鸽副黏病毒油乳剂灭活疫苗不同水油比的研究

为了减少鸽副黏病毒油乳剂灭活疫苗的副作用,保证疫苗的安全性及免疫效果,利用分离到的鸽Ⅰ型副黏病毒(S-1株)作为抗原,配制了不同水油比的疫苗,对疫苗的物理性状、安全性、效力试验及免疫效果进行观察,探究疫苗不同水油比的差异。结果表明:该疫苗的水油乳化比为1:4时,疫苗的稳定性最好、免疫效果最佳。     

不同乳化工艺对猪圆环病毒2型灭活疫苗稳定性的影响

为探讨乳化工艺中影响猪圆环病毒2型油包水剂型灭活疫苗的稳定性因素,以提升猪圆环病毒疫苗的质量,分别对圆环病毒抗原pH值、乳化剪切机转数、乳化时间进行筛选,并以疫苗黏度、粒径、保存温度评价疫苗稳定性。结果表明,抗原pH值为7.0~7.5时疫苗稳定性较好;剪切机转数越高,乳化时间越短,乳化效果越好,样品稳定性较高;在一定的时间内样品随乳化时间的延长,样品稳定性增强,但黏度不断增大。在本试验条件下,选择抗原pH值7.0~7.5,剪切机转数19 000r/min,乳化时间8min乳化的样品稳定性好,黏度合适,建议不同厂家在疫苗产业化生产时需调节抗原pH值至7.0~7.5,根据不同的乳化设备进行乳化试验摸索乳化剪机的转速及乳化时间,从而保证疫苗的稳定性。     

猪细小病毒病灭活疫苗佐剂筛选及配苗乳化工艺研究

为了筛选制备猪细小病毒病灭活疫苗(L株,悬浮培养)的佐剂,用注射用白油和法国赛比克公司生产的MontanideTMISA 206 VG佐剂(简称206佐剂)分别配制灭活疫苗,通过对两种疫苗的配苗乳化工艺、疫苗性状、无菌检验、安全检验、效力检验和免疫期等方面进行比较。结果显示:与注射用白油配制的疫苗相比,使用206佐剂配苗乳化工艺相对简单;制备疫苗剂型为水包油包水型,易注射,吸收良好;局部和全身均无不良反应,安全性良好;免疫后第7天猪细小病毒206佐剂疫苗免疫猪产生HI抗体效价显著高于白油佐剂疫苗,免疫后第60天猪细小病毒206佐剂疫苗免疫猪HI抗体效价达到峰值;免疫期为6个月。综上,确定206佐剂作为制备猪细小病毒病灭活疫苗的佐剂。     

不同佐剂的新城疫疫苗免疫效果的研究

为评价不同佐剂的新城疫(newcastle disease,ND)灭活疫苗对鸡的免疫效果,选用铝胶佐剂、国产油佐剂及进口油佐剂与新城疫病毒抗原混合制成疫苗,免疫雏鸡,探讨不同佐剂的疫苗对鸡的安全性、新城疫的HI抗体水平及攻毒保护率。结果表明,3种佐剂的疫苗注射部位无不良反应;28天时HI抗体分别为28.2、28.5和28.8;56天时HI抗体分别为27.4、28.8和29.2,攻毒后的保护率分别为90%、100%和100%,铝胶佐剂、国产油佐剂、进口油佐剂配制的新城疫灭活疫苗以及对照组攻毒后肛棉拭子NDV阳性率分别为10%、0、0及100%。用进口油佐剂配制的疫苗可刺激接种动物产生快速免疫应答反应,抗体产生的效价高、维持的时间长,其效果优于其它佐剂,有望成为ND灭活疫苗的候选佐剂。     

禽用油乳剂灭活苗乳化技术

探讨了环境温度，油水配比，胶体磨间隙，均质机压力配比，以及乳化时间对油乳剂灭活疫苗稳定性的影响。结果表明，在环境温度为１０℃，油水比３：１，胶体磨转速８０００ｒ／ｍｉｎ，间隙为１，乳化时间为５ｍｉｎ，均质机压力为２０＾＊１０时，可制备出稳定性很高的油乳剂灭活疫苗。     

鸡葡萄球菌灭活疫苗的研究

本项研究制出了三种鸡葡萄球菌灭活疫苗,即无佐剂灭活疫苗;油包水乳剂疫苗(以下简称单相油乳剂疫苗);油包水-水包油乳剂疫苗(以下简称双相油乳剂疫苗).用油乳剂疫苗对鸡免疫接种一次,能产生良好的免疫力;无佐剂灭活疫苗免疫接种三次,才能产生较好免疫力。单相油乳剂疫苗粘性较大,不易注射。三种类型的疫苗相比较,双相油乳剂疫苗优点较多,这种乳剂疫苗稳定,粘性很小,容易注射.免疫保护指数为88.6～94.2。20～25日龄雏鸡免疫接种一次能健康度过葡萄球菌病的严重危害时期。     

不同方法制备的佐剂对油乳剂疫苗稳定性的影响

利用A、B、C三种不同方法制备佐剂，并对其制备的油乳剂疫苗作室温、4℃冷藏和冷冻处理，结果表明疫苗的乳化效果及稳定性依次为A、B、C三组，二次乳化疫苗也符合上述规律，但疫苗的稳定性及保存期差于常规疫苗。     

盐酸咪唑苯脲W/O型乳剂的处方工艺筛选

旨在筛选盐酸咪唑苯脲W/O型乳剂的基础处方.采用单因素分析方法对油相、乳化剂的种类及用量、油水比例进行筛选以及采用正交试验对处方工艺进行优化;确定了盐酸咪唑苯脲W/O型乳剂的基础处方,最终筛选出白油为最佳油相、亲水性乳化剂OP-10为最佳乳化剂,初步确定白油、亲脂性乳化剂司盘-80、亲水性乳化剂OP-10为最佳处方组合,乳化剂的最佳用量为处方量的10%,油水最佳比例为7∶3.确定最佳乳化温度为50℃,最佳乳化时间为3 min,最佳乳化速度为8000 r/min.通过上述处方筛选及工艺优化,制备了2%的盐酸咪唑苯脲W/O型乳剂.     

禽法氏囊、腺病毒二联灭活疫苗的制备与检验

本试验在成功分离鉴定当地法氏囊、腺病毒流行株后,经过大量培养病毒,以白油为疫苗佐剂制备了法氏囊、腺病毒二联油乳剂灭活疫苗,并对制备疫苗的质量和临床效果进行初步研究,为我国进行法氏囊、腺病毒二联疫苗研发和疾病预防控制提供借鉴。     

猪丹毒丝菌灭活疫苗免疫佐剂的筛选

为筛选猪丹毒丝菌灭活疫苗免疫佐剂,将5种佐剂(聚合物佐剂、矿物油佐剂ISA 201 VG、蜂胶佐剂、弗氏佐剂、铝胶佐剂)分别与3株猪丹毒丝菌株(AEr21、AEr31和AEr32)制备成15种灭活疫苗,经物理性状检验、无菌检验、安全检验合格后分别免疫小鼠,应用ELISA方法检测小鼠血清中IgG抗体水平和细胞因子含量(IL-4、IL-10、TNF-β、IFN-γ、MCP-1)。通过腹腔注射和灌胃2种方式对免疫后小鼠进行攻毒,计算免疫保护率。结果显示,5种佐剂与3株猪丹毒丝菌株制备的灭活疫苗均可刺激小鼠产生良好的体液免疫和细胞免疫,矿物油佐剂ISA 201 VG疫苗免疫组诱导小鼠产生的IgG抗体水平和细胞因子含量最高,与铝胶佐剂、弗氏佐剂疫苗免疫组差异显著(P<0.05),与聚合物佐剂、蜂胶佐剂疫苗免疫组差异不显著(P>0.05);矿物油佐剂ISA 201 VG疫苗免疫组在攻毒后的免疫保护率最高,对腹腔注射和灌胃攻毒小鼠的免疫保护率分别为80%、80%、60%和100%、100%、80%。试验结果表明,矿物油佐剂ISA 201 VG可作为猪丹毒丝菌灭活疫苗制备的候选免疫佐剂。     

EDS_（76）灭活油乳剂疫苗的乳化工艺研究

本研究是在研制成ＥＤＳ７６油乳灭活苗的基础上．用高压匀浆机代替原先使用的高速均装机来大批量生产疫苗．系统地研究了整个工艺流程中质量控制的各种因素，确定了水相和油相比例、乳化剂和稳定剂的ＨＬＢ值和乳化压力这３个技术参数．结果表明３３％的水相、复合乳化剂的ＨＬＢ值为７．１和在２０Ｐ压力下初次乳化。再在３０Ｐ压力下匀乳的工艺流程能获得稳定性好、粘度低、质量可靠的ＥＤＳ７６油乳剂灭活疫苗，适宜于生产实际使用．     

鸡新城疫灭活疫苗免疫佐剂的研究

佐剂与抗原混合后注射动物体内,能非特异性改变或增强机体对该抗原的特异性免疫应答,发挥其辅佐作用。凡是可以增强抗原特异性免疫应答的物质均可称为佐剂。目前新城疫灭活疫苗的佐剂免疫增强效果不理想,亟待开发一种适用于鸡新城疫灭活疫苗的免疫佐剂。试验对鸡新城疫灭活疫苗免疫佐剂进行研究,结果表明,佐剂溶液中含有左旋咪唑2~10 mg·mL~(-1)的用量配比效果最优,且用此佐剂制成的鸡新城疫灭活疫苗,疫苗免疫效果明显提高。     

ND-EDS-76异源二联油苗的研制

将鸭源鸡新城疫 (ND)病毒 D1 0 株和鸡减蛋综合症 (EDS- 76 )病毒 GC2 株同时接种于同一鸭胚内复制 ,增殖 96 h收取尿囊液 ,用甲醛灭活后加白油佐剂制成 ND- EDS- 76异源二联油乳剂灭活疫苗。该疫苗生产工艺简单 ,成本低 ,经试用表明可有效地预防 ND和 EDS- 76的发生。     

基于正交设计法的利福平明胶微球制备工艺优化

采用正交试验及单因素对利福平明胶徼球的最佳工艺条件（包括表面活性剂类型、乳化剂浓度、乳化时间、乳化温度、搅拌速度、水油相比、明胶浓度等）进行了研究.结果表明,制备微球的最佳工艺条件为：span-80与tween-80以1∶3（质量比）的比例形成复配乳化剂,乳化剂浓度为3.5％,乳化时间为35min,乳化温度为65℃,搅拌速度为900r/min,水油相比为1∶20,明胶溶液浓度0.15g/ml.     

猪肺炎支原体自家油乳苗免疫效果评价

试验采用已经分离得到的猪肺炎支原体,经扩大繁殖后制成油乳剂灭活疫苗,并采用ELISA抗体检测方法进行疫苗免疫学效果评价。结果表明:自制疫苗2次采血抗体合格率100%(滴度达1∶16以上);进口疫苗2次采血抗体合格率为100%;而国产疫苗在抗体滴度和维持时间上比较进口疫苗和自家苗差,第2次采血抗体合格率仅为20%。自制疫苗的免疫接种效果明显优于国产疫苗,与进口疫苗相当。     

鸡霍乱组织灭活苗的研究

选择鸡源多杀性巴氏杆菌C481强毒株(血清1型)接种鸡胚,收集死胚组织,分别以油乳剂、蜂胶和铝胶为佐剂,按一定比例配制成含1.5×1010个/ml巴氏杆菌的灭活苗。经试验证明,该疫苗安全、有效,其中油乳剂灭活苗的保护期和蜂胶灭活苗的保护期相当,但蜂胶灭活苗的抗体水平上升速度比油乳剂苗快且保护率高;铝胶苗的效果不及蜂胶苗和油苗。     

鸡新城疫—减蛋综合症—传染性支气管炎三联油佐剂灭活疫苗的研究及应用

用分离、鉴定、筛选出的病毒株 ,研制成鸡新城疫—减蛋综合症—传染性支气管炎三联油佐剂灭活疫苗。通过实验室免疫效力、安全性、免疫期、保存期和攻毒试验 ,该疫苗强毒攻击保护率为10 0 % ,免疫期 2 0 0d以上 ,保存期在 4 50d以上 ,经大范围应用 ,免疫效果良好。     

牛轮状病毒灭活疫苗的免疫原性研究

制备了牛轮状病毒甲醛灭活疫苗,以小鼠和兔子为模型检测其免疫原性。将本室分离鉴定的牛轮状病毒野毒株（CHLY株）在恒河猴肾细胞系（MA-104）上增殖,制备病毒抗原液。当病毒的感染力达到10^6 TCID50／mL以上时,甲醛灭活,并分别制备油乳佐剂疫苗和铝胶佐剂疫苗,然后免疫试验动物,检测疫苗的免疫原性。小鼠免疫试验结果表明,第2次免疫后所有免疫组均产生了高水平IgC抗体,与对照组差异极显著（P〈0．01）,油乳佐剂疫苗与铝胶佐剂疫苗免疫效果差异不显著（P〉0．05）;兔免疫试验中,免疫组母兔产下仔兔血清中含有高水平的牛轮状病毒特异性抗体,与对照组差异极显著（P〈0．01）。试验表明制备的牛轮状病毒甲醛灭活疫苗具有较好的免疫原性,免疫后可显著提高体内特异性抗体水平。     

仿生法制备酸枣仁提取物工艺条件的优化

以酸枣仁总皂苷含量和浸膏得率的综合评分为考察指标,通过L9(34)正交设计试验,研究影响仿生法制备酸枣仁提取物的各因素。结果表明,影响仿生法制备酸枣仁提取物的各因素大小依次为:固液比(酸枣仁生药与提取液的比例D)>搅拌时间(B)>搅拌次数(C)>转速(A)。仿生法制备酸枣仁提取物的最佳工艺条件为:固液比1:10,搅拌提取两次,每次搅拌时间10min,搅拌转数125r/min。     

聚肌胞对禽流感油乳剂疫苗的体液免疫增强作用研究

为了研究聚肌胞是否能够增强油乳剂灭活疫苗免疫后鸡群的体液免疫应答,将3个不同来源的聚肌胞产品与H5亚型禽流感病毒灭活抗原相混合,使用轻质矿物油乳化制备疫苗,分别免疫21日龄SPF鸡,同时设置添加抗菌肽的疫苗免疫组、常规油乳剂疫苗免疫组以及不免疫对照组。在免疫后第14、21、28、35 d分别翅下静脉采集SPF鸡抗凝血,通过血凝抑制试验检测鸡血清中禽流感抗体的水平,使用统计学方法评价疫苗中添加聚肌胞对鸡群体液免疫反应的影响。结果发现,添加了聚肌胞或抗菌肽的疫苗免疫后,鸡血清中禽流感抗体水平显著高于普通油苗组。另外,不同来源的聚肌胞产品(PIC-1、PIC-2和PIC-3)免疫增强作用存在差异,以PIC-1免疫增强效果最好。在PIC-1疫苗免疫后,鸡血清抗体增长快,且可维持较高水平。总之,本研究表明聚肌胞是良好的禽病毒性疫苗免疫增强剂;不同厂家的聚肌胞产品质量有差异,应择优使用。