大黄鱼（♀）与黄姑鱼（♂）人工杂交子代的胚胎发育

2008年10月,在福建宁德水产技术推广站进行了大黄鱼（Pseudosciaena crocea,♀）×黄姑鱼（Nibea alb-iflora,♂）杂交,观察了杂交子代胚胎发育。大黄鱼和黄姑鱼亲鱼平均体质量和体长分别为405 g、27.9 cm和390g、24.8cm,采用干法人工授精。受精卵浮性,为单油球端黄卵,卵径1060～1500μm,油球379.8μm左右。在水温25.8～26.2℃,盐度26的条件下,经18h55min半数受精卵破膜,胚胎发育分为卵裂期、囊胚期、原肠期、肌节出现期、心跳期、肌肉效应期、出膜前期和出膜期,初孵仔鱼全长2.75～2.98mm,受精率约为14.4%,孵化率约为31.9%,畸形率约为30%。共培育杂交初孵仔鱼5万尾。3日龄仔鱼开口摄食轮虫,7日龄开始摄食小型挠足类。     

鮸鱼（Miichthys miiuy♀）与大黄鱼（Larimichthys crocea♂）杂交子代的胚胎发育

以鮸鱼（Miichthy s miiuy）为母本、大黄鱼为父本（Larimichthys crocea）的人工杂交试验结果表明：在水温25.4±0.4℃、盐度为28和pH为7.99的环境中,杂交鱼卵的胚胎发育过程需21h54min,刚孵出的仔鱼全长2.18mm。3d时,杂交仔鱼开口,口径为0.288±0.067mm。     

大黄鱼（♀）与鮸（♂）杂交的遗传分析

用大黄鱼（♀）和鮸（♂）进行属间杂交,获得了56.25%的受精率,45.24%的孵化率和0.65%的鱼苗成活率。对杂交亲本与子代进行了微卫星和AFLP标记的比较分析,结果表明：4个微卫星位点（LYC0003,LYC0006,LYC0007,LYC0008）都可扩增出清晰的亲本差异条带,26个F1个体中均未出现雄鱼特有条带;4 对选择性扩增引物（E-ACC/M-CAG, E-AAC/M-CAT, E-AAC/M-CTA, E-AGC/M-CTC）共检出326个AFLP条带,143条母本特异性条带中有132 条出现在子代中,94 条父本特异性条带中只有18 条出现在子代中,子代中另出现了33 条非亲条带。F1个体之间的遗传相似系数为0.891,与母本、父本间的遗传相似系数分别为0.853、0.271;F1个体之间的遗传距离为0.116,与母本、父本间的遗传距离分别为0.159、1.307,表明杂交子代与母本大黄鱼之间具有极高的遗传同质性,属异精雌核发育个体。     

大黄鱼♀与黄姑鱼♂杂交F1家系初孵仔鱼的AFLP分析

为了评估大黄鱼♀与黄姑鱼♂杂交F₁在良种培育与遗传学研究中的应用潜力,利用AFLP标记研究了双亲基因在2个杂交F₁家系(HF1和HF2)初孵仔鱼中的传递和分离方式。8对AFLP选择性扩增引物在两对亲本中分别检出478和446个片段。在HF1中,检出片段包括215条母本特异条带(FSB)、165条父本特异条带(MSB)和98条双亲共有条带(MuB),其中,121条(56.3%)FSB、115条(69.7%)MSB和93条(94.9%)MuB传递给了全部后代,其余片段在后代中发生分离。FSB和MSB分离位点的平均显性表型频率之间没有显著性差异。AFLP标记在HF2的传递与分离和HF1相似,只是分离位点的比例较HF1低,而且检出了2个非亲位点。此外,在HF1和HF2中都出现了较高比例的偏离孟德尔定律的分离位点。这些结果表明,大黄鱼♀×黄姑鱼♂杂交F₁初孵仔鱼中同时含有来自双亲的基因;虽然计算结果显示杂交F₁在遗传上略偏向于母本,但是父源基因和母源基因没有明显的选择性丢失;母本特异位点多态比例与大黄鱼种内杂交F₁相当。研究结果为大黄鱼♀×黄姑鱼♂杂交F₁的开发与管理提供了科学依据。     

大黄鱼(♀)与鮸状黄姑鱼(♂)杂交及其子代的遗传分析

为了探讨大黄鱼(♀)与鮸状黄姑鱼(♂)远缘杂交的可行性,构建了2个杂交家系(LN1和LN2),检测了杂交F1的倍性,并利用10个微卫星标记对杂交亲本及F1进行遗传分析。结果表明,大黄鱼(♀)与鮸状黄姑鱼(♂)可以成功杂交产生形态正常后代,45日龄成活率达到30%,但杂交受精率(29.0%、32.6%)与孵化率(75.0%、76.7%)要显著低于大黄鱼自繁(P<0.05)。杂交幼鱼体型修长,头为尖钝型,体侧布满黑褐色斑点;DNA相对含量测定和微卫星标记分析结果显示,90%以上杂交后代是杂交二倍体,另外有少量的杂交三倍体和雌核发育二倍体;杂交幼鱼形态兼具有双亲的特征,与大黄鱼明显不同;至45日龄为止,杂交二倍体和三倍体生长速度均慢于大黄鱼。研究结果为大黄鱼(♀)和鮸状黄姑鱼(♂)杂交F1的开发利用及管理提供了参考依据。     

牙鲆（♀）×圆斑星鲽（♂）杂交子代的胚胎及仔鱼发育

以牙鲆(Paralichthys olivaceus)为母本,圆斑星鲽(Verasper variegatus)为父本进行科间远缘杂交,观察和记录了杂交受精卵胚胎及胚后仔鱼的发育情况,描述了各时期的形态特征。杂交受精卵为浮性卵,其受精率和孵化率分别为(71.18±0.14)%和(61.65±0.19)%,胚胎发育的畸形率为(17.00±0.06)%,4日龄仔鱼出苗率为(58.63±0.19)%,35日龄仔鱼的成活率为(57.08±0.20)%。在水温为(15±0.5)℃、海水盐度为29~30的条件下,受精卵经74 h孵化。孵化后4 d开口摄食,17 d开始变态,35 d完成变态。变态时,37%的仔鱼向右偏转,63%的仔鱼向左偏转。结果表明,牙鲆和星鲽杂交不存在配子不亲和,受精卵可以正常发育,杂交子代可以正常成活和生长。本研究旨为下一步杂交育种奠定基础。     

泥蚶（♀）×毛蚶（♂）受精及胚胎发育过程的初步研究

以泥蚶为母本、毛蚶为父本,运用同步催产法,同时收集泥蚶的卵和毛蚶的精子进行人工杂交,采用普通光镜和荧光显微镜,对泥蚶(♀)×毛蚶(♂)受精及胚胎发育的细胞学过程进行了连续观察。结果显示,毛蚶的精子可以附着并穿过泥蚶的卵膜进行受精,并激活卵子减数分裂使其释放第一极体(PB1)和第二极体(PB2),能够形成雌、雄原核并发生原核联合,接着受精卵开始进行卵裂;杂交受精率统计为60.2%,发育速度较自交组慢;杂交胚胎发育前两次卵裂发育基本正常,后期才出现明显畸形;囊胚期持续时间很长,只能发育到担轮幼虫期,且纤毛越来越长,最后全部死亡。另外,在实验中发现有多精入卵和多极分离现象。     

盐度对云纹石斑鱼（♀）×七带石斑鱼（♂）杂交子一代胚胎发育和仔鱼 活力的影响

观察了在9个盐度梯度（5、10、15、20、25、30、35、40、45）下云纹石斑鱼（♀）×七带石斑鱼（♂）杂交子一代受精卵和初孵仔鱼在水中的分布状态;对不同盐度条件下其胚胎发育周期、孵化率和畸形率进行比较;并对其初孵仔鱼进行了耐饥饿试验,测定其生存活力指数（Survival activity index,SAI）.结果表明,其受精卵孵化的适宜盐度范围是25～40,最适盐度范围为30～35,盐度低于30时,盐度越低,孵化率越低,畸形率越高;盐度高于35时,盐度越高,孵化率越低,畸形率越高;仔鱼的最适生存盐度范围为30～35,此盐度下的SAI值分别为33.3±0.8和24.1±0.2,盐度低于30时,盐度越低,仔鱼的存活率及SAI值越低;盐度高于35时,盐度越高,仔鱼的存活率及SAI值越低.     

草鱼（♂）×青鱼（♀）人工杂交初步试验

我场为了促进鱼业生产的发展,适应广大群众的需要,于今年6月13日将青鱼作母本,草鱼作父本进行人工杂交。青鱼8龄,体重13公斤,草鱼10龄,体重11公斤,催产时间是6月13日下午七点进行注射,注射时水温27℃,青鱼注2市斤左右的草、鲢里体10个,激素2500单位;草鱼注激素7500单位、垂体5个。两条鱼共放一个产卵池,到14日上午七时,测定水温为25℃,仔细观察,注射后7——9时无动情,到10时后,发现底层翻水,但不见追逐现     

草鱼（♀）×鲤鱼（♂）人工杂交试验的初步总结

遵照伟大领袖毛主席“人类总得不断地总结经验,有所发现,有所发明、有所创造、有所前进”的教导,我场在搞好家鱼人工繁殖的同时,从一九七二年以来,结合生产开展了鱼类杂交育种工作,进行了草鱼和鲤鱼的人工杂交试验。设想草鱼是一种很好的养殖对象,它的饲料来源广:具有生长快,肉味鲜美等优点,是我县群众所喜欢的主要养殖鱼类。但它的弱点是多病,尤其是当年的春片鱼种更为严重。近年     

盐度对Mian状黄姑鱼（Nibea miichthioides）胚胎发育和仔鱼成活的影响

本研究采用不同盐度的海水对Ｍｉａｎ状黄姑鱼受精卵的沉浮性，胚胎发育的孵化时间，孵化率，仔鱼的分布状态和成活率的影响进行研究。结果表明，Ｍｉａｎ状黄姑鱼受精卵在盐度２６．９‰以下的海水呈沉性，在盐度４０．７‰以上的海水呈乳性，盐度２６．９‰－４０．７‰则由沉性向浮性过渡。Ｍｉａｎ状黄姑鱼受精卵在盐度１３．７‰－５３．０‰均可孵化，但孵化适合盐度为２６．９‰－４０．７‰。     

施氏鲟Acipenser schrenckii ♀×西伯利亚鲟A.baeri ♂杂交子代胚胎发育的观察

对施氏鲟Acipenser schrenckii♀×西伯利亚鲟A.baeri♂进行人工繁殖,观察杂交子代的胚胎发育过程。结果表明,在水温15~22℃时,杂交鲟胚胎发育历时141~151 h,所需总积温为2 608.5~2 793.5℃·h。施氏鲟成熟卵为多黄卵,卵裂呈特殊的辐射裂,受精后胚盘隆起不明显。根据对施氏鲟♀×西伯利亚鲟♂杂交子代胚胎发育外部形态及典型特征的观察,将胚胎发育分为受精卵、卵裂期、囊胚期、原肠胚期、大小卵黄栓塞期、神经胚期、眼囊形成期、心脏形成博动期和孵出期9个时期。     

草（♂）鳙（♀）杂交的初步试验

我们为了扩大养殖品种,提高单位面积产量,为人类多作贡献、今年我场进行了草鳙鱼杂交试验,初步获得了成功。由于我们的水平关系,很多问题还没有得到解决,有待今后继续探讨,现仅就我们的初步试验过程和点滴体会来谈如下几个方面的看法：     

温度、盐度对褐牙鲆（♀）×犬齿牙鲆（♂）杂交子一代胚胎发育和仔鱼存活的影响

探讨了温度、盐度对褐牙鲆（♀）×犬齿牙鲆（♂）杂交子一代（杂交F1）胚胎和初孵仔鱼发育的影响。结果表明，杂交F1受精卵孵化适宜温度范围和最适温度分别为15～21℃和18℃，在适宜温度范围内胚胎发育时间随温度的升高而缩短，二者符合乘幂函数关系式N=115．99T^-0.768.8（R^2=0．9769）。胚胎发育的生物学零度和有效积温分别是7．54℃和540．1℃·h，积算温度（A）与试验水温间呈乘幂函数相关，表达式：A=1328．1T^-0.3149。（R^2=0．9624）。胚胎发育的最低盐度界限为10，孵化的适宜盐度范围和最适盐度范围分别为10～45、25～35；初孵仔鱼生存发育的适宜盐度范围、最适盐唐范围分别为10～40和10～20。     

稀土元素铈对大黄鱼胚胎发育的影响

试验结果表明:稀土元素铈的质量浓度为1.1～1.4 mg/L,最适宜大黄鱼孵化.铈质量浓度为1.1 mg/L时发育时间最短,为24.30 h;铈质量浓度为1.4 mg/L时,孵化率最高,平均达86.08%,比对照组提高18.60%.     

大黄鱼与黄姑鱼异源三倍体的诱导和微卫星分析

参照大黄鱼雌核发育诱导程序,应用冷休克抑制大黄鱼(♀)与黄姑鱼(♂)杂交受精卵的第二极体排出,培育了两个异源三倍体家系(PPN1和PPN2)。异源三倍体家系的受精率、孵化率略低于大黄鱼自繁二倍体对照家系(PP),而初孵仔鱼畸形率略高于PP家系。倍性分析显示,异源三倍体家系初孵仔鱼细胞DNA含量约为大黄鱼自繁对照家系的初孵仔鱼细胞DNA含量的1.46倍,且三倍体率达到100%。5个微卫星标记分析结果表明,父本杂合基因在异源三倍体中分离,后代分别得到父本两个等位基因中的一个,分离比符合孟德尔式遗传预期;由于基因的第二次分离被阻断,母本基因在异源三倍体中的传递表现出半四分子的特点,其中部分个体同时保留了母本两个等位基因,表现为杂合基因型。综合倍性分析和微卫星分析结果可以判断,异源三倍体家系成员为含有2个大黄鱼基因组和1个黄姑鱼基因组的异源三倍体。可见,大黄鱼减数分裂雌核发育或三倍体诱导程序中用于抑制第二极体排放的条件,同样适用于诱导异源三倍体。然而,PPN1和PPN2的仔鱼在15日龄后出现生长停滞,陆续死亡,没有个体存活超过1个月,表明母本染色体加倍不能有效提高杂种成活率,但异源三倍体仔鱼可作为遗传作图、基因组比较...     

苏氏圆腹（♂）与南方大口鲶（♀）杂交种的胚胎学观察

在（26＋1）℃水温条件下以苏氏圆腹为父本,南方大口鲶为母本采用干法授精进行杂交,用双筒显微镜对其子一代的胚胎发育过程续跟综观察。结果显示：两者杂交受精率80%,胚胎畸形率72%,孵化率22.4%,整个胚胎发育历时26h35min,其发育过程与其父本、母本基本一致。杂交种既有父本的特征,又有母本的特征,说明绝非单性生殖。     

岱衢洋和官井洋大黄鱼自交与杂交子代生长性能及杂交优势分析

2007年3月至2008年8月对象山港海区网箱养殖的岱衢洋、官井洋大黄鱼自交以及正反向杂交子代进行生长特性观察。结果表明:整个实验过程(0~526 d),官井洋大黄鱼自交子代(GG)和反交子代(GD)(官井洋♀×岱衢洋♂)大黄鱼较岱衢洋自交子代(DD)和正交子代(DG)(岱衢洋♀×官井洋♂)大黄鱼生长快,到526 d实验结束时,GG和GD体重分别达到330.514 g和336.694 g,而DD和DG则仅为278.975 g和243.297 g。对其各阶段生长速度分析,发现虽然一龄DD生长较慢,但过冬后DD生长明显加快,体长增长速度超过其他各群子代,体重增长也达到GG和GD增长水平,即有后期增长潜能。对比各群子代肥满度发现,526 d时,DD肥满度最低(1.675),GD肥满度(1.779)虽高于DD,但显著小于GG(1.933)。鉴于GD生长速度高于DD,与GG相当,而体型又优于GG,认为GD具有较大的经济养殖和优良品种选育的潜力。拟合各阶段体长体重数据,得出各群体生长曲线公式如下,DD:W=0.0206L^2.9427, R²=0.9949;GG:W=0.0139L^3.0994,R²=0.9785;DG:W=0.0229L^2.9136,R²=0.9905;GD:W=0.0177L^3.0079,R²=0.9949,拟合度较好,可通过体长估算体重,应用于实际生产。     

舟山近海黄姑鱼胚胎发育及前期仔鱼形态的观察

通过对黄姑鱼胚胎发育全过程的连续观察,描述了黄姑鱼胚胎发育的特征、发育速度及前期仔鱼的形态特征等。观察结果表明,黄姑鱼的胚胎发育与其它硬骨鱼浮性卵鱼类基本相似,属端黄卵,盘状分裂。在水温22.0~22.5℃、盐度26.5的条件下,黄姑鱼受精卵经24h15m in孵出仔鱼。初孵仔鱼全长1.75±0.09mm,孵出后约50h,卵黄囊完全被吸收。     

杂交鲶（怀头鲶♀×鲶鱼♂）人工驯养饲料试验研究

试验用杂交鲶鱼苗是以捕自黑龙江水域怀头鲶为母本，鲶鱼为父本进行正交获得的杂交一代。用人工饲料在水族箱、水槽中进行仔鱼开口驯养、集约化育苗试验，分别获得开食6天72%驯化率和强化培育13天52%成活率；同时初步形成人工驯养饲料配制技术和驯化投喂技术。