禽波氏杆菌对雏鸡和鸡胚毒力的测定

本文介绍了禽波氏杆菌对雏鸡和鸡胚毒力的测定。测定结果表明,禽波氏杆菌对2日龄公雏腹腔接种的 LD_(50)为1.352×10~4个菌,对12日龄鸡胚尿囊腔内接种的 MLD 低于196个菌。     

兔波氏杆菌病

兔波氏杆菌病是由兔波氏杆菌引起的一种兔的传染病。本文综述了该病的发病特点,临床症状与病理变化以及防治措施。     

獭兔波氏杆菌的分离与鉴定

从 2～ 3月龄病死獭兔的肺病变组织中分离到 3株细菌 ,经形态特征、培养及生化特性、药敏试验和动物实验等表明 ,分离菌株为能运动、无芽孢的革兰氏阴性小杆菌 ,即支气管败血波氏杆菌。该菌在鲜血平板上产生溶血 ,在麦康凯平板上形成光滑、中央突起的珍珠状菌落 ,且能与兔支气管败血波氏杆菌参考株S80 10 3抗血清发生凝集 ,人工接种小白鼠能引起死亡 ,并从病死鼠中回收到相应细菌     

PCR检测兔支气管败血波氏杆菌方法的建立及应用

为建立准确、快速检测兔支气管败血波氏杆菌(Bordetella bronchiseptica)的PCR方法,根据Gen Bank中波氏杆菌ptxA基因设计1对特异性引物,用建立的PCR方法扩增兔波氏杆菌,可扩增出870 bp的目的片段。该方法特异性好,仅对波氏杆菌有特异性的扩增,而对大肠埃希菌、无乳链球菌、金黄色葡萄球菌、多杀性巴氏杆菌等病原菌的扩增结果呈阴性;敏感性较高,最低检测限可达6.8×10~(-7)μg/m L;用建立的PCR方法检测临床疑似感染支气管败血波氏杆菌病兔的脏器及鼻拭子样品,可扩增出目的条带,且与细菌分离的结果一致。可见,建立的检测方法敏感、特异,可用于临床上兔波氏杆菌病的快速诊断及鉴定。     

兔波氏杆菌病的防治

兔波氏杆菌是由支气管败血波氏杆菌引起的家兔的一种常见多发的、广泛传播的慢性呼吸道传染病,以鼻炎、支气管炎和脓疱性肺炎为特征。     

支气管败血波氏杆菌PCR检测方法的建立和应用

根据支气管败血波氏杆菌ptxA基因设计1对引物,扩增特异的872 bp核酸片段,建立了应用PCR检测支气管败血波氏杆菌的方法.特异性试验结果表明,3株支气管败血波氏杆菌参考菌株均能扩增出872 bp特异性的核酸片段,兔源性的大肠杆菌、巴氏杆菌、沙门氏菌、金黄色葡萄菌的扩增结果均为阴性.敏感性试验结果表明,PCR的最低检出限量为210个支气管败血波氏杆菌.利用建立的PCR检测方法对22株从山东省泰安地区某兔场采集的疑似兔支气管败血波氏杆菌病病兔鼻黏液棉拭子进行检测,结果19株为阳性.并同时进行普通血清学方法和细菌学方法,对检测结果进行了比较,结果显示,PCR方法阳性检出率高于其他检测方法.     

禽波氏杆菌病原特性的研究

从患眼炎、鼻窦炎不同发病鸡群的病料中共分离到１７株细菌，经细菌学鉴定为禽波氏杆菌。该细菌能运动、无芽孢的革兰氏阴性小杆菌，在鲜血琼脂上产生β溶血。在麦康凯琼脂上生长良好，形成光滑中央突起的珍珠状菌落；不利用糖类，不能在６．５％，ＮａＣｌ增减基中生长，尿素酶和硝酸盐还原试验均呈阳性，能凝集豚鼠和其他动物红血球，人工接种细菌均能使雏鸡发生相似于自然病例的临床症状和死亡，并且从病部回收到相应细菌。     

禽波氏杆菌病原特性的研究

从患眼炎、鼻窦炎不同发病鸡群的病料中共分离到１７株细菌，经细菌学鉴定为禽波氏杆菌。该细菌能运动、无芽孢的革兰氏阴性小杆菌，在鲜血琼脂上产生β溶血，在麦康凯琼脂上生长良好，形成光滑中央突起的珍珠状菌落；不利用糖类，不能在６．５％ＮａＣｌ培养基中生长，尿素酶和硝酸盐还原试验均呈阳性，能凝集豚鼠和其他动物红血球；人工接种细菌均能使雏鸡发生相似于自然病例的临床症状和死亡，并且从病部回收到相应细菌     

鸡波氏杆菌的毒力试验

本文介绍了鸡波氏杆菌对鸡胚、雏鸡、小白鼠、幼兔的毒力试验。结果表明，鸡波氏杆菌可致鸡胚、雏鸡、幼兔、小白鼠发病、病程为急性经过，呈出血性败血症病变，从病程和病变可看出，鸡胚、幼雏、家兔的日龄与抵抗力成正相关、1月龄以上的鸡有较强抵抗力，呈隐性带菌，通过成年兔，豚鼠的汞氏皮内反应表明鸡波氏 力可产生毒性很强的坏死毒素。     

养兔谨防波氏杆菌病

兔波氏杆菌病也叫兔支气管败血波氏杆菌病,是由支气管败血波氏杆菌引起兔的一种常见的呼吸道传染病,特征表现慢性鼻炎、支气管肺炎和咽炎。在冬季和早春多发。主要通过空气传播,经呼吸道感染。幼兔发病率高,并且有死亡病例。成年兔发病较少。此菌在笼养兔污染为64.4%,散养兔为20.0%。在自然条件     

鸡沙门氏菌病的综合防治

沙门氏杆菌病是由沙门氏杆菌属中的一种或几种沙门氏杆菌引起的禽类的急性或慢性疾病的总称。由于可以垂直传播,因此,发病率极高。由鸡白痢沙门氏杆菌引起的称为鸡白痢,由鸡伤寒沙门氏杆菌引起的称为鸡伤寒。由有鞭毛能运动的沙门氏杆菌引起的禽类疾病统称为禽副伤寒。沙门氏杆菌病存在于世界各地,对禽类危害较大。     

兔多杀性巴氏杆菌和支气管败血波氏杆菌复合PCR方法的建立及临床应用

根据Gen Bank中多杀性巴氏杆菌ATP合成酶基因(atp B)的保守序列设计特异性引物,建立巴氏杆菌PCR检测方法,并与已建立的支气管败血波氏杆菌PCR检测方法进行合并,经反应条件的优化,成功建立多杀性巴氏杆菌、支气管败血波氏杆菌复合PCR诊断方法。该方法检出的最小多杀性巴氏杆菌和支气管败血波氏杆菌菌数分别为40 CFU和4 CFU;对兔源产气荚膜梭菌、大肠杆菌、猪胸膜肺炎放线杆菌、猪鼻支原体、链球菌的检测结果均为阴性,说明该方法具有良好的特异性。用该方法对中国4个省份采集的临床鼻拭子样本共712份进行检测,结果显示,多杀性巴氏杆菌阳性率为25.56%,支气管败血波氏杆菌阳性率为34.55%,双阳性率为13.20%。该复合PCR方法能快速、敏感地从家兔鼻拭子样品中检出多杀性巴氏杆菌和支气管败血波氏杆菌,为临床疾病检测和流行病学调查提供了技术保障。     

兔支气管败血波氏杆菌不同感染途径研究

用兔支气管败血波氏杆菌分离株BJL0504菌株(I相菌)经滴鼻、肺内、气管、静脉、皮下对30～40日龄兔攻毒,并进行临床观察和微生物学检查,比较不同攻毒方法的优势。结果显示,经静脉注射的家兔发病率和死亡率高,症状较典型;经肺内注射也可以引起部分发病和死亡;滴鼻和气管注射感染均可以复制到典型的临床症状,但是解剖病变都不明显。由此可见,支气管败血波氏杆菌经静脉攻毒可以较好的复制病例,这对支气管败血波氏杆菌的致病机理的研究、疫苗的研制和评价提供了理论基础。     

冬季安全养兔严防波氏杆菌病

<正>兔波氏杆菌病也叫兔支气管败血液氏杆菌病,是由支气管败血波氏杆菌引起兔的一种常见的呼吸道感染传染病,本病在冬季和早春多发,幼兔发病率高,并且有死亡病例。成年兔发病较少。在自然条件下,多种哺乳动物上呼吸道中都有本菌寄生,常引起慢性呼吸道病的相互感染。尤其在天气突变、兔的抵抗力下降、兔舍卫生不好、空气污浊等情况下,易引起此病发生。兔波氏杆菌病特征表现为慢性鼻炎、支气管肺炎和咽炎。该病主要通过空气传播,经呼吸道而感染。1病状与剖检本病的潜伏期为7~10 d。成年兔表现为鼻炎和支气管     

兔巴氏杆菌-波氏杆菌二联蜂胶疫苗的研制及安全、效力试验

本试验以免疫原性良好的兔多杀性巴氏杆菌Pm90株以及兔支气管败血波氏杆菌Bb82株作为菌种,选择蜂胶乙醇提取液的水溶物作为佐剂,研制兔巴氏杆菌-波氏杆菌二联蜂胶灭活苗,并进行了该疫苗的安全、效力试验。实验室生产的4批疫苗对巴氏杆菌和波氏杆菌的攻毒保护率均在90%以上。     

四川省猪源支气管败血波氏杆菌的分离鉴定及耐药基因和毒力基因检测分析

【目的】为了解四川省猪源呼吸道疾病支气管败血波氏杆菌的流行情况及菌株生物特性。【方法】采集56份病料进行支气管败血杆菌的分离纯化、药敏及相关耐药基因和毒力基因的筛选。【结果】分离到10株支气管败血波氏杆菌，分离率为17.86%。分离菌对青霉素、氨苄西林、羧苄西林、林可霉素、复方新诺明和头孢氨苄的耐药率为100%，对新霉素、氯霉素、氧氟沙星和左氧氟沙星高度敏感。共检出耐药基因9种，其中gyrA、sul1和tetC的检出率超过50%；共检出毒力基因6种，其中fla、dnt、prn和fhaB的检出率高达100%。小鼠致病试验结果显示大部分菌株具有较强的致病性。【结论】四川省主要流行的支气管败血波氏杆菌多重耐药情况严重，耐药机制复杂，耐药基因和耐药表型符合率较低，毒力基因检出率较高，且对小鼠呈现较强的致病性。研究结果可为四川省支气管败血波氏杆菌的防控和治疗提供参考。     

猪源Bb SC-SN株的分离鉴定及其皮肤坏死毒素（DNT）全基因序列分析

【目的】了解当前支气管败血波氏杆菌(Bb)地方菌株皮肤坏死毒素(DNT)基因的变异特点。【方法】利用分离培养、PCR及16SrRNA扩增片段同源性分析,对采自四川遂宁某规模化猪场有明显萎缩性鼻炎症状的鼻拭子进行病原分离鉴定,并对分离株的DNT基因进行克隆和序列分析,对其抗原域、氨基酸二级结构、特定区域位于蛋白质表面可能性等参数进行预测,分析其B细胞抗原表位。【结果】成功分离得到一株支气管败血波氏杆菌,命名为支气管败血波氏杆菌SC-SN株。分离株DNT基因序列全长4 357bp,与其他11株菌DNT基因的核苷酸序列同源性为93.1%~100.0%,但由于其356位插入碱基A,使得该序列仅编码1 426个氨基酸,与上述11株DNT基因编码的氨基酸序列同源性仅为12.8%~47.0%。遗传进化树显示,SC-SN分离株与S798日本株和未知1株的亲缘关系最近。软件预测结果显示,Bb SC-SN株DNT基因编码氨基酸B细胞抗原表位发生较大变化。【结论】经鉴定,分离株确为支气管败血波氏杆菌,且SC-SN株的DNT基因序列变异较大,第356位插入的碱基A,对其氨基酸序列、ORF及B细胞抗原表位分布产生了较大的影响。     

支气管败血波氏杆菌PRN基因CDS区的生物信息学分析

通过生物信息学软件预测分析支气管败血波氏杆菌PRN基因编码蛋白功能及其调节机制。结果表明,支气管败血波氏杆菌PRN基因CDS区编码911个氨基酸,分子式为C_{4 121}H_{6 556}N_{1 250}O_{1 258}S₁₁,分子质量为13 196,消光系数为95 800,其理论等电点为9.64,不稳定系数为36.24,PRN蛋白的理化性质稳定;PRN蛋白有多个磷酸化位点和糖基化位点;信号肽预测PRN蛋白有1个信号肽,信号肽位置在1～34;PRN蛋白为亲水性蛋白,存在1个跨膜结构;预测二级结构主要由无规则卷曲构成,占39.08%,β-折叠占23.93%,α-螺旋占23.30%,三级结构主要由无规则卷曲和β-折叠构成。上述结果提示,该蛋白具有重要生物学意义,可为进一步开发支气管败血波氏杆菌亚单位疫苗奠定基础。     

兔支气管败血性波氏杆菌fimN基因的原核表达

应用PCR方法扩增兔支气管波氏杆菌(Bb)的菌毛蛋白基因( fimN),将fimN基因克隆到表达载体pET-28a(+)中,获得重组质粒pET28a-fimN。将此重组质粒转化受体菌BL21后,用IPTG进行诱导表达,SDS-PAGE结果显示表达蛋白分子量大小约为27 kD,与理论预期值相符。用Western-blot试验分析纯化的表达产物,结果表明,该重组蛋白能与Bb阳性血清发生特异性反应。     

兔支气管败血波氏杆菌OMP-ELISA抗体检测方法的建立

为简便快速检测支气管败血波氏杆菌(Bb),建立了一种特异、敏感的间接ELISA方法。通过应用超声波裂解和超速离心法提取了支气管败血波氏杆菌Ⅰ相菌外膜蛋白(OMPs),并用该蛋白包被酶标板,经特异性、敏感性和重复性试验优化后建立间接ELISA方法。结果表明,试验确定抗原的包被浓度为14.44μg/ml,可检测血清最高稀释度达1：400;该方法有很高的特异性和敏感性,与微量凝集试验相比,敏感性提高约33倍;该方法重复性良好。