鸡抗大肠杆菌O126卵黄抗体理化特性的研究

自1893年Patterson发现亲代鸡通过鸡卵向幼雏转移抗体以后，科学家们对各种抗原引起的产蛋鸡产生的特异性抗体在卵黄中的蓄积状况进行了许多研究，发现从卵黄中可以获得大量特异性的多克隆抗体。早期对卵黄抗体(Egg yolk Immunogloblin，IgY)的研究主要用于确定鸡对某些疾病的免疫力。目前，卵黄抗体的应用已经扩展到人类的某些疾病防治中。本研     

产蛋鸡抗大肠杆菌F4菌毛的血清抗体和卵黄抗体消长规律的研究

从浙江省10多个规模化猪场采集仔猪断奶腹泻病料,分离致病性大肠杆菌。血清学和PCR方法鉴定菌毛型主要为F4和F18。挑取1株致病性和菌毛表达较强的F4阳性菌株,接种改良M inca培养基培养,热抽提法分离菌毛并纯化菌毛蛋白。将50只蛋鸡随机分5组,分别肌注1 mL免疫原/只:A组菌毛蛋白(250μg/只),B、C和D组菌毛蛋白(250,50,10μg/只) 弗氏佐剂,E组为空白对照。21 d加强免疫。定期采血分离血清,水稀释法和饱和硫酸铵盐析法分离卵黄抗体。ELISA法检测血清和卵黄抗体效价。结果表明,F4菌毛蛋白具有良好的免疫原性:在弗氏佐剂的辅助下,二免后21 d抗体效价达最高峰,血清和卵黄抗体效价分别为4.7 lg和4.4 lg,二免后56 d血清和卵黄抗体效价仍维持在4.0 lg;另外二免后21 d,10μg/只免疫剂量与50μg/只及250μg/只相比,诱导产生的卵黄抗体效价之间差异不显著(P>0.05)。     

鸡抗大肠杆菌血清抗体和卵黄抗体变化规律研究

用猪源大肠杆菌四价(K88、K99、987P、F41)灭活疫苗免疫蛋鸡,微量凝集法定期检测蛋鸡血清抗体和卵黄抗体的效价。结果表明,血清抗体比卵黄抗体出现早,免疫蛋鸡血清中和卵黄中4种抗体的消长规律基本相似,但不同抗体水平之间存在明显的差异,整个试验期间血清抗体水平均比卵黄抗体水平高。     

鸡抗猪大肠杆菌血清抗体和卵黄抗体消长规律及其相互关系的探讨

用猪源大肠杆菌单价(K88)与三价(K88、K99、987P)灭活疫苗分别免疫产蛋母鸡,定期检测母鸡血清和卵黄的抗体效价。结果表明,两种疫苗免疫母鸡的卵黄抗体和血清抗体的消长规律基本一致,但前者比后者上升和下降期有所滞后;血清抗体水平比卵黄抗体水平平均约高21 8以上,两者间的差异极显著(P<0 01)。     

蛋鸡血清抗体与卵黄抗体效价对比试验

笔者通过试验对免疫后的蛋鸡血清抗体和卵黄抗体进行测定比较,探讨应用卵黄代替血清开展蛋鸡免疫抗体的监测技术。试验结果表明,卵黄抗体检测完全可以取代血清检测,方法简便实用。     

产蛋鸡免疫程序对卵黄抗体效价的影响

试验用小鹅瘟免疫原按8种免疫程序接种120日龄产蛋鸡,分别在接种后不同时间琼脂扩散试验试验检测卵黄抗体效价,筛选出最佳免疫接种程序。基础免疫,产蛋鸡每只肌肉注射小鹅瘟活疫苗1.0 m L（5羽份）;在基础免疫后14 d进行第2次接种,加强免疫,产蛋鸡每只肌肉多点注射小鹅瘟灭活疫苗2.0 m L;在加强免疫后14 d进行第3次接种,强化免疫,产蛋鸡每只肌肉多点注射小鹅瘟灭活疫苗3.0 m L。     

禽流感血清抗体与卵黄抗体消长规律比较研究

应用禽流感病毒二价（H5、H9）油乳剂灭活疫苗免疫160日龄非免疫蛋鸡，免疫接种后分别于第0、7、14、21、28、35 d采集相应的鸡蛋和血清，采用血凝抑制(HI)试验监测血清及卵黄中H5、H9抗体的消长规律，结果表明：H5、H9血清抗体于免疫后7 d时开始产生，14 d时到中等水平，21 d时达到最高值，一直维持到35 d之后；而H5、H9卵黄抗体与血清抗体水平相比相对滞后7 d左右；卵黄抗体与血清抗体在28 d时均达到高峰值并一直维持到35 d之后，28 d后血清和卵黄抗体达到相同水平。本研究为临床上以禽流感卵黄抗体检测替代血清抗体检测及以后禽流感高免卵黄抗体的研究提供了依据和数据。     

鸡卵黄抗体在防治仔猪大肠杆菌性腹泻中的应用

仔猪大肠杆菌性腹泻主要是由产肠毒素性大肠杆菌(Enterotoxigenic Escherichia coli,ETEC)引起的仔猪的一种常见病,严重影响养猪业的发展。目前对该病的防治除加强综合性预防措施以外,生产上多采用ETEC的多价疫苗和基因工程苗免疫母猪,提高初乳中的抗体水平,以防治哺乳仔猪产肠毒素大肠杆菌性腹泻。然而母乳中的抗体     

犬瘟热病毒免疫蛋鸡血清抗体与卵黄抗体消长规律的研究

试验旨在了解产蛋鸡对犬瘟热病毒(canine distemper virus,CDV)抗原的免疫反应及其血清抗体和卵黄抗体的消长规律,为制备卵黄抗体提供依据。将CDV接种Vero细胞和DF1细胞进行传代并测定其病毒滴度,选取细胞病变出现早、病毒滴度高的Vero细胞毒作为接种病毒抗原免疫蛋鸡。每10 d免疫蛋鸡1次,第4次免疫后每30 d加强免疫1次。免疫前及免疫后每10 d采血分离血清,每5 d收集鸡蛋提取卵黄抗体,用琼脂扩散法和间接ELISA法测定其抗体水平。结果显示,血清抗体比卵黄抗体的滴度高,两者呈正相关性,卵黄抗体出现较血清抗体迟3~5 d,卵黄抗体在第3次免疫后3~5 d就已达到较高水平,此时即可开始收集鸡蛋制备卵黄抗体。     

鸡新城疫卵黄抗体效价动态变化情况研究

选取150日龄健康产蛋母鸡40羽,肌肉注射鸡新城疫Lasota疫苗2倍剂量/羽,10 d后再注射鸡新城疫油乳剂灭活苗4倍剂量/羽,自由采食和饮水。分别收集免疫前、免疫后10、20、30、40和50 d,母鸡所产鸡蛋提取卵黄抗体,测定不同时间卵黄抗体效价。结果发现免疫前卵黄抗体效价较低,鸡新城疫Lasota疫苗免疫后卵黄抗体效价开始缓慢升高,鸡新城疫油乳剂灭活苗加强免疫后卵黄抗体效价大幅度提高,并在二免后20 d卵黄抗体效价达到高峰,维持一段时间后卵黄抗体效价开始逐步下降。表明收集鸡新城疫疫苗二免后20 d左右的鸡蛋提取卵黄抗体效价高。     

ELISA检测卵黄和血清中禽呼肠孤病毒抗体相关性试验

本试验通过选取氯仿抽提卵黄抗体方法,经ELISA检测鸡卵黄和血清中禽呼肠弧病毒(REOV)抗体的相关性试验,确定卵黄抗体和血清抗体的对应关系,并依此建立ELISA试剂盒检测卵黄抗体的检测方法及判定标准.试验结果显示,采用REOV-ELISA检测试剂盒检测鸡血清及对应卵黄中REOV抗体二者具有良好的相关性,相对于血清ELISA检测法,所选样本206份中,检测结果相符的样本有200份,卵黄ELISA检测法的符合率为97.08％,表明可以采用检测血清的REOV-ELISA试剂盒检测卵黄中的REOV抗体水平.     

卵黄抗体三种提取方法的比较研究

运用硫酸铵法、聚乙二醇(PEG)法、冷乙醇法对卵黄抗体进行提取,并使用间接竞争酶联免疫吸附试验(ELISA)方法测定所得卵黄抗体的特异性,用十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)测其纯度,用Nanodrop2000测其蛋白浓度并计算提取量,比较三种方法所得抗体的特异性、纯度和提取量。结果显示,三种提取方法所得卵黄抗体特异性高低依次为硫酸铵法、冷乙醇法、PEG法;纯度高低依次为硫酸铵法、冷乙醇法、PEG法;三种方法的提取量高低依次为PEG法、硫酸铵法、冷乙醇法。经综合分析与评价,硫酸铵法的抗体特异性较好、纯度较高、提取量也较高,且其操作方法相对简便,是比较具有优势的提取方法。     

肠毒性大肠杆菌(ETEC)蛋黄抗体防治仔猪腹泻病试验

肠毒性大肠杆菌(ETEC)蛋黄抗体是将K88、K99、987P和HRV的大肠杆菌抗原免疫产蛋母鸡后,使血清产生相应抗体,产蛋母鸡又以产蛋方式将含有抗大肠杆菌K88、K99、987P和HRV的高效价血清免疫球蛋白(IgG)有效地转移到蛋黄中,即免疫球蛋白,简称IgY,再采用理化方法从高免鸡蛋中提取纯化IgY,即肠毒性大肠杆菌蛋黄抗体粉.     

SPF鸡感染网状内皮组织增生症病毒后血清和卵黄的抗体反应相关性比较

为进一步研究采用卵黄抗体检测代替血清抗体检测的可行性,采用已建立的卵黄抗体ELISA检测方法,比较同一时期卵黄抗体与血清抗体的相关性。人工感染23周龄无特定病原体（SPF）鸡,每周采集全血分离血清,每天收集种蛋,ELISA方法检测血清、种蛋中的REV抗体,并进行比较,结果表明：攻毒后第2周开始血清抗体和卵黄抗体呈阳性,并达到峰值,之后抗体水平缓慢下降,两者具有相似的消长规律;对同一时期的卵黄抗体和血清抗体S/P比值进行统计学比较,P值小于0.05,相关系数为0.931,表明两者差异性不显著,相关性很好;阴阳性符合率比较,阳性符合率为97.8%,阴性符合率为100%,总体符合率为98.4%,阴阳性复合率很高。试验证明,同一时期的卵黄抗体和血清抗体的相关性很好,可用卵黄抗体检测方法代替血清抗体检测,从而为监测SPF鸡群感染REV提供新的技术手段。     

Voluntary food and calcium intake by the laying hen

Two experiments, each of 40 d duration, are described in which a diet rich in calcium (3.5% Ca) or one deficient in calcium (1% Ca), but with oyster shell offered separately, were fed ad libitum to four laying hens. The voluntary consumption of food and oyster shell was automatically recorded every 2 h. The hourly consumption of the high Ga diet increased during the afternoon while the daily pattern of consumption was modified by the position of the egg in the clutch.

When the low Ca diet was fed with oyster shell, the daily consumption was increased but the effect of the position of the egg in the clutch was reduced. The ingestion of oyster shell was very high between 16.00 and 20.00 h when egg calcification was in progress; after the last oviposition of the clutch this elevated level of intake remained though to a lesser degree. In relation to the stage of egg formation, the voluntary intake of oyster shell increased sharply between 4 and 12 h after the former oviposition.

These results confirm that the laying hen can discriminate between food and calcium intake. It seems that appetite for calcium is firstly related to light‐dark cycles with a modulation of the afternoon peak by ovulation and then egg shell calcification.     

卵黄抗体代替血清抗体评价种鸡群病原感染状态的研究

为了解卵黄抗体与血清抗体间的相关性,分别采集一定数量的莱芜黑鸡、海兰褐蛋种鸡和SPF白来航鸡的血清、鸡蛋,所有鸡蛋与血清样品均一一对应。用禽网状内皮组织增生症病毒(REV)、呼肠孤病毒(REOV)、J亚群禽白血病病毒(ALV-J)、AB亚群禽白血病病毒(ALV-AB)、禽传染性贫血病毒(CAV)以及传染性法氏囊病病毒(IBDV)等6种ELISA检测试剂盒,分别检测血清与卵黄中的抗体水平,用SPSSStatistics17.0程序比较分析血清与卵黄抗体OD值的相关系数,从而获得针对ELISA检测卵黄抗体的最佳稀释倍数。结果显示,23~38份卵黄样品中REV、REOV、ALV-J、ALV-AB、CAV以及IBDV的抗体检测最佳稀释比例分别为1∶200、1∶400、1∶250、1∶200、1∶20和1∶500,与血清中抗体OD值的相关系数分别为0.982、0.939、0.927、0.993、0.935和0.989;检测结果还表明,最佳稀释度卵黄与血清样品的阴阳性符合率为96%~100%。本研究显示,卵黄可代替血清样品用ELISA检测试剂盒检测,以判断种鸡群的病原感染状态。     

Composition of crop and gizzard contents in the laying hen.

Crop and gizzard contents were analysed at six stages of egg formation. 2. The crop was empty during the day and full during the night while the gizzard contained a constant amount of dry matter. The water content of the crop did not change but that of the gizzard was at a minimum just after the ovulation and at a maximum 18 h later. 3. The osmotic pressure of the gizzard contents remained constant and close to that of the blood; that of the crop contents was almost isotonic at oviposition but hypertonic 18 h later. In both organs the pH of the liquid phase varied cyclicly with the egg formation and was lowest during egg shell deposition. 4. The Na+, K+ and Cl- contents of the crop liquid phase did not vary but Ca2+ increased with decreasing pH.Na+ and K+ were also constant in the gizzard liquid phase but Cl- and Ca2+ increased during shell formation. 5. It is concluded that the amount of HCl secreted by the proventiculus is related to egg shell deposition and that calcium solubilisation depends on microbial fermentation in crop and HCl secretion by proventriculus.     

微生态益生菌粉在蛋鸡日粮中应用效果

在蛋鸡日粮中加入2～8％生物饲料添加剂——兹生态益生茵粉等量替代豆粕,以61周龄海兰褐鸡群为试验鸡群,通过7周的饲喂试验观察结果如下：饲料成本略有下降;鸡群料蛋比下降2．79～4．57％;能明显改善蛋鸡的产蛋性能,延迟蛋鸡产蛋后期产蛋率的下降速度,使只鸡每周可多盈利0．036～0．06元;能增加鸡蛋壳的颜色和硬度,加深鸡蛋黄的颜色和弹性;对去除鸡舍中的臭味有一定的效果。微生态益菌粉在蛋鸡饲料中的添加量以5～8％为宜。