藏獒精液冷冻过程中pH值及甘油对其活力的影响

为探讨pH值和甘油对藏獒精液冷冻保存前后精子活力的影响,筛选6条种公藏獒在其繁殖季节(9~12月份)以不同pH值梯度(5.5,6.0,6.5,7.0,7.5)稀释液和不同甘油平衡时间(10,20,30,40,50,60,70,80,90 min)对藏獒精液进行冷冻,检查精子活力变化。结果表明,在藏獒精液冷冻过程中,pH值为6.5的稀释液中精子在冷冻前后有较高的活力;甘油平衡时间对藏獒精液活力有较大影响,冻前精子活力随甘油作用时间而下降,在甘油平衡时间为20 min所得藏獒冻后精子活力效果较好。     

藏獒精液冷冻技术研究

为了确定适合藏獒精液冷冻保存的方法,试验对藏獒精液的形态学指标评价、稀释液pH值、甘油浓度、甘油平衡时间及不同冷冻形态对藏獒精液冷冻及解冻后活力的影响进行研究。结果表明:三羟甲基氨基甲烷(Tris)-柠檬酸稀释液和冷冻液的pH值在6.5~7.0,4%的甘油浓度,甘油平衡时间为60 min,用液氮熏蒸法0.25 mL细管进行藏獒精液冷冻效果最佳。     

几种因素对鸵鸟冷冻精液精子活力影响的研究

对每组20份精子样品,采取不同冷冻程序,分析了各单因子如:稀释液种类、稀释液中甘油浓度、稀释方法、4℃低温平衡时间、冷冻面与液氮面距离及热平衡时间对鸵鸟冷冻精液的精子解冻复苏活率的影响。结果表明:以含甘油浓度2.8%的(MEM·蛋黄)稀释液,采用两步稀释,低温平衡2.5h,冷冻面与液氮面距离1.5cm进行2min热平衡,鸵鸟精液的冷冻效果较好。     

兔精液冷冻保存的研究

本试验采用不同的稀释液对兔精液进行冷冻保存,并比较了在稀释液中添加不同防冻剂以及平衡时间对兔精液冷冻保存效果的影响.结果表明:稀释液Ⅱ稀释的精液,解冻后,精子活率明显高于稀释液Ⅰ稀释的(P＜0.01),其复苏率显著高于后者(P＜0.05).以稀释液Ⅱ为基础液,添加不同浓度(27.3%,15%,12%,9%)的DMSO对兔精液冷冻保存,结果解冻后精子活率以15%及12%两组较好,其中添加15%的优于12%的,但差异不显著(P＞0.05).选择不同种类的防冻剂(7%甘油与15%DMSO)比较时,发现7%甘油组解冻后精子活率明显低于15%DMSO组,二者差异极显著(P＜0.01),其复苏率显著低于后者(P＜0.05).以15%DMSO作为防冻剂,采用不同的平衡时间在5 ℃平衡,结果发现平衡30 min和60 min的解冻后精子活率较好,但差异不显著(P＞0.05),而90 min和120 min的冷冻效果较差.     

陕北白绒山羊精液冷冻稀释液配方优化

为筛选陕北白绒山羊精液冷冻保存稀释液中最适的甘油及卵黄浓度,试验以三羟甲基氨基甲烷(Tris)6.057 0 g,蔗糖5.134 6 g,果糖1.500 0 g,柠檬酸钠3.318 6 g,青霉素10万IU,双蒸水200 m L配制成基础液,采用双因素正交试验研究不同浓度甘油、卵黄对精液冷冻保存的影响;采用一步稀释法冷冻保存陕北白绒山羊精液,复苏后检测活率、畸形率等确定精液冷冻稀释液最佳配方。结果表明:最佳冷冻稀释液配方为基础液80.5%+甘油6%+卵黄13.5%,精液冷冻、复苏后精子活率达到(37.2±0.5)%,精子畸形率为(11.2±0.5)%,质膜完整率为(64.2±0.5)%,均优于其他组,冷冻效果达到最佳,是保存山羊精液的冷冻稀释液最佳配方。     

东佛里生奶绵羊精液冷冻保存方法的研究

本研究旨在探讨东佛里生奶绵羊冷冻稀释液中添加维生素B₁₂以及不同冷冻保护剂对冷冻精液品质的影响，并筛选适合东佛里生奶绵羊的精液冷冻程序。通过假阴道法采集3只健康配种用东佛里生奶绵羊的精液，分为3组，分别为对照组(基础稀释液+6%甘油)、维生素B₁₂组(基础稀释液+6%甘油+0.05 mg/mL维生素B₁₂)、冷冻保护剂组(基础稀释液+5%乙二醇)。在-10～-100℃温区内设置3种降温速率(40、30、20℃/min)进行冷冻。结果显示：维生素B₁₂组冷冻精液的运动性能和畸形率较对照组没有显著变化；对照组冷冻精液的总活率、前向运动比例、平均路径速度、直线速度、曲线速度、直线性、鞭打频率、摆动性优于冷冻保护剂组(P<0.05)，畸形率低于冷冻保护剂组(P<0.05)。在冷冻程序的设计上，在-10～-100℃温区内以-40℃/min速率进行降温的冷冻程序A，其冷冻精液总活率、前向运动比例、平均路径速度、直线速度、曲线速度、直线性优于其他2个程序(P<0.05)，其畸形率最低(P<...     

冷冻距离和冷冻保护剂种类对超低温保存新西兰兔精液品质的影响

为了探讨新西兰兔精液超低温冷冻保存的最佳方法,试验采集新西兰成年公兔精液,采用0.25 mL细管冷冻法进行超低温冷冻,以解冻后精液活率、质膜完整性、顶体完整率为指标,研究距离液氮面不同高度和冷冻保护剂种类对冷冻保存兔精液品质的影响。结果表明:冷冻精液距离液氮面3 cm,其精液活率、质膜完整性和顶体完整率明显优于1 cm和5 cm;在冷冻稀释液中添加甘油相对于其他冷冻保护剂对精液品质的保护效果好,甘油浓度为3%时相对其他浓度效果较好。说明了距液氮面3 cm冷冻,冷冻稀释液中添加3%甘油对兔精液的保存效果较好。     

不同家禽卵黄对德国牧羊犬精液冷冻的影响

为了探索不同家禽卵黄在德国牧羊犬精液冷冻中的应用效果,分别在精液冷冻稀释液中添加不同家禽(鸽、鸡、鸭、鹅和鹌鹑)和不同浓度(10%、15%、20%、25%和30%)的卵黄,并分别对冷冻前和解冻后的精子活率、顶体完整率和畸形率进行比较分析。结果:在德国牧羊犬精液冷冻稀释液中加入相同浓度的5种不同家禽卵黄,家鸽组冻后活率、顶体完整率和畸形率分别为(52.0±2.1)%、(54.3±3.7)%和(27.7±1.8)%,对德国牧羊犬精液冷冻有最佳的保护效果,其最佳浓度为20%。因此,鸽卵黄可替代鸡卵黄,作为冷冻稀释液的组成成分,用于德国牧羊犬的精液冷冻。     

不同稀释液配方对奶牛冷冻精液的影响

采用假阴道法采集成年种公牛精液,经精液品质检查后,合格精液用四种不同冷冻稀释液进行稀释、冷冻、以筛选出适宜的冷冻稀释液和最佳冷冻保护剂.结果表明:Ⅱ号稀释液优于其它3种稀释液(P＜0.05);甘油为最佳冷冻保护剂.优于乙二醇和DMSO冷冻效果(P＜0.05),其最佳浓度为7%,精子冷冻后活率平均可达0.45±0.575,畸形率15.44%,项体完整率57.82%;奶牛细管冻精的解冻效果以75℃水浴,2 S到6 S的解冻时间最佳.     

重庆板角山羊细管冷冻精液的研究

为了建立重庆板角山羊精液的细管冷冻保存方法,实验进行了不同冷冻稀释液(配方Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ)、不同冷冻保存剂(甘油、EG)及不同离心速度(1000、1200、1400r/min)对重庆板角山羊细管精液冷冻保存效果的研究,结果表明:配方Ⅱ对重庆板角山羊精液的冻后活率显著优于配方Ⅰ和Ⅲ(P<0.05)。在配方Ⅱ中添加相同剂量(5%)的EG和甘油,精液冻后活率差异不显著(P>0.05)。以1200r/min的速度对山羊鲜精作离心处理后,冻后活率相对于对照组有所提高,但差异不显著(P>0.05)。     

山羊冷冻精液糖类保护剂试验的报告

家畜精液的冷冻保存，是人工授精的一项重大改革，在精液冷冻技术发展过程中，由于稀释液中加入甘油作为保护剂，而使精液保存技术取得重大突破，但不同畜种的精子对甘油的反应不同。牛冷冻精液稀释液中甘油浓度或高或低对精子活率及受胎率关系不大，对猪和羊来说，甘油浓度增加时，冷冻精液的精子活率虽高，但受胎率极不理想。现将采用最新研制的无甘油糖类保护剂，     

新疆驴冷冻精液的研究

试验旨在探究新疆驴冷冻精液的最佳稀释保护液与处理方法。以假阴道采集新疆驴精液,并用5种不同稀释保护液稀释冷冻后,选取其中较为理想的稀释液作为对照组,再通过分别添加4%、5%、6%、8%甘油处理试验,最后再选用添加甘油后冷冻效果最优的稀释液为对照来进行离心浓缩试验。结果表明：①5号稀释液冷冻—解冻精液后,其活力、顶体完整率要显著高于其他4种稀释液（P<0.05）;②以5号稀释液为对照组,添加6%甘油(7号稀释液)冷冻后,精子的活力、顶体完整率要显著高于添加4%、5%、8%甘油组（P<0.05）;③以7号稀释液为对照组,通过离心浓缩,精液在冷冻后其活力和精子顶体完整率都显著提高（P<0.05）。结果提示,将驴精液用6%葡萄糖、2%乳糖、6%甘油为主的稀释液稀释,并经500 r/min离心浓缩10 min处理后,其冷冻效果最好。     

近交五指山小型猪精液冷冻保存技术的研究

用液氮熏蒸法在氟板上制作冻精颗粒,以解冻后的精子活率、活力和质膜完整性为判定指标,比较4种冷冻稀释液及不同冷冻-解冻程序对五指山小型猪精液冷冻的效果。结果表明:①Ⅳ号冷冻稀释液冷冻解冻后精子的活率(0.610±0.036)、活力(0.427±0.025)和质膜完整性(0.503±0.015)均显著高于Ⅰ、Ⅱ和Ⅲ号冷冻稀释液(P<0.05)。②实验中精液在4℃冰箱中平衡降温2 h的精液精子活力、质膜完整性均好于在17℃平衡3 h再放入4℃冰箱中平衡2 h的解冻效果,而且精子活率差异显著(P<0.05)。③湿解法的效果优于干解法。     

不同冷冻保护剂对犬精子冻存的影响

本试验通过对比冷冻保护剂和冷冻程序,优化犬精液冷冻保存方法,比较了不同甘油、乙二醇浓度、不同平衡时间对犬精子冷冻复苏率及精子顶体完整率的影响。结果发现,甘油作为冷冻保护剂时,其对精液冷冻保存后的效果明显优于乙二醇,当甘油浓度为4%时,平均冷冻复苏率最高;冷冻平衡时间为1 h最佳。因此,犬精液在冷冻保存时,甘油浓度为4%,平衡60 min,可获得平均39.21%±0.013%的冷冻复苏率,且比较稳定。     

新西兰兔精液冷冻保护剂的筛选

本试验的目的是分析在新西兰兔精液冷冻保存稀释液中分别添加不同浓度的海藻糖、透明质酸、维生素E(Ve)、超氧化物歧化酶(SOD)对兔精液冷冻保存效果的影响,以冻后精子活率、质膜完整性、顶体完整率等作为质量评定指标,筛选出效果较好的新西兰兔精液的冷冻保护剂种类及浓度。结果表明,精液冷冻保存稀释液中添加3种浓度的海藻糖均未提高兔精液冷冻后的精子活率、质膜完整率和顶体完整率(P0.05);添加0.5%和1%的透明质酸提高了兔精液冷冻后的精子活率(P0.05),但各组间质膜完整率和顶体完整率无显著差异;添加2 g/L Ve提高了兔精子4℃平衡后的活率、冷冻后精子活率、质膜完整率和顶体完整率(P0.05);添加4 000 IU的SOD提高了兔精子4℃平衡后的活率、冷冻后精子活率、质膜完整率和顶体完整率(P0.05)。结果证实,在新西兰兔精液冷冻保存稀释液中添加适宜浓度的Ve和SOD可提高兔精液冷冻后的精子活率、质膜完整率和顶体完整率。     

中卫山羊细管冻精制作与种质资源保存初步研究

为了中卫山羊种质资源的保护、利用,试验采用细管冷冻技术对宁夏地方品种中卫山羊进行了冻精制作和保存,比较了稀释液、冷冻保护剂类型和浓度、稀释倍数及不同稀释法等对中卫山羊精液冷冻保存品质的影响。结果表明:解冻后的精液品质,3号稀释液精子活率高于1号、2号稀释液,差异极显著(P0.01);相同浓度的甘油和二乙醇,解冻后的精子活率甘油高于二乙醇,差异极显著(P0.01),当甘油浓度为5%时,解冻后精子活率显著(P0.05)高于3%和6%;2倍稀释解冻后精子活率最高,5倍稀释解冻后精子活率最低,但不同稀释倍数解冻后精子活率差异不显著(P0.05)。     

小尾寒羊精液冷冻技术研究

本试验对11只2～3岁小尾羊种公羊的精液品质、保存稀释液和冻精制作技术进行了研究。结果表明:小尾寒羊种公羊的射精量、精液品质、精液pH值、密度、色泽、活率和畸形率均属正常范围,优于无角道塞特和莎福克绵羊;4种稀释液中,A液低温保存效果优于B、C、D 3种稀释液,差异极显著(P<0.01)。B液作为小尾寒羊冷冻精液稀释效果较理想(P<0.01)。6％甘油作为小尾寒羊冷冻精液保护剂效果较理想。     

羊冷冻精液的制作技术研究

通过对羊精液冷冻稀释液组成成分的研究,筛选合适的稀释液配方,研究精子平衡时间、解冻温度、稀释倍数和稀释方法等对精子活力的影响。结果如下:①解冻后的精子活率以加入Tris的一组稀释液活率最高,与其他组相比差异极显著(P<0.01)。②精液的平衡时间以平衡4～5h解冻后活率最高。③在45℃～60℃的水温条件下,取得了精子复苏率74.5%的解冻效果。④选用5种稀释比例(精液:稀释液),分别为1∶4、1∶5、1∶6、1∶6、1∶8,结果1∶8的稀释比例精液解冻后活率最高,达到了70%以上。     

精子平衡后活率变化对冷冻效果的影响

通过对7头公牛146次的采精冷冻,观察精子平衡后活率变化对冷冻效果的影响。稀释液配制12%蔗糖水75毫升,甘油5毫升,卵黄20毫升,青链霉素各10万单位。采精后即对原精液作1:3稀释,于5℃冰箱中平衡4小时,在聚四氟乙烯塑料板上冷冻颗粒,剂量为0.1毫升。用刚果红染色法计算原精液、平衡后、解冻后精子活率及计算冻后复苏率。根据精子     

传统稀释液配方中添加不同保护剂对藏羊精液冷冻效果的影响

为探索在传统稀释液配方中添加保护剂对藏羊精子的冷冻保存效果,在传统稀释液配方(果糖-蔗糖-柠檬酸钠-甘油)中,由Tris(三羟甲基氨基甲烷)代替柠檬酸钠,乙二醇代替甘油,在果糖-蔗糖-Tris-乙二醇基础上添加维生素B12、维生素E、维生素C、复合维生素B等,以增强精子缓冲力,减少毒性,提高精子活力、顶体完整率及受精力。结果表明:精液冷冻保存稀释液中添加Tris比添加柠檬酸钠有更好的冷冻保存效果,能有效改善冻后精子活力和顶体完整率;精液冷冻保存稀释液中添加维生素B12对精子有良好的保护作用;用等体积乙二醇代替甘油作为防冻剂,对精子冷冻时的保护作用不亚于甘油;藏羊细管冷冻精液的制作中,用果糖-蔗糖-Tris-乙二醇-维生素B12组合稀释液配方进行2次稀释,8 min冷冻,其冷冻效果最佳,顶体完整率最高。