家用保鲜盒冷藏植病材料方法及其应用

在植物病原菌研究的日常工作中,经常需要将平板培养的菌体材料进行冷藏保存,常规的冷藏方式容易导致需要保存的材料出现污染与失水干燥问题。本文介绍一种解决方法,其要点是利用日常家用普通塑料保鲜盒装盛培养基平板,再转移到冰箱中冷藏;所用的保鲜盒要求密封性能良好。该方法所有的器具容易买购、使用方便,具有解决污染与失水干燥问题,简单有效,而且长期冷藏保存可靠等特点。     

昆虫病原线虫一级种单菌培养的一种方法

目前,线虫的固体培养方法是通过无菌操作技术,在动物组织匀浆(如鸡内脏匀浆)加海绵的培养基中加入共生细菌,接入线虫一级种而完成的(Bedding 1981,19841 Wouts 1981)。液体培养则是在接有共生细菌的液体培养基中加入线虫一级种而得到(Buecher et al.1989)。这类培养方法要求加入的线虫一级种仅携带其共生细菌才能达到单菌培养。如果线虫一级种带有杂菌,就会造成培养物的严重污染,大幅度降低线虫产量。因此建立线虫一级种的单菌培养方法对线虫的大量繁殖和工业化生产     

瓶式平板培养制备稻曲病菌薄壁分生孢子

利用三角瓶装纳马铃薯琼脂培养基制备稻曲病菌薄壁分生孢子。结果发现,瓶装培养基的体积与产孢量无关。各菌株在瓶式培养平板上均能正常形成后代孢子。瓶式培养比常规培养皿平板培养具有更高的产孢效率。产孢平板上产生的孢子收取后,菌落继续培养,新形成的孢子数量大幅下降。由于三角瓶能高效避免污染,因而认为瓶式培养是制备稻曲病菌薄壁分生孢子的理想技术。     

高山草甸土壤放线菌分离方法研究

采用平板涂抹分离法研究了不同分离培养基及样品预处理对高山草甸土放线菌分离的效果。结果表明：土样在120℃干热处理1 h后其悬浮液加0.05%SDS（十二烷基磺酸钠）和6%酵母膏,40℃振荡30 min,能促进放线菌孢子萌发,增加放线菌的分离数量,并抑制杂菌生长,是高山草甸土放线菌分离时理想的预处理方法。改良HV琼脂和高氏1号加重铬酸钾（50 mg/L）培养基是较好的分离培养基。     

介绍一种灰霉病菌的选择性培养基

介绍一种灰霉病菌的选择性培养基姚技强朱国仁（中国农业科学院蔬菜花卉研究所北京１０００８１选择性培养基是在病菌生长的基本培养基成分中，加入某些合适种类和适当比例的抑菌物质，从而使目标病菌比其他杂菌相对较快地生长。通过对目标病菌的选择性培养，可以观察其是...     

从稻田水中检测细菌性条斑病菌噬菌体的方法比较

采用噬菌体技术进行水稻细菌性条斑病的发生、发展趋势预测,关键是能否准确地测定稻田水中的噬菌体数量。噬菌体数量是通过一定量的稻田水在指示菌的琼脂平板上显现的噬菌斑数量反映的,随着气温的升高,田水中所含的杂菌数量也急剧升高,将影响噬菌斑在指示菌底板上显现。为了使培养基底板清晰地显示噬菌斑,必须采取相应的措施处理稻田水样品,以减轻杂菌的干扰。作者通过对几种方法的比较,选择出一种切实可行     

绿色木霉的防治要点

在食用菌的大规模生产中，控制杂菌的技术，是生产成败的关键之一。根据我们在已污染的金针菇。香茹、平菇的培养袋料提取分离的杂菌中，污染最多的杂菌是绿色木霉，其次是青霉、曲霉。绿色木霉病在食用菌的菌丝体和子实体期最易感染发生，是危害性最严重的一种真菌类病害。在研究过程中，发现平茹、香菇等食用菌在营养、温度、湿度、pH值等方而与木霉极为相似。从试验中还观察到，木霉的适应能力强，生存环境范冈比食用菌类的范围广，往往表现出比食用菌更强的生长优势。木霉生长速度快，换代周期短；传播迅速，造成食用菌在竞争中死亡或…     

平菇中多菌灵残留量分析的初步研究

在平菇生产中,接种时原料和菌种带菌引起杂菌污染是一大问题,目前全国各地大都用多菌灵来防治制种与栽培过程中的杂菌污染,并取得了很好的效果。由于多菌灵在食用菌生产上的大量应用,也带来了不良的付作用。即农药在食用菌中的污染问题必须引起重视。为此,我们进行了平菇中多菌灵残留量的分祈。目的是确定适当的施用量,从而避免多菌灵对平菇的污染。     

基于CTAB的莱氏绿僵菌选择性培养基制备及分离效果研究

制备适用于分离莱氏绿僵菌(Metarhizium rileyi)的选择性培养基。以十六烷基三甲基溴化铵(cetyltrimethyl ammonium bromide,CTAB)为选择性成分,以SMAY培养基为基础培养基,分别研究CTAB对M. rileyi生长的影响、对杂菌的抑制作用,并以土壤菌群为基础对该选择性培养基进行验证。结果表明,CTAB对莱氏绿僵菌具有明显的抑制作用,当CTAB浓度高于0.4 g/L时,莱氏绿僵菌无法生长,浓度低于0.2 g/L时,能够生长、产孢。CTAB可以有效抑制杂菌的生长,浓度为0.18 g/L时,对灰霉(Botrytis cinerea)、木霉(Trichoderma longibrachiatum)的抑制作用较强,对青霉(Penicillium sp.)、大肠杆菌(Escherichia coli)则完全抑制,且莱氏绿僵菌可产孢。0.18 g/L的CTAB培养基对土壤菌群具有很强的抑制作用,可以从处理土样中分离得到莱氏绿僵菌并产孢。CTAB含量为0.18 g/L的培养基可以作为莱氏绿僵菌的专用选择性培养基。     

除草剂莠去津降解菌SFAD3的分离鉴定及其土壤修复潜力

为获得能够修复除草剂莠去津污染土壤的高效降解菌,采用摇瓶富集法、平板分离法从莠去津过量使用的土壤中分离得到降解菌SFAD3,通过形态学、生理生化特征观察以及16S rDNA和ITS序列分析进行种类鉴定,测定获得菌株的最适降解条件,并通过土壤接种和盆栽试验验证菌株对莠去津污染土壤的修复作用。结果表明,菌株SFAD3最终被鉴定为门多萨假单胞菌Pseudomonas mendocina,该菌株培养30 d时对污染土壤中50 mg/kg莠去津的降解率可达72.6%;菌株SFAD3在MM液体培养基中最适降解条件为温度37℃、pH 7、莠去津初始浓度6.25 mg/L、接种量2%,对莠去津降的降解率为50.0%～72.2%;与仅有莠去津的处理相比,添加有SFAD3发酵液的处理20 d后芝麻的株高、根长、湿重和干重能够显著恢复,并且该菌对芝麻还具有一定的促生作用。表明降解菌SFAD3在修复莠去津污染土壤方面具有潜在的应用价值。     

杀细菌剂毒力测定方法的研究

用抑菌圈法和平板菌落计数法分别测定农用链霉素、氧氯化铜对柑桔溃疡病菌与白菜软腐病菌的毒力，以比较两种毒力测定方法。结果表明，与抑菌圈法相比，平板菌落计数法具有快速、简便、重复性好等优点。认为平板菌落计数法可用于室内杀细菌剂的毒力测定。     

黄瓜炭疽病菌对杀菌剂的敏感性的优化测定方法研究

本文以黄瓜炭疽病菌(GloeosporiumorbiculareArs)为研究对象,采用随机试验设计,比较了不同培养基、孢子萌发方法对病菌孢子萌发的影响,建立了一套测定炭疽病菌分生孢子对杀菌剂敏感性的简易方法。结果表明:不同培养基培养的分生孢子,均以使用玻片水琼胶表面萌发法的萌发效果最好,且以PDA培养基培养的分生孢子在玻片水琼胶表面萌发率最高、最稳定。此外使用该方法测定了黄瓜炭疽病菌对福美双、百菌清的敏感性。     

两株对辣椒疫霉菌有拮抗作用的拮抗菌分泌蛋白的研究

用平板对峙生长法筛选到两株对辣椒疫霉菌具有较强拮抗作用的细菌,经鉴定为芽孢杆菌属。测定了无菌滤液的抑菌活性及两菌产生拮抗物的热稳定性。用硫酸铵沉淀法提取到对辣椒疫霉菌有拮抗作用的抗菌蛋白。发酵条件的研究表明,用Ｇ培养基、ｐＨ７、培养３２小时,ＸＡ１、ＸＦ１能产生具有较强拮抗作用的拮抗物。     

Characterizing the mechanism of biological control of postharvest diseases on fruits with a simple method to study competition for nutrients

ABSTRACT Biocontrol agents may compete with pathogens for nutrients and space to delay or prevent decay of fruits after harvest. These mechanisms of biological control have been difficult to study because no method has been available to determine the significance of each of the components of competition. We developed a nondestructive method using tissue culture plates with cylinder inserts containing defusing membrane at one end to study competition for nutrients without competition for space. Other biocontrol mechanisms in which direct contact between an antagonist and a pathogen is not required also can be studied. The method was used to determine the competition between the yeastlike biocontrol agent, Aureobasidium pullulans, and Penicillium expansum for limited nutrients in apple juice during 24 h incubation, simulating a fruit wound. The antagonist depleted amino acids and inhibited germination of P. expansum conidia. Exposing these conidia to fresh apple juice increased conidial germination to the level comparable to that exhibited by conidia which were not exposed to the antagonist. Because the culture plate method was nondestructive, follow-up experiments in an agar diffusion test were conducted. Juice in which the antagonist grew did not inhibit germination of P. expansum conidia that were seeded on the plates. This corroborates findings from the culture plate method that inhibition of the conidia germination resulted from competition for nutrients. The new method can be coupled with existing techniques to improve understanding of antagonist-pathogen interaction for biological control of postharvest diseases.     

百里香内生真菌塞缪尔斯木霉Trichoderma samuelsii 2-63菌株的鉴定及其抗真菌活性

植物病原真菌是导致作物产量损失和品质下降的重要因素之一,因此,开发低毒高效的抑菌剂一直是研究的热点。本研究从百里香植株茎中分离得到1株内生真菌2-63菌株,通过形态学结合分子生物学鉴定其为塞缪尔斯木霉Trichoderma samuelsii。平板拮抗活性表明：T. samuelsii 2-63菌株对8种植物病原真菌的拮抗活性均达70.0%以上,其中对枸杞黑霉病菌Alternaia alternata拮抗活性最高可达87.1%;平板共培养试验表明：T. samuelsii 2-63菌株挥发性有机化合物(VOCs)也表现出对病原菌不同程度的抑制活性,抑制率在31.0%～68.5%;但T. samuelsii 2-63菌株液体发酵液和粗提物的抑菌活性较低。抑菌活性结果结合气相色谱-质谱联用(GC-MS)分析试验结果表明：T. samuelsii 2-63菌株抑菌活性的关键成分为VOCs,其主要组分为6-戊基-2H-吡喃-2-酮(6-PP)。探索性试验表明：固体发酵条件下,大米培养基比大麦培养基更利于6-PP的产生,最大产量为38.6 mg/mL;浅层液体培养条件下,6-PP随着培养时间的增...     

新型杀螨剂F1050优势降解菌(芽孢杆菌)的筛选及其鉴定

为探明土壤微生物对新农药F1050的降解能力,用平板稀释和富集培养法分离驯化土壤中F1050的优势降解细菌,并用合成培养基进行纯化培养,利用美国Biolog公司的细菌自动鉴定系统,初步筛选出5个菌株:ZJU.01为枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis,69％);ZJU.02为巨大芽孢杆菌(Bacillus megaterium,99％);ZJU.03为腊状芽孢杆菌(Bacillus cereus,86％);ZJU.04为腊状芽孢杆菌(Bacillus cereus,92％);ZJU.05为球形芽孢杆菌(Bacillus sphaericus,99％)。F1050添加浓度为50 mg/kg的液体培养和室内土壤模拟降解试验结果表明,ZJU.02、ZJU.04 和ZJU.05三个优势降解菌株对F1050表现出了较强的降解能力,50 mg/kg F1050的降解半衰期为6.41~6.74 d,而对照的灭菌和未灭菌土壤中的半衰期分别达72.20和29.88 d;不同菌株对F1050的降解能力没有显著差异。     

葡萄溃疡病菌原生质体的制备与再生条件的优化

对葡萄溃疡病菌菌丝摇培时间、酶解时间、渗透压稳定剂种类及再生培养基类型进行了探索和优化,建立了葡萄溃疡病菌稳定、高效的原生质体制备体系。以SR培养基作为再生培养基时,原生质体再生率达到最高,为32.2%。该研究为建立葡萄溃疡病菌高效、稳定的遗传转化体系,开展其致病机理的研究奠定了基础。`     

A laboratory study on accelerated multiplication of virus-free potato material1

Various approaches have been tested for improving the production of usable microtubers in tissue culture propagation of virus-free potato material. Cultures in which microtubers are spontaneously produced under conditions when only vegetative growth should occur are generally not usable, either for further propagation or for microtuber production. Feeding with supplementary sucrose solution has been shown to stimulate such cultures to produce adequate quantities of usable microtubers. Use of a liquid medium instead of a solid medium was another method used to increase microtuber yield. An attempt was also made to increase efficiency by placing more transplants in each culture flask. Improvements were obtained by making various adjustments in the density of plants and the volume of medium, with supplementary feeding if necessary. The density could best be expressed in relation to total surface area of growth chamber used.     

分离土壤棉花黄萎病菌选择性培养基的筛选

 采用土壤检测稀释法、水筛法和不同土样接种量,对5种土壤浸提液改良培养基进行了比较研究。结果表明,土壤水筛法对土壤棉花黄萎病菌的检测效果优于稀释法,其菌落检测数增加4~10倍。培养基每皿0.25 g土样接种量的检测效果高于0.5 g和1g。5种测试培养基中,培养基D对分离土壤棉花黄萎病菌的选择性表现最好,其土壤接种体检测回收率达63.5%~83.3%.培养基D的组份为:土壤浸提液25 ml,KH₂PO₄ 1.5 g,K₂HPO₄ 4 g,尿酸钠0.2 g,半乳糖醛酸钠(果胶)1g,山梨糖1g,Dox盐2 ml,Tergitol NP-101ml,PCNB0.1g,琼脂17g,蒸馏水1000 ml,pH6.4~6.7。每1000ml融化培养基倒皿前加抗菌素液50 ml (含氯霉素0.05 g,链霉素0.05 g,青霉素-G盐0.05 g)。