大花蕙兰原球茎增殖分化影响因素研究

大花蕙兰在供试的MS、1/2MS、KC和VW4种培养基中.其原球茎增殖倍率没有明显差异,在3.51～3.89倍之间,发芽率在MS培养基中最佳,达16.1%.Ad、KT、6-BA等细胞分裂素处理中,以6-BA最有利于原球茎增殖倍数的提高,6-BA浓度在0.1～1.0mg/1范围内对大花蕙兰原球茎增殖没有明显的影响,对幼苗的分化则有一定的影响.原球茎增殖培养基中加入0.5～1mg/1 NAA有利于原球茎增殖倍数与生根率的提高.继代周期以4～6周为宜,培养基中宜加入20～30g/1的蔗糖、10%的椰乳、0.5g/1的活性碳.     

大花蕙兰原球茎增殖、分化与离体保存的研究

以大花蕙兰原球茎为材料,从培养时间、基本培养基、糖浓度、培养方式及切割方式5个方面探讨了原球茎增殖、分化及离体保存的问题。结果表明,2个月内随着培养时间的延长,原球茎增殖与分化越显著,但培养2个月后,原球茎增殖不明显,分化却持续增加;1/2MS基本培养基利于原球茎增殖与分化,而3MS基本培养基利于原球茎保存;糖浓度的高低对原球茎增殖与分化影响显著,20 g·L~(-1)蔗糖适于原球茎保存,50 g·L~(-1)蔗糖适于原球茎增殖,而原球茎分化成苗应选用30 g·L~(-1)白糖;在3种培养方式中,固体培养利于原球茎分化,液体振荡培养利于原球茎增殖,液体静置培养利于原球茎离体保存;片状切割法利于原球茎增殖与分化,整体剥离接种法利于原球茎保存。即以2.0 mg·L~(-1) 6-BA+0.1 mg·L~(-1) NAA为激素组合时,以片状切割法接种原球茎于1/2MS+50 g·L~(-1)蔗糖的培养基中并以液体振荡方式培养时利于原球茎增殖;以片状切割法接种原球茎于1/2MS+30 g·L~(-1)白糖的培养基添中并以固体方式培养时利于原球茎分化成试管苗;以整体剥离法接种原球茎于3MS+20 g·L~(-1)蔗糖培养基中并以液体静置方式培养时利于原球茎保存。上述结论为大花蕙兰试管苗快速繁殖与离体保存提供了有效的技术支持。     

蕙兰“红翡翠”原球茎芽分化的主要因素分析

本试验研究了培养基、激素和添加物等主要因素对大花蕙兰“红翡翠”原球茎芽分化效果的影响。明确了适合原球茎分化的培养基配方，筛选出较理想的原球茎分化的培养基、6-BA浓度、添加物的配比参数值：芽分化为改良KC＋100g／L椰乳＋3％蔗糖、0．3％活性炭、1．0％琼脂。     

大花蕙兰原球茎的诱导和增殖研究

通过对大花蕙兰茎尖和茎段的组织培养,建立了大花蕙兰原球茎的无菌繁殖体系。结果表明:芽诱导的最适培养基为1/2MS+0.2 mg/L NAA+1.0 mg/L 6-BA+100 mg/mL VC;原球茎诱导培养基为1/2MS+0.2 mg/L NAA+2.5 mg/L 6-BA+100 mg/mLVC;原球茎诱导增殖培养基为1/2MS+0.3 mg/L NAA+3.0 mg/L 6-BA+100 mg/mL VC;适宜原球茎增殖培养的外植体为原球茎。     

大花蕙兰原球茎增殖条件研究

采用原球茎（PLB）进行繁殖是大花蕙兰-种重要的再生方式。本研究以大花蕙兰原球茎为外植体进行研究,比较不同基本培养基（1／3MS、1／2MS、MS）、有机添加物（椰乳、香蕉泥、苹果汁）、活性炭和植物激素（6-BA、NAA）等因子对大花蕙兰原球茎增殖效果的影响。结果表明：1／2MS为基本培养基有利于PLB的增殖;有机添加物对PLB的增殖也有影响,其中,以椰乳的增殖效果最好,其次为香蕉泥、苹果汁;1．5g·L。活性炭可以有效减少褐变的发生;低水平的NAA（O．2mg·L-1）和较高水平的6-BA（1．0mg·L-1）对大花蕙兰PLB的增殖具有显著的促进作用。     

大花蕙兰原球茎增殖影响因素的研究

[目的]为探明组培过程中大花蕙兰原球茎增殖生长的影响因素。[方法]以大花蕙兰茎尖诱导的原球茎为外植体,研究了MS培养基浓度、BA浓度及培养方式对原球茎增殖和生长的影响。[结果]1MS基本培养基适合大花蕙兰原球茎培养;在振荡培养时MS培养基中加入BA1．5mg／L时,原球茎生长良好,显著好于其他浓度处理;在液体培养基中培养原球茎明显优于在固体培养基中培养,液体培养基培养的原球茎鲜重和增殖系数均为固体培养的1．75倍。[结论]培养基配方为Ms＋BA1．5mg／L＋NAA0．2mg／L＋蔗糖30g／L且振荡培养时,大花蕙兰原球茎增殖及生长效果较好。     

内外源激素对大花蕙兰类原球茎增殖与分化的影响

将扩繁5代后的大花蕙兰类原球茎置于MS培养基中,以不同浓度水平的IBA,6-BA,活性炭和在缺少6-BA的情况下进行正交试验,观察类原球茎的平均增殖倍数和分化率,以及用高效液相色谱仪测定类原球茎中的6-BA,ABA,IAA,IBA,ZT,KT的含量.结果表明:适合于类原球茎增殖的培养基配方为MS+IBA 2.0 mg/L+6-BA 0.1～3.0 mg/L+活性炭0.5～5.0 g/L,适合于类原球茎分化的培养基配方为MS+IBA 0.1 mg/L+6-BA 1.0 mg/L+活性炭2.0 g/L.在多次继代培养的情况下,类原球茎的增殖和分化受到外源激素和内源激素的共同影响,已测到的高含量内源激素ZT,KT部分代替了外源激素6-BA起影响作用.     

大花蕙兰原球茎一步成苗快速繁殖研究

[目的]筛选适宜原球茎一步成苗的培养基,探讨原球茎试管苗的快繁移栽技术。[方法]以大花蕙兰(Cymbidium grandiflorum)幼嫩芽为外植体进行组织培养研究。以MS为基本培养基附加不同的激素,分别设计5种配方的原球茎诱导培养基和3种配方的原球茎一步成苗培养基,原球茎一步成苗的最适培养基。用农用链霉素稀释2500～3500倍对原球茎试管进行消毒后,栽入不同的基质,研究原球茎试管苗的移栽技术。[结果]大花惠兰在MS+6!BA1.0mg/L+NAA0.1mg/L配方培养基上诱导原球茎效果最好。试管苗的快繁以MS+6-BA2.0mg/L+NAA0.2mg/L的培养基为最适,21d后原球茎大量增殖和分化,诱导出丛生芽并生根。在腐殖土中适当使用农用链霉素有利于练苗成功。[结论]该试验探究出原球茎从增殖,诱导分化到生根只用一种培养基,大大缩短生产周期,但其生根率只有75%,需做进一步研究。     

大花蕙兰组织培养及快速繁殖研究

以8个大花蕙兰品种茎尖为材料,采用不同培养基对茎尖原球茎进行诱导、增殖和分化培养,探讨不同浓度6-BA和椰乳对原球茎诱导、增殖和分化的影响效果。结果表明,低激素水平培养基1/2MS 0.5mg/L 6-BA 10%椰乳 2%白糖 适量活性炭对诱导产生原球茎的效果很好,大部分品种的原球茎诱导率达80%以上;在增殖培养基中添加0.5~1.0 mg/L6-BA和15%椰乳,可明显提高5个品种的原球茎诱导率和增殖率。将多次增殖的原球茎转入1/2MS 1.0mg/L 6-BA 0.5mg/L NAA 20%椰乳 1%白糖的分化培养基,原球茎可继续增殖并分化形成许多类胚性的单极丛生芽,再经分化培养后可获得大量根苗完整的再生植株。因此,试验结果可为大花蕙兰的高效低成本组培快繁途径提供依据。     

大花蕙兰原球茎的诱导、增殖及其解剖结构研究

通过诱导根状茎上的休眠芽萌发,以其茎尖和幼茎段材料为外植体进行组织培养,建立了大花蕙兰(Cymbidium hynridum)的无菌繁殖体系,并筛选出大花蕙兰无菌繁殖的最佳培养基组成。原球茎诱导的较适宜的培养基为MS 1.5 mg.L-16-BA 0.1 mg.L-1KT 0.05 mg.L-1NAA,诱导率达15%;原球茎增殖培养基在诱导培养的基础上添加150 g.L-1香蕉泥,其增殖系数1个月内可达15~35。原球茎是由顶端分生组织后面的薄壁细胞脱分化,形成胚性细胞,经球状胚发育而来。     

春兰根状茎的增殖与分化条件优化

以春兰种子无菌萌发的根状茎为材料,采用正交设计方法,研究了春兰根状茎增殖与分化的适宜条件.结果表明,根状茎增殖适宜的培养基为1/2MS+3 mg·L-1BA+蔗糖3%+香蕉5%+琼脂0.8%,根状茎分化适宜的培养基为1/2MS+3.0mg·L-1BA+1.0mg·L-1NAA+0.8mg·L-1IBA+蔗糖3%+琼脂0.8%.使用100 g.L-1香蕉作为附加物,春兰根状茎在培养30d后重量可达初重的2.1倍.根状茎在固体培养过程中不发生褐变现象,添加活性炭能促使根状茎产生根毛类似物.     

大花蕙兰(Cymbidium hybridium)离体快速繁殖技术

以大花蕙兰茎尖和茎节段作外植体进行了离体快速繁殖技术研究。结果显示:茎尖诱导芽的效果优于茎节段;适宜诱导培养基为MS BA4.0mg·L-1 NAA0.2mg·L-1 AC0.6g·L-1,茎尖在该培养基上芽的诱导率为71.4%;丛芽增殖适宜培养基为MS BA2.0mg·L-1 NAA0.2mg·L-1 AC03.g·L-1,增殖率为3.79;原球茎增殖、分化的适宜培养基为MS BA1.0mg·L-1 NAA0.2mg·L-1 AC0.3g·L-1,增殖率为6.1,分化率为71.1%;生根和壮苗的适宜培养基为MS NAA0.5mg·L-1 AC0.3g·L-1,试管苗生根率达100%。     

春兰杂交种子无菌萌发及根状茎增殖的研究

研究了杂交塑果的成熟度、植物激素、有机添加物及培养方式对春兰杂交种子无菌萌发和根状茎增殖的影响。结果表明：成熟度为五个月的春兰杂交蒴果萌发率最高,杂交种子高萌发率和中等萌发率的比例也比较高。1/2MS＋0.3 mg/L NAA＋20g/L蔗糖＋7.0g/L琼脂和1/2MS＋1.5 g/L蛋白胨＋20g/L蔗糖＋7.0g/L琼脂的培养基配方培养根状茎的增殖系数较高,根状茎生长优良;薄层液体培养有利于根状茎的增殖。     

大花蕙兰原球茎诱导培养影响因素及褐化防治的研究

[目的]研究大花蕙兰茎尖外植体原球茎诱导及增殖培养、褐化污染的影响因素。[方法]以大花蕙兰茎尖作为外植体,研究无菌系建立、诱导培养的灭菌方法与褐化防治、原球茎诱导培养初始培养基的筛选、原球茎增殖培养的影响因素。[结果]结果表明:解决茎尖内生菌污染及褐化严重的问题,两段式灭菌(75%酒精30 s+0.1%升汞10 min+剥去幼叶+0.05%升汞5 min)优于单一式的灭菌;原球茎诱导培养基为1/2MS+2.0 mg/L 6-BA+0.2 mg/L NAA;原球茎增殖培养基为1/2MS+2.0 mg/L 6-BA+0.2 mg/L NAA+2.0 g/L活性炭+10%马铃薯。[结论]该研究可为大花蕙兰的茎尖快速繁殖及工厂化生产提供技术依据。     

大花蕙兰与朱砂兰杂种根状茎增殖和分化的研究

以大花蕙兰与朱砂兰杂交种子萌发后形成的根状茎为试验材料,采用KT、6-BA和NAA三种外源激素对杂交兰根状茎进行实验,比较不同激素对根状茎增殖和分化的影响。单因素实验中,随着激素KT、6-BA浓度的增加,杂交兰根状茎的增殖率和分化率逐渐增加,但不成正比例关系。NAA浓度一定时,6-BA浓度为3 mg/L时,杂交兰根状茎的平均增殖率最高达到290%,6-BA浓度为4 mg/L时,根状茎的平均分化率最高达到85.64%;KT浓度为2.5 mg/L时,平均增殖率最高为300%;KT浓度为3.0 mg/L时,根状茎的平均分化率最高为87.89%。三种激素复合添加对杂交兰根状茎增殖和分化效果最佳。增殖效果最佳的培养基为1/2 MS+6-BA 3.0 mg/L+KT 2.0 mg/L+NAA 0.2 mg/L+琼脂粉7.0 g/L+香蕉80 g/L+蔗糖30 g/L+活性炭1 g/L,根状茎粗壮且长,增殖率高。分化效果最佳培养基为1/2 MS+6-BA 4.0 mg/L+KT 2.5 mg/L+NAA 0.2 mg/L+琼脂粉7.0 g/L+香蕉80 g/L+蔗糖30 g/L+活性炭1 g/L,分化苗生长良好,叶色深绿。本研究为杂交优株实现工厂化育苗奠定了一定的理论基础。     

蝴蝶兰原球茎组织学研究

采用常规方法对蝴蝶兰原球茎结构进行了解剖研究。结果表明：蝴蝶兰原球茎表面存在透明的根状纤毛。中间有分生区。顶端有生长点,在原球茎上部有气孔。在原球茎外层组织中存在成簇的“棒状结构”．是兰花原球茎所特有的。在部分原球茎细胞中存在真菌的菌丝,是与兰花共生的真菌。     

植物生长调节物质及有机添加物对春兰根状茎增殖与分化的影响

以春兰‘宋梅’为试验材料,研究了植物生长调节物质及有机添加物对春兰根状茎的增殖与分化的影响,结果表明适合春兰根状茎增殖的培养基为:1/2MS+3~5 mg/L NAA+0.1 mg/L BA+10%椰子汁+30 g/L蔗糖+6.8 g/L琼脂;最适合根状茎芽分化的培养基为:1/2MS+0.5 mg/L NAA+3 mg/L BA+10%椰子汁+30 g/L蔗糖+6.8 g/L琼脂。     

大花蕙兰种子的液体保藏研究

大花蕙兰是一种具有极高观赏价值的兰属植物,其主要的育种方法是杂交育种。杂交后得到的种子很多,每个果实中有种子数万粒,需进行无菌播种才可以萌发。即便在低温下,种子在空气的保藏时间也很短。把种子放在按照MS培养基配方配制的液体中,pH5.4,蔗糖30g/L,每毫升保藏液中保藏种子数量在50粒以上,环境温度控制在15℃左右,光照约2000lux,保藏液每天早晚震荡两次,每次2h,即可获得理想的保藏效果。     

白墨兰试管苗快速生根试验研究

以白墨兰茎尖诱导产生的原球茎形成无根幼苗为材料,在MS培养基上探究不同生长激素(NAA)浓度、缓冲基质(香蕉泥、苹果泥、椰汁)及其浓度对白墨生根的影响,结果表明:生长激素NAA最佳使用浓度为1.5mg/L;最好的缓冲基质为香蕉泥,其最佳用量为4g/L,表现为生根快、发根率高、根粗、苗壮、均匀。