利用间歇浸没式植物生物反应器培养金钗石斛种苗

以金钗石斛（Dendrobium nobide Lindl.）原球茎为材料,利用间歇浸没式植物生物反应器进行金钗石斛组培快繁的研究。通过优化浸没频率、接种量和培养基蔗糖浓度,获得最佳的培养条件为：浸没频率5 min/8 h、接种量10 g·L-1、蔗糖浓度20 g·L-1,并与传统的固体培养比较,反应器培养在组培苗的生长形态、增殖倍数和有效成分上都明显优于固体培养。利用间歇浸没式植物生物反应器进行金钗石斛种苗培养,为金钗石斛种苗的高效率、低成本的生产提供了一种新的方法。     

间歇浸没式生物反应器培养铁皮石斛组培苗

目前铁皮石斛种苗生产主要采用植物组织培养的方法,传统的固体培养方式成本高效率低,无法满足市场需求,利用间歇浸没式生物反应器可以减少人工投入,降低生产成本。利用自主研发的间歇浸没式生物反应器培养铁皮石斛种苗,同时以固体培养作对照,比较了两种培养方式的铁皮石斛增殖率及植株高度、茎粗、根系情况、移栽成活率等。结果显示间歇浸没式生物反应器培养获得的铁皮石斛增殖率更高,组培苗更健壮,而且根系适中,利于栽培,移栽成活率也高于固体培养,为铁皮石斛种苗生产提供了一种新的方法。     

利用间歇浸没式生物反应器进行甘蔗脱毒苗快繁研究

利用新型间歇浸没式生物反应系统(TIBs)在培养基配方、接种数量、蔗糖浓度及品种差异等方面对甘蔗脱毒组培苗快繁进行研究.结果表明:①PP333及6-BA+PP333均能促进组培苗分化,增殖率较高且生长整齐,可进入下一阶段培养;②GA3浓度为1.0 mg·L-1伸长培养效果最好,平均苗高9.87 cm;③每升培养液接种量为20株时的增殖率最高;④培养基蔗糖浓度以20 g·L-1较为适宜.利用该系统对ROC16和ROC22两个甘蔗品种的脱毒苗经过3个阶段的培养,ROC16增殖率达40倍,每瓶得苗800株苗左右;ROC22增殖率为30倍,每瓶苗的数量达600株.     

接种密度、培养基中蔗糖和活性炭浓度对生物反应器内大花蕙兰原球茎增殖的影响

为了探明生物反应器内大花蕙兰原球茎增殖生长的影响因素,为大花蕙兰种苗生产中大量培养繁殖材料提供理论依据,以大花蕙兰茎尖诱导的原球茎为外植体,研究了接种量、蔗糖浓度、活性碳浓度对5 L气升式反应器内原球茎增殖和生长的影响。结果表明,大花蕙兰原球茎在5 L反应器内增殖时,接种量为20 g的处理原球茎鲜重显著优于10 g和30 g接种量处理;添加蔗糖30 g/L处理对大花蕙兰增殖生长有促进作用;活性炭浓度0.25 g/L处理原球茎的生长良好,高于0.25 g/L抑制原球茎的生长,增殖系数为7.5。利用5 L气升式生物反应器培养原球茎,接种量为20 g、蔗糖浓度为30 g/L、活性炭浓度为0.25 g/L时,大花蕙兰原球茎增殖较快,生长较好。     

间歇浸没式生物反应器在植物组织培养中的应用研究进展

间歇浸没式生物反应器是植物组织培养中的一种新兴技术装备，其基本原理是在无菌条件下将组培苗在培养液中进行周期性浸泡培养以实现快速繁殖。与传统组织培养相比，间歇浸没式生物反应器改进了液体培养的方式，在这种培养方式下，植物组织与液体培养基紧密接触，可刺激和促进植物组织对营养元素和激素的吸收；间歇及连续振动给液体培养基提供了足够氧气，提高了组培苗的繁殖系数。间歇浸没式生物反应器主要应用于快繁后期繁殖苗和生根苗的培育，较好地促进了自动化、机械化和商业化的植物组培快繁技术的发展。因此，间歇浸没式生物反应器具有自动化程度高、生产成本低、组培苗质量好、繁殖系数高、移栽易成活及适应性较强等特点，已在多种植物组织培养上得到应用。为更好地将该系统应用于植物组织培养，文章概述了间歇浸没式生物反应器的发展、参数设置、快繁的优势和缺点等方面的进展情况；同时对间歇浸没式生物反应器技术在植物组织培养中的研究进行展望。     

荸荠组培苗在间歇浸没式生物反应器(TIBs)中的高效增殖技术

【目的】探讨间歇浸没式生物反应器(TIBs)对荸荠(Eleocharis dulcis)组培苗快速繁殖的效果,为提高荸荠组培苗繁殖效率及其工厂化生产提供技术支撑。【方法】以初代诱导培养获得的桂蹄2号荸荠组培苗为外植体,利用TIBs系统进行组培快繁,研究荸荠组培苗不同继代代数、接种密度、激素组合及反应器间歇浸没频率等因子对荸荠组培增殖的影响。【结果】经初代诱导培养的第4、5、6代继代材料增殖倍数较高,其中第6代继代苗增殖倍数最高,达31.1倍,到第7代后随继代代数的增加增殖倍数逐渐降低。当接种密度大于15丛/瓶时,外植体污染率达16.0%;当接种密度低于10丛/瓶时,外植体的污染率为0。低于10 min/6 h的间歇浸没频率有利于降低污染率,在6 h内低于15 min的浸没时间有利于降低玻璃化苗率;当激素组合为3.0 mg/L 6-BA+0.01 mg/L NAA时,组培苗增殖倍数达38.5倍,且组培苗生长正常。【结论】在TIBs系统中,采用经初代诱导培养的第5代荸荠继代组培苗,增殖培养基为MS+3.0 mg/L 6-BA+0.01 mg/L NAA+30.0 g/L蔗糖,pH 6.0,接种密度10丛/瓶,反应器间歇浸没频率为10 min/6 h,可获得较好的培养效果。     

马铃薯组培苗液体间歇浸没培养初探

为探索马铃薯液体间歇浸没培养的最佳条件,以马铃薯品种夏泊蒂(Shepody)和费乌瑞它(Favorita)为材料,研究不同营养液间歇浸没频率、接种密度、单株营养液量对马铃薯组培苗的影响.研究结果显示:间歇液体培养的马铃薯组培苗在株高、茎粗、有效茎节数、根数等方面显著优于传统固体培养；当营养液间歇浸没频率1 d3～4次、接种密度0.26～0.39株/cm2、单株营养液量2.5 mL时马铃薯组培苗生长最佳.     

基于间歇浸没式生物反应器的荔浦芋组培快繁体系优化

[目的]优化基于间歇浸没式生物反应器系统(TIBs)的荔浦芋组培快繁体系,为荔浦芋脱毒组培苗的工厂化、自动化生产提供技术支持.[方法]以荔浦芋新品种桂芋2号茎尖分生组织脱毒诱导获得的不定芽为外植体,利用TIBs培养系统筛选出适合组培苗增殖及生根的最佳激素组合,并分析不同继代材料、接种密度及浸没间歇频率对组培苗增殖和生根效果的影响.[结果]利用TIBs培养系统可有效提高荔浦芋组培苗的增殖效果,增殖倍数达28.96倍,约是传统固体培养方法(2.87倍)的10倍,且组培苗的株高和生根数均极显著高于传统固体培养植株(P<0.01).在TIBs培养系统中,含4.00 mg/L 6-苄氨基嘌呤(6-BA)+0.05 mg/L萘乙酸(NAA)的培养基最适合荔浦芋组培苗增殖和生长,其组培苗增殖倍数为32.04倍.当接种材料为第4代荔浦芋继代材料、接种密度为10株/L、浸没间歇频率为5 min/6 h时,最有利于组培苗增殖和生长,增殖倍数均在30.00倍以上,可缩短萌芽时间,组培苗长势良好,且培养基污染率为0.[结论]利用TIBs培养系统对荔浦芋继代材料进行高效快繁具有可行性,可为实现及推动荔浦芋健康种苗繁育的工厂化生产提供技术支持.     

天然有机物添加对金钗石斛快繁的影响

为研究兰科植物组织培养常用有机添加物香蕉和马铃薯对金钗石斛快繁的影响,以云南临沧野生金钗石斛蒴果为材料,比较金钗石斛在添加不同类型或不同浓度添加物的种胚萌发培养基、原球茎分化培养基、幼苗扩繁培养基、生根培养基上的生长情况,结果表明,在MS培养基基础上添加马铃薯汁和香蕉汁均可促进金钗石斛种胚萌发和原球茎形成,最佳萌发培养基为MS+马铃薯汁30 mL/L+3%蔗糖;MS+马铃薯汁40～60 mL/L+3%蔗糖适于金钗石斛原球茎分化成苗培养,在MS+6-BA 1 mg/L+NAA 0.2 mg/L+马铃薯汁60～80 mL/L+3%蔗糖条件下幼苗的扩繁系数为4.8～5.1;MS+NAA 1 mg/L+IBA 0.5 mg/L+香蕉汁60～100 mL/L+3%蔗糖可用于金钗石斛生根培养。在金钗石斛组培快繁过程中,添加马铃薯汁可促进金钗石斛的种胚萌发、幼苗分化和扩繁,添加一定浓度的香蕉汁对金钗石斛生根具有较好的促进作用。     

间歇浸没式生物反应器在大规模组织培养中的应用研究

介绍了组织培养中4种间歇浸没式生物反应器,即叶轮驱动和蠕动泵驱动的间歇浸没式反应器及2种气体驱动的间歇浸没式生物反应器及其研究进展;综述了农林业中实现商业化生产和正在研究的一些树种以及存在的问题.     

春石斛和铁皮石斛试管苗壮苗生根条件的优化

以离体保存5 a的春石斛和铁皮石斛原球茎为材料,采用正交试验对其试管苗壮苗生根的条件进行优化,从鲜重、假鳞茎、颜色、株高和根系生长等方面对植株进行综合评定.结果表明:适宜春石斛壮苗生根的培养基为1/2MS+20 g.L-1白糖+50 g·L-1香蕉匀浆物;适宜铁皮石斛壮苗生根的培养基为1/2MS+10 g·L-1白糖.     

三叶木通愈伤诱导及分化研究

三叶木通（Akebia trifoliate (Thunb.) Koidz.）具有很高的开发应用价值,其优良品系组织培养快繁体系的建立尤为重要。以三叶木通幼嫩枝条及叶片作为外植体,研究了三叶木通无菌外植体获得、愈伤诱导以及胚状体诱导等过程,同时分析了抑制愈伤组织褐化的影响因素。结果表明：外植体经75%乙醇处理1 min,0.1%升汞灭菌12 min,再经无菌水浸泡处理3 min后,接种至MS+NAA 0.4 mg·L-1+2,4 D 4.0 mg·L-1+活性炭1.0 g·L-1+蔗糖30.0 g·L-1 +琼脂6.0 g·L-1培养基中,避光培养可得到愈伤组织,并能有效抑制愈伤组织褐化。愈伤组织接种至MS+NAA 0.4 mg·L-1+6 BA 2.0 mg·L-1+蔗糖30.0 g·L-1 +琼脂6.0 g·L-1的培养基中可得到胚状体,然后接种至无激素的MS培养基中,可以得到种苗。     

金钗石斛的离体快繁体系研究

[目的]研究金钗石斛的离体快繁体系。[方法]以金钗石斛的种子为材料,采用组培法进行离体培养。[结果]适宜于金钗石斛圆球茎诱导增殖及芽分化的培养基为:MS+1 mg/L BA+0.02 mg/L NAA+浓度2%马铃薯+浓度3%白糖,增殖系数为7～10。生根培养基为1/2MS+0.2 mg/L BA+0.2 mg/L NAA+0.2 mg/L GA+浓度2%香蕉+浓度2%马铃薯+浓度2%白糖;生根率达98%以上,移栽成活率在90%左右。[结论]该方法对金钗石斛的离体快繁体系进行了研究,为组培繁殖金钗石斛种苗提供了参考。     

兰花种子的原球茎诱导及其生长分化研究

[目的]从培养基方面优化兰花快速繁殖的技术体系。[方法]将石斛兰和秋花独蒜兰的干种子培养于MS、B5、KC液体培养基上,诱导原球茎形成,再将原球茎培养于MS、KC及B5固体培养基中,研究原球茎分化苗在不同培养基上的生长发育情况。[结果]石斛兰和秋花独蒜兰种子在B5液体培养基中诱导产生的原球茎最多,萌发率分别为3.1%、7.3%。秋花独蒜兰原球茎在KC固体培养基上的成活率最高,为71.9%,且幼苗生长发育状况最好,原球茎直径为(5.8±0.3)mm;石斛兰原球茎在B5固体培养基上的成活率最高,为65.0%,在KC固体培养基上的生长发育状况最好,原球茎直径为(3.8±0.6)mm。[结论]根据不同的组培快繁目标,可在兰花的不同生长发育阶段选用合适的培养基。     

鸡爪槭（Acer palmatum Thunb.）品种‘赤枫’组培再生体系的建立

鸡爪槭品种‘赤枫’是稀有的生长季观叶,冬季观枝的园林彩化树种。为了建立合理的组培再生体系,在短时期内获得大量种苗,以‘赤枫’带芽茎段为外植体,对其灭菌方式及启动、增殖、生根培养基进行了筛选,并对所获组培苗移栽技术进行了探讨。结果显示：全年中6月份为最佳外植体采集时间,外植体经50%多菌灵400倍液浸1 h后,以75％乙醇30 s+0.1％升汞10 min浸泡处理的灭菌效果最佳。再生体系各阶段最适培养基为：①启动培养：MS+0.5 mg·L-1 IAA;②增殖培养：MS+2.0 mg·L-1 6-BA+0.5 mg·L-1 IAA;③生根培养：1/2MS+0.3 mg·L-1 NAA。组培苗闭瓶炼苗6 d,开瓶炼苗3 d后,移栽到草炭∶蛭石∶珍珠岩=1∶1∶1的基质中,炼苗成活率可达90%。     

欧洲缬草不定根诱导与悬浮培养的研究

为获得欧洲缬草不定根诱导及悬浮培养的理想条件,以欧洲缬草无菌苗的叶片和茎段为外植体,研究了外源激素IAA、NAA、IBA对不定根诱导的影响,考察了不同培养基和不同外源激素对不定根悬浮培养的影响。结果表明：在不定根诱导过程中,茎段为外植体要优于叶片,NAA要优于IBA和IAA,MS+0.5 mg·L-1 NAA是诱导不定根的理想培养基,不定根诱导率最高达94.44%。不定根悬浮培养过程中,RCM是理想培养基,其不定根收获鲜重达7.80 g·L-1,收获干重达1.46 g·L-1,干物率为18.73%;0.5 mg·L-1 NAA是理想外源激素,其不定根收获量最高达33.56 g·L-1,增殖倍数最高达24.51。该研究建立的欧洲缬草不定根高效培养体系可以短期内获得大量不定根,为工业化生产提供技术依据。     

几种外部因子对春石斛组培生根的影响

[目的]为春石斛种苗的规模化生产提供理论依据。[方法]以春石斛组培增殖的不定芽为外植体,研究MS培养基浓度、IBA浓度、活性炭浓度及天然物质等外部因子对春石斛试管苗生根的影响。[结果]MS培养基浓度对试管苗生根影响较大,试管苗在1/2 MS培养基中生根效果较好,生根率达95%,根多且长。在1/2 MS培养基中加入0.5 mg/LIBA和0.5 mg/L活性炭对试管苗生根及生长有明显促进作用。在培养基中添加天然物质对试管苗生根有促进作用,其中添加100 g/L椰子汁时生根效果最佳,生根率可达97%。[结论]当培养基配方为1/2 MS+0.5 mg/LIBA+0.5 mg/L活性炭+100 g/L椰子汁时,春石斛试管苗生根及生长效果较好。     

皱叶酸模的试管苗培养研究

为了对野生资源进行保护,同时满足人们的需求,以具生长点的皱叶酸模茎段为材料,采用植物组织培养方法,对生长点的分化培养、分化芽生根培养、试管苗移栽、定植进行了研究。结果表明:MS+NAA0.05mg·L-1+6-BA2.0mg·L-1+蔗糖30g·L-1是皱叶酸模生长点分化培养的理想培养基;诱导分化芽生根的理想培养基是MS+IAA0.2mg·L-1+蔗糖30g·L-1;最佳的分化模式是先生根,再加入液体形式的最适分化培养基;试管苗移栽成活率高达100%,定植的试管苗保持了野生植株的生物学性状。