伽师瓜四倍体诱变方法研究

[目的]探索四倍体甜瓜的高效诱变及鉴定方法.[方法]以新疆伽师瓜(卡拉克塞)为材料,用0.2;、0.4;、0.6;的秋水仙素溶液,采用滴苗和浸根2种方法进行四倍体诱变,并通过染色体观察和细胞 学鉴定对其进行倍性分析.[结果]滴苗法比浸根法诱变率高,其中以0.2;秋水仙素滴苗诱变率最高,为6;;与二倍体相比,四倍体植株子叶和真叶长宽比变小,茎增粗,节间变短,花冠变大,保卫细胞变大,气孔密度变小.[结论]不同处理四倍体诱变率差异明显,0.2;的秋水仙素滴苗效果最佳.,四倍体伽师瓜与二倍体相比,在生理生态特性方面变化显著.     

白魔芋多倍体诱导研究初报

采用种子浸泡法和根状茎顶芽滴液法进行白魔芋多倍体诱导,比较了不同秋水仙素浓度和不同处理时间对出苗率和变异率的影响。结果表明,滴液法对材料的毒害性更小,经同一浓度秋水仙素溶液处理后出苗率和植株形态变异率均高于种子浸泡法,但诱变加倍的效果不如浸泡法。实验中获得一株纯合四倍体植株,由0.20%秋水仙素溶液处理种子48h诱变得到。     

秋水仙碱处理粗肋草丛生芽对其生长和诱变效应的影响

以粗肋草去顶丛生芽为诱导材料,采用秋水仙碱处理方法进行了粗肋草多倍体诱变。结果发现：不同处理方式、秋水仙碱浓度和处理时间,粗肋草诱变率不同。采用浸泡法诱变率比混培法诱变率高,在一定范围内随着秋水仙碱浓度和处理时间的增加,粗肋草诱变率升高。用0．15％秋水仙碱浓度的液体培养基浸泡处理2d,诱变率最高,达到16．2％。变异植株明显矮化、变粗、叶片变厚、颜色变深,能耐10℃低温不受冻害。     

秋水仙素诱导矮牵牛四倍体的研究

用不同浓度的秋水仙素溶液对矮牵牛种子进行浸渍处理。结果表明,以0.05%秋水仙素溶液浸渍处理诱变效果最好,变异株率及四倍体诱变率最高,分别达到29%,4.5%。经染色体鉴定确定的四倍体植株较二倍体对照植株生长缓慢、生育期延长、开花期延后,但生长势强、茎秆变粗、叶片变厚变大,花器官增大,叶片气孔变大,气孔密度减少,叶色深绿,叶绿素含量高于二倍体植株。     

秋水仙素诱导兰考泡桐四倍体的研究

用不同质量浓度的秋水仙素液体、固体和固液双层介质处理预培养时间不同的兰考泡桐二倍体幼苗叶片,叶柄和茎段后,在不同培养基上进行体外植株再生,得到了兰考泡桐的四倍体植株.结果表明,固液双层介质处理兰考泡桐叶片四倍体诱导率最高可达23.4%.显微镜观察诱变植株根尖染色体数为2n=4x=80,四倍体幼苗较二倍体幼苗叶片大而厚、叶色深,气孔大,生长更为健壮.     

ORYZALIN不同处理方法对西瓜四倍体诱变效果的影响

以不同西瓜二倍体自交纯系为实验材料,以播前除草剂ORYZALIN为诱变剂,比较了不同处理方法(浓度为25,40 mg/L和55 mg/L的ORYZALIN溶液田间滴苗;浓度为125,200 mg/L和275 mg/L的ORYZALIN羊毛脂浸膏涂抹;40 mg/L的ORYZALIN溶液浸种及浸芽处理)以及滴苗处理后不同整枝方式对西瓜四倍体的诱变效果.不同处理方法对四倍体诱变效果的综合比较结果表明:以40 mg/L,6 d滴苗处理和125 mg/L涂抹处理效果最佳,其诱变率分别达到17.39%和36.36%;浸芽处理诱变率最高仅为3.33%,干种子浸种处理未见明显变异.不同材料间的四倍体诱变效果具有一定差异.     

野生二倍体草莓叶片离体再生及四倍体诱导

以野生绿色草莓"5-9"试管苗叶片为外植体,研究了培养基中激素对叶片再生不定芽效率的影响及适宜的四倍体诱导方法.结果表明,当培养基中TDZ质量浓度为2.0 mg/L、2,4-D质量浓度为0.5 mg/L时,再生频率达96.3%;以附加50、100、150 mg/L秋水仙碱的液体和固体再生培养基处理叶片5 d,各个处理均诱导出四倍体植株,诱变率在15.1%～23.3%之间.诱变获得的四倍体试管苗表现出生长缓慢、叶色浓绿、叶片大、叶形指数变小等典型的四倍体植株特点,与普通二倍体试管苗相比具有明显差异.本研究揭示野生绿色草莓试管苗叶片具有极强的不定芽再生能力,叶片再生过程中进行秋水仙碱处理是获得四倍体的有效途径.     

秋水仙碱诱导山杨异源多倍体

[目的]利用综合倍性育种和杂交优势的多倍体育种培育山杨优良新品种。[方法]以中国山杨及其杂交品种中关山杨为母本,山杨和新疆杨为父本,进行树上杂交与切枝水培杂交,对授粉后的雌花序施加秋水仙碱进行多倍体诱导,利用流式细胞术检测植株倍性。[结果]切枝水培杂交,授粉48h后,以浓度0．3％秋水仙碱持续处理24h,诱导三倍体效果最佳;授粉96h后,以浓度0．3％秋水仙碱持续处理24h,诱导四倍体效果最佳。另外树上杂交,授粉96h后,以浓度0．1％秋水仙碱持续处理48h,诱导三倍体效果最佳;授粉120h后,以浓度0．1％秋水仙碱持续处理48h,诱导四倍体效果最佳。[结论]对山杨、中美山杨授粉后施加秋水仙碱处理,成功获得了三倍体与四倍体,结果表明利用秋水仙碱溶液诱导山杨多倍体行之有效。     

优质小型四倍体西瓜的诱变及其主要经济性状研究

用0.2%和0.4%秋水仙碱对64-2-6-4-1等优良小型二倍体西瓜进行滴苗和浸种处理诱导四倍体,结果表明,用0.2%秋水仙碱进行剥滴处理,其四倍体诱导率达11.6%~14.1%,比常规处理约高出10.0%,对诱变获得的小型四倍体西瓜进行不同基因型杂交、回交和系统分离筛选,决选出早熟、优质、耐贮运等综合性状突出的小型四倍体西瓜B154n和XH4n等品系。     

秋水仙素对菊苣多倍体的诱导

利用不同质量浓度秋水仙素溶液对菊苣生长点进行不同次数的诱变处理。通过观察气孔特征、测定DNA相对含量进行诱变植株筛选鉴定,确定其倍性水平。结果表明,0.2%秋水仙素处理4次,菊苣诱导率最高,为8.16%,获得8株菊苣同源四倍体植株,与二倍体对照相比,变异植株叶片增厚,叶色加深,叶片褶皱,下表皮气孔变大,保卫细胞内叶绿体数量增加,叶绿素含量增加,单位面积气孔数目减少。本试验共获得23株变异植株,其中22株同源四倍体,1株混倍体,构建了菊苣多倍体诱导技术体系,获得了菊苣多倍体新种质,丰富了菊苣遗传基础,为良种选育提供了材料。     

二倍体及同源四倍体不结球白菜核型分析

以二倍体不结球白菜及其同源四倍体为材料,采用常规染色压片法进行核型分析。结果表明:二倍体不结球白菜核型公式为2n=2x=20=10m+8sm(2SAT)+2st,其中第1、2、3、4、6对为中着丝粒染色体,第5、7、8、9对为近中着丝粒染色体,第10对为近端着丝粒染色体,第5对染色体具有随体,核型类型属于2A型,为基本对称型;四倍体不结球白菜核型公式为2n=4x=20m+16sm(4SAT)+4st,核型特征与二倍体基本一致,仅染色体长度变异范围与二倍体相比略大。表明四倍体不结球白菜是由其二倍体加倍得到的,为同源四倍体。     

几种芸薹属蔬菜的核型分析与比较

对大白菜、菜薹、结球甘蓝、芥蓝、花椰菜和四倍体菜薹与二倍体芥蓝种间杂种的核型进行了比较分析,旨在为研究其亲缘关系及品种鉴定提供细胞学依据。结果表明:四倍体菜薹与二倍体芥蓝的种间杂种包含2个菜薹的染色体组(AA)和1个芥蓝的染色体组(C),为异源三倍体(AAC)。结球甘蓝、芥蓝和花椰菜的染色体的平均相对长度基本相同,大于大白菜和菜薹,但变异系数小于大白菜和菜薹。大白菜和菜薹的核型类型属2B型,而结球甘蓝的属3A型,芥蓝和花椰菜的属2A型。     

优质、抗热同源四倍体不结球白菜的创制及鉴定

以二倍体抗热不结球白菜品种‘依伶’为材料,用不同浓度秋水仙素溶液处理子叶期生长点,对变异株进行倍性鉴定,研究不同倍性水平的营养品质、农艺学性状以及抗热性。结果表明：（1）0.2％秋水仙素处理4次的效果最好,四倍体加倍率为7.64％。与二倍体相比,叶片长和宽、叶柄长和宽、花器官、气孔、花粉粒、叶重、柄重、开展度、单株重均增加或增大,但结实率明显降低,以上指标差异均达显著或极显著水平。流式细胞仪及染色体鉴定四倍体DNA含量、染色体数目均为二倍体的2倍。小区产量比二倍体高出12.62％;（2）四倍体叶片和叶柄中可溶性总糖、可溶性蛋白、干物质分别增加了7.32％、74.85％,3.91％、17.22％,1.94％、4.89％,有机酸降低了22.56％、25.00％,差异显著;（3）热胁迫下,二、四倍体不结球白菜叶片的MDA、游离脯氨酸、可溶性蛋白含量均增加,恢复期内含量都降低,但二倍体MDA、游离脯氨酸含量一直高于四倍体,可溶性蛋白低于四倍体。四倍体表现出优质、抗热的特点。     

离体培养条件下金鱼草四倍体切花的诱导及培育

 离体培养条件下以金鱼草(Antrirrhinum majus)二倍体切花实生苗为材料,0.1%,0.2%秋水仙素处理12～36 h均能成功诱导出四倍体切花,其中以0.2%秋水仙素处理24 h效果最好,变异率为48%,死亡率为30%. 对诱导初期得到的具多倍体特征的苗经丛生芽途径反复切割分离实现同质稳定,生根移栽,经培育得到2个品系41株花大、花瓣厚而挺、质感厚重、花枝粗、花序长的四倍体切花。并以二倍体切花为对照对其光合作用特性、生育特性作了初步研究。     

秋水仙素诱导四倍体石刁柏的研究

用0.2%浓度的秋水仙素溶液处理石刁柏萌芽种子48h,获得了较好的诱变结果。最后得到了四倍体。其诱变率为36.8%。对四倍体石刁柏进行了形态观察和染色体数的鉴定,其染色体数是n=20,2n=40,井初步分析了四倍体嫩茎的粗脂肪,粗蛋白,粗灰分,16种氨基酸及维生素C等营养成分,其含量均比二倍体高。     

虹鳟(Oncorhynchus mykiss)多倍体的倍性鉴定

采用红细胞核体积测量法检测虹鳟多倍体的倍性,并用流式细胞术对其准确性进行验证,统计二倍体、三倍体与四倍体的核质比和微核率。结果显示,红细胞核体积测量法检测的三倍体诱导组(109尾)中有81尾三倍体,四倍体诱导组(154尾)中有26尾四倍体;流式细胞术鉴定结果显示,三倍体诱导组(109尾)中有79尾三倍体,四倍体诱导组(154尾)中有25尾四倍体,并且全部是红细胞核体积测量法所确定的三倍体和四倍体,测量法的准确率分别达到97.5%和96.2%;二倍体、三倍体和四倍体的核体积分别为51.87±6.79,78.32±2.72,99.07±9.85μm3,质体积分别为614.88±50.77、1 088.33±93.97、1 415.72±507.55!m3,核质比分别为0.084±0.024、0.072±0.014、0.070±0.010,统计表明三者的核质比无显著差异(P>0.05);三个倍性红细胞均未发现微核现象;三倍体和四倍体血液中有细胞核形态异常的红细胞,其出现率分别为0.07%和0.08%,二者无显著差异(P>0.05)。     

二、四倍体不结球白菜子叶再生能力及其与内源激素的关系

以6个同源四倍体和2个二倍体不结球白菜（Brassica campestris ssp．chinensis Makino）的子叶为外植体,正交设计筛选不定芽诱导优化培养基,测定二、四倍体不结球白菜子叶内源生长素IAA（吲哚-3-乙酸）和细胞分裂素ZR3（玉米素核苷类）的含量及ZRs／IAA比值大小,探讨再生能力与内源激素的相关性。结果表明：四倍体不定芽再生率变化范围是33．4％-83．3％,2个二倍体材料的最高再生率分别是33．3％和80．3％。四倍体白菜内源激素ZRs和IAA含量高于其相应二倍体白菜。用2种方法确定四倍体材料再生能力与内源激素含量的相关性,结果表明再生能力与ZRs／IAA比值显著相关,相关系数分别为0．9428和0．8857。     

秋水仙碱诱导四倍体大麦的研究

以30个大麦品种为材料,利用秋水仙碱进行四倍体大麦的诱导。结果表明,以秋水仙碱浓度0.1%处理16h效果最好,共获得6个大麦品种的加倍植株,其中以秃头和尚露仁大麦和宽颖裸麦的诱导率较高,分别获得7株和6株四倍体类型;观察到获得的四倍体大麦材料均表现出晚熟,籽粒增大,并表现为不同程度的部分不育。     

黄色马蹄莲多倍体诱导研究

为探明秋水仙素诱导彩色马蹄莲多倍体的最佳处理方法．以黄色马蹄莲奇妙Zantedeschia elliottian‘Black Magic’球茎为材料,在离体条件下诱导愈合组织并产生芽点．放入0．2,0．5及1．0g·L^-1秋水仙素溶液中分别浸泡24,48和72h,诱导黄色马蹄莲多倍体。结果显示：秋水仙素能成功诱导黄色马蹄莲多倍体．其最佳处理是使用0．5g·L^-1秋水仙素浸泡芽点48h．四倍体诱导率13．3％。四倍体植株体细胞染色体数目为2n=4x=64。获得的四倍体植株与二倍体比较,外部形态特征、气孔特性等方面有显著性差异,具有植株强健,叶片变大增厚,保卫细胞增大,叶绿体数目增多．气孔密度减少等特点．图3表3参18     

同源四倍体矮脚黄白菜与芸苔属作物杂交的亲和性

以选育的同源四倍体矮脚黄白菜为母本,选用其亲本二倍体矮脚黄及其它白菜品种,以及大白菜、甘蓝、甘蓝型海莱、芥菜等为父本,分别进行人工杂交,所得F_1种子中的杂株率有差异:二倍体矮脚黄为父本的是1.7％,其反交为6％;黑心乌白菜和甘蓝为父本的都是0;而芥菜和甘蓝型油为菜父本的分别是31％和36％。但是统计其杂种指数,则皆小于1,表现杂交不亲和。 连续三年调查了同源四倍体矮脚黄自然授粉采种的杂株率,平均为0.59％,但杂株中又以芥型和甘蓝油菜型较多,平均占65.0％和22.5％;而二倍体矮脚黄在同样条件下却高达16.5％。由此可见,同源四倍体矮脚黄在留生产种时,只需与芥菜和甘蓝型油菜隔离即可。