牦牛发情周期和妊娠早期乳脂孕酮水平的变化

采用放射免疫分析法对牦牛发情周期和妊娠早期的乳脂孕酮水平进行了测定,并对应用乳脂孕酮测定进行耗牛早期妊娠诊断的方法作了探讨。4头牦牛发情周期乳脂孕酮水平的变化类型与奶牛基本相似。发情期的乳脂孕酮含量低,为0.10±0.01(S.E.)ng/10μl;发情终止后4～5天,孕酮含量开始显著升高(P<0.01),并分别于周期第16,17,21和22天(周期长度分别为20、24、25、27天)达到峰值,平均为1.69±0.10(S.E)ng/10μl,下次发情前2天孕酮含量急剧下降到较低水平,于下次发情时重返到基础水平。15头牦牛妊娠12—30天的乳脂孕酮含量维持较高水平,平均为2.18±0.05(S.E)ng/10μl,妊娠18、20、22、24、26、28和30天的孕酮含量极显著高于8头未孕牛授精后相应各天的孕酮含量(P<0.01)。根据配后16和24天两份乳样的乳脂孕酮含量诊断怀孕与未孕的准确率分别为78.9%(15/19)和100%(11/11)。     

羊的早期妊娠诊断

用放射免疫分析法测定配种后16～20日妊娠和未妊娠阿华西母羊血清标本的孕酮浓度.发现妊娠母羊的孕酮浓度(1.89ng/ml)高于未妊娠母羊(0.34ng/ml).依据血清孕酮量作出的妊娠诊断,通过产羔得到证实(以特定期间高于1ng/ml的孕酮量作为妊娠指标).此种诊断的准确率为90％以上.60月龄母羊的孕酮浓度2.65ng/ml),比24月龄母羊的孕酮浓度(1.66nc/ml)更高,但不同体重组母羊的血清孕酮差异不显著.故阿华西母羊配种后16～20日的血清孕酮定量分析适宜于早期妊娠的判定.     

酶免疫测定法检测粪便孕酮进行母猪早期妊娠诊断的研究

粪便中孕酮含量是判断母猪卵巢机能状态的重要指标,应用粪样孕酮酶免疫法可以对母猪进行早孕诊断。由实验结果可知,配种后母猪粪便中孕酮的含量超过150 ng/g粪样时,就可确认其妊娠;小于150 ng/g时,可确认其空怀。对164头配种后21～25 d的母猪进行了检测,早孕诊断的准确率为95.9%(138/146),空怀诊断的准确率为72%(13/18)。母猪粪便孕酮酶免疫法进行早期妊娠诊断有较高的临床适用性,对提高母猪繁殖率和猪场经济效益具有重要意义。     

根据乳汁孕酮水平进行奶山羊早期妊娠诊断的研究

为探求西农莎能奶山羊早期妊娠诊断的方法,应用放射免疫法,分别测定6只奶山羊发情同期和153只奶山羊妊娠早期下午末乳的孕酮水平。6只母羊发情0～1天(发情为0天)的孕酮水平最低,均值为0.83±0.28毫微克/毫升,发情第五天后逐渐上升,于第十一至十七天达峰值分别为32.2、23.4、15.9、12.6和34.2毫微克/毫升,此后又陡然下降,恢复到下一发情周期前的基础水平。配种后第十五至二十九天的孕酮值波动在0.30～42.2毫微克/毫升的范围。根据配种后返情及产羔情况观察,产羔羊配种后第二十二至二十五天的孕酮均维持较高水平,均值≥8.3毫微克/毫升,而返情和未产羔羊这四天的孕酮水平则较低(P<0.01),均值<8.3毫微克/毫升。故以8.3毫微克/毫升的孕酮值为判定界限,即:≥8.3毫微克/毫升为妊娠,<8.3毫微克/毫升为未妊娠,准确率是96.5%(109/113),未妊羊是90%(9/10)。据此,作者认为:根据乳汁孕酮水平能够进行西农莎能奶山羊的早期妊娠诊断。采样时间在配种后第二十二至二十五天,采样次数为隔日2次。此外,对判定界限及诊断的准确率等问题、也进行了讨论。     

奶牛发情期前后脱脂乳中孕酮水平与受胎率之间的关系

本试验用酶联免疫法(EIA)对34头具有发情表现的上海黑白花奶牛进行了脱脂乳孕酮含量的测定.结果表明,配种后妊娠的母牛和未妊娠的母牛在原人工授精当天的脱脂乳孕酮水平分别为0.23±0.17ng/ml 和0.65±0.72ng/ml,两者差异显著(P<0.05).母牛在开始发情后16～18小时,脱脂乳孕酮水平低于0.23ng/ml 时配种,其受胎率为100%.     

电化学发光法对绒山羊孕酮水平检测效果分析

利用电化学发光法跟踪测定了绒山羊母羊血清孕酮(P4)水平。结果表明,在发情期的0~3 d P4值为(0.68±0.18)ng/m L;之后孕酮水平逐渐上升,于10~12 d间达到峰值(15.14±3.21)ng/m L,而后开始下降。母羊配种后若妊娠,在推测下一个发情期间,孕酮水平可达(12.24±3.72)ng/m L以上,妊娠中期也会保持相对较高的水平。说明辽宁绒山羊母羊在繁殖季节体内孕酮值随发情周期呈规律性变化。电化学发光法与微粒子发光法测定孕酮值符合度高。     

奶牛早期妊娠诊断—应用放射免疫测定乳汁孕酮含量的研究

应用放射免疫测定91头黑白花母牛,(配种后21—28天和42天)的混合全乳的孕酮含量,进行早期妊娠诊断研究。结果显示怀孕与未孕牛之间孕酮值差异非常显著(P<0.01)。据此确定全乳孕酮值的判定标准:>11毫微克/毫升为怀孕,<8毫微克/毫升为未孕,8.1～10.9毫微克/毫升为疑似。经直肠妊检核实,用这标准衡量配后21,23,24天妊娠牛的确诊率分别为85.7％,90.2％,91.4％,未孕牛确诊率是100％,因此,最佳采样时间以配后23—24天为宜。     

LRH—A3对全奶母牦牛的诱导发情效果和作用机理初探

本研究初步探讨了促性腺素释放激素类似物(LRH-A3)对全奶母牦牛(在当年4～6月份产犊的泌乳母牦牛)的诱导发情排卵效果及机理.1998年7月对试验组(n=20)母牦牛注射LRH-A3(300μg/头),对照组(n=42)未作任何处理.9月15日前用普通牛公牛配种,9月15日后用公牦牛补配.1999年产犊率为试验组50.0%(10/20),对照组28.6%(20/42),试验组和对照组差异极显著(P<0.01).对5头母牦牛在注射LRH-A3前30min及注射后30,45和60min血清中促黄体素(LH)浓度测定以进一步探明全奶母牦牛诱导发情第一情期受胎率低的原因.结果发现,虽然注射LRH-A3后60min全奶母牦牛血清中LH浓度显著升高(P<0.05),但该峰值(3.34±0.67ng/ml,n=5)未达到自然发情排卵的LH峰值(17.1829±2.1174ng/ml).     

酶免疫法测定水牛奶孕酮作早期妊娠诊断的研究

本试验采用酶免疫分析法（ＥＩＡ）测定８７头杂种水牛，７１头摩拉水牛的脱脂乳孕酮含量，初步掌握了水牛发情、配种、妊娠、空怀和流产等不同生殖状态的孕酮变化规律。摩拉和杂种水牛发情配种时脱脂乳孕酮含量均在０．５毫微克／毫升以下，妊娠２１天和２７天时孕酮含量两次都在１．７毫微克／毫升以上，妊娠３０天以后直至产前干奶期间，脱脂乳孕酮保持在４～５毫微克／毫升的水平。母水牛流产和胚胎死亡时孕酮浓度下降。为对水牛繁殖状态的监控提供了可靠的方法和依据。结合生产实践，用上述方法和标准对６４头配种后２１天的母水牛进行早期妊娠诊断，判断妊娠牛和非妊娠牛的准确率分别为８８．９０％和９７．３％，总准确率为９３．８％。     

水牛早孕诊断方法比较研究

本试验的目的是通过比较几种不同的妊娠诊断方法,建立一套简便而准确的水牛早孕诊断方法。选择体况相似的8头中国沼泽型奶水牛为研究对象,通过视诊法连续观测8头母水牛配种后15个时间点眼睛形态学特征的变化;采用ELISA法检测8头母水牛人工授精后8个时间点晨血的血清中孕酮、雌二醇水平;采用牛早孕试纸检测卡检测尾根血清中的早期妊娠相关糖蛋白,以上早孕检测结果均与B超孕检结果进行对比分析。结果发现：配种后前28d观测水牛的眼部未见异常形态;怀孕母牛的孕酮水平均为5.76ng/mL,自16d开始保持在4.9～8.43ng/mL,至24d有小幅度升高,而未怀孕母牛的孕酮水平则表现下降趋势;配种后28d时采用牛早孕试纸检测卡检测发现有4头水牛怀孕,与B超孕检结果相一致。可以得出,配种后前28d形态学观察法不适用于水牛早期的妊娠诊断;孕牛与未孕母牛的孕酮激素水平变化规律存在差异,可为今后建立水牛早孕诊断方法提供技术支撑;牛早孕试纸检测卡在28d后获得较高的准确率,可应用于水牛早期妊娠诊断。该试验的开展可为今后水牛早期妊娠诊断研究提供参考,同时对促进水牛产业的健康发展具有重要的意义。     

湘西黄牛发情周期与妊娠早期孕酮变化规律研究

采集湘西黄牛母牛的血液样品,通过酶联免疫吸附技术检测和比较其在发情周期和早期妊娠期的孕酮(P4)水平。结果表明,湘西黄牛的发情周期中,P4浓度变化非常明显,大致呈先上升再下降的趋势。发情前期、中期、后期和间情期P4浓度分别为8.85、0.72、1.40和9.13ng/mL,发情中期与后期P4浓度显著低于发情前期和间情期(P0.05);妊娠早期的母牛,从发情配种后,血液中P4浓度缓慢升高,其中妊娠后0~10d、11~20d、21~30d和31~36dP4浓度分别为3.36、8.91、12.69和16.12ng/mL,各阶段P4浓度差异显著(P0.05);发情后第21d、24d、27d和30d,妊娠母牛血液中的P4浓度显著高于未妊娠的母牛(P0.05)。试验表明,发情配种后20d,妊娠母牛与未妊娠母牛的血液中孕酮含量差异明显,可作为判断是否受孕的标记因子。     

妊娠早期母猪外周血浆孕酮和雌二醇水平及断奶后不育机理的探讨

母猪妊娠早期外周血出现的17β雌二醇,可能是建立母体妊娠识别及维持胚胎正常发育同孕酮一样是不可缺少的。妊娠早期(40～45天)高水平孕酮可作为早期妊娠诊断的指标。高于10毫微克/毫升可判断为妊娠,低于此值可判断为不孕。对46头配种后40～45天的长白、苏白杂种母猪,14头产后屡配不孕猪外周血浆孕酮和17β雌二醇测定(放射免疫 RIA法),经直肠检查和屠宰验证结果:妊娠组孕酮(n=39)和17β雌二醇(n=19)含量分别为19.47±7.23毫微克/毫升和31.82±24.40微微克/毫升。未妊娠及产后不孕组分别为7.87±4.25毫微克/毫升和12.72±12.16微微克/毫升。妊娠组比非妊娠及产后不孕组孕酮和17β雌二醇水平均高,经统计处理,差异分别为极显菩(P<0.01)和显著(P<0.05)。一例卵泡囊肿猪(84730号)血浆孕酮值为37.65毫微克/毫升,高出妊娠组平均值(19.47毫微克/毫升),为此可考虑用促性腺激素释放激素(G_n,RH)或促黄体素(LH)治疗。     

用ELISA测乳汁孕酮进行奶牛的发情检查和早孕诊断的研究

本试验用ELISA测定了101头奶牛配种期0～2天和配种后18～24天的乳汁孕酮含量,提供了牧场分两阶段测试乳样进行奶牛的发情检查和早孕诊断的可行方案。测定的结果经临床检验核实:发情检查的确诊率为100％;配种后20～22天,妊娠牛和空怀牛的确诊率分别为92.1％和96.9％,可疑率为4.0％,总确诊率为89.9％。     

枫泾小猪生殖机能的发展和孕酮含量的测定

在枫泾小公猎生殖机能发展的试验中,用小公猪4头,从3月龄开始至7月龄,每个月龄都与6～8月龄母猪配种,共配22头,受胎率分别为40%(2/5)、100%(5/5)、50%(1/2)、66.7%(2/3)和85.7%(6/7),妊娠28天胚胎数量、重量和分娩仔猪数、初生重都达成年公猪所配的效果。表现枫泾小公猪3月龄已属发身期,配种后可使母猪受胎,4.5月龄已属性成熟期,具有充分的受精能力。在枫泾小母猪生殖机能发展试验中,用小母猪25头,分成5组,分别在初情期到第五情期,各用成年公猪精液配种,受胎率分别为20%(1/5)、100%(5/5)、100%(5/5)、100%(5/5)和60%(3/5);排卵数分别为13.0、12.2、14.8、14.8、和16.6。小母猪妊娠28日龄胚胎的大小与大母猪28日龄胚胎的相似。小母猪各情期孕酮含量高水平之间,各情期妊娠早期孕酮含量高水平之间,差异均不显著(P>0.05)。情期第9天和第12天孕酮水平为27.4ng/ml 和29.6ng/ml,妊娠第9天和第12天为21ng/ml 和26.8ng/ml,与8～10月龄大母猪的孕酮水平相似。上述受胎率和孕酮水平均表明枫泾小母猪113.2日龄(体重18.9公斤)已属初情期,可以配种受胎;135.8日龄(体重23.2公斤)已属性成熟期,具有充分的受胎能力。     

母牛早期妊娠诊断——应用放射免疫测定乳汁孕酮在母牛性周期内变化规律的试验报告

应用放射免疫法对10头黑白花母牛性周期内乳汁孕酮含量进行了测定。结果显示母牛配种当天(0天)乳汁不含孕酮,配种后第3天含量仍是低值(范围0—4ng/ml,平均0.71±1.338)。以后逐渐上升,配种后第13天,70%个体出现峰值(范围14.8～36.5ng/ml,平均24.9±6.73);其余个体于配种后第16天出现峰值(范围15—31ng/ml,平均24.83±8.6)。此后显示分化现象,其波动曲线与同类报道相似。     

孕酮固相放免法的建立及其应用初探

利用孕酮 (Progesterone ,P4 )单克隆抗体 ,建立P4 自包被固相放免分析法 (Self -coatingRadioim munoassay,Sc -RIA)。其灵敏度为 0 .0 6nmol/L ,回收率达 95 .73 %批内CV6.8% ,,批间CV9.3 %。对 5头正常健康未孕奶牛的一个发情周期的奶样进行检测 ,检测范围在 0 .0 9～ 2 1 .3 7nmol/L ;同时对 2 0头配种奶牛进行早期妊娠诊断 ,妊娠诊断准确率达 89.4 7% ,未孕诊断准确率达 1 0 0 %。     

营养不平衡日粮对泌乳奶牛一些血液和产后繁殖性能指标的影响

该试验研究了在泌乳奶牛产后的泌乳早期和晚期,由于日粮矿物质不平衡以及能量负平衡对繁殖性能造成的影响。随机选择100头年龄在2～8岁、平均体重为650kg的经产奶牛进行试验。试验动物的日粮没有进行调控,饲喂试验农场配合的日粮。分别于产后0d,20d,24d,30d,31d,38d,45d,60d和90d采集血液样品,记录难产及/或产后期出现的繁殖问题。分析试验动物血清中非酯化脂肪酸、钙、磷、镁、尿素氮、SGOT（AST）浓度及孕酮含量。试验结果表明,产后0d,20d,30d,60d和90d,血清中非酯化脂肪酸的浓度分别为670μmol/l,660μmol/l,660μmol/l,620μmol/l和640μmol/l。上述非酯化脂肪酸含量可能反映出日粮中显著的能量负平衡。血液样品中钙磷比为1：1.25。产后0d～45d,31%的试验动物血清孕酮含量一直在增加,而其余69%的试验动物血清孕酮含量低于1ng/ml。产后出现繁殖问题奶牛的繁殖性能指标分别为：产后配种间隔：102.44±36.41d;产后怀孕间隔：132.69±34.00d;怀孕配种次数：2.00±0.70;重配率：33.3%。未出现奶牛繁殖性能指标：为产犊后配种间隔108±28.61d;产后怀孕间隔128.63±35.50d;怀孕需要的配种次数：2.12±0.71;重配率：37.93%。上述参数表明试验农场试验动物具有繁殖障碍并由此产生了经济损失。     

奶牛发情周期中毛 唾液和乳汁孕酮水平的变化

本实验采用放射免疫分析法(RIA)测定了11头奶牛一个发情周期里毛、唾液、乳汁中孕酮(P_4)含量。经产牛(n=8)的毛和唾液中P_4水平变化与乳汁中P_4水平变化一致。青年牛(n=3)的毛和睡液中的P_4水平变化一致,并分别与经产牛毛和唾液中P_4水平变化一致。7头配种后的经产牛和5头配种后的青年牛分别取20和23天的样品进行妊娠诊断,与配种后60天的直检结果相对照,依据经产牛毛、乳P_4水平进行妊娠诊断的阳性准确率分别是85.7％(6/7)和100％(7/7),依据青年牛毛P_4水平进行妊娠诊断的阳性准确率为100％(5/5)。     

几种常见猪妊娠诊断方法的利弊

1实验室诊断方法 1.1血浆孕酮测定未妊娠而有发情周期的母猪,在发情期的第16d左右,外周血浆孕酮浓度下降,因此可在配种后16～24d检测,若血浆孕酮含量仍很高,则为妊娠的征象.猪妊娠22d时血浆孕酮含量一般在5mg/mL以上.但此方法不利于推广的原因为采集血样困难.     

孕酮免疫生物传感器在奶牛上的临床应用

为了解孕酮免疫生物传感器的临床应用效果,本试验对7头妊娠奶牛,8头产后发情奶牛和18头乏情奶牛的血浆雌二醇、促黄体素、促卵泡素和孕酮浓度进行了检测,同时应用的孕酮免疫生物传感器进行了乳汁孕酮检测。结果显示,孕酮免疫生物传感器检测的乳汁孕酮水平与ELISA检测血浆孕酮含量之间呈正相关。该优化的生物传感器检测奶牛妊娠的孕酮浓度范围为10~15 ng/mL,发情的孕酮浓度范围为4~10 ng/mL;持久黄体的孕酮浓度范围为10~16 ng/mL,卵巢静止的孕酮浓度范围为3~7 ng/mL,黄体囊肿的孕酮浓度范围为12~18 ng/mL。表明该孕酮免疫生物传感器能有效的检测奶牛妊娠、发情和繁殖障碍疾病的乳汁孕酮水平。