黑果枸杞的组织培养快速繁殖技术

为黑果枸杞野生种质资源的保存和优良株系的快速繁殖提供技术支持,以黑果枸杞的带芽茎段为外植体,在MS、1/2 MS培养基中添加不同种类和浓度的激素,进行组织培养快速繁殖试验,研究黑果枸杞的组织培养快速繁殖技术。结果表明:MS+6-BA 1.0mg/L+IBA 0.5mg/L+0.7%琼脂+3%蔗糖为最佳诱导芽分化的培养基;最适继代增殖培养基为MS+0.7%琼脂+3%蔗糖;生根培养基选用1/2MS+IBA 0.3mg/L+0.7%琼脂+3%蔗糖,移栽成活率为90%。     

洋水仙组培快繁技术研究

以洋水仙品种Sun Disc为材料进行组织培养,重点研究洋水仙组织培养中的最佳培养基配方,结果表明:最佳诱导培养基配方为MS+6-BA 2.0 mg/L+NAA 0.5 mg/L;最佳增殖培养基配方为MS +6-BA 2.0 mg/L+ NAA 0.2 mg/L;最佳促根培养基为1/2MS+ NAA 0.5 mg/L,生根率达90％.     

麦蓝菜离体再生体系的建立

以麦蓝菜的干燥成熟种子为材料建立麦蓝菜的离体再生体系.结果表明:种子发芽培养基为MS,麦蓝菜继代增殖最适培养基为:MS 6-BA2.0mg/L NAA0.2mg/L,平均增殖系数达到3.0,平均苗高达3.2cm;生根最适培养基为:1/2MS NAA0.10mg/L,生根数为4-6条,生根率达到100%.     

猕猴桃高效离体再生体系的研究

为建立猕猴桃高效离体再生体系,试验以猕猴桃离体茎尖和茎段作外植体,在初代培养诱导试管苗成功的基础上,分别以MS和1/2MS为基本培养基,附加不同的激素组合,研究不同培养基对猕猴桃叶片和叶柄芽诱导的影响和对猕猴桃生根的影响.试验结果表明,在MS 1.0mg/L 6-BA 0.1mg/L NAA的培养基中培养,初代苗诱导成功、生长良好;在MS 2.0mg/L 6-BA 0.1mg/L NAA的培养基中,平均每个叶片、叶柄外植体芽诱导数分别为1.38和5.13;在1/2MS 0.9mg/L IBA和1/2MS 0.6mg/L IBA的培养基诱导生根效果好,生根数、根长统计均显著高于其他处理;温室、自然光照条件下封闭瓶口炼苗1周后,揭开封口膜再炼苗1周,以消过毒的珍珠岩和草炭土(3:7)为移栽基质,成活率达到80%.试验结果为猕猴桃转基因育种及优良品种快速繁殖研究提供了依据.     

月季的离体培养及快速繁殖研究

试验结果表明:适宜月季离体侧芽分化的培养基为MS+0.3~1.0mg/L 6-BA+0.01mg/L NAA,生根培养基为1/2MS+0.5mg/L IBA,移栽基质为蛭石。     

白芥离体快繁体系的建立

以白芥幼苗为外植体,MS和1/2MS为基本培养基分别加入不同浓度的6-BA、NAA和KT进行白芥离体再生技术体系研究.结果表明:以白芥幼苗为外植体进行培养,其不定芽增殖效果较好.6种不定芽增殖培养基增殖效果存在明显差异,其中最适宜的芽增殖培养基是MS+1mg/L 6-BA+1mg/L KT,侧芽及不定芽生长迅速、且旺盛,2周后不定芽平均增殖到10个;大量元素含量对幼苗的壮苗具有显著效应,其中3MS培养基的壮苗效果最好,培养21d的苗较对照明显变粗壮;组培苗接种在1/2 MS+0.133mg/L NAA的培养基上诱导生根的效果最佳,茎段培养约15d时发现白色根,主根较多、细长,有侧根,每单株可达7条根.     

多花水仙胚珠离体培养

对多花水仙4个品种类型进行胚珠离体培养,结果表明品种的倍性起着重要作用。三倍体难以培养成功。胚珠的发育状况亦有很大影响。用作离体培养的胚珠,以授粉后15—20天,正值球形胚或心脏形胚形成期为最适宜;未经授粉、受精的胚珠未能培养成功。适宜的培养条件可以打破种子的休眠,直接在试管审发芽成苗。     

洋水仙栽培管理

洋水仙主要是在欧洲生长,所以生长环境和我国生长环境不同,这就需要选择合理的栽培管理方式,确保洋水仙能够茁壮生长。本文就洋水仙栽培管理进行分析,客观阐述洋水仙和中国水仙之间的差异,洋水仙的生长习性,栽培管理和病虫害管理要点,以期推动洋水仙在我国园林绿化中应用。     

葡萄水仙离体快繁技术研究

采用不同诱导、增殖和生根培养基进行葡萄水仙鳞片离体快繁技术研究,结果表明:鳞片不定芽诱导的最佳培养基为MS+6-BA1.0~1.5 mg/L+NAA 0.2~0.4 mg/L;不定芽增殖培养的最佳培养基为MS+6-BA 1.0 mg/L+NAA 0.2 mg/L;最佳生根培养基为1/2MS+NAA 0.3 mg/L;蛭石是葡萄水仙试管苗最佳的驯化移栽基质,在该基质中生根苗移栽成活率达90%。     

小鼠心肌细胞的体外培养

对采用组织块法和酶消化法体外培养小鼠心肌细胞的结果进行了比较,并对体外培养心肌细胞的生理活性进行了初步测定。结果表明,用组织块法分离培养胎、乳鼠心肌可得到自主节律性搏动的心肌细胞;分别用1g/L胶原酶+10g/LBSA,0.5g/L胰酶+1g/L胶原酶,1g/L胰酶分离培养胎、乳鼠心肌,均可得到大量心肌细胞,且细胞活力较好,能自主博动20d以上;用上述2种方法分离培养成年鼠心肌,结果均不理想;在载有自主节律性搏动的小鼠心肌功能性细胞团的培养皿中加入Ca2+和肾上腺素后,细胞团搏动速度加快,搏动力加强;加入K+后则细胞团搏动速度减缓,搏动力减弱,其对钾、钙、肾上腺素的反应与在体内基本一致,表明体外培养的小鼠心肌细胞具有与在体心肌细胞相似的功能。     

猕猴桃离体生根期间抗氧化系统的变化

以美味猕猴桃品种海沃德组培苗为试材,研究了生根过程中抗氧化系统的变化规律及其相互关系。结果表明,在美味猕猴桃海沃德组培苗生根过程中,超氧化物歧化酶(SOD)活性和抗坏血酸(ASA)含量先增加后下降;过氧化物酶(POD)活性先降低后升高;过氧化氢酶(CAT)活性和谷胱甘肽(GSH)含量先下降后升高,接着又降低。与对照相比,NAA不同程度地提高了抗氧化酶活性和抗氧化剂含量,说明猕猴桃体内较高水平的抗氧化能力对生根具有促进作用。     

不同培养基对铁皮石斛组培快繁的影响

【目的】探讨铁皮石斛种子萌发、芽增殖和生根的适宜培养基,为铁皮石斛组织快繁技术提供依据。【方法】以铁皮石斛种子为外植体进行培养,研究6-BA（0-3.0mg/L）、NAA（0.1-0.3mg/L）、香蕉泥（15%～25%）和马铃薯泥（15%～25%）对铁皮石斛种子萌发、芽增殖和生根壮苗的影响。【结果】适宜种子萌发的较好培养基为MS＋20%马铃薯泥,芽增殖最适培养基为MS＋2.0mg/L6-BA,增殖率达282.7%;最适生根培养基为MS＋15%香蕉泥,生根率达100%。【结论】经马铃薯泥、香蕉泥培养的铁皮石斛组培苗,生长健壮,能为生产提供大量的种苗,因而此类培养基可用于大规模生产铁皮石斛组培苗。     

山羊胎儿成纤维细胞的冷冻保存和体外培养

将胎儿成纤维细胞悬浮于不同的冷冻保护液中 ,在不同的温度下进行冷冻保存试验。结果显示 ,当保护液中含有 90 0 m L / L胎牛血清 (FBS)时 ,- 196℃下保存的山羊胎儿成纤维细胞解冻后的细胞贴壁率高于- 80℃ ,且前者贴壁细胞增殖也较后者快 ,二者间差异显著 ;而在 - 2 0℃条件下只有一小部分细胞能够存活 ,与前两者相比差异极显著 ,说明 - 2 0℃不适合冷冻胎儿细胞。冷冻保护液中含有 10 0 m L / L二甲基亚砜 (DMSO)的保护效果明显好于 5 0 m L / L DMSO,二者间差异显著。用组织块法培养的细胞 ,在两种培养基 DMEM和 M199中添加 10 0 m L / L FBS和 2 mm ol/ L 2 -巯基乙醇 (2 - Me) ,其组织块成活率及细胞生长速度均高于单纯添加 10 0 m L / LFBS,同时证明 DMEM和 M199都能用于胎儿成纤维细胞的体外培养。以 DMEM培养液为基础 ,分别添加 2mm ol/ L 2 - Me,5 m L / L FBS,10 0 m L / L FBS和 2 m mol/ L 2 - Me+10 0 m L / L FBS对山羊胎儿成纤维细胞进行体外培养 ,结果显示 ,细胞在 10 0 m L / L FBS和 2 mm ol/ L 2 - Me+10 0 m L / L FBS培养液中生长迅速 ,两者间无明显差异 ,2 - Me的存在促进了细胞的增殖 ;两者都与添加 2 m mol/ L 2 - Me组存在显著差异 ;添加 2 m mol/ L 2 - Me和 5m L / L FBS相     

朝鲜淫羊藿种胚组培研究

【目的】建立朝鲜淫羊藿（Epimedium koreanum Nakai）种胚组织培养快繁体系,筛选其适宜的组织培养条件。【方法】以朝鲜淫羊藿种胚为外植体,研究外植体最佳消毒方式;在1/2MS基础培养基上,采用L₉(3⁴)正交试验设计,探讨6-BA、NAA、IBA和蔗糖对种胚愈伤组织诱导的影响,筛选适宜培养基,并分析不同激素组合对愈伤组织增殖、丛生芽增殖及幼芽生根的影响。【结果】朝鲜淫羊藿的最佳消毒方式为：利用体积分数0.1% HgCl₂对种子表面消毒8 min,再对种胚消毒5 s,该条件下种子存活率为71.11%;诱导种胚愈伤组织的适宜培养基为1/2MS+1.0 mg/L 6-BA+0.5 mg/L NAA+0.5 mg/L IBA+30 g/L蔗糖,诱导率为47.78%;愈伤组织增殖的适宜培养基为1/2MS+0.5 mg/L KT+0.3 mg/L NAA,增长率为172.67%;丛生芽的适宜增殖培养基为1/2MS+2.0 mg/L 6-BA+0.4 mg/L NAA,增殖系数为2.78;0.5 mg/L NAA的生根效果最好,生根率为43.33%。【结论】建立了朝鲜淫羊藿种胚适宜的组织培养体系,在该体系下,组培苗长势良好,但生根效果需进一步研究。     

猕猴桃体外快繁条件优化及高效再生体系的建立

为进一步优化‘红阳’猕猴桃（Actinidia chinensis cv. Hongyang）组织培养育苗技术体系,采用‘红阳’猕猴桃无菌组培苗的茎尖和叶片为材料,以ZT 1.5 mg·L^-1为外源激素,筛选适宜的基本培养基,并研究不同外源激素及组合对‘红阳’猕猴桃间接、直接器官发生及植株再生的影响。结果表明,适合‘红阳’猕猴桃生长的基本培养基为OM。在OM + 2.0 mg·L^-1 6-BA + 0.5 mg·L^-1 NAA + 0.01 mg·L^-1 2, 4-D培养基中,叶片愈伤诱导率为100%,不定芽发生系数为3.68;而带叶茎尖在OM + 1.5 mg·L^-1 6-BA + 0.5 mg·L^-1 NAA + 1.0 mg·L^-1 KT培养基中培养60 d后,通过直接器官产生基茎丛生芽,其增殖系数可达7.65。试管苗适宜的生根培养基为1/2 OM + 0.5 mg·L^-1 NAA,60 d后平均不定根数为4.87,驯化移栽后成活率为90%以上。选择出了适宜‘红阳’猕猴桃生长的基本培养基,解决了组培苗叶片黄化、植株矮小和畸形的问题,且大幅提高了增殖系数。优化了‘红阳’猕猴桃的人工快繁体系,可为猕猴桃其他品种的研究提供参考。     

突尼斯软子石榴组织培养快繁体系的建立

以突尼斯软子石榴茎段为材料,对其组织培养快繁体系进行了研究.结果表明,突尼斯软子石榴的最适增殖培养基为Ms+1.0 mg·L-16-BA+0.1 mg·L-1NAA,其增殖系数达到3.32;最适宜生根培养基为1/2MS+0.1 mg·L-1NAA,其生根率可达90.0%,移栽成活率达96.0%.     

鸡胚原壳体外培养研究

以种蛋原壳为鸡胚体外培养的孵化蛋壳,就开孔位置、开孔大小以及鸡胚胚龄对鸡胚体外培养效果的影响进行了研究。结果表明:(1)小头侧面开孔明显优于小头顶端开孔(P<0.01),小头侧面开孔的已孵化3 d鸡胚的孵化率为80.0%,而小头顶端开孔的则只有60.0%;(2)随着开孔直径的增加,鸡胚孵化率呈下降趋势,开孔直径为0.5,1.0和1.5 cm时的孵化率分别为80.0%,30.0%和16.7%;(3)在小头侧面开孔且孔直径为0.5cm时,X期鸡胚和已孵化3 d鸡胚的体外培养孵化率差异达极显著水平(P<0.01),已孵化3 d鸡胚的体外培养孵化率为80.0%,X期鸡胚的孵化率则为0。     

培养条件对牛卵母细胞体外受精后胚胎发育的影响

以屠宰场牛卵巢为材料,采用体外成熟、体外受精、早期胚胎的体外培养等方法,研究了牛卵泡液(BFF)浓度、颗粒细胞单层(GCM)和培养微滴大小对牛卵母细胞体外发育潜力的影响。结果表明:(1)与未添加BFF的对照组相比,成熟培养液中分别加入10%,20%和40%的混合BFF,均可明显促进卵母细胞受精后的发育(P<0.05),但20%组和40%组出现卵母细胞或胚胎粘连。因此,成熟培养液中以添加10%的混合BFF较为适宜。(2)添加GCM对1级卵母细胞的卵裂率、6~8细胞发育率和囊胚率无显著影响(P>0.05);但添加GCM的2级、3级卵母细胞受精后的卵裂率、6~8细胞发育率和囊胚率分别显著高于未添加组(P<0.05)。(3)将取自每头牛的约20枚卵母细胞,分别置于不同大小的微滴(30,50,100和200μL)中培养、受精,结果表明,30和50μL组的囊胚发育率显著高于100和200μL组(P<0.05)。     

君迁子组培体系的建立及优化

【目的】建立君迁子（Diospyros lotus L.）组培快繁体系并进行优化,为君迁子组培苗的生产应用提供技术支持及理论依据。【方法】以污染率、褐化率、成活率为考察指标,设置体积分数10% H₂O₂消毒10,20,30 min和体积分数2% NaClO消毒5 min+体积分数10% H₂O₂消毒10 min 4个处理,筛选君迁子外植体适宜的消毒方法;分别以君迁子萌动芽、春梢、腋芽和休眠芽作为外植体,筛选最合适的外植体材料;分析DKW、（1/2N）MS、1/2MS、MS培养基对组培苗启动培养的影响,筛选组培苗生长的最适培养基;增殖培养中,激素ZT、6-BA均设0,1.0,2.0,3.0,4.0 mg/L 5个水平,IAA设0.05,0.1,0.2 mg/L 3个水平,筛选组培苗继代增殖最适激素配比;最后分析不同质量浓度IBA（0,1.0,2.0,3.0 mg/L）对组培苗生根的影响。【结果】君迁子外植体最适的消毒方法为体积分数2% NaClO消毒5 min+体积分数10% H₂O₂消毒10 min;最佳外植体材料为萌动芽,其成活率可达60.00%;在（1/2N）MS培养基上组培苗生长更加健壮,启动培养效果较好;增殖培养最佳的激素配比为3.0 mg/L ZT+0.1 mg/L IAA,在此处理下,组培苗2级愈伤占比79.00%,显著高于其余处理,2级和3级株高占比分别为55.33%和44.67%,长势均匀且主茎粗壮,其增殖系数达5.83;君迁子生根培养较为适宜的IBA质量浓度为1.0 mg/L,生根率可达83.33%。【结论】初步建立了较为完整的君迁子组培体系,有助于柿砧木无性系产业化扩繁的推进。