甘露糖对甘蔗外植体再生的影响

在甘蔗外植体再生体系的基础上,在甘蔗愈伤组织继代、胚性愈伤组织芽分化以及幼芽生根阶段的培养基中附加甘露糖,研究甘露糖对甘蔗外植体再生的影响,以确定用于甘蔗遗传转化筛选的最适浓度.结果表明,甘露糖对甘蔗茎尖愈伤组织诱导、愈伤分化和幼芽根形成均产生抑制作用.愈伤组织生长、分化、生根3个阶段的抗性筛选浓度分别为3-5、4-5和3 g.L-1.     

植物激素对高山红景天试管苗愈伤组织再分化的影响

以高山红景天试管苗叶片为外植体,研究植物激素浓度对高山红景天再分化的影响,比较诱导培养基和分化培养基植物激素对愈伤组织分化的影响,结果表明:高山红景天试管苗叶片愈伤组织再分化与植物激素浓度关系较大,在0.5 mg/L NAA 0.5 mg/L 6-BA配比的诱导培养基上诱导的愈伤组织均在提供的3种分化培养基上分化率最高;MS 0.5 mg/L NAA 5.0 mg/L 6-BA的分化培养基对不同诱导培养基来源的愈伤组织均表现较高的分化率.     

籼稻Kra Dang Ngah成熟胚愈伤组织诱导及植株再生的研究

为了建立籼稻Kra Dang Ngah的再生体系,以其成熟胚作为试验材料,研究不同种类植物激素及其浓度配比对诱导愈伤率、愈伤组织形态学特征、分化及植株再生的影响。结果表明:2,4-D可诱导愈伤组织产生,但愈伤组织诱导率极低;2,4-D和其他植物激素配合使用显著提高了诱导率,在2 mg/L 2,4-D、1 mg/L NAA、1.0 mg/L 6-BA和0.5 mg/L KN的条件下可获得较高的愈伤组织诱导率,为56.3%。继代培养基中添加激素浓度为诱导培养基中的一半可获得较好的增生的胚性愈伤组织,形态学特征为淡黄色,比较致密、较硬、呈颗粒状结构,没有褐化出现,表现出很强的分化能力。再生培养中,MS培养基中添加0.5 mg/L NAA、1.0 mg/L 6-BA和2 mg/L KN可获得较高的分化率(达到75.5%)和再生率(33.3%),表明6-BA和Kn的配合使用显著提高了分化率。     

糜子愈伤诱导及再分化最适条件研究

研究旨在应用组织培养技术探究愈伤诱导及再分化的最适条件,以期为糜子建立遗传转化体系奠定基础。采用5种不同类型的糜子品种研究愈伤诱导及再分化的最适条件。利用植物激素2,4-二氯苯氧乙酸(2,4-D)诱导茎尖愈伤组织,筛选出发芽率高,愈伤组织诱导率高,染菌率低的品种,并对诱导愈伤最适激素浓度及配比进行了鉴定。结果显示,冀黍2号出芽率高、愈伤组织诱导率高、染菌率低,适宜进行组织培养;2,4-D对冀黍2号愈伤诱导效果最好,最适浓度为2.5mg/L,诱导率达86.67%,淡黄色块状,结构紧密,质地较硬,继代培养后形成的胚性愈伤组织状态更好。再分化过程中,2,4-D浓度为2.5mg/L+TDZ浓度为3.5mg/L时出现明显的嫩芽。该试验获得冀黍2号愈伤诱导及再分化的最适条件,可为糜子再生体系的构建提供参考。     

苦糖果愈伤组织诱导与不定芽分化研究

[目的]建立苦糖果再生体系,保存种质资源.[方法]以苦糖果种子诱导的幼嫩茎段为外植体,接种在附加6-BA、IBA等不同浓度植物激素和营养物质的培养基上,研究不同培养条件对愈伤组织诱导及不定芽分化的影响.[结果]在不同的培养基、激素种类和激素浓度条件下,愈伤组织的诱导形成有很大差异.相同浓度激素条件下,以MS为基本培养基可诱导出苦糖果愈伤组织,最佳配方为MS+6-BA 0.5 mg/L+IBA 1.0 mg/L,诱导率为76.26％,而1/2MS培养基上无愈伤组织出现.经过愈伤组织的增殖和分化培养,最佳分化培养基为MS+6-BA 1.0 mg/L+IBA 0.05 mg/L,芽分化率达67.40％.[结论]该研究实现了苦糖果愈伤组织诱导并获得再生植株,初步建立起苦糖果植株再生体系.     

不同基因型甘蔗离体培养技术研究

为探讨甘蔗不同基因型的组织培养技术,以ROC22、03-75、02-6和B8品种(系)为试验材料,经过(52±0.2)℃水浴热处理及培养后,筛选出适宜的愈伤组织诱导培养基、愈伤组织分化培养基、芽增殖和苗生根培养基。结果表明:甘蔗在不同培养阶段对激素种类、质量浓度有差异,其中MS+3.0 mg/L 2,4-D+0.1 mg/L NAA培养基对愈伤组织诱导培养较适宜,愈伤组织的分化培养基、增殖培养基分别为MS+2.0 mg/L 6-BA+0.1 mg/L NAA+0.05 mg/L TDZ、MS+2.0 mg/L 6-BA+0.1 mg/L NAA+0.5 mg/L PP333,1/2MS改良+4.0 mg/L NAA+1.0 mg/L PP333培养基为最佳的生根培养基,各甘蔗品种(系)的生根率高,根系粗壮。     

谷子种子愈伤组织的诱导与植株再生

[目的]研究不同激素种类和浓度配比对晋谷21号谷子种子愈伤组织诱导及植株再生的影响,旨在筛选最佳的愈伤组织诱导和分化的激素配比,建立稳定高效的谷子种子再生体系。[方法]以晋谷21号谷子的成熟种子为外植体,研究不同激素种类和浓度配比对晋谷21号谷子愈伤组织诱导及植株再生的影响。[结果]愈伤组织的诱导以MS培养基中附加2,4-D的效果要优于NAA,同时加入适合浓度的6-BA与之配比可以提高愈伤组织的质量,以MS培养基中附加2,4-D 2.0 mg·L~(-1)、6-BA 0.2 mg·L~(-1)时,愈伤组织诱导率最高,达92.86%; 6-BA诱导愈伤组织分化的效果优于ZT,培养基中附加6-BA 1.0 mg·L~(-1)时,愈伤分化率最高,为13.33%;将谷子分化苗转接于MS培养基上可诱导生根。[结论]诱导愈伤组织的最佳培养基为MS+2.0 mg·L~(-1)2,4-D+0.2 mg·L~(-1)6-BA,愈伤组织分化的最佳培养基为MS+1.0 mg·L~(-1) 6-BA。     

山药零余子诱导愈伤组织研究

研究了山药零余子愈伤组织的出愈方式、不同愈伤组织的细胞形态以及不同激素种类和浓度对愈伤组织的诱导效果。结果表明:零余子不同部位诱导出2种不同类型的愈伤组织,其细胞大小和形态差别较大;不同激素种类和浓度对愈伤组织出愈率和分化速度的影响是不同的,以6-BA 2 mg/L+NAA 2 mg/L处理的零余子出愈率最高,分化速度最快。     

甘蔗03-75 品系脱毒苗培育技术研究

为探讨甘蔗脱毒苗的培育技术,以甘蔗03-75 品系为试验材料,经过52（依0.2）益水浴热处理及培养后, 对甘蔗心叶的诱导培养。愈伤组织分化、生根培养基的筛选,以及脱毒苗炼苗尧移栽及病毒检测方法等进行研究。结 果表明：采用热处理结合心叶脱毒的方法能有效去除甘蔗病害,不同培养阶段对激素种类、质量浓度有差异,其中 MS+2,4-D 3.0 mg/L+NAA 0.1 mg/L 培养基对愈伤组织诱导、继代较适宜,MS+ BA 1.0 mg/L + NAA 0.1 mg/L 培养基对 愈伤组织分化效果好,1/2MS 改良+NAA 4.0 mg/L +MET 1.0 mg/L 培养基生根率高、根系粗壮;组培苗通过利用分子 生物学技术（PCR）对甘蔗花叶病及酶联免疫吸附法( ELISA)对甘蔗宿根矮化病进行检测袁结果呈阴性。     

小麦幼穗愈伤组织诱导与植株再生的研究

以 3个小麦品种的幼穗为外植体 ,选用 9种培养基 ,研究了影响小麦幼穗愈伤组织诱导和分化的因素。结果表明 :小麦幼穗愈伤组织诱导和再分化都存在基因型效应 ;外源激素的种类和浓度也是影响小麦幼穗愈伤组织诱导和再分化的重要因素。在愈伤组织诱导中 ,较低的2 ,4-D浓度 ( 0 .5～ 1 .0mg/L)也能达到较好的诱导效果 ,但 2 ,4-D最适宜的使用浓度为2 .0mg/L ,细胞分裂素KT或 6-BA不利于愈伤组织的诱导。     

高羊茅组织培养基的选择

用不同种类的基本培养基及不同浓度2，4-D、6-BA，对本地高羊茅的种子进行愈伤诱导，结果表明：基本培养基种类对愈伤诱导无明显的效果；MS培养基下不同浓度2，4-D、6-BA对高羊茅愈伤诱导时间及出愈率差别很大，以9mg/L效果最佳，愈伤诱导率达70．2％左右；过高浓度2，4-D、6-BA对萌芽和愈伤的形成有负作用；愈伤组织分化以MS-PBA2.0mg/L-NAAO-5mg／L为最佳MS基本培养基，2，4-D浓度以9．0mg／L为最佳，最适合高羊茅愈伤组织诱导的培养基为MS＋9.0mg／L 2，4-D。     

植物生长调节物质对黑果腺肋花楸离体叶片愈伤组织诱导及再分化的影响

在MS培养基中加入不同植物激素,研究黑果腺肋花楸离体叶片愈伤组织的诱导及其再分化。结果表明：单独加入NAA0.5～3.0mg／L可诱导出绿色致密的愈伤组织,并再生出根,其中NAA0.5mg／L处理生根率最高,达90％;单独加入2,4-D0.1-3.0mg／L可诱导出白色疏松的愈伤组织;单独使用BA0.5—3.0mg／L不能诱导出愈伤组织;BA与NAA或2,4-D只有在适当的质量浓度范围内配合使用才能分化出芽,芽分化率最高的处理为BA3.0mg／L＋NAA0.5mg／L,分化率为30％。     

大花海棠再生方法优选及丛芽高效增殖体系优化

以大花海棠带顶芽茎段为试验材料,建立外植体直接诱导组培苗和愈伤组织间接诱导成苗2种途径,通过单因素和完全组合试验,研究不同种类植物激素及其不同质量浓度对愈伤组织诱导、丛芽诱导及组培苗壮苗的影响,筛选最佳再生途径以及最佳培养基。结果表明：外植体通过愈伤组织诱导,再生植株成苗周期较长,但丛芽增殖系数高,组培苗生长健壮,更适合工厂化大规模生产。     

华山松体细胞胚状体诱导研究

以华山松种子成熟胚为材料,在不同培养基上分别用不同种类及浓度的植物激素,进行华山松胚性愈伤组织诱导试验。结果表明：一定激素浓度范围内的LM培养基上,成熟胚可以诱导出胚性愈伤组织,但在对胚性愈伤组织转接培养以促进体胚成熟时,其褐化死亡。     

不同施肥措施对稻田土壤氮素矿化的影响

以甘蔗品种新台糖22和粤糖93-159的愈伤组织和刚分化4周的小苗为试验材料,初步确定了灭草烟在愈伤组织分化阶段和刚分化4周小苗的筛选浓度.结果发现,不同基因型甘蔗的愈伤组织和刚分化小苗对灭草烟的耐受浓度均有差异.综合试验结果,适合灭草烟在新台糖22和粤糖93-159愈伤组织分化阶段的筛选浓度为0.3 μmol/L;适合灭草烟对新台糖22刚分化4周小苗的筛选浓度为0.5 μmol/L,适合灭草烟对粤糖93-159刚分化4周小苗的筛选浓度为1.0μmol/L.     

濒危植物延龄草愈伤组织诱导

为建立延龄草组织培养体系,以延龄草的叶片、茎、根茎为外植体,研究不同种类浓度激素对愈伤诱导和芽分化的影响。结果表明:三种外植体中根茎最易形成愈伤组织,愈伤诱导较好的培养基是1/2MS+1.2mg·L~(-1) BA+0.5 mg·L~(-1) IAA,诱导率为83.3%,芽分化较好的培养基为1/2MS+1.2 mg·L~(-1) BA+0.6mg·L~(-1) IAA,分化率37.5%。     

农杆菌介导冷调节基因（Cbcor15a）遗传转化甘蔗体系的建立

【目的】利用农杆菌介导法,将外源冷调节基因Cbcor15a导入甘蔗愈伤组织,建立快速、高效的甘蔗遗传转化体系,为培育具抗寒性甘蔗品种奠定基础。【方法】以新台糖22号（ROC22）为材料,通过对愈伤组织诱导、分化、生根等培养基进行优化,筛选出外源基因转化甘蔗的适合激素种类与用量、PPT用量、抗生素种类与用量;利用甘蔗转基因二元植物表达载体pCambia1300-Cbcor15a-bar,通过农杆菌介导法将目的基因Cbcor15a导入甘蔗愈伤组织。【结果】当农杆菌菌液OD600为0.4、侵染20 min时有利于愈伤组织分化;甘蔗愈伤组织诱导和分化培养阶段的最佳PPT为0.50mg/L。侵染后在共培养中添加500.00 mg/L抗生素Cef能有效抑制农杆菌,添加300.00 mg/L抗生素Cef能促进愈伤组织分化成苗,添加200.00 mg/L抗生素Cef能促进幼苗生根。MS培养基中添加低量NAA更有利于甘蔗愈伤组织的分化;在促进细胞分裂时KT的效果明显优于6-BA。MS培养基中添加5.00 mg/LNAA和70.00g/L蔗糖能有效促进分化苗生根。利用建立的遗传转化体系可获得286株转冷调节基因Cbcor15a的甘蔗转化植株;选取83株通过PPT抗性筛选后长势良好的转化植株进行阳性检测,其中有4株呈阳性。【结论】利用农杆菌介导的Cbcor15a基因转化甘蔗的遗传转化体系能成功将Cbcor15a基因整合到甘蔗基因组。     

几种细胞分裂素和生长素对杜仲下胚轴离体培养的影响

培养在附加不同种类的激素和不同激素浓度组合的 MS 基本培养基上的杜仲下胚轴切段,能诱导出愈伤组织,但诱导出的愈伤组织的生物产量及芽数不同:1.含0.2mgL~(-1)～2mgL(-1)BA 和2mgL(-1)ZT的 MS 培养基上,外植体诱导出了愈伤组织和芽,而在附加2mgL(-1)KT 的 MS 培养基上,外植体只能诱导出愈伤组织。2.在 MS+8mgL(-1)BA 的培养基上,只有愈伤组织的产生而无芽的分化,说明8mgL(-1)BA 抑制了芽的发生。3.MS+2mgL(-1)BA+0.2mgL(-1)生长素(NAA、IAA、IBA)的培养基,能促进外植体诱导出愈伤组织,也能分化出芽。     

影响羊草愈伤组织分化因素的研究

[目的]探索影响羊草愈伤组织分化及再生的因素,为羊草组织培养及转基因受体系统建立提供理论依据。[方法]选取5种类型羊草种子进行组织培养,研究在愈伤组织继代、分化培养过程中培养基类型、激素种类和浓度、低温处理等因素对分化率的影响。[结果]不同种群的羊草愈伤组织分化率差异极大;在愈伤组织诱导和继代过程中添加2.0mg/L2,4-D有利于羊草胚性愈伤组织再生能力的保持;继代培养时,不同种类培养基对分化率影响不大,低温处理不能提高长时间继代培养愈伤组织的分化率;分化培养时,外源激素对提高羊草分化率作用不大。[结论]影响羊草愈伤组织分化率的因素主要包括种质资源以及诱导和继代过程中的激素浓度。     

胡萝卜再生体系的建立

以胡萝卜直根系为材料，分别研究了不同培养基、不同外植体及培养条件时愈伤组织诱导的影响．以及培养基时愈伤组织分化的影响。结果表明，在试用的6种培养基中．以2，4-D浓度为0．1mg／L时．愈伤组织状态为最佳；尽管以直根系不同部住为外植体均能诱导产生愈伤组织，但以形成层为外植体时诱导的愈伤组织质量为最佳；愈伤组织的诱导宜在黑暗条件下；培养基种类时愈伤组织的分化率影响不大，且主要以胚状体形式出芽。