嗜水气单胞菌HEC毒素单克隆抗独特型抗体研究

用嗜水气单胞菌ＨＥＣ毒素免疫Ｂａｌｂ／Ｃ小鼠，通过一次性杂交瘤融合，在筛选ＨＥＣ毒素单克隆抗体（ＭｃＡｂ１）的同时，用兔抗ＨＥＣ毒素血清（ＰＡｂ）包板的ＥＬＩＳＡ方法，筛选到两株抗ＨＥＣ毒素的单克隆抗独特型抗体（ＭｃＡｂ２）。两株ＭｃＡｂ２腹水ＥＬＩＳＡ效价分别为１：２０４８０和１：５１２０，属于ＩｇＧ１亚类。ＨＥＣ毒素的模拟抗原ＭｃＡｂ２不能溶解人的Ｏ型红细胞，但能与相应的ＰＡｂ反应，并能阻断ＰＡｂ与ＨＥＣ毒素的结合。将ＭｃＡｂ２连接到同源小鼠红细胞（ＭＲＢＣ）后免疫小鼠，用ＨＥＣ毒素包板的ＥＬＩＳＡ检测其血清，呈阳性结果，说明ＭｃＡｂ２能模拟ＨＥＣ刺激机体产生抗ＨＥＣ毒素的抗体（Ａｂ３）。     

斑点ELISA检测鸡传染性支气管炎病毒及抗体

采用鼠抗鸡传染性支气管炎病毒（ＩＢＶ）高免血请作第１抗体，利用酶标羊抗鼠ＩｇＧ作第２抗体，建立间接法Ｄｏｔ－ＥＬＩＳＡ程序检测ＩＢＶ抗原；利用鸡抗ＩＢＶ血清阻断试验检测ＩＢＶ抗体。试验表明，本程序检测ＩＢＶ抗原及其抗体具有高度过感性和特异性。最低抗原检出量达１０￣（－８）ｇ数量级，阳性检出率９８％，阳性阻断率１００％。     

抗鸡传染性法氏囊病病毒单克隆抗体抗原结合位点分析

用酶联免疫吸附试验（ＥＬＩＳＡ）测定六株ＩＢＤＶ单克隆抗体抗结合位点，结果表明，六株ＭｃＡｂ的抗识别位点非常相似。     

分泌抗BVDV McAb杂交瘤细胞株的建立

用牛病毒性腹泻病毒（ＢＶＤＶ）感染ＭＤＢＫ细胞,将感染细胞培养物冻融后离心取上汪经ＰＥＧ沉淀浓缩抗原免疫ＢＡＬＢ／Ｃ小鼠,取血清抗体效价高遥免疫鼠的脾细胞与ＳＰ２／Ｏ细胞在ＰＥＧ作用下融合,产生杂交瘤细胞,用间接ＥＬＩＳＡ法检测杂交瘤细胞生长孔上清,筛选阳性杂交瘤细胞株。以有限稀法克隆２－３次,得到８ 泌抗ＢＶＤＶ的单克隆抗体（ＭｃＡｂ）杂交瘤细胞株。８株ＭｃＡｂ对ＢＶＤＶ,猪瘟均呈阳性反应。杂交     

甘薯青枯病菌单克隆抗体的分类及其血清型研究

用甘薯青枯病菌（Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓｓｏｌａｎａｃｅａｒｃｕｍ）免疫的ＢＡＬＢ／Ｃ小鼠脾细胞与鼠骨髓瘤细胞杂交融合，建立了４株分泌抗甘薯青枯病菌的特异性、有鉴别力的杂交瘤细胞株：ＰＳＢ２４、ＰＳＢ２８、ＰＳＢ４６、ＰＳＢ５６。 交瘤细胞株染色体数范围为９８－１０４，ＥＬＩＳＡ试验培养液抗体滴度为保这ＭｃＡｂ的玫＃＃     

鸡群类甲,乙,丙型肝炎病毒感染的血清流行病学调查

从河南部分地区收集鸡血清３１２份，用ＥＬＩＳＡ法分别检测：（１）抗甲型肝炎病毒抗体－ＩｇＭ（ＨＡＶＩｇＭ）；（２）乙型肝炎病毒“两对半”；（３）抗丙型肝炎病毒抗体。其结果３１２份鸡血清抗ＨＡＶＩｇＭ和抗ＨＣＶＡｂ全部阴性。乙肝病毒“两对半”血清阳性数分别为：ＨＢｓＡｇ１８份，抗－ＨＢｓ１６份，ＨＢｅＡｇ１４份，抗－ＨＢｅ２份；抗－ＨＢｃ零份。     

抗鹅IgY抗血清制备及在ELISA中的应用

为制备鹅免疫球蛋白特异性抗体,通过主动免疫兔子制备了抗鹅ＩｇＹ抗血清,并在ＥＬＩＳＡ中比较分析了该抗血清的应用效果．结果显示,将制备的抗鹅ＩｇＹ抗血清作为二抗,当抗原包被浓度（１６μｇ／ｍＬ）和血清（１∶１６００）、抗鹅ＩｇＹ抗血清（１∶５１２００）与酶标抗体（１∶２０００）稀释到合适浓度时,在ＥＬＩＳＡ检测鹅抗体水平中呈现出良好效果,其特异性和灵敏度明显好于以兔抗鸡ＩｇＹ作为替代二抗．结果表明所制备的抗鹅ＩｇＹ抗血清在鹅相关的酶联免疫研究方法中是合格和有效的．     

辣椒病毒的酶联免疫吸附法检测

辣椒病毒的酶联免疫吸附法检测程秉铨，周俊，孙晓陆，肖英，彭湘儒，刘文朴（新疆农科院中心实验室，乌鲁木齐，８３００００）（乌鲁木齐市蔬菜研究所）酶联免疫吸附试验技术（ＥＬＩＳＡ）是７０年代发展起来的用于检测抗原或抗体的新方法。１９７１年由瑞典的Ｅｎｇｖ...     

兔出血症病毒单克隆抗体的抗原识别位点分析

通过ＥＬＩＳＡ迭加试验对５株抗兔出血症病毒（ＲＨＤＶ）单克隆抗体（ＭｃＡｂ）的抗原表位进行了分析。抗体反应增值结果表明，６株单抗分别针对３类不同的抗原决定簇。ＣＧ４－１、ＣＨ３－１和ＡＡ８－１针对病毒结构多肽上的同一决定簇，ＣＦ２－１和ＲＭ－１７针对另一决定族，而ＲＭ－１４针对第３种决定簇；其识别表位可能与ＡＡ８－１非常接近。单抗的识别表位与其生物学活性密切相关。     

黄瓜花叶病毒（CMV）高效价抗血清的制备及其在FLISA中的应用

以提纯的ＣＭＶ作为抗原，经静脉注射、肌肉注射和足垫注射等对家兔进行免疫，获得高效价的抗血清（琼脂双扩散效价为１／２５６）；在间接ＥＬＩＳＡ试验过程中，用ＰＢＳ＋０．０５％ＴｒｉｔｏｎＸ－１００作为样本研磨液，用１：１６０００稀释度的ＣＭＶ抗血清或Ｚμｇ／ｍｌＣＭＶ抗血清的ＩｇＧ作为第一抗体，用１：１０００稀释度的冻干辣根过氧化物酶标记的羊抗兔的ＩｇＧ作为第二抗体，以待测样本光密度值与阴性对照光密度值之比大于或等于３作为判断待测样本为阳性反应的标准，结果表明：间接ＥＬＩＳＡ试验的灵敏度比生物检测的灵敏度要高３２～１６０倍。用间接ＥＬＩＳＡ检测矮牵牛的病毒样本３０份，ＣＭＶ占７０％。     

褪黑激素主动免疫对蛋鸡生殖内分泌的影响

运用Ｍａｎｎｉｃｈ反应制备褪黑激素（ＭＬＴ）完全抗原（复合物中ＭＬＴ与ＢＳＡ的结合比为１１．５：１）。在秋冬季用该搞原主动免疫５只罗曼蛋鸡，经ＥＬＩＳＡ检测，各鸡均产生ＭＬＴ特异性抗体。在自然光照下，通过ＭＬＴ完全抗原主动免疫，可显著提高首次免疫２个月后的雌二醇（Ｅ２）水平，且抗体效价高的两只鸡提高的幅度较大，还抑制了雌二醇（Ｅ２）和孕酮（Ｐ）在秋冬季的下降趋势，因此短日照下通过主动免疫中和蛋鸡体     

应用酶联免疫吸附测定检测鸡血液中抗新城疫病毒抗体的动力学研究

应用新城疫ＬａＳｏｔａ系疫苗接种１日龄雏鸡并在２１日龄用ＬａＳｏｔａ系疫苗及油佐剂灭活苗联合接种。应用酶联免疫吸附测定（ＥＬＩＳＡ）和血凝抑制试验（ＨＩ）检测鸡血液中抗体水平，并在３０，６０日龄进行攻毒试验。结果表明：ＨＩ效价与攻毒保护率之间没有相关性，不能真正反映出机体的免疫水平，而ＥＬＩＳＡ用于检测其抗体水平具有很高的敏感性，ＥＬＩＳＡ滴度与攻毒保护率具有相关性，可作为评定机体免疫力的可靠指标。     

渭北烟区黄瓜花叶病毒酶联免疫检测方法

将采自渭北烟田的黄瓜花叶病毒（ＣＭＶ）分离纯化后,制备抗血清并建立了双抗体夹心式酶联免疫检测方法（ＤＡＳ－ＥＬＩＳＡ）,同时对其各项指标作了合理选择,结果发现最适包被和酶标抗体的质量浓度均为０．６２５ｍｇ·Ｌ－１．用此方法测定表明,在渭北烟区越冬油菜是ＣＭＶ的主要越冬寄主;ＣＭＶ侵染烟草所引起的花叶病约占６４．３％．     

抗鸡IgC单克隆抗体杂交瘤细胞株的建立

利用纯化鸡血清ＩｇＣ免疫的Ｂａｌｂ／ｃ小鼠脾细胞与ＳＰ２／０骨髓瘤细胞进行融合，用ＥＬＩＳＡ间接法和夹心法作阳性抗体检测，经有限稀释法克隆，结果筛选出１株可持续分泌抗鸡ＩｇＣ单克隆抗体（ＭｃＡｂ）的杂交瘤细胞株３Ｅ３，其培养上清和诱生Ｂｌａｂ／ｃ小鼠腹水的ＭｃＡｂ效价分别为１：４×１０＾２－１．２８×１０＾４和１：８×１０＾５－１×１０＾１０，经染色体分析可见到两种形态的染色体，该细胞株经体连续     

用双夹心法ELISA检测兔轮状病毒的研究

建立了检测兔轮状病毒抗原的夹心法ＥＬＩＳＡ（ＤＳ－ＥＬＩＳＡ）。用此法检测了６７份兔腹泻粪便样品和腹泻死亡兔肠内容物样品。轮状病毒（ＲＶ）阳性检出率（３１．３４％）明显高于双抗体夹心法ＥＬＳＡ（２５．３７％）和对流免疫电泳（１６．４１％）。经阻断试验和重复性试验，证明了ＤＳ－ＥＬＩＳＡ具有特异性强和重复性好等优点。     

副结核分枝杆菌McAb的某些特性鉴定

以超声波粉碎的副结核分枝杆菌地方株Ｃ２抗原免疫Ｂａｌｂ／ｃ小鼠，经与ＮＳ－１骨髓瘤细胞三次融合，获得了３株能稳定分泌抗副结核分枝ＭｃＡｂ的杂交瘤细胞系，其染色体数目为７８－１１０条，分别为ＩｇＭ和ＩｇＧ２。应用间接ＥＬＩＳＡ法测定细胞培养液，腹水和血清效价为１０＾－２～１０＾－７。交叉试验证明，ＭｃＡｂＯ１与受试的各株副结核分枝杆菌反应强烈，与牛分枝杆菌和草分枝杆菌有微弱特异性抗原之一。ＳＤＳ－Ｐ     

六种不同蛋白质载体制备克伦特罗抗血清的比较

以偶氮法将β激动剂克伦特罗（ＣＬ）连接小鼠血清白蛋白,小鼠ＩｇＭ（ＭＩＭ）,小鼠全血清（ＭＷＳ）,牛血清白蛋白（ＢＳＡ）,嗜水气单胞菌（ＡＨＪ）,虾全血清（ＳＷＳ）。各连接物分别免疫６组小鼠免疫４次后用间接抑制ＥＬＩＳＡ,间接ＥＬＩＳＡ检测各组血清特异性和抗ＣＬ的效价。结果表明,各组鼠血清均含有抗ＣＬ的特异性的抗体;ＡＨＪ,ＳＷＳ,ＭＷＳ,ＭＳＡ组血清效价显著高于ＭＩＭ,ＢＳＡ组,提示组分复杂的蛋     

聚合酶链反应检测轻微感染病毒的水稻植株和带毒介体叶蝉内…

聚合酶链反应（ＰＣＲ）检测水稻病毒侵染株内水稻东格鲁杆状病毒的灵敏度是酶联免疫吸附试验法（ＥＬＩＳＡ）的１０＾３～１０＾４倍。由于ＰＣＲ有更高检查灵敏度，它能检测单头二点黑尾叶蝉（Ｎｅｐｈｏｔｅｔｔｉｘｖｉｒｅｓｃｅｎｓ）体内的水稻东格鲁杆状病毒（ＰＴＢＶ），二点黑尾叶蝉是ＰＴＢＶ的半持久性传播介体，而用ＥＬＩＳＡ检测是不成功的，为了评价水稻品种对ＲＴＢＶ的抗性，在ＵｔｒｉＭｅｒａｈＵｔｒｉＲａｊ     

渭北烟区黄瓜花叶病毒酶联免疫检测方法

将采自渭北烟田的黄瓜花叶病毒（ＣＭＶ）分离纯化后,制备抗血清并建立了双抗体夹心式酶联免疫检测方法（ＤＡＳ－ＥＬＩＳＡ）,同时对其各项指标作了合理选择,结果发现,最适包被和酶标抗体的质量浓度均为０．６２５ｍｇ·Ｌ＾－１,用此方法测定表明,在渭北烟区越冬油菜是ＣＭＶ的主要越冬寄生;ＣＭＶ侵染烟草所引起的花叶病约占６４．３％。     

应用酶联免疫吸附测定检测鸡血液中抗新城疫病毒抗体的动…

应用新城疫ＬａＳｏｔａ系疫苗接咱１日龄雏鸡并在２１日龄用ＬａＳｏｔａ系疫苗及油佐剂灭活苗联合接种。应用酶联免疫吸附测定（ＥＬＩＳＡ）和血凝抑制试验（ＨＩ）检测鸡血液中抗体水平，并在３０，６０日龄进行攻毒试验。结果表明：ＨＩ效价与攻毒保护率之间没有相关性，不能真正反映出机体的免疫水平，而ＥＬＩＳＡ用于检测其体水平具有很高的敏感性，ＥＬＩＳＡ滴度与攻毒保护率具有相关性，可作为评定机体免疫力的可靠指标。