禽脑脊髓炎病毒内蒙分离株(AEV-NH937)基因组全序列分析

禽脑脊髓炎病毒（ avian encephalomyelitis virus, AEV）的大小、形态和浮力密度显示其属于小RNA病毒家族，小RNA病毒是小的单链RNA病毒。AEV可引起鸡、火鸡、鸭及鹌鹑等禽类的脑脊髓炎。AEV野毒株通常在肠道生长，而且在酸性条件下具有相当的稳定性，这一特性使其被划分为肠道病毒属的成员。然而，根据基因序列，它与甲肝病毒属的亲缘关系最近。AEV在家禽中的传播方式是口一粪途径，     

利用鸡胚成纤维细胞培养禽脑脊髓炎病毒的研究

利用鸡胚成纤维细胞 (CEF)培养禽脑脊髓炎病毒 (AEV) ,经过六次盲传发现 :AEV在 CEF上无细胞病变 (CPE) ,但利用 CEF细胞上清接种 SPF鸡胚 ,可产生不同程度的 AE鸡胚病变。分别取不同时间的感染细胞上清 ,测定 AEV浓度 ,结合培养条件 ,进而确定 AEV培养的最佳时机。结果表明 :以 AEV在 CEF上培养 7天最好 ,病毒滴度可达 10 2 .8EID50 / 0 .2 ml。将经 CEF培养的 AEV差速离心 (浓缩约 5 0 0倍 ) ,接种 SPF鸡胚 ,可产生典型的鸡胚病变 ,其滴度为 8× 10 5.0 EID50 / 0 .2 m l。通过 Cs Cl密度梯度离心提纯病毒 ,在电镜下观察到了大小基本一致的病毒粒子 ,病毒直径约为 2 5 nm。利用 AEV感染的 CEF或通过“细胞飞片”制备荧光片 ,建立了间接免疫荧光快速检验 CEF是否感染 AEV的方法。     

间接免疫荧光检测禽脑脊髓炎病毒抗体

ＡＥＶ Ｖａｎ Ｒｏｅｋｅｌ鸡胚适应株在鸡胚成纤维细胞和鸡胚神经胶质细胞传代,用盲传至第６代的ＣＥＦ,ＣＥＢ制成荧光标本。建立了ＡＥＶ荧光抗体检测方法,确定了待检血清稀释度１：１０和荧光抗体ＦＩＴＣ羊抗鸡ＩｇＧ的稀释率１：１０的工作浓度。通过对ＮＤＶ,ＭＤＶ,ＩＢＤＶ,ＡＩＶ,Ｒｅｏ等标准阳性血清的交叉试验,证实该法特性强且简单,方便经济,适合于鸡群ＡＥＶ抗体的检测。     

禽脑脊髓炎病毒感染鸡胚的病理学研究

６日龄ＳＰＦ鸡胚经卵黄囊分别接种禽脑脊髓炎病毒ＶａｎＲｏｅｋｅｌ株、１１４３株和ＮＨ９３７株，１０日后剖杀。鸡胚主要病变：眼观活动减弱，发育不良，体重减轻，皮下和脑部出血，脑积水和萎缩，脑重量明显减轻；光镜下见中枢神经组织非化脓性脑脊髓炎，腺胃、十二指肠、肝、胰、肾淋巴细胞浸润，骨骼肌萎缩、肌间水肿，其中神经细胞中央染色质溶解具有证病意义；电镜下脑神经细胞胞核淡染，胞浆内近核处粗面内质网崩解，十二指肠上皮细胞、胰岛细胞胞浆内含有约２５～３０ｎｍ密集或散在的病毒颗粒。     

AEV-NH937引起禽脑脊髓炎的病理学观察

用禽脑脊髓炎病毒NH937毒株脑内接种1日龄SPF雏鸡，分别在攻毒后3，5，10，14，20，25和30d分别宰杀对照组两只和攻毒组4只，取大脑和小脑、固定、HE染色。结果临床发病在第6天出现，第9天普遍发病并开始死亡，到第14天死亡停止。在第3天时，软脑膜充血出血、神经元再现少量变性坏死，第10天和14天损伤性变化最重，后管套现象和小胶质细胞增生等占主导地位。     

抗禽脑脊髓炎病毒单克隆抗体的研究——禽脑脊髓炎病毒抗原的培养和纯化

为获得用于制备AEV单克隆抗体的抗原，将禽脑脊髓炎病毒（AEV VR）接种于鸡胚成纤维细胞（CEF）盲传，通过间接免疫荧光试验（IFA）监测AEV增殖情况，以第六代CEF培养物作为种毒扩大培养，将其培养物经差速率心后的半提纯物接种6日龄SPF鸡胚、1日龄SPF鸡，再将半提纯物经密度梯度离心后进行PAGE－SDS电泳，电镜观察。结果证实，AEV VR在CEF上增殖成功。     

用鸡胚敏感试验监测蛋鸡群禽脑脊髓炎

通过鸡胚敏感试验监测了哈尔滨地区１７个蛋鸡群，其中１１／１７（占６４．７％群有免疫力；５／１７（占２９．４％）群最近或过去曾发生本病，但抵抗力已降低；１／１７（占５．９％）群对禽脑脊髓炎病毒攻击易感，１７个蛋鸡群总的阳性率为９５．１％，说明哈尔滨市产蛋鸡群中ＡＥＶ感染是十分广泛的。     

禽脑脊髓炎病毒的分离与初步鉴定研究

通过SPF鸡胚连续快速传代,从自然发病雏鸡脑组织中分离出一株食脑脊髓炎病毒（AEV）,经鸡胚接种,雏鸡接种、琼脂扩散试验和电镜观察,初步鉴定该株病毒为AEV,暂命名为AEV-SD961株。     

用单克隆抗体检测禽脑脊髓炎病毒抗原

建立了抗禽脊髓炎病毒（ＡＥＶ）的单克隆抗体（ＭＡｂ）ＶＲ９－１。接种ＡＥ鸡胚适应毒Ｖａｎ Ｒｏｃｋｃｌ株、２种疫苗株和２种野毒株的雏鸡脑冰冻切片、鸡胚成纤维细胞和鸡胚脑细胞，用间接免疫荧光和免疫过氧化物酶染色检查，结果，均可与ＭＡｂ ＶＲ９－１起反应。该ＭＡｂ也可用于石蜡包埋切片的抗生物素蛋白－生物素－过氧化物酶染色。试验结果表明，该ＭＡｂ可认别ＡＥＶ毒株的一个共同抗原决定簇，可用于ＡＥＶ检测和定     

间接免疫荧光检测禽脑脊髓炎病毒抗体

ＡＥＶＶａｎＲｏｅｋｅｌ鸡胚适应株在鸡胚成纤维细胞（ＣＥＦ）和鸡胚神经胶质细胞（ＣＥＢ）传代,用盲传至第６代的ＣＥＦ、ＣＥＢ制成荧光标本。建立了ＡＥＶ荧光抗体检测方法,确定了待检血清稀释度１∶１０和荧光抗体ＦＩＴＣ羊抗鸡ＩｇＧ的稀释度１∶１０的工作浓度。通过对ＮＤＶ、ＭＤＶ、ＩＢＤＶ、ＡＩＶ、Ｒｅｏ等标准阳性血清的交叉试验,证实该法特异性强,且简单、方便、经济,适合于鸡群ＡＥＶ抗体的检测。     

现代禽病防治技术专题（十二）：禽脑脊髓炎的防治要点

禽脑脊髓炎（ＡＥ）是一种主要侵害雏鸡的病毒性传染病,雏鸡感染后以共济失调、头颈震颤和病毒性脑炎为特征。成年鸡感染后会引起产蛋量和种蛋孵化率下降。我国自８０年代初报道该病以来,目前大多数省区都有发生。１病原本病的病原是禽脑脊髓炎病毒（ＡＥＶ）,它属于小...     

禽脑脊髓炎的病理学诊断

禽脑脊髓炎又称禽流行性震颤,是由禽脑脏脊髓炎病毒感染引起的一种地方性传染病.本病主要侵害30日龄以内的幼年鸡,1～2周龄的幼雏鸡易感性最强.病鸡临床主要表现共济失调,头颈肌肉震颤和两肢不完全麻癖.病毒主要侵害脑和脊髓等中枢神经系统,其病理学变化特征为"非化脓性脑脊髓炎"病变.现将近年来各养鸡场送检的禽脑脊髓炎病例的病理变化特点总结报告如下.     

禽脑脊髓炎病毒的分离鉴定

通过ＳＰＦ鸡胚连续、快速传代，从自然发病雏鸡脑组织中分离出一株禽脑脊髓炎病毒，暂命名为ＡＥＶ－ＮＨ９３７株，该病毒在发病鸡胚的肠上皮细胞、胰岛细胞和大脑神经细胞的胞浆中呈颗粒状，直径２５－３０ｎｍ，对盐酸、氯仿、胰蛋白酶具有抵抗力，在二价镁离子保护下可抵抗热效应，病毒滴度６．１６，中和指数２４５。     

禽脑脊髓炎的防治

<正>禽脑脊髓炎是一种主要侵害雏鸡神经系统的病毒性传染病,其特征是运动共济失调和头颈震颤,成年鸡产蛋率下降。     

环境潜在的禽脑脊髓炎病毒

某肉鸡场从1986年建场以来,先后引进不同品种肉鸡的种蛋,由本场进行孵化,各批都不同程度地受到禽脑脊髓炎病毒的威胁。使育雏成活率明显下降,经济效益低下,给肉鸡生产带来了极大的损失。通过对     

禽脑脊髓炎病毒的提纯和电镜观察

将禽脑脊髓炎病毒ＶａｎＲｏｅｋｅｌ株、１１４３株和Ｎ９３７分别经卵黄囊接种于６日龄ＳＰＦ鸡胚，接毒１０日后解剖鸡胚，收集尿囊液，采集脑，消化道和胰腺，用玻璃匀浆器制备２０％的组织悬液。     

禽脑脊髓炎病毒内蒙株分子致病机理的研究

本文应用分子克隆技术获得了鸡白细胞介素１β（ Ｉ Ｌ１β）ｃ Ｄ Ｎ Ａ 片段,并对其进行了序列分析,与人及小鼠 Ｉ Ｌ１β基因核酸序列同源性分别为４５％ 和３０％ 。并应用核酸原位杂交、斑点杂交技术检测了正常和禽脑脊髓炎病毒内蒙株（ Ａ Ｅ Ｖ Ｎ Ｈ９３７）感染鸡脑组织中 Ｉ Ｌ１β及其受体（ Ｉ Ｌ１ Ｒ）产生细胞的分布,试图进一步从分子水平阐明禽脑脊髓炎的某些发病机理。     

禽脑脊髓炎病毒检测技术研究进展

禽脑脊髓炎是一种病毒性传染病,能引起雏鸡、雉、鹌鹑和火鸡感染,其特点是运动失调和快速震颤。文章就其检测技术,如病毒分离,血清学诊断和核酸探针等的研究进展做一阐述。     

环介导等温扩增(LAMP)检测禽脑脊髓炎病毒方法的建立

根据已发表的禽脑脊髓炎病毒的VP2基因序列,设计并合成了6对特异扩增禽脑脊髓炎病毒VP2基因片段的引物,通过条件优化,成功建立了针对禽脑脊髓炎病毒的环介导等温扩增(LAMP)检测法,并测定其特异性和敏感性,对采集的禽临床样品的核酸分别进行了检测.结果表明,该法只检出禽脑脊髓炎病毒.敏感性扩增结果表明,Lamp检测禽脑脊髓炎病毒为100fg的RNA模板.该LAMP方法有简便、快速和特异性高的优点,可用于临床上对禽脑脊髓炎病毒的快速检测.