正交设计在根茎秋海棠‘Helen Lewis’组织培养中的应用

用正交试验设计法研究了6-BA,NAA和2,4-D 3种植物生长调节剂对根茎秋海棠 ‘Helen Lewis’叶片诱导不定芽的影响,建立了根茎秋海棠叶片再生体系。结果表明,诱导根茎秋海棠不定芽发生的最佳配方为：MS+2 mg·L-1 6\|BA+0.5 mg·L-1 NAA+0.5 mg·L-1 2,4-D,36 d时诱导率为86.7%,并有淡绿色愈伤组织形成。附加0.5 mg·L-1 6\|BA+0.2 mg·L-1 NAA的MS培养基有利于不定芽的分化和增殖。在1/2 MS+0.5 mg·L-1 IBA的培养基中生根效果最好,高于4 cm的再生植株移栽成活率达90%以上。     

绒毛狼尾草幼穗的愈伤组织诱导与植株再生

以绒毛狼尾草幼嫩花穗为材料,研究了培养基种类和2,4-D对愈伤组织诱导以及6-BA对分化的影响。结果表明,MS较N6培养基适合绒毛狼尾草的组织培养。在附加3 mg·L-1 2,4-D的MS培养基中愈伤组织诱导率最高,达到100%。分化培养基以附加1.0 mg·L-1 6-BA的MS培养基为最佳,分化率为44.0%。在1/2MS培养基中附加0.5 mg·L-1 NAA和0.3 mg·L-1活性炭进行生根培养,根系生长健壮,生根率达100%。     

甜瓜品种‘GT-1’真叶再生体系的建立

以甜瓜薄皮品种‘甘甜一号’(‘GT-1’)为材料,研究了不同生长素对甜瓜真叶外植体不定芽分化的影响以及不同生长素、无机盐和糖浓度对甜瓜生根的影响.结果表明,‘GT-1’在含有MS+6-BA 1.0 mg/L+IAA 0.01mg/L的分化培养基上的不定芽诱导率最高,达95%,诱导真叶外植体分化附加IBA,对不定芽的分化诱导并不明显;在1/2MS+IBA 0.5 mg/L+蔗糖20 g/L的诱导生根培养基上生根效果最好,生根率达97.5%.     

黄精的组织培养与植株再生

研究离体条件下黄精不同外植体的愈伤组织诱导及其植株再生。结果表明,黄精的根茎、嫩茎及幼嫩的组培叶片在MS+6-BA 2.0 mg.L-1+2,4-D 1.0 mg.L-1和MS+6-BA 2.0 mg.L-1+NAA 1.0mg.L-1的培养基中均诱导产生愈伤组织,并在MS+6-BA2.0 mg.L-1+2,4-D2.0 mg.L-1和MS+6-BA2.0 mg.L-1+NAA2.0 mg.L-1的培养基上继代增殖良好。黄精愈伤组织在MS+6-BA3.0 mg.L-1+IAA1.0 mg.L-1的培养基上可诱导出不定芽,出芽率达66.33%,平均每块愈伤组织可分化出5.2个芽。试管苗在MS附加IAA0.5 mg.L-1培养基上诱导生根,生根率达86.67%。     

伴矿景天叶片愈伤组织诱导及植株再生

以伴矿景天Sedum plumbizincicola幼嫩叶片为外植体,以添加了300 mg·L-1水解酪蛋白的MS（Murashige and Skoog）培养基为基本培养基,研究不同植物生长调节剂组合对伴矿景天愈伤组织诱导及分化的影响,并建立再生体系。结果表明:1.00 mg·L-1 2,4-二氯苯氧乙酸（2,4-D）+0.30 mg·L-1 6-苄基腺嘌呤（6-BA）组合下,愈伤组织诱导效果最佳（P < 0.05）,诱导率为92.01%;0.10 mg·L-1 2,4-D+1.00 mg·L-1 6-BA组合下,分化效果最优（P < 0.05）,分化率为27.44%。适宜的芽增殖培养基为0.10 mg·L-1 2,4-D+（0.50~1.00）mg·L-1 6-BA;适宜的生根培养基为1.00~2.00 mg·L-1吲哚丁酸（IBA）。本研究为伴矿景天转基因技术体系的建立奠定了组织培养基础。     

‘闽牧6号’狼尾草组织培养再生体系的建立

为建立杂交狼尾草高效再生体系,以‘闽牧6号’狼尾草为材料,研究外植体、培养基、植物激素等对‘闽牧6号’狼尾草愈伤组织诱导、继代、分化的影响。结果表明:选择侧芽作为适宜外植体;诱导培养基采用NB+2,4-D(2mg·L~(-1)),诱导率最高,为89.9%;继代培养基采用NB+2,4-D(2mg·L~(-1))+KT(1mg·L~(-1)),愈伤组织形态最好;分化培养基采用NB+KT(1mg·L~(-1))+6-BA(2mg·L~(-1))+NAA(0.5mg·L~(-1)),分化率最高,为75%;生根培养基采用1/2MS培养基,形成了较为完善的组织培养再生体系。     

川芎幼嫩叶片植株再生的研究

为了建立一套川芎Lisgusticum chuanxiong Hort快速繁殖技术.以川芎幼嫩叶片为外植体,以MS和1/2MS为基本培养基,通过研究6-BA、2,4-D、 NAA、IAA、和IBA对愈伤组织诱导、不定芽分化和不定根产生的影响,找出相应的最佳激素组合.结果表明:川芎最佳愈伤组织培养基为MS+ 6-BA 0.5 mg·L-1+2,4-D 2 mg·L-1;最佳不定芽分化培养基为MS+ 6-BA 0.5 mg·L-1+ NAA0.5 mg·L-1;最佳生根培养基是1/2MS+NAA0.5 mg·L-1+IBA0.5 mg·L-1.组培苗移栽后,生长健壮,成活率达100%.     

蝴蝶兰“V31"品种花梗腋芽快繁体系的建立

以蝴蝶兰"V31"品种花梗腋芽为试验材料,通过筛选丛生芽诱导、增殖、生根及移栽各阶段最适培养基,建立其快繁体系。结果表明,最佳腋芽诱导丛生芽培养基MS+8.0 mg·L-1 6-BA+2.0 mg·L-1 NAA+15 g·L-1椰子粉,诱导率84.57%;最佳丛生芽增殖培养基MS+10 mg·L-1 KT+0.6 mg·L-1 NAA+0.2 mg·L-1 2,4-D,增殖倍率7.94;最佳生根壮苗培养基1/2 MS+0.1 mg·L-1 NAA+1 mg·L-1 6-BA+20 g·L-1蔗糖+10 g·L-1香蕉粉,平均生根数9.47;最佳栽培基质为经过0.1%高锰酸钾浸泡0.5 h的水苔+玉米棒(比例为1:1)。     

不同激素配比对南非叶茎愈伤组织诱导的影响

以南非叶(Vernonia amygdalina Del)的嫩茎为外植体,1/2 MS为基本培养基,每个培养皿中加入50.0g·L-1蔗糖+1.0 g·L-1花宝,以不同激素(NAA,6-BA,2,4-D)不同浓度配比诱导产生愈伤组织,筛选出最佳浓度配比。结果表明:在NAA和6-BA组合中,2.0 mg·L-1NAA+0.5 mg·L-16-BA诱导率最高,达97.8%。在NAA和2,4-D组合中,1.5 mg·L-1NAA+1.0 mg·L-12,4-D诱导率最高,达97.7%。     

特色马铃薯品种红宝石再生系统的筛选

采用3因素3水平L9(34)正交试验设计,以特色马铃薯品种红宝石试管苗茎段为试材,分别选用3种植物激素(诱导愈伤用NAA,2,4-D,6-BA;诱导分化用NAA,GA3,6-BA)的3个水平对其茎段的离体再生进行研究,筛选适合红宝石的愈伤和芽分化诱导培养基。结果表明,不同培养基表现出不同的诱导效果,愈伤组织诱导的最佳培养基是MS+NAA 0.5 mg·L-1+2,4-D 1.0mg·L-1+6-BA 0.5 mg·L-1,愈伤率达100%;植株再生最佳培养基是MS+NAA 0.5 mg·L-1+GA31.0 mg·L-1+6-BA 1.0 mg·L-1,再生率为80.3%,分化后再生苗健壮。     

风信子离体快繁体系的建立

研究以风信子Gipsy queen的鳞片及幼叶为外植体育接诱导不定芽生成,结果表明:Gipsy queen单鳞片、双鳞片的初代最佳诱导培养基为:MS+6-BA5.0mg.L-1+NAA0.1mg·L-1,且双鳞片诱导效果好于单鳞片.诱导率达100%,增殖系数达10;幼叶外植体初代最佳诱导培养基为:MS+6-BA3.0mg·L-1+NAA0.2mg·L-1,幼叶作为外植体比鳞片诱导效果好,诱导率达100%,增殖系数达26.27:最佳继代培养基为:MS+6-BA2.0mg·L-1+NAA0.5mg·L-1+KT0.2mg·L-1,增殖系数达2.91;生根诱导最佳培养基为:1/2MS+NAA0.2mg·L-1,生根率可达93.33%.     

重瓣长寿花组织培养再生体系的建立

以重瓣长寿花的茎段和叶片为外植体,利用单因子和交叉试验设计,探究了不同激素组合对叶片和茎段愈伤组织的诱导、分化及生根的影响,以及不同栽培基质对移栽成活率的影响。结果表明:适合愈伤组织诱导的外植体是茎段,最佳愈伤组织诱导培养基是MS+6-BA0.10 mg·L-1+2,4-D1.00 mg·L-1,以茎段为外植体的愈伤组织诱导率为100.000%;最佳的愈伤组织分化培养基是MS+6-BA1.00 mg·L-1,增殖系数达19.920;最佳的生根培养基是1/2MS+IBA0.50 mg·L-1,生根率为100.000%,根长3.87 cm;最佳的栽培基质是V(园土)∶V(蛭石)=2∶1,此时移栽成活率为95.710%。     

725杨组培繁殖技术研究

以美洲黑杨725杨树(Populus deltoides cl.‘725’)叶片为材料,对其再生体系的建立及其分化和生根苗对潮霉素B的浓度筛选进行了研究。结果表明,叶片的最佳消毒体系为75%的酒精消毒时间8 s,0.1%的升汞消毒3 min,最佳诱导愈伤的培养基是MS+6-BA 0.2 mg·L-1+2,4-D 1.5 mg·L-1+蔗糖25 g·L-1+琼脂6 g·L-1;最佳诱导分化培养基为MS+6-BA1.0 mg·L-1+NAA 0.3 mg·L-1+KT 0.3 mg·L-1+蔗糖25 g·L-1+琼脂6 g·L-1;适宜的继代增殖培养基为MS+6-BA 0.3 mg·L-1+NAA 0.05 mg·L-1+蔗糖25 g·L-1+琼脂6 g·L-1;最佳生根培养基为1/2MS+NAA 0.01 mg·L-1+IBA 0.7 mg·L-1+蔗糖20 g·L-1+琼脂6 g·L-1;对725杨叶片分化和不定芽生根进行了潮霉素B的敏感性试验,确定叶片分化的临界浓度为2.5 mg·L-1,生根的临界浓度为1.5 mg·L-1。     

豌豆再生体系的建立

【目的】建立用于豌豆组织培养与转基因的再生体系.【方法】利用植物组织培养的外植体的消毒、接种、脱分化、再分化和生根等方法进行豌豆再生体系的建立.【结果】以‘陇豌1号’为试验材料,其胚轴为豌豆愈伤组织诱导最佳外植体;适宜诱导培养基为MS+1.0mg/L 2,4-D+0.2mg/L 6-BA;最佳增殖培养基为:MS+1.0mg/L NAA+1.0mg/L 6-BA;胚轴在MS+0.2mg/L NAA+2.0mg/L 6-BA培养基中分化率最高,达26.21%,MS+B5+0.5mg/L NAA+2.0mg/L 6-BA条件下最适宜子叶的分化(14.80%);不定芽在1/2 MS+0.5mg/L NAA下生根率最高,达66%.【结论】‘陇豌1号’的这一再生体系可用于其转基因受体系统的建立和种苗的组培快繁.     

耧斗菜的组织培养

以耧斗菜幼嫩叶片及叶柄为外植体,研究了不同生长调节物质对外植体愈伤组织诱导、不定芽分化和生根的影响。结果表明,在培养基MS+2,4-D 1.0 mg/L+6-BA 0.5 mg/L上诱导叶柄产生愈伤效果最好,诱导率为80.5%;在培养基MS+NAA 0.5 mg/L+6-BA 1.0 mg/L上叶片愈伤诱导效果最好,诱导率为92.7%。继代培养基为MS+2,4-D 0.5 mg/L+6-BA 0.5 mg/L和MS+NAA 0.5 mg/L+6-BA 2.0 mg/L。在培养基MS+NAA 0.5 mg/L+6-BA 0.5 mg/L中分化芽;分化的芽在MS+NAA 0.1 mg/L+6-BA 0.5 mg/L中增殖。生根培养基为1/2 MS+NAA0.1 mg/L或1/2 MS+IBA 0.2 mg/L。     

大蒜气生鳞茎愈伤诱导和植株再生

以优良品系"金蒜3号"气生鳞茎为外植体,成功地建立了再生体系。基本培养基为MS,在添加了2,4-D 1.5mg·L-1的培养基上最适于气生鳞茎愈伤诱导,愈伤诱导率为87.6%,黄色颗粒愈伤诱导率为100%,愈伤最佳继代培养基为MS+2,4-D 1.5 mg·L-1;在最佳分化培养基MS+6-BA 3.0 mg·L-1上,黄色愈伤分化率为94.6%,芽最佳生长培养基为MS+6-BA 1.0 mg·L-1+KT 1.0 mg·L-1+GA 0.2 mg.L-1+NAA 0.1 mg·L-1;试管苗最佳生根培养基为MS+NAA 0.2 mg·L-1,生根率达到92.4%;生根的试管苗移栽到装有田园土的土盆中,其存活率达到82%。试验为今后大蒜体细胞突变体筛选等工作提供了技术支持。     

印尼野生姜黄的离体培养和再生体系研究

以印尼野生姜黄的根茎及无菌苗的茎段为试材,研究并建立了离体培养的再生体系.根茎在MS 6-BA1.0 mg·L-1 NAA0.1 mg·L-1培养基上分化效果最好,30 d后不定芽的诱导率达83.33%.茎段在2,4-D 0.5 mg·L-1 KT4.0 mg·L-1培养基上愈伤组织的诱导率最高,达80%,且不经转接就能分化出少量的不定芽;在添加有6-BA的几种培养基上,不经愈伤组织而直接分化出不定芽,其中MS 6-BA3.0 mg·L-1 NAA0.1 mg·L-1为最适合不定芽分化的培养基,平均3.3芽每茎段.适宜不定芽增殖培养基为MS 6-BA1.5 mg·L-1 NAA0.2 mg·L-1,增殖率100%,平均增殖系数6.25.在不定芽的生根壮苗中,以培养基1/2 MS NAA0.5 mg/L效果最好.     

三个南方紫花苜蓿品种的耐盐性及其再生体系的建立

采用不同浓度的NaCl单盐系列溶液,以MS培养基为基本成分,附加不同浓度和组合的2,4-D、6-BA、KT、NAA和蔗糖,对我国南方广泛种植的‘Victoria’‘CW787’和‘Millennium’3个紫花苜蓿品种的耐盐性和再生体系进行研究.结果表明:3个紫花苜蓿品种随着NaCl溶液浓度的升高,发芽率均逐渐降低;下胚轴作为外植体的诱导效果较好;愈伤诱导以2.0 mg.L-12,4-D+0.2 mg.L-16-BA的配比最佳;0.5 mg.L-1KT+0.05 mg.L-1NAA的激素组合对体细胞胚的发育和幼苗的形成效果最好;适宜的生根培养基为1/2 MS+0.5 mg.L-1NAA+20g.L-1蔗糖+7.5 g.L-1琼脂;‘Millennium’的耐盐性和植株愈伤再生能力较好.     

人参茎愈伤组织的诱导和分化研究

以4年生人参茎为外植体,探讨了最适的消毒方法;以MS培养基为基本培养基,用均匀设计的方法探讨了2,4-D和6-BA不同浓度组合对人参愈伤组织诱导率的影响;用2,4-D和6-BA不同浓度组合探讨了对人参茎愈伤组织分化成再生苗的影响。结果表明:人参茎部最好的消毒方法为自来水冲洗2h,无菌操作台内70%酒精溶液浸泡30s,再用0.1%升汞溶液浸泡4min;最适合人参茎外植体诱导愈伤组织的培养基为MS+2.57mg/L 2,4-D+0mg/L 6-BA,诱导率可达64.75%;人参茎愈伤组织分化成试管苗的最好培养基为MS+2.00mg/L 2,4-D+0.05mg/L 6-BA,分化率达22.22%。     

草木樨愈伤组织的诱导和芽的再生

为了建立草木樨的高效再生体系和基因转化体系,以黑龙江草木樨为材料,用MS、1/2MS为基本培养基,添加不同种类和浓度的植物激素,对草木樨的愈伤组织培养和绿色芽点培养进行了研究。结果表明,诱导其愈伤组织的培养基以MS 2,4-D 1.0 mg.L-1 KT 0.3 mg.L-1为最好,愈伤组织的形成率可达90%;诱导绿色芽点的培养基以MS 2,4-D 0.2 mg.L-1 6-BA 1.0～1.5 mg.L-1为最好,芽点形成率可达45%。最后,将再生芽转入生根培养基1/2 MS IAA 0.5 mg.L-1上,生根率可达100%。