鲜猪肉小肠结肠炎耶尔森氏菌的分离鉴定

对重庆市２１５份鲜猪肉污染小肠结肠炎耶尔森氏菌分离鉴定和增菌、分离培养基选择结果表明，猪肉中小肠结肠炎耶氏菌污染率为２．７９％，６株分离菌均为生物３型。其中，５株属０∶３血清型，１株为０∶６．３０血清型。在２５℃时，用１．５％去氧胆酸钠增菌效果显著。分离培养基以ＳＳ，ＭＴ，ＳＳ－Ｄ和ＳＳ－Ｍ琼脂培养基较好。     

仔猪小肠黏膜上皮细胞体外分离培养及鉴定

 【目的】阐明产肠毒素大肠杆菌F18（ETEC F18）引发仔猪腹泻的机理,针对其候选基因FUT1 的CDS区第307位点处的突变（G→A）,建立3个仔猪小肠黏膜上皮细胞系（GG、GA和AA）。【方法】首先以胎鼠和仔猪为试验材料,确定小肠上皮细胞的最佳分离方法。采用XI型胶原酶和I型中性蛋白酶的联酶混合液,将胎鼠小肠组织机械剪碎后用联酶进行消化和直接将联酶灌注到仔猪小肠腔内消化的两种方法进行比较。针对仔猪小肠黏膜上皮细胞体外培养过程中成纤维细胞污染难以消除的问题,本研究采用局部画圈法逐步去除成纤维细胞。最后,用电镜和CK18免疫荧光染色对纯化后的原代仔猪小肠黏膜上皮细胞进行鉴定。【结果】两种小肠上皮细胞分离效率对比表明,后一种消化方式更为有效。进而取出生12 h内未吃初乳的大白仔猪,剖腹剪取其小肠段,使用联酶混合液灌注消化分离得到形态完整、容易贴壁生长的小肠绒毛细胞团。电镜和CK18免疫荧光染色结果均显示,小肠黏膜上皮细胞纯度达90%以上。经纯化处理,最后获得了FUT1基因型为GG和GA的两种小肠黏膜上皮细胞。仔猪原代小肠黏膜上皮细胞培养周期显示,7代前细胞生长状况良好,形态为典型的上皮细胞样,单层细胞呈铺路石排列,培养至第9代,细胞出现生长停滞、胞体空泡化等现象。【结论】最终获得了FUT1基因型为GG和GA的仔猪原代小肠黏膜上皮细胞。建立了仔猪小肠黏膜上皮细胞分离及培养方法,为后续的细胞建系工作奠定了良好的基础。     

动物微生态制剂鸡肠源乳球菌的分离与鉴定

试验的茵种是从宁夏固原山区完全自然生长的土种健康产蛋母鸡的大肠和盲肠中分离获得的,共分离出44株菌株.通过对这44株菌株的菌落形态观察和革兰氏染色镜检,筛选出12株进行了乳球菌属的生理生化鉴定,初步确定12株菌株属于乳球菌属(Lactococcus).通过糖醇类发酵产酸鉴定,确定8株为植物乳球菌(L.plantarum),4株为棉籽糖乳球茵(L.raffinolactis).各项鉴定结果均符合乳球菌属和相应种鉴定标准.     

内蒙古地区鸡源霉形体的分离和鉴定

本实验对内蒙古呼和浩特和包头地区某些鸡场病鸡取样进行霉形体的分离及其生物学特怀的研究。结果分离到３株霉形体,其中２株为鸡败血霉形体。所鉴定的菌株符合相应菌种的形态,染色特性及其他生物学特性的标准。     

鸡魏氏梭菌的分离和鉴定

为了研究鸡魏氏梭菌的生物学特性及其发病机制,从河南某鸡场临床症状、剖检病变疑似鸡魏氏梭菌病例进行细菌分离,从中分离到1株细菌。对分离的病菌进行形态培养、生化试验、动物试验等鉴定,鉴定为鸡魏氏梭菌。药敏实验表明鸡魏氏梭菌对青霉素、庆大霉素敏感性较高。     

鸡肠道枯草芽孢杆菌的分离鉴定及生物特性研究

为研究和开发动物新型微生态制剂,最大程度的提高经济效益,改变抗生素滥用、药物残留等现状,从健康鸡肠道中分离出1株芽孢杆菌,并命名为W,且对其进行形态观察、生化试验鉴定和16S rRNA序列分析及同源性比较。结果表明,本菌株与Bacillus subtilis strain CICC 10023(GU980947.1)的同源性达99.5%,最终确定该菌株为枯草芽孢杆菌,对该菌株进行药敏试验和安全性试验。结果表明,该菌对青霉素、杆菌肽耐药,对小鼠无致病性。     

农业微生物制剂的活性菌分离与鉴定

微生物制剂是以自然界中分离的有益菌为主体开发的产品,在健康、环保及农业生产上应用广泛。某农业微生物制剂在海南的热带农业生产中能显著增产和增强作物抗性,为了了解该微生物制剂的作用机制,本研究采用平板划线法对活性菌进行分离和纯化,对分离菌株进行生长、形态及显微观察,对16S rDNA进行序列PCR扩增、测序及生物信息学分析,鉴定活性菌的种属。结果表明,分离得到2个形态不同的细菌菌株,通过形态观察及16S rDNA序列的分子鉴定,发现这2个菌株与枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)具有99.9%的同源性;2个菌株的16S rDNA序列的比较结果发现它们有7个碱基的差别,说明这2个菌株可能是不同的生理小种。     

鸡传染性法氏囊病毒田间株的分离和鉴定

山东某鸡场送检的40日龄发病鸡法氏囊经处理,离心取上清液,以绒毛尿囊膜途径接种10日龄SPF鸡胚,分离到一株病毒株.该毒株能使鸡胚于接种后72～84h内死亡,经琼脂扩散、血凝试验及动物回归试验,排除其他病原混合感染的可能,鉴定该分离毒株为鸡传染性法氏囊病毒(IBDV).     

鸡死胚中绿脓杆菌的分离和鉴定

绿脓杆菌(Pseudomonas aeruginosa),也称铜绿假单胞杆菌,广泛分布在土壤、空气和水中,在正常人与动物肠道和皮肤上亦有存在.该实验旨在分离和鉴定沈阳新城子区某鸡厂鸡群中的绿脓杆菌.通过该实验证明分离得到的绿脓杆菌为致病性绿脓杆菌.由药物敏感实验的该菌对新霉素、诺氟沙星高度敏感;对卡那霉素、洛美沙星、阿米卡星、链霉素中度敏感;对头孢塞肟、氨苄青霉素、四环素、氨苄西林、青霉素、痢特灵耐药不敏感.     

一株氯氰菊酯降解菌的分离和鉴定

从氯氰菊酯污染土壤中,分离到一株氯氰菊酯的降解菌,命名为HF12-8.根据形态、生理生化和16S rDNA聚类分析、Biolog GN测试等,将该菌株初步鉴定为铜绿假单胞菌.HF12-8能够以氯氰菊酯或联苯菊酯为唯一碳源生长,5 d内对20 mg·L-1的氯氰菊酯和联苯菊酯降解率分别为93.03%和58%.     

一株氯氰菊酯降解菌的分离和鉴定

从氯氰菊酯污染土壤中,分离到一株氯氰菊酯的降解菌,命名为HF12-8.根据形态、生理生化和16S rDNA聚类分析、Biolog GN测试等,将该菌株初步鉴定为铜绿假单胞菌.HF12-8能够以氯氰菊酯或联苯菊酯为唯一碳源生长,5 d内对20 mg·L-1的氯氰菊酯和联苯菊酯降解率分别为93.03%和58%.     

动物微生态制剂菌种的分离与鉴定--鸡肠源乳杆菌的分离与鉴定

试验的菌种是从宁夏固原山区完全自然生长的土种健康产蛋母鸡的大肠和盲肠中分离获得的,共分离出51株菌株．通过对这51株菌株的菌落形态的观察和革兰氏染色镜检．筛选出11株进行了乳杆菌属的生理生化鉴定,初步确定为乳杆菌(Lactobacillus)．再通过糖醇类发酵产酸鉴定,确定6株为类布氏乳杆菌(L．parabuchneri),4株为短乳杆菌(L.brevis),1株为戊糖乳杆菌(L．pentosus)．各项鉴定结果均符合乳杆菌属和种的鉴定标准．     

苎麻脱胶共生菌群RAMCD407中两株优势菌的分离、鉴定和脱胶能力分析

为了从苎麻脱胶共生菌群RAMCD407中分离高效脱胶菌种,利用苎麻发酵物培养基分离筛选高效脱胶菌株;形态、生化结合16S rDNA分子方法鉴定菌株;水解圈法结合酶活力测定验证入选菌株产酶能力;苎麻脱胶试验核实入选菌株脱胶能力;分离出K30和L11两个菌株。K30和L11都能在果胶和木聚糖平板上形成水解圈,K30的果胶酶和木聚糖酶活力分别为238.47 U/mL和 98.36 U/mL,L11的果胶酶和木聚糖酶活力分别为 170.79 U/mL和 64.11 U/mL;K30和L11进行苎麻生物脱胶时,能使纤维残胶率由32.3％下降为1243％和15.70％, 纤维强力均超过5.5 cN/dtex。VITEK系统生化鉴定和16S rDNA序列分析都一致表明,K30与枯草芽孢杆菌Bacillus subtilis相似性高达99％,L11与蜡样芽胞杆菌Bacillus cereus相似性达到99%。     

双歧杆菌的分离鉴定及活菌胶囊的研制

从母乳哺育的３－５月龄健康婴儿的粪便中分离到可颖双歧杆菌，通过驯化，获得一株较耐氧的菌株。经属和种的系统生理生化鉴定。确认为两叉双歧杆菌。将它制成活菌胶囊，在本校小范围服用结果表明，该菌对急慢性肠炎、腹泻、便秘等症有显著疗效。     

鸡传染性喉气管炎病毒的分离鉴定

[目的]证实江都市存在鸡传染性喉气管炎。[方法]以江都市5只发病鸡的喉、气管粘膜及其分泌物为病料,采用鸡胚传代的方法从中分离出1株病毒（ILTV—JD07）,对分离毒株进行了理化特性检验、毒价测定、中和试验、琼脂免疫扩散试验、PCR扩增及电泳检测等。[结果]鸡胚接种病料后48h胚体活性减弱,3—8d内死亡6枚,解剖死胚可见其绒毛尿囊膜（CAM）增厚,取病变CAM传至第4代接种鸡胚,鸡胚集中于接种后3—5d内死亡;第4代分离毒的毒价基本稳定在10^5.77EID50／0．2ml,分离毒毒株可被鸡传染性喉气管炎（ILT）标准阳性血清中和,中和价为1：54;参考株ILT／13与分离株ILTV-JD07均可扩增出1条183bp的DNA条带。[结论]江都市存在鸡传染性喉气管炎。     

鸡传染性支气管炎病毒的分离鉴定

从江西省一以产蛋下降、呼吸道症状为特征的蛋鸡群中分离到一株病毒，经血凝试验、干扰NDV、鸡胚发育试验等，证实该分离毒株为鸡传染性支气管炎病毒。     

亮盖鸡(土从)菌的分离和鉴定

作者在福州郊区发现一种鸡(土从)菌,经鉴定为亮盖鸡(土从)菌 Termitomyces fuliginosus(Berk)Heim。对其形态特征进行了描述。该菌较难分离。在蚕豆等特殊培养基上,菌丝体生长良好,可形成大量分生孢子。试验证明小白球菌是鸡(土从)菌生活史中的一个阶段。     

鸡传染性腺胃炎病原分离和初步鉴定

从１９９７年在浙江省建德市发生的一种新的以腺胃肿大为特症的鸡传染病病例中收集的腺胃组织（ＺＪ９７１）为鸡胚接种材料,感染鸡胚第１代可达３３．３％的死亡率,长３代达７５％的死亡率并出现规律性死亡,自第６代开始死亡率达１００％,鸡胚尿囊液经１％胰酶处理后可凝集鸡和刀的红细胞,电镜观察可见直径９０￣１９０ｎｍ的带囊膜和突起的冠状病毒粒子,中和试验结果显示低滴度的ＺＪ９７１可被ＩＢＶ－Ｈ５２和Ｔ株血清中和     

鸡有益乳杆菌的分离鉴定

用乳杆菌选择培养基（ＬＳＣＭ）从鸡直肠内容物中分离出五株革兰氏阳性杆菌,分别是嗜酸乳杆菌２株（ＬＢ１、ＬＢ２）、唾液乳杆菌液亚种１株（ＬＢ３）、短乳杆菌１株（ＬＢ４）、发酵乳杆菌１株（ＬＢ５）。五株菌对雏鸡安全,对小白鼠无致病性。