4种石斛的多糖对高血压大鼠降血压的影响

以铁皮石斛、金钗石斛、大苞鞘石斛和春石斛品种(Dendrobium Second Love‘Tokimeki’)为试材,研究4种石斛茎段的不同纯度多糖(粗多糖CDPs、精多糖DPPs和纯化多糖水洗组分DPPs-I)对自发性高血压大鼠(SHR)体内降血压效果的影响。结果表明,4种石斛的不同纯度多糖均对SHR具有降血压的效果,且处理时间越长效果越显著,处理240 min后均显著优于阳性对照硝苯地平。金钗石斛多糖水洗组分(DNPP-I)在240 min内降血压效果好于其对应的粗多糖和精多糖,而铁皮石斛、大苞鞘石斛和春石斛品种D.Second Love‘Tokimeki’的各多糖间降血压效果差异不显著。4种石斛DPPs-I间降血压作用无显著差异。本研究显示石斛多糖具有一定的降血压活性,其中纯化多糖水洗组分DPPs-I具有较好的降血压效果,药用开发前景良好。     

春石斛杂交种多糖及生物碱含量比较研究

采用改良的苯酚-硫酸法和酸性染料比色法测定了野生金钗石斛(Dendrobium nobile Lindl.)、组培金钗石斛(由种子无菌萌发、快繁,并移栽成活的成熟植株)和4种春石斛杂交种(Nobile-type Dendrobium)的多糖和生物碱含量,通过与野生金钗石斛对比,以期为春石斛杂交种的药用开发提供依据和参考.结果表明:9月和12月份,‘Red Cat1’(10109)和‘Pink Star’(2810)两种石斛杂交种在茎多糖含量方面与野生金钗石斛无显著差异;不同器官多糖含量呈现茎＞叶＞花＞根;茎段总生物碱含量方面,组培金钗石斛优于野生金钗石斛;野生金钗石斛明显优于春石斛杂交种,呈现组培金钗石斛＞野生金钗石斛＞10109＞‘Little Bee’(10213)＞‘Red Cat2’(9101)＞2810,其中10109的总生物碱含量显著高于其它3种杂交种,且达到野生金钗石斛的50％左右.     

6种叶面肥对海南林下栽培金钗石斛生长和品质的影响

为筛选适宜的叶面肥种类,促进金钗石斛生长和提高其品质,以海南林下栽培的金钗石斛为试材,采用喷雾处理的方式,研究3种化学叶面肥和3种有机叶面肥对金钗石斛生长和品质的影响。结果表明：所有施肥处理均增加了金钗石斛的分蘖数、叶片数、茎节数、茎粗和株高,不同程度提高了金钗石斛的鲜重、干重、干鲜比和叶绿素含量,同时也提高了金钗石斛多糖和总生物碱含量,因此喷施叶面肥有利于促进金钗石斛生长和改善金钗石斛品质。3种化学肥料中,沃生促进金钗石斛生长和改善金钗石斛品质的性能优于磷酸二氢钾,其次是碧护;与对照相比,沃生显著提高了金钗石斛的茎粗、鲜重、干重、叶片SPAD值、多糖和石斛总生物碱含量,增长率分别达到21.87%、35.68%、39.50%、7.96%、15.01%和9.89%。3种有机肥料中,黄腐酸钾促进金钗石斛生长和改善金钗石斛品质的性能优于杜高活力藻,其次是海岛素;与对照相比,黄腐酸钾显著提高了金钗石斛的茎粗、鲜重和干重,增长率分别达到20.68%、28.39%和34.50%。因此,沃生和黄腐酸钾对金钗石斛生长和品质改善明显,可以作为海南林下栽培金钗石斛的叶面肥。     

酶法修饰绿茶多糖对免疫低下模型小鼠免疫活性的影响

以糖苷酶溶液为工具酶,研究酶法修饰茶多糖对环磷酰胺抑制的免疫低下模型小鼠的免疫功能的影响。结果表明,原多糖TPS与改性后的茶多糖ETPS在免疫低下模型小鼠的细胞免疫功能、体液免疫功能、单核-巨噬细胞功能和NK细胞活性4个方面的实验中,结果均呈阳性,说明它们均具有明显的增强免疫功能的作用,酶法修饰改性能显著提高绿茶多糖的免疫活性。在同等剂量下,ETPS与TPS相比能提高脾指数、腹腔巨噬细胞吞噬率和吞噬指数,能显著提高DTH试验耳肿程度、血清HC50、NK细胞活性。绿茶多糖通过酶法修饰免疫活性得到增强。     

铁皮石斛与霍山石斛杂交后代性状分析

为选择杂交后代优良株系,对铁皮石斛（Dendrobium officinale）、霍山石斛（Dendrobium huoshanense）及其杂交F₁代株系的组培苗及栽培苗生长量、表型性状及多糖含量进行测定和分析。结果表明：各株系的组培生长量差异显著,变幅为0.15~0.69 g,超亲株系占75.00%,移栽生长量变幅为0.03~0.44 g,超亲株系占75.00%;组培苗8个表型性状表现为超亲,占总考察性状的88.89%;栽培苗4个表型性状表现为超亲,占总考察性状的44.44%,各株系多糖含量与亲本差异显著,7个株系的多糖含量表现为超亲,占总考察株系的87.50%。可见,利用铁皮石斛与霍山石斛杂交是改良石斛产量与品质的有效途径之一。     

海南与浙江产铁皮石斛主要营养成分分析比较

采用国标方法分别对海南产和浙江产铁皮石斛的主要营养成分（蛋白质及氨基酸、脂肪及脂肪酸、总多糖及矿质元素）的组成和含量进行测定。结果表明,海南产铁皮石斛中的粗脂肪、粗纤维、灰分、总多糖和水与浙江产铁皮石斛差异显著（p<0.05）,粗脂肪和粗蛋白含量与浙江产铁皮石斛则差异不显著（p>0.05）;两种铁皮石斛同时含有多种人体必需矿物质,其中以K、Mg、Ca和P的含量较高,尤其是K和Ca含量较高,不过,海南产铁皮石斛中微量元素的含量均要高于浙江产铁皮石斛。此外,两种铁皮石斛中不饱和脂肪酸含量均较高,但海南产铁皮石斛要比浙江产铁皮石斛更符合联合国粮农组织（FAO）提出的人类膳食中（ω-6）/（ω-3）的推荐值。两种铁皮石斛中必需氨基酸含量较高,两种铁皮石斛中的第一限制性氨基酸均为赖氨酸,且海南产铁皮石斛的必需氨基酸总量均要高于浙江产铁皮石斛。因此,海南产铁皮石斛具有较高的营养价值和良好的开发应用前景。     

不同光质条件下铁皮石斛多糖含量与磷酸烯醇式丙酮酸羧化酶基因表达变化

以铁皮石斛试管苗为材料,研究不同光质下铁皮石斛磷酸烯醇式丙酮酸羧化酶(PEPC)和多糖积累的差异。结果表明:红、蓝和绿3种光质下多糖含量、PEPC活性和PEPC基因表达量变化趋势基本一致,表现为红光蓝光绿光;在白光下则出现显著差异,呈现出基因表达量低、酶活性高、多糖含量高的特征,显示出光质对光合代谢调控的复杂性。     

金钗石斛扦插试验

选择金钗石斛不同株龄、不同部位的枝条进行扦插试验,测定新生苗的增殖及生长情况,结果表明：一年生插条扦插后生长情况要优于多年生插条,而采用一年生枝条下半部插条扦插,新生苗株高增长量和新增叶片数均优于上半部插条。     

膜过滤绿茶多糖的系统分级纯化及免疫活性分析

采用150kD、20kD、6kD的超滤膜和对水溶性茶多糖进行分级和浓缩,得到的三部分截留液分别经过DEAE-52纤维素离子交换层析和丙烯葡聚糖凝胶Sephacryl S-300柱层析系统分离、纯化,共得到了20多个分级组分;HPGPC-ELSD鉴定各多糖组分的纯度及分子量分布,结果表明得到5个均一多糖组分;用小鼠巨噬细胞系Raw264.7检测免疫活性,发现对小鼠巨噬细胞Raw264.7有显著活性的多糖组分大多集中在20kD左右,大多为不均一多糖。     

不同种源铁皮石斛生物学性状和糖类成分比较

为筛选出适宜在广西南宁地区种植的优良铁皮石斛种源,并为下一步筛选优良品系和遗传育种提供参考依据。以5种不同种源铁皮石斛为试验材料,在南宁地区引种栽培2 a后,观察其生物学性状,测定叶绿素和糖类含量。结果发现：不同种源地的铁皮石斛生物学性状、叶绿素和糖类含量均呈现出差异;云南河口铁皮石斛生物学性状表现良好,叶绿素含量中等,但多糖和甘露糖含量较低。浙江乐清种源株高最矮,叶面积最小,叶绿素含量最低,但多糖含量较高,甘露糖含量中等。广西桂平铁皮石斛茎较粗,叶片宽大,叶绿素含量、多糖含量中等,甘露糖含量最高。广西玉林和桂平铁皮石斛生物学性状相近,多糖含量最高,甘露糖含量较低;广西乐业铁皮石斛茎细,叶片狭长,叶绿素含量最高,多糖和甘露糖较高。说明广西桂平和广西乐业2个种源在南宁地区的适应性较好,品质较高,适宜推广种植。     

铁皮石斛新品种‘雁吹雪3号’多点比较试验

采用常规育种和生物快繁技术,经多年研究培育而成铁皮石斛新品种‘雁吹雪3号’。该品种生长势强、植株整齐、直立丛生,成龄苗平均株高25.5 cm,最高可达30 cm,平均茎粗0.6 cm。石斛多糖含量为57.5%,甘露糖含量32.6%,二者均高于对照。广东省多点多批测产结果显示,二年生植株年均每公顷产鲜茎6 165 kg。抗病性较强,耐热、耐寒性比对照增强,经广东省多点多批比较种植试验,综合性状遗传稳定。     

微波真空干燥对铁皮石斛品质特性影响的研究

本研究以新鲜铁皮石斛为原料,采用微波真空干燥方法干燥,通过测定铁皮石斛的多糖含量、色泽、多酚氧化酶（PPO）、水分分布状态、组成氨基酸以及多酚的DPPH?和?OH清除率,研究微波真空干燥对铁皮石斛品质特性的影响。结果表明：相比于新鲜样品,当微波强度为9 W/g,干燥后样品的多糖含量最高可达52.21%;氨基酸分析仪分析结果表明,微波真空干燥后铁皮石斛的总游离氨基酸和风味氨基酸含量显著提高。在微波强度9 、12 、15 W/g下,微波真空干燥的铁皮石斛的PPO活性分别在干燥16、12、6 min后不再存在,表明微波真空干燥能够在较短时间内钝化铁皮石斛的PPO活性,且微波强度越大时间越短。干燥过程的非酶促褐变主要由Maillard反应引起。低场核磁共振结果表明,自由水驰豫时间T₂₃和A₂₃均显著降低。自由基清除能力研究结果表明,铁皮石斛多酚仍具有较强的羟基自由基清除能力。通过观察干燥后样品的微观结构发现,随着微波功率密度的增大,样品孔状结构受到更严重破坏,微波强度越大,铁皮石斛的复水特性越好。     

云南鲜铁皮石斛及其不同加工品主要质量指标研究

目的测定并分析鲜铁皮石斛主要质量指标水分、浸出物、多糖和甘露糖含量,并比较与铁皮石斛不同加工品之间的差异。方法采集24批次云南省鲜铁皮石斛样品,参照2015版《中国药典》铁皮石斛质量标准,对鲜铁皮石斛多糖和甘露糖含量方法进行方法学验证,测定样品采收后7日内的水分、浸出物、多糖和甘露糖含量;并以鲜铁皮石斛为原料,比对高温烘烤卷曲制得铁皮枫斗、常压低温(45℃)鼓风烘干制得铁皮石斛片、真空冷冻干燥制得铁皮石斛粉三种不同加工品上述四个主要质量指标差异。结果鲜铁皮石斛水分平均含量为82%±3.8%,浸出物平均含量为7.7%±1.3%,多糖平均含量为41.1%±9.6%,甘露糖平均含量为31.5%±7.6%;三种不同加工品中常压低温鼓风烘干所得铁皮石斛片浸出物、多糖及甘露糖含量最高,而高温烘烤卷曲制得铁皮枫斗最低。结论鲜铁皮石斛多糖、甘露糖定量分析方法重复性好,可实现对鲜铁皮石斛进行质量控制的目的,其主要质量指标浸出物、多糖和甘露糖含量,符合《中国药典》铁皮石斛项下要求;常压低温加工方式有利于保持铁皮石斛主要质量指标值,但与铁皮石斛生物活性关系还有待进一步研究,。该研究可为铁皮石斛新产品开发提供参考依据。     

安吉白茶多糖抗肿瘤及免疫调节研究

选用MTT法研究了安吉白茶多糖的体外抗肿瘤活性;采用建立小鼠移植瘤模型,通过测定安吉白茶多糖对荷瘤小鼠抑瘤率和腹腔巨噬细胞吞噬能力,研究其体内抗肿瘤活性和免疫调节作用。结果表明,安吉白茶多糖体外能显著抑制S180细胞的生长,且具有剂量依赖关系。体内试验表明,与模型对照组相比,安吉白茶多糖对小鼠S180实体瘤和H22腹水型肝癌移植瘤的生长均有显著抑制作用(P<0.05),对荷瘤小鼠脾指数和胸腺指数也有较强增高作用。体内免疫调节试验结果显示,安吉白茶多糖可使荷S180实体瘤小鼠腹腔巨噬细胞吞噬能力显著升高(P<0.05)。     

石斛的氨基酸组成及分析

利用全自动氨基酸分析仪测定22种主要石斛栽培品种的氨基酸组成和含量,并应用多元统计分析方法对其品质进行分析。结果表明,石斛中以天冬氨酸、谷氨酸、亮氨酸、精氨酸4种氨基酸含量最丰富;蛋氨酸和胱氨酸分别为石斛的第1和第2限制性氨基酸。不同品种石斛的氨基酸含量和组成比例存在一定差异,其中,10种石斛含有17种氨基酸和7种必需氨基酸,11种石斛未检出蛋氨酸或胱氨酸。参照FAO/WHO推荐标准,氨基酸营养价值较高的是线叶石斛、紫瓣石斛、杓唇石斛、玫瑰石斛、紫菀石斛和叠鞘石斛6个品种;采用主成分分析方法和聚类分析,可将22种石斛氨基酸分为4类品质,以石斛氨基酸指标聚类可将22种石斛聚为3类。     

三七丹参片功能学实验研究

目的通过经口给予小鼠不同剂量三七丹参片实验,验证三七丹参片的增强免疫力功能,为临床使用提供依据。方法实验设低、中、高三个剂量组,分别相当于人体推荐摄入量的5、10、30倍,同时设阴性对照组(1%羧甲基纤维素钠),连续一个月经口给予小鼠不同剂量的受试物。结果与阴性对照组比较,三个剂量组小鼠血清溶血素抗体积数值均升高;中、高剂量组小鼠腹腔巨噬细胞吞噬鸡红细胞的吞噬率、吞噬指数均升高;以上差异均具有显著性意义(P<0.05,P<0.01)。结论三七丹参片具有增强免疫力功能。     

大苞鞘石斛与铁皮石斛主要活性成分比较分析

石斛（Dendrobium）是一类名贵中药材,活性成分的构成也直接影响着石斛属植物的药用价值。为了探明大苞鞘石斛（Dendrobium warkianum Warner.）的药用价值,比较了其与铁皮石斛（Dendrobium catenatum Lindl.）多糖、生物碱、氨基酸及微量元素含量的异同。结果表明,大苞鞘石斛多糖含量较高（p<0.001）;2种石斛生物碱含量都较低;2种石斛都含有所测的19种氨基酸（包含8种必需氨基酸）,大苞鞘石斛中的苯丙氨酸（0.111％）、氨基丁酸（0.152％）、天冬氨酸和天冬酰胺（0.115％）等含量较高,而铁皮石斛只有组氨酸（0.070％）较高;2种石斛都含有所测的8种微量元素,大苞鞘石斛镁元素（4.06×103 mg/kg）、锰元素（359.33 mg/kg）、铁（87.80 mg/kg）和硼（16.85 mg/kg）含量较高,而铁皮石斛锌含量（34.60 mg/kg）较高。以上研究结果对大苞鞘石斛的开发利用具有一定的参考价值。     

秋石斛‘三亚阳光’中苗低温胁迫生理响应研究及耐寒指标筛选

对秋石斛’三亚阳光’中苗进行15、10和5℃胁迫处理,测定各处理样品的电导率、可溶性蛋白、可溶性糖、游离脯氨酸、丙二醛、叶绿素含量、恢复生长之后的落叶率等耐寒生理指标,分析这些耐寒指标在胁迫下的变化规律,筛选出有效的耐寒评价生理指标。结果表明,电导率及可溶性蛋白、可溶性糖、游离脯氨酸、丙二醛含量和落叶率均随着处理温度的降低和处理时间的延长呈现上升趋势,而叶绿素含量则呈现逐渐下降的趋势。相关性分析发现,可溶性糖、游离脯氨酸、丙二醛、叶绿素含量和落叶率都与半致死温度有极显著的相关性,表明可溶性糖、游离脯氨酸、丙二醛、叶绿素含量和落叶率可作为秋石斛’三亚阳光’耐寒性综合评价的有效评价指标。研究结果可以为秋石斛种质资源的耐寒性评价提供了理论依据和技术方法。     

黄精铁皮石斛口服液的制备工艺研究

目的以黄精和铁皮石斛为原料,辅以甜菊糖苷、木糖醇为甜味剂,三七皂苷、蒸馏水,研究黄精铁皮石斛口服液的最佳制作工艺。方法在单因素实验的基础上,设计四因素三水平的正交试验对黄精铁皮石斛口服液的制作工艺进行探讨,以求得黄精铁皮石斛口服液的最佳研制配方。采用水提的方法制备黄精铁皮石斛口服液,通过测提取液中总多糖的含量作为考察指标,采用L(3)正交试验优化水提温度、水提时间、料液比和提取次数优选出黄精铁皮石斛口服液最佳提取工艺。结果黄精铁皮石斛口服液的最佳提取工艺为料液比1:20,60℃的温度,浸泡1h,提取1次。黄精铁皮石斛口服液中总多糖的含量为50g/L。结论验证试验表明优选出的提取工艺稳定、合理可充分提取黄精铁皮石斛口服液中的功能性成分。     

SDS法提取石斛基因组DNA的研究

以密花石斛(Dendrobium densiflorum Lindley ex Wallich)为研究试材,对植物SDS方法提取基因组DNA中的若干影响因子诸如药品、试剂配制方法、DNA取材部位、蛋白质去除次数、DNA析出时间、提取样品水浴时间等进行了比较分析。结果表明：不同的SDS缓冲液配制方法提取效果差异较大,Wang's配方产率及纯度都较高;石斛花苞的DNA提取产率较叶片高,但纯度较叶片低;提取过程中,适宜的水浴时间当为30～40 min,过短DNA产率下降,过长会引起DNA的降解,或最后产物中增加