隐孢子虫卵囊不同计数方法的比较

应用PBS液计数法、孔雀绿染色计数法和3种甘油卵囊原液(甘油∶卵囊原液分别为1∶2,1∶1,2∶1)计数法,对同一样本中牛安氏隐孢子虫卵囊进行了计数和比较。结果表明,孔雀绿染色计数法具有灵敏、特异和易操作等特点,是一种比较好的隐孢子虫卵囊计数方法。     

实验性雏鸡隐孢子虫病治疗试验

评价了交沙霉素、大蒜素、甲硝唑、复方新诺明等４种药物对实验性雏鸡隐孢子虫病的治疗效果．雏鸡感染后第９ｄ起，分组在饲料中添加交沙霉素（８．０ｇ／ｋｇ）、大蒜素（６ＯＯｍｇ／ｋｇ），甲硝唑（４．０ｇ／ｋｇ），复方新诺明（８．６ｇ／ｋｇ），连续５ｄ任鸡采食，结果试验组鸡粪中卵囊数明显低于对照鸡，病鸡症状和眼观病变得到缓解，表明这４种药物对雏鸡实验性隐孢子虫病有一定治疗作用．     

牛隐孢子虫检测技术研究进展

隐孢子虫病是一种世界性的人畜共患寄生虫病,能造成染病哺乳动物出现严重腹泻。现阶段,我国牛感染隐孢子虫的情况十分普遍,并且尚无有效治疗和预防的药物,防控难度很大,严重影响我国养牛业可持续发展。因此,汇总牛隐孢子虫检测技术,以期让从业人员了解牛隐孢子虫检测技术,能够快速准确鉴别隐孢子虫,及时进行防控,降低传播风险。     

不同条件下蔗糖溶液对隐孢子虫卵囊分离纯化效果的比较

[目的]探索以蔗糖溶液作为介质分离纯化隐孢子虫卵囊的最佳条件。[方法]以隐孢子虫感染阳性奶牛粪样为材料,设计5个蔗糖浓度、3个离心时间和3个离心速度进行隐孢子虫卵裳的分离纯化。[结果]蔗糖浓度为1：2．0和1：2．5时,分离出的卵囊总数极显著大于其他3组（P〈0．01）,其中1：2．5组卵囊平均数最大;不同离心时间分离出的卵囊总数在数量上差异均不显著（P〉0．05）,其中离心20min时卵囊平均数最大;不同离心速度分离出的卵囊总数的比较表明,3000r／min得到的卵囊数量最多。[结论]蔗糖浓度为1：2．5、离心速度为3000r／min、离心时间为20min是隐孢子虫卵囊分离纯化的最佳条件。     

交沙霉素等四种药物对雏鸡隐孢子虫病的预防效果

对经口感染(4.0×10~5个/鸡)贝氏隐孢子虫(Cryptosporidium baileyi)卵囊的雏鸡在其饲料中分别添加交沙霉素(4.0g/kg)、复方新诺明(4.9g/kg)、大蒜素(400mgkg/)、甲硝唑(2.0g/ks),任鸡自由采食,连用7d.结果表明,实验鸡潜隐期延长,粪中卵囊数显著降低,体重明显增加,血液学值及血清酶学指标与健康对照鸡无明显差异.由此证明,这4种药物对实验性雏鸡隐孢子虫病有不同程度的预防作用.     

保存在重铬酸钾中的微小隐孢子虫卵囊活性及传染性研究

探索保存在4℃2.5%重铬酸钾(K2Cr2O7)中1～30个月的微小隐孢子虫卵囊(CPO)的活性和对免疫抑制BALB/c小鼠的传染性.通过体外脱囊技术评价卵囊的活性,以BALB/c小鼠为感染模型,通过检测CPO感染小鼠的潜伏期、排卵囊数量和回肠末端绒毛中的隐孢子虫数量来评价卵囊的传染性.结果表明:保存在K2Cr2O7中1～16个月的卵囊出现脱囊;免疫抑制BALB/c小鼠在感染保存1～16个月的卵囊后3～8天开始排出大量的卵囊,且在末端回肠绒毛中寄生有大量的隐孢子虫;卵囊的保存时间与潜伏期之间存在强烈的相关性(R2=0.92).因此,CPO在4℃K2CCr2O7中能保持活性和传染性至少16个月,k2Cr2O7是保存CPO的良好介质.     

安氏隐孢子虫卵囊壁蛋白的原核表达及其免疫原性研究

[目的]验证安氏隐孢子虫卵囊壁蛋白(COWP)的免疫原性,为建立安氏隐孢子虫病免疫学诊断方法奠定基础.[方法]根据GenBank已公布的安氏隐孢子虫COWP同源基因序列(DQ060431)设计引物,克隆COWP基因并构建原核表达载体,经IPTG诱导表达后,采用蛋白印迹法检测其免疫原性.[结果]扩增获得的COWP基因片段为549bp,其序列与GenBank已公布CO WP同源基因序列(DQ060431)的同源性达100％,将其插入pET-32a载体可构建pET-32a-COWP表达载体.重组菌在30℃下经0.5 mmol/L IPTG诱导5h后,其表达形式以可溶性表达为主;NTA-Ni亲和层析柱层析时用200 mmol/L咪唑洗脱液洗脱,即能得到纯化的重组蛋白,重组蛋白分子量约40 kDa.以抗His标签鼠单克隆抗体或鼠抗安氏隐孢子虫高免血清为一抗进行Western blotting检测,均能获得预期的目的条带.[结论]重组COWP蛋白具有良好的免疫原性,可作为安氏隐孢子虫病免疫学诊断的候选抗原.     

安氏隐孢子虫ITS-1基因PCR检测方法的建立

[目的]建立针对安氏隐孢子虫的PCR快速检测方法,为安氏隐孢子虫的检测和分子流行病学调查提供技术支撑.[方法]根据GenBank中安氏隐孢子虫的ITS-1基因序列设计1对特异性引物,建立基于ITS-1基因的PCR方法,并通过特异性试验、敏感性试验、临床检测以及与经典巢式PCR检测方法进行比较等,验证其可行性.[结果]基于ITS-1基因的PCR检测方法能扩增出安氏隐孢子虫的特异条带,而对猪源隐孢子虫、贝氏隐孢子虫、微小隐孢子虫、牛泰勒氏虫、牛巴贝斯虫、伊氏锥虫、食道口线虫的扩增结果均为阴性;将测序结果进行BLAST比对,发现其与GenBank中安氏隐孢子虫的同源性均在99%以上.敏感性最低可检测每克牛粪中5个卵囊;用于检测广西不同地区的1613份牛粪样品时,与经典巢式PCR检测方法相比,发现两者的阳性检出率均为11.72%,且吻合率达100%.[结论]安氏隐孢子虫ITS-i基因PCR检测方法具有快速、敏感、特异的特点,适用于安氏隐孢子虫的检测和分子流行病学调查分析.     

贝氏隐孢子虫生活史的超微结构研究

本文利用透射电镜观察了樱桃谷鸭贝氏隐孢子虫人工感染石歧杂鸡后法氏囊虫体生活史的超微结构。结果表明：各期虫体，除裂殖子，子孢子或小配子体，均寄生于微绒毛包围形成的带虫空泡内，但未与上皮细胞浆接触。在虫体和上皮细胞间存在附着带和营养器。成熟裂殖体具有８个或４个裂植子，孢子化卵囊具有４个子孢子。裂殖子前端有顶泡，锥体前环，锥体，棒状体和微线。后端有致密体，粗面内质网，高尔基体和细胞核。但没有发现线粒体。     

猪圆环病毒检测方法的研究进展

综述了国内外检测猪圆环病毒的各种方法,包括病毒检测、病毒抗体检测等,便于全面了解猪圆环病毒的研究进展.     

贝氏隐孢子虫在鸡胚绒毛尿囊膜上发育过程的研究

 借助微分干涉显微镜（NIC）对贝氏隐孢子虫（C. Baileyi）在鸡胚CAM上的发育过程进行了研究。整个发育周期为96小时，全部发育过程包括：脱囊 — 裂殖生殖 — 配子生殖 — 孢子生殖，共4个阶段。裂殖生殖共产生3代裂殖体，在第Ⅰ、Ⅲ代裂殖体中分别含有8个裂殖子，在第Ⅱ代裂殖体中含有4个裂殖子。孢子化过程在CAM内胚层上皮细胞表面的带虫空泡内完成，并产生薄壁型和厚壁型两种卵囊。首次提出虫体具有群体寄生现象和同步发育特征；描述了C. Baileyi的运动期虫体离开母体和发育为滋养体的动态变化过程；应用由粪便中纯化的卵囊直接感染鸡胚成功 。并用37℃水浴脱囊，脱囊率达60%左右，表明温度对隐孢子虫的脱囊具有重要作用，无需胰酶和牛胆酸钠的参与。动物回归试验表明：C. Baileyi不能经胚胎途径造成感染，在CAM上发育的C. Baileyi卵囊对雏鸡具有较强的感染性。     

白浆土腐殖质测定方法的比较研究

白浆土含有的五种形态 Zn 中,RES—Zn 占85%以上,含量顺序依次为:RES—Zn>OM—Zn>EXC—Zn>R_2O_3—Zn>Ca—Zn。各种形态 Mn 的含量顺序为:R_2O_3—Mn>RES—Mn>OM—Mn>EXC—Mn>Ca—Mn。R_2O_3—Mn 平均占 Mn 总量的37%,可能与频繁的土壤氧化还原过程有关。Mn 在土壤中的变化、移动、淀积和分布主要受土壤水分的变化—氧化还原过程所控制。从养分观点看,Zn 和 Mn 的有效态的含量都较高,可以大致满足植物的需要,但是否由此引起的离子颉抗作用妨碍 Fe、Ca 及 P 等的吸收,尚有待进一步研究。     

设施土壤盐分积累及防治措施研究进展

就国内外学者对设施（温室、大棚）土壤盐分积累问题的现状、成因、危害及防治措施的研究现状作一介绍，旨在为保护地蔬菜生长发育创造良好环境条件提供理论依据和方法。     

动物转基因技术及其研究进展

本文简述了转基因动物技术的发展、现状和转基因动物的技术原理,介绍了显微注射法、反转录病毒法、精子载体法、胚胎干细胞法和体细胞核移植法制作转基因动物以及转基因动物的鉴定方法.     

神经干细胞的研究进展

神经干细胞广泛存在于胚胎及成年哺乳动物神经系统中.本文就近年来神经干细胞的研究进展作一简要综述.     

奶牛碳水化合物营养的研究进展

碳水化合物是奶牛的重要营养物质，是奶牛能量和脂肪贮备的主要原料。本文主要参考国内外研究成果，系统论述了碳水化合物谷物类淀粉饲料的营养、乳牛饲料的物理特性、NDF与CF、Pe NDF及其饲喂量，以期引起关注并推动我国对碳水化合物营养的深入研究。