-血管紧张素系统(RAS)的新成员。作为RAS系统的关键酶,ACE2与ACE的作用相反,它主要是通过降解血管紧张素Ⅱ生成7肽的血管紧张素Ang(1-7)而发挥机体保护功能。研究发现,ACE2不仅可以起到保护心脏、肾脏、肝脏、肠道等器官的作用,而且广泛参与肌肉、脂肪等组织的生理病理过程。此外,还与氨基酸、葡萄糖等物质的代谢过程密切相关。论文就ACE2多样性的生物功能做一综述。     

肾素血管紧张素系统在溃疡性结肠炎小鼠肠-血屏障损伤中的调控作用

本研究旨在探讨肾素血管紧张素系统(renin-angiotensin system, RAS)在溃疡性结肠炎小鼠肠-血屏障损伤中发挥的作用。选取16只ICR小鼠,随机分为正常对照组(Control组)和葡聚糖硫酸钠盐处理组(DSS组),等体积灌胃生理盐水。试验至第4天,DSS组小鼠在饮用水中添加DSS(终浓度为4%)制造小鼠溃疡性结肠炎模型。期间每天记录小鼠体重、粪便性状和粪便隐血情况,并计算疾病活跃指数(disease activity index, DAI)。DSS饮用至第8天,所有小鼠采血后剖检,量取结肠长度,取结肠组织等样品。进行如下试验：1)HE染色观察结肠组织病理变化;2)ELISA法检测血液中血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor, VEGFA)及结肠组织中Ang1-7和AngⅡ的含量;3)Western blot检测结肠组织中血管紧张素转化酶2(angiotensin-coverting enzyme 2, ACE2)、血管紧张素转化酶(ACE)和质膜膜泡关联蛋白(plasmalemma vesicle associate...     

绵羊乳酪蛋白血管紧张素转换酶抑制肽的制备与鉴定

以绵羊乳酪蛋白为原料,采用中性蛋白酶水解制备生物活性肽,研究酶解时间对酶解产物水解度和血管紧张素转换酶(angiotensin converting enzyme,ACE)抑制率的影响,利用液相色谱-质谱联用技术对水解产物进行分析和鉴定,筛选具有潜在ACE抑制作用的生物活性肽.结果表明:酶解时间达到300 min时,水...     

血管紧张肽Ⅱ在哺乳动物卵巢中的作用

肾素-血管紧张肽系统(renin-angiotensin system,RAS)是哺乳动物体内重要的生理功能调节系统,血管紧张肽Ⅱ(AngⅡ)是RAS发挥功能的主要活性物质。AngⅡ通过与其受体(AT1R和AT2R)的特异性结合,激活细胞内多种信号转导通路,在动物卵巢功能调节过程中起着重要的作用。本文就AngⅡ及其受体在哺乳动物卵巢的分布、作用和发挥作用的信号通路等进行综述。     

乳酸菌发酵对血管紧张素转换酶抑制肽功能特性的影响

研究乳酸菌发酵血管紧张素转换酶抑制肽对其功能特性的影响。结果表明：血管紧张素转换酶抑制肽经乳酸菌发酵后提高了血管紧张素转换酶抑制活性，其中以鼠李糖乳杆菌发酵后的活性最高，为97．83％；血管紧张素转换酶抑制肽对乳酸菌的生长有促进作用，以双歧杆菌活菌数量提高最大，鼠李糖乳杆菌次之；乳酸菌对致病性大肠杆菌有明显的抑制作用，血管紧张素转换酶抑制肽经乳酸菌发酵后对致病性大肠杆菌的抑制作用优于发酵乳，以鼠李糖乳杆菌的抑制作用最强，其抑菌圈直径高达24mm。     

酶解蚕蛹蛋白制备血管紧张素转换酶抑制肽的工艺优化

采用碱性蛋白酶水解蚕蛹蛋白,制备血管紧张素转换酶(angiotensin-converting enzyme,ACE)抑制肽,是蚕蛹蛋白深度开发的途径之一。以ACE抑制率为响应值,用响应面分析法研究酶解温度、酶解pH和加酶量等因素对酶解产物的ACE抑制活性的影响,优化制备工艺。结果表明,各因素对制备ACE抑制肽的活性影响程度由大到小依次为酶解pH、酶解温度、加酶量。获得碱性蛋白酶水解蚕蛹蛋白制备ACE抑制肽的最佳工艺条件为:酶解温度50.8℃,酶解pH 9.0,加酶量3 500 U/g。在此条件下,蚕蛹蛋白酶解产物对ACE的理论抑制率最高可达96.67%,验证值为96.49%±1.75%,IC50值为0.102 mg/mL,预测模型可靠性高,可应用于蚕蛹ACE抑制肽的酶法制备。     

新疆双峰驼乳酪蛋白血管紧张素转化酶抑制肽的酶法制备和抑制特性

对新疆双峰驼乳酪蛋白分别进行胃蛋白酶和胰蛋白酶的单酶和双酶联合水解,用反相高效液相色谱外标法,对产生的马尿酸含量进行检测,测定水解产物血管紧张素转化酶(angiotensin converting enzyme,ACE)抑制活性.通过米式方程对比水解产物与卡托普利之间的竞争关系,并用50、10、3?kDa的超滤膜对水解...     

断奶仔猪ACE2基因的克隆及遗传进化分析

采用RT-PCR扩增和基因克隆技术鉴定断奶仔猪血管紧张素转化酶2(ACE2)基因序列,并与公布的猪以及其他物种的ACE2基因进行同源性比对.结果,成功克隆出了仔猪ACE2部分序列,该核苷酸序列与GenBank上公布的野猪ACE2核苷酸序列同源性达到98％,与欧洲牛的同源性为87.8％,与人的同源性为78.8％,与禽类(鸡)的同源性较低.遗传进化分析发现该扩增片段与牛的遗传距离最近,与鸡则处在完全不同的2个分枝上.氨基酸进化与基因遗传进化结果一致.本研究为仔猪ACE2的有效表达、生物学活性及其在苏姜猪中作用的研究奠定基础.     

真核表达质粒pcDNA.3.1(+)-ACE2的构建及其在CHO细胞中的表达

为了构建pcDNA.3.1(+)-血管紧张素转化酶2(ACE2)真核表达质粒并检测在中国仓鼠卵巢(CHO)细胞中的表达,从羊肾脏中提取总RNA,经RT-PCR扩增出ACE2基因,后将其与pcDNA3.1载体进行连接重组,构建pcDNA3.1(+)-ACE2真核表达质粒,经HindⅢ、XhoⅠ限制性内切酶双酶切及DNA序列测序分析等方法验证后,通过Lipofectamine 3000脂质体介导转染至CHO细胞,Western blot法检验ACE2基因在蛋白质水平上的表达。结果显示:RT-PCR扩增出大小约为2 200 bp特异ACE2基因片段,连接获得的pcDNA3.1(+)-ACE2重组体经HindⅢ、XhoⅠ酶切后分别出现约2 200 bp和5 000 bp片段,测序分析与Gen Bank上公布的结果完全一致,表明成功克隆了重组pcDNA3.1(+)-ACE2真核表达质粒,Western blot检测显示该pcDNA3.1(+)-ACE2能在CHO细胞中表达。本研究成功构建了pcDNA3.1(+)-ACE2真核表达质粒,并证实其能在CHO中表达,为后续探究ACE2蛋白活性及其作用的研究奠定了基础。     

兔动脉粥样硬化斑块与肾素-血管紧张素系统关系的研究

为探讨肾素 -血管紧张素系统 ( RAS)对实验性兔动脉粥样硬化 ( AS)的影响 ,采用 2 0只雄性新西兰大白兔 ,随机分为 2组。对照组饲以全价颗粒饲料 ,实验组采用高胆固醇饮食( HCD)饲喂法建立 AS模型。分别检测总胆固醇( TC)、血管紧张素转换酶 ( ACE)和血管紧张素 ( Ang ) ,并对主动脉 AS病灶进行病理检查。结果表明 :与对照组相比 ,高胆固醇饮食 1周后 TC开始显著升高 ,第 4周达高峰 ,第 1 6周组织中 Ang 水平显著升高 ( P <0 .0 5) ;病理检查见主动脉内膜满布淡黄色斑块 ,镜检由增厚的内膜、泡沫细胞和胆固醇结晶组成 ;对照组无异常。高胆固醇饮食 1 6周可建立兔 AS模型 ,RAS可影响 AS斑块的形成     

白羽肉鸡血管紧张素转换酶2(ACE2)全基因克隆及序列信息分析

血管紧张素转换酶2(Angiotensin converting enzyme 2,ACE2)作为血管紧张素系统(Renin-Angiotensin System,RAS)的重要一员,对鸡ACE2的研究尚没有开展。本研究以白羽肉鸡为研究对象,从白羽肉鸡空肠组织中扩增出ACE2基因编码区的特异性片段,TA克隆到pMD-19T载体并转到大肠杆菌DH5α感受态细胞,对生长出的单菌落进行蓝白斑筛选、菌液PCR、酶切验证后测序,对所得序列进行了生物信息学分析。结果:本研究明确了ACE2在白羽肉鸡体内有存在,分布表达有组织特异性,在消化系统及肾脏有较高表达。并且首次成功克隆了白羽肉鸡ACE2全基因序列,共包括2,444个核苷酸,编码808个氨基酸残基,同源性及遗传进化结果一致。该基因编码ACE2蛋白属不稳定、亲水性蛋白,蛋白信号肽序列位于第1-17aa之间,蛋白跨膜螺旋预测为I型跨膜蛋白。研究所得序列已上传GenBank(基因序列号为MK560199),为ACE2在肉鸡及禽类方面的研究提供了基础资料。     

中国麻鸭血管紧张素转化酶2(ACE2)的基因克隆及基因结构的序列解析

血管紧张素转化酶2（ACE2）被发现以来，其病理生理功能，特别是作为SARS、COVID-19等冠状病毒侵入细胞的功能性受体，显示了巨大的潜能，明确其在不同物种的基因序列及结构可为冠状病毒感染机制研究提供依据。本研究以中国麻鸭为研究对象，利用RT-PCR和Western blot检测ACE2在中国麻鸭各组织中的表达，然后用PCR技术，扩增出中国麻鸭ACE2基因的完整ORF序列，再TA克隆至pMD-19T载体中进行测序，对所得序列进行生物信息学解析。结果证实，ACE2在中国麻鸭心、肝、肺、肾等组织中均有表达。基因克隆结果显示，该中国麻鸭ACE2基因的CDS序列全长为2 435 bp，编码805个氨基酸残基，与人ACE2核苷酸序列和氨基酸序列同源性分别为66.2%和66.4%，且处在不同进化树分支上。通过对与SARS病毒S蛋白结合有关的18个关键氨基酸残基分析发现，中国麻鸭除第330和353位氨基酸外，其余均与人不相同。结构分析发现，中国麻鸭ACE2为Ⅰ型跨膜蛋白，有多处N-糖基化位点。研究首次获得中国麻鸭ACE2基因的完整ORF序列及相关基础资料，所得序列已上传GenBank并被成功收录，研究结果为开展ACE2在鸭上的功能研究提供了理论依据。     

阿拉善双峰驼ENaCα亚基基因克隆及激素对肾皮质细胞中该基因表达的影响

为探究阿拉善双峰驼上皮细胞钠通道的作用特点,试验采用深圳华大公司提供的ENaCα亚基基因片段序列设计PCR引物,提取阿拉善双峰驼肾皮质总RNA,反转录合成cDNA,PCR扩增获得双峰驼ENaCα亚基基因,构建克隆质粒pMD19-T-ENaCα,对重组质粒进行双酶切和测序分析;采集双峰驼肾皮质部分,细胞体外培养到P3代后,加入不同浓度的醛固酮(aldosterone)和血管紧张素Ⅱ(angiotensinⅡ),实时荧光定量PCR技术检测细胞中ENaCα亚基基因的表达情况,以确定ENaCα对两种激素浓度变化的敏感性。结果显示,PCR扩增得到2.2kb的特异性条带,SmaⅠ和PstⅠ双酶切得到2.2和2.7kb的条带,表明重组质粒pMD19-T-ENaCα构建成功。实时荧光定量PCR结果显示,1×10^-9 mol/L醛固酮和血管紧张素Ⅱ处理的双峰驼肾皮质细胞的ENaCα表达量显著高于对照组(P<0.05);1×10^-6、1×10^-7和1×10^-8 mol/L醛固酮和血管紧张素Ⅱ表达量显著低于对照组(P<0.05)。本研究结果为揭示双峰驼水盐代谢的生理机制提供了试验依据。