东北地区高毒力苏云金芽孢杆菌HB-3菌株生物学特性研究

从自然死亡的玉米螟幼虫体内分离获得一株对玉米螟高毒的苏云金芽孢杆菌,编号为HB-3。该菌株产生菱形和方形两种晶体蛋白。纯化晶体及孢晶混合物的毒力测定结果表明,该菌株对玉米螟具有较高毒力,LC₅₀分别为5.82μg/mL和5.94μg/mL,对尖音库蚊也有一定毒力,LC₅₀分别为16.59μg/mL和17.50μg/mL。生理生化特性研究结果表明,HB-3与已知的蜡螟亚种(Bacillus thuringiensissubsp.galleriae)基本一致,血清型为H5ab。晶体蛋白的SDS-PAGE分析表明,HB-3菌株晶体蛋白至少由分子量为133 kDa、65 kDa4、5 kDa和23 kDa的4种多肽组成。     

夜蛾科昆虫高毒力苏云金杆菌菌株的分离和筛选

从山东省采集的750份土样中分离出苏云金芽孢杆菌菌株57株,这些菌株的晶体形态主要有菱形、圆形等。以夜蛾科害虫粘虫和甜菜夜蛾初孵幼虫为试虫,通过生测筛选出一株高毒力菌株QCL-1。菌株QCL-1对甜菜夜蛾的毒力显著高于标准菌株HD-1,对粘虫的毒力与HD-1相当。     

三种苏云金芽孢杆菌晶体蛋白火箭免疫电泳的研究

本文以火箭免疫电泳技术检测HD—1、81—6、187三种苏云金芽孢杆菌的晶体蛋白,结果表明:这种方法可以快速、特异性地检测晶体蛋白的含量。在抗血清浓度为3％的凝胶上抗原抗体所形成的免疫沉淀线峰高与晶体蛋白的浓度呈明显的线性关系。本文还就火箭免疫电泳沉淀线峰高与一些条件的关系进行了讨论。     

苏云金芽孢杆菌对甜菜夜蛾幼虫毒力的生物测定方法

甜菜夜蛾的室内人工饲养及不同感染因素对生物测定结果的影响研究表明,用人工半合成饲料在室内可以大量饲养甜菜夜蛾,其生长发育历期、化蛹率、羽化率、雌雄性比和产卵均表现正常。感染时间、幼虫日龄和感染温度对生物测定结果有一定影响,随着感染时间（３、５、７天）的延长,生物测定中致死中浓度ＬＣ５０显著降低,测定结果的重复性增强;而随着感染幼虫日龄（１、２、３天）的升高,ＬＣ５０有显著升高,且测定结果的重复性降低,依次为３２．１、６４．９、１７１．１μｇ／ｍｌ;随着感染温度（２２、２５、２８℃）的升高,ＬＣ５０有较显著降低;饲料的存放时间（４～８天）对生物测定的结果只有轻微影响。     

苏云金芽孢杆菌培养条件及晶体蛋白提纯方法初探

在苏云金芽孢杆菌常用培养基的基础上,设计了３种改进苏云金芽孢杆菌产生伴孢晶体的培养基,从中筛选出一种比１／２ＬＢ、Ｇ Ｔ培养基培养周期短（约需３８ｈ）的ＺＭ培养基。同时,改进了晶体蛋白的提纯方法—碱裂解法。改进后的方法与不连续蔗糖密度梯度离心法相比,简便易行,提取量大,在Ｂｔ的生化和生物活性研究上具有一定参考价值。     

对草地贪夜蛾高毒力的苏云金杆菌菌株筛选

筛选对草地贪夜蛾高毒力Bt菌株,对于开发绿色高效防治草地贪夜蛾新产品具有重要意义。本研究从自行筛选的对夜蛾科害虫高毒力的Bt菌株资源中,选取9株菌株进行草地贪夜蛾室内毒力测定,并对高毒力菌株进行杀虫基因分析;选取室内毒力测定活性最高的3株菌株进行田间小区药效试验。结果表明,9株Bt菌株在药后7 d对草地贪夜蛾初孵幼虫均表现出显著的毒杀效果,LC50范围在0.07~3.38μg/g,其中毒力最高的3个菌株分别是KN50、KN11和KNR8,LC50分别为0.07、0.23和0.43μg/g,表现非常显著的致死效果;对KN50、KN11和KNR8等6种高毒力的Bt菌株的杀虫基因分析发现,他们都含有vip3Aa、cry2Ab、cry1Ac、cry1Ia杀虫基因。KN50、KN11和KNR8菌株的32000IU/mg制剂在田间对草地贪夜蛾表现出不同程度防效,其防效高低与室内毒力结果一致,其中KN50药后7 d防效最高,在200和400 g/667 m2下对1~3龄幼虫防效分别可达86.09%和95.22%,对不同龄期幼虫混发的防效为72.61%和86.59%。因此KN50、KN11和KNR8这3个菌株能作为备选高效菌株用于防治草地贪夜蛾新产品开发,为实现草地贪夜蛾的绿色防控、化学农药合理减替提供重要保障。     

苏云金杆菌HBF-1菌株晶体蛋白活化及对金龟幼虫毒力的影响

通过SDS-PAGE研究了缓冲液pH值对HBF-1菌株晶体蛋白的降解活化作用及其对晶体蛋白杀虫毒力的影响.结果表明,晶体蛋白在牛胰蛋白酶和金龟子幼虫中肠液作用下的降解程度,随着缓冲液pH值的增加而加深.幼虫中肠蛋白酶在缓冲液pH值达到8.0时,就能完全降解晶体蛋白;而胰蛋白酶在pH值达到11.0时,才能把晶体蛋白完全降解.产生的活力片段分子量近似,均在63.0kD左右.在pH11.0条件下,胰蛋白酶的降解速度大干幼虫中肠液.生测结果显示,晶体蛋白经中肠液水解后,其毒力明显增强,在7d和14d增效率分别达到1.25和1.00.同时,经强碱性缓冲液处理后,也起到了较强的增效作用.     

快速筛选苏云金杆菌高毒力菌株的有效方法

对7株苏云金芽孢杆菌菌株进行了cry 1基因检测、晶体形态观察、晶体蛋白SDSPAGE以及杀虫活性检测。结果表明，综合菌株的PCR结果、晶体形态和晶体蛋白图谱结果可以预测其杀虫特性。根据菌株预测的杀虫特性进行有目的的生物测定，可以快速、准确地筛选到对特异害虫具高毒力的菌株。     

苏云金杆菌新菌株对金龟子幼虫的毒力比较

金龟子类幼虫是一类重要的地下害虫,可危害农、林、果、菜、草等多种植物。由于这类害虫危害植物地下部分或地面附近根茎部分,具有一定的隐蔽性,而且分布广,也是难以防治的世界性害虫。随着人们对苏云金杆菌(Bacillus thuringiensis,以下简称Bt)资源调查与研究的深入,新的具有特异杀虫谱的Bt菌株陆续被发现。1992年,Ohba等在世界上首次从土壤中分离筛选出对金龟子幼虫具有特异杀虫活性的Bt新菌株BuiBui。笔者于     

苏云金芽孢杆菌菌株B-Pr-88的生物学特性

就自行分离的、对鳞翅目夜蛾科害虫具有高毒力的Bt菌株B-Pr-88的生物学特性进行了系统研究.B-Pr-88可形成菱形、球形和不规则形等多种形态的晶体,主要由130kDa和60kDa两种蛋白组成;酯酶型与标准菌株蜡螟亚种和库斯塔克亚种一致,同属于galleriae型;10项生理生化反应结果表明,B-Pr-88与标准菌株蜡螟亚种反应一致;B-Pr-88菌株至少含有3种大小不同的质粒,经PCR-RFLP鉴定该菌株至少包括cry2Ab、cry9Ba和多种cry1(包括cry1Cb、cry1Db、cry1Fb和cry1Gb)等6种不同的杀虫晶体蛋白基因.     

几株高效苏云金杆菌菌株对玉米螟、棉铃虫、粘虫和黄地老虎的毒力测定

本文以玉米螟、棉铃虫、粘虫和黄地老虎为供试昆虫，对筛选出的７株高效苏云金杆菌菌株的孢晶制剂进行了毒力测定。以ＬＣ５０为衡量各菌株的毒效指标，属血清型Ｈ６的“Ｇ０２”菌株对上述４种供试昆虫的毒力最高，属血清型Ｈ３ａ３ｂ的“８０－１”菌株对棉铃虫和粘虫的毒力也高于“ＨＤ－１”菌株。这一研究结果为今后生产高效的苏云金杆菌制剂及生产菌株的轮换提供了后备菌株     

苏云金杆菌芽孢与晶体不同配比对亚洲玉米螟的毒效

苏云金杆菌3个变种的芽孢与晶体按重量百分比混合,以亚洲玉米螟1龄和2龄幼虫测定毒力。对1龄幼虫主要致病因素是晶体。对2龄幼虫,“HD—1”以晶体为主;SB—14菌株当芽孢与晶体1:1时,杀虫效果最好;E743—4菌株以芽孢为主。     

亚致死剂量苏云金杆菌蜡螟亚种对大蜡螟幼虫酯酶活力的影响

本文研究了亚致死剂量苏云金杆菌蜡螟亚种对大蜡螟幼虫以及幼虫肠道、血淋巴酯酶的影响。结果表明，经Ｂ．ｔ．晶体处理后大蜡螟整体幼虫和肠道酯酶比活力均下降，同功酶谱无明显变化；血淋巴酯酶同功酶活力及同功酶谱亦无明显变化     

应用计算机进行BT—ICP基因的分类和同源性比较

本文应用DNASIS(V7.12)和PROSIS(V7.12)软件、GenBank(1994.8,Releasee 84.0)和Swiss—Prot(1994.2,Releasee 28.0)数据库对苏云金杆菌(Bacillus Thuringiensis,BT)杀虫晶体蛋白(Insecticidal Crystal Proteins,ICPs)及其编码基因进行了检索,在此基础上对ICPs基因序列结构的同源性、DNA片段总碱基数、晶体蛋白氨基酸数及分子量、晶体蛋白基因编码序列(CodingSequence,CDS)范围、目标生物等进行了比较,发现属同一基因型的不同菌株来源的晶体蛋白基因编码蛋白区的序列几乎完全一样,同源性高达99％,而不同基因型编码的蛋白氨基酸序列则差异较大。文中根据上述资料对100个苏云金杆菌晶体蛋白基因进行归类,将之分为cryⅠ——cryⅧ、cytA、cytB等10类36个亚类,还对晶体蛋白基因分类的有关问题进行了讨论。     

甘蓝田四种鳞翅目幼虫的生物学特性及其田间株内分布

作者研究了不同层次甘蓝叶片对四种鳞翅目幼虫(菜粉蝶、小菜蛾、甜菜夜蛾和斜纹夜蛾)生长发育和取食特性的影响。随着叶片成熟度提高(内层→外层),四种幼虫的存活率和生物量积累均逐渐下降,发育历期和总取食量均逐渐增加,但在低、高龄幼虫之间存在一定差异。在田间,低龄幼虫株内分布通常与其卵的株内分布相一致,而高龄幼虫均集中分布在植株中部以内叶片上;甜菜夜蛾和斜纹夜蛾低龄幼虫表现明显的趋边性,高龄幼虫却表现明显的趋中性。作者讨论了叶片营养状况、害虫自身的生物学特性和其它环境因素对四种幼虫田间株内分布的综合影响。     

不同生长期蔬菜叶片对Bt制剂生物测定结果的影响

在室内用蔬菜叶片浸渍苏云金杆菌药液测定对小菜蛾的ＬＣ５０试验结果指出，供试蔬菜的生长期对测试结果有明显的影响。用营养生长旺盛期的菜叶，所得的ＬＣ５０值比营养生长末期的菜叶高出４倍左右，差异显著。因此，用叶片浸渍法测定药液毒力，提供生长期标准一致的植物是保证试验准确性的必要条件     

苏云金素与苏云金杆菌芽孢晶体混剂对小菜蛾的增效作用

将苏云金素和苏云金杆菌的孢晶制剂分别作为单一制剂，用混和饲料感染法在室内测定苏云金素分别与苏云金杆菌ＨＤ－１、ＣＴ－４３、８１－６、ＷＰ－２等４个菌株孢晶制剂的混剂对小菜蛾幼虫的协同作用。按Ｓｕｎ－Ｊｏｈｎｓｏｎ毒力指数法计算结果表明，苏云金素对所有供试菌的孢晶制剂都有增效作用，共毒系数从１２７．４３至４１５．６２不等。当混剂以芽孢晶体为主要活性组分，苏云金素占全部活性组分的１６．７％情况下增效作     

害虫对转Bt基因植物抗性的治理策略

转Bt基因植物在害虫综合防治中发挥着重要作用。但是害虫对转Bt基因植物可以产生抗性，从而影响其对害虫的防治效果和应用价值。通过制订合理的抗性治理策略可以使害虫对转Bt基因植物的抗性得到延缓和克服，在论述了转Bt基因抗虫植物的研究和应用现状的基础上，从IPM理论和生态学角度，就害虫对转Bt基因植物的抗性治理中的多毒素策略，高表达/低表达策略、避难区策略、特异性/诱导性表达策略以及其他可并用的防治手段进行了评价。     

苏云金杆菌H-14对致倦库蚊子_1代的影响

用14×10~3/ml的BtH-14菌液处理亲代第4龄致倦库蚊幼,观察其子_1代生命表特征。经与对照组比较,处理组蚊虫的净生殖率降低16.49％,雌蚊年均产卵量减少33％,世代周期延长约9天。     

CT—43乳剂防治几种蔬菜害虫的应用效果初报

应用CT—43双毒乳剂防治小菜蛾,菜青虫和豆荚螟有较好的防治效果。以500倍稀释液防治菜青虫的平均防效为93.9％,防治小菜蛾的平均防效为84.8％,防治豆荚螟的平均防效为83.2％,对棉铃虫的防治效果为86.5％。防治效果受虫龄和气温的影响较大。CT—43双毒乳剂对斜纹夜蛾高龄幼虫防治效果欠佳。