鸡柔嫩和巨形艾美尔球虫混合感染试验

鸡柔嫩和巨形艾美尔球虫混合感染试验陶建平符敖齐（扬州大学农学院动医系扬州２２５００９鸡球虫病的病原体有９种,对鸡的致病性不同,其中柔嫩艾美尔球虫的致病性最强,巨形艾美尔球虫的致病性中等,这些已有许多学者进行了广泛的研究,但这两种球虫混合感染的致病性研...     

柔嫩艾美尔球虫郑州株的抗药性研究

柔嫩艾美尔球虫郑州株的抗药性研究宁长申张龙现许兆孟王志祥武爱梅（河南农业大学牧医工程学院，郑州４５０００２）柔嫩艾美尔球虫病是对鸡危害很大的原虫病，暴发该病的雏鸡群，死亡率可达４０％～８０％以上；耐过的病鸡，生长受阻，饲料利用率降低，常给养鸡业造成很...     

柔嫩艾美尔球虫和巨形艾美尔球虫混合感染致病性研究

材料和方法１．试验动物ＡＡ肉鸡，购自江苏省家禽研究所，出壳后运回实验室饲养在杀灭卵囊的笼具中至１５日龄，经数次粪检未见卵囊后供试验。２．球虫卵囊为本教研室分离鉴定的纯种柔嫩艾美尔球虫和巨形艾美尔球虫孢子化卵囊，４℃保存。３．试验分组挑选体况相近的１５日龄ＡＡ肉鸡５０羽，分成５组。第１组为不感染对照组；第２组为单种球虫感染组，每羽经口接种柔嫩艾美尔球虫孢子化卵囊１万个；第３、４和５组为混合感染组，每羽分别同时感染柔嫩艾美尔球虫和巨形艾美尔球虫孢子化卵囊：０．５＋５万、１＋１０万和２＋２０万个。４．…     

球虫散防治鸡柔嫩艾美尔球虫病试验

试验观察了中药制剂球虫散分别以0．5％、1％和2％添加于饲料中的抗鸡柔嫩艾美尔球虫效力，结果发现将球虫散按1％以上添加于饲料中其抗球虫指数达到180以上，具有高效抗球虫作用。由于中药具有毒性低、残留少等优点，在防治鸡球虫病方面具有很好的应用前景。     

球虫散防治鸡柔嫩艾美尔球虫病试验

本试验观察了中药制剂球虫散分别以0.5%、1%和2%添加于饲料中的抗鸡柔嫩艾美尔球虫效力,结果发现将球虫散按1%以上添加于饲料中其抗球虫指数达到180以上,具有高效抗球虫作用,由于中药具有毒性低、残留少等优点,在防治鸡球虫病方面具有很好的应用前景。     

中药抗柔嫩艾美尔球虫机制研究

根据中兽医理论和鸡球虫病的特点，用纯中药组方，经组方药效筛选试验，选用抗球虫效果最佳的组方进行抗球虫机制研究，结果表明，所选中药组方具有明显的抑制未孢子化柔嫩艾美尔球虫卵囊的成熟，对孢子化孵囊具有杀灭作用，并且使外周血液中淋巴细胞尤其是Ｔ淋巴细胞增多，提高免疫器官中Ｔ和Ｂ淋巴细胞的数量和活性，从而提高机体的免疫能力，证明了该组具有高效抗球虫效果。     

抗球虫中药方剂对柔嫩艾美尔球虫感染鸡的疗效研究

为研究中药方剂对鸡感染柔嫩艾美尔球虫的疗效,试验将80只AA肉鸡随机分为4组,除空白对照外,其余各组经口感染混合孢子化球虫卵囊;第3组按5%剂量拌料添加中药,第4组按0.06%的比例拌料添加磺胺氯吡嗪钠。试验中药方剂抗球虫指数(ACI)为167.4,属中效抗球虫药。结果表明,该中药方剂可以用于鸡球虫病的防治。     

感染柔嫩艾美尔球虫的雏鸡血清蛋白醋膜电泳分析

用E .tenella卵囊感染雏鸡 ,通过醋酸纤维薄膜电泳检测 5种血清蛋白百分含量的变化。分别在感染后 3d和 7d进行采血检测。结果如下 :试验组的白蛋白 (% )在感染后 7d显著低于对照组 (P <0 0 5 ) ;试验组的α1 球蛋白 (% )在感染后 7d比在3d显著下降 (P <0 0 1) ;试验组的γ球蛋白 (% )在感染后 7d极显著高于 3d和对照组 (P <0 0 1)。α2 球蛋白 (% )和β球蛋白(% )在组间和组内无明显差异     

鸡感染柔嫩艾美尔球虫后某些血清生化指标变化的研究

23日龄AA鸡36只均分为3组，第一组和第二组分别经口感染E.tenella卵囊35万／只和7万／只，第三组为对照组，对病鸡10项血清生化指标进行检测，结果如下：（1）血清葡萄糖含量在感染后5天（5天）和8天与感染前（0天）无显著差异（P＞0．5）。（2）血清总蛋白、白蛋白、甘油三酯的含量，天冬氨酸氨基转移酶、酸性磷酸酶的活性在5天均显著低于0天（P＜0．5），第一组所降的幅度较第二组大，其中总蛋白和甘油三酯含量在两组间的差异达到显著水平（P＜0．5）；甘油三酯含量和磷酸磷酸酶活性在8天继续下降，其他指标在8天都有不同程度回升。（3）两感染组的碱性磷酸酶活性和第一组的血清尿酸含量在5天显著高于0天（P＜0．5），到8天又回落。第二组尿酸含量在0天、5天和8天之间无显著差异。（4）球蛋白含量在5天和8天均显著高于0天（P＜0．5）。（5）胆碱酯酶活性在第一组的8天显著高于0天和5天（P＜0．5），在第二组的0天、5天和8天之间无显著差异     

柔嫩艾美尔球虫裂殖子免疫原性的研究

本文评价了柔嫩艾美尔球虫第二代裂殖子的免疫原性。试验采用弗氏完全佐剂乳化的裂殖子抗原及从组织中分离得的活游离殖子，以不同剂量的不同时间接种健康小鸡，随后用同源球虫进行攻击。效果评价指标为：（１）比较各抗原组的鸡只死亡率及盲肠病变记分；（２）各抗原组鸡只的增重差异。结果表明，柔嫩艾美尔球虫第二代裂殖子抗原不能刺激鸡体产生保护性免疫力；具有活力的裂殖子接种于健康鸡盲肠能诱发部分免疫力，但较自然感染者为     

柔嫩艾美耳球虫裂殖生殖阶段超微结构的研究

利用透射电镜对柔嫩艾美耳球虫（Eimeria tenella)裂殖生殖阶段的超微结构进行了观察描述。其第二次裂殖生殖方式为外裂殖生殖，裂殖子侵入宿主细胞后，裂殖子逐渐变圆形成裂殖体，此过程中裂殖子的棒状体首先消失，引后锥体和极环消失、最后微浅、淀粉颗粒和折光体消失。裂殖体长大后，细胞膜下陷，将裂殖体分成几个部分，随后裂殖体进行核分裂成多核裂殖体，此后在靠近细胞核处细胞膜加厚外突，临近部位的细胞膜凹陷，同时近突起部位内膜复合体加厚形成极环，随着时间的推移逐渐形成幼稚裂殖子，幼稚裂殖子后部与残体相连，此过程中裂殖子的锥、极环、微线、棒状体、淀粉颗粒、折光体依次逐渐形成。裂殖子成熟的标志为从残体脱离，裂殖子的膜下微管24根纵向贯穿裂殖子直达顶端和极环相连，裂殖子内部由锥体、锥体前环1、锥体前环2、极环、微线、线粒体、折光体和3－多个棒状体等组成。     

五种抗球虫药防治鸡E．tenella的疗效对比试验

挑选体况相近的21日龄伊莎公鸡210羽和罗斯公鸡70羽，在人工感染E.tenella下，对氯嗪苯乙腈（diclazuril）、常山酮（halofuginone）、氯羟吡啶（clopidol）、马杜拉霉素（maduramicin）和盐霉素（salinomycin）5种抗球虫药，进行了3批防治鸡E.tenella疗效对比试验，以抗球虫指数（ACI）作为疗效的综合评判指标。结果显示各种药物的ACI分别为，氯嗪苯乙腈195.52,195.29,192.74；常山酮200.60,199.04,194.45；氯羟吡啶179.64，174.42,167.93；马杜拉霉素194.23,194.23,198.89；盐霉素167.32,170.95,164.82；用于对照的感染不用药组的ACI为126.50，130.79和93.31。氯嗪苯乙腈、常山酮和马杜拉霉素抗该球虫的效果非常好，其ACI均超过190，氯羟吡啶和盐霉素效果次之，其ACI在160-180之间。     

柔嫩艾美耳球虫氯嗪苯乙氰抗性株与氯羟吡啶抗性株的实验室诱导

在药物浓度递增的情况下，经过10次传代，诱导出对1．25mg/kg氯嗪苯乙氰产生抗花药性的E.tenella虫株，初始诱导浓度为0．07mg/kg；经过6次传代，诱导出对150mg/kg氯羟吡啶产生抗药性的E.tenella虫株，初始诱导浓度为75mg/kg，低浓度（0．125mg/kg)氯嗪苯乙氰即具有高效抗球虫作用，在诱导过程中，E.tenella一旦对浓度（0．07mg/kg,0.125mg/kg)氯嗪苯乙氰产生了较为稳定的抗药性，诱导过程便进行得很快，一步一个台阶，即于虫的抗药性突破某一阈值后容易对高一级浓度的药物产生抗药性。     

柔嫩艾美耳球虫对四种抗球虫药的交叉抗药性试验

为了测试柔嫩艾美耳球虫的４种抗药虫株（抗地克珠利、抗拉沙里菌素、抗盐霉素和抗克球粉虫株）对４种抗球虫药（地克珠利、拉沙里菌素、盐霉素和克球粉）的敏感性进行了本试验。结果表明：柔嫩艾美耳球虫地克珠利抗药虫株对拉沙里菌素、盐霉素和克球粉均表现敏感,拉沙里菌素抗药虫株、盐霉素抗药虫株和克球粉抗药虫株对地克珠利也表现为高度敏感,因此,柔嫩艾美耳球虫对地克珠利与拉沙里菌素、地克珠利与盐霉素、地克珠利与克球粉３组药物不存在交叉抗药性。     

杀球灵对柔嫩艾美耳球虫作用的研究

本文报道了杀球灵(Diclazuril)对鸡柔嫩艾美耳球虫E.tenella的杀灭作用、作用峰期及停药后作用持续时间。以1ppm的推荐剂量混于饲料,分别于感染前2天、感染当天、感染后1天开始饲喂,对经口一次人工感染8×10~4/只柔嫩艾美耳球虫卵囊的鸡有显著的保护作用。试验鸡不出现血便、盲肠组织学检查及粘膜刮取物镜检均不见合子及卵囊,感染后2天给药则其抗球虫作用显著降低。故可认为杀球灵作用峰期是子孢子和第一代裂殖体阶段。停药后其抗球虫作用很快减弱或消失。     

鸡柔嫩艾美耳球虫广西株的分离与鉴定

目的建立一种简单、实用的单卵囊分离方法，并对一株广西柔嫩艾美耳球虫进行分离。方法采用电泳制胶槽来制作琼脂块进行球虫单卵囊的分离，单卵囊实验感染9只1日龄雏鸡，感染后收集粪便，用饱和盐水漂浮法进行卵囊检测。纯种卵囊经口感染10只1日龄雏鸡，观测卵囊寄生部位、最短孢子化时间，以及其潜在期和排卵高峰期。结果2只雏鸡粪便中检出卵囊，单卵囊感染成功率为22％。通过对其中一株球虫的研究，根据其卵囊的形状、大小、寄生部位、潜在期、卵囊最短孢子化时间、排卵高峰期等生物特征，鉴定该株球虫为柔嫩艾美耳球虫（Eimeria tenella）。结论本研究成功建立一种单卵囊分离技术，可作为球虫单卵囊分离的常规方法。     

药物对柔嫩艾美尔球虫内生阶段超微结构影响的研究

本文对柔嫩艾美尔球虫(Eimeria tenella)在鸡体内正常发育的超微结构和分别用三种抗球虫药物处理情况下超微结构的变化进行了观察和比较研究,注意到125ppm尼卡巴嗪(Nicarbazin)能引起裂殖生殖阶段的滋养体或初生裂殖体及裂殖子的线粒体、内质网等膜结构系统和核的异常变化;168ppm磺胺喹恶啉(SQ)对滋养体、初生裂殖体及裂殖子、大配子和卵囊壁的形成均有影响,对裂殖生殖阶段的影响主要表现为核膜的增生复制等一系列核的异常变化;对配子生殖阶段的影响表现为Ⅰ型和Ⅱ型卵囊壁形成颗粒(WFB_1和WFB_2)的异常变化;80ppm盐霉素(Salinomycin)对上皮内淋巴细胞(IEL)中的子孢子及粘膜中成熟裂殖子的影响表现为表皮的分离或破裂及胞浆内微线粒(MN)和多糖颗粒(PG)等的轮廓模糊。由药物引起的其他一些超微结构的异常变化也作了观察和描述。     

柔嫩艾美耳球虫的抗原分析

本文采用十二烷基硫酸钠－聚丙烯酰胺凝胶电泳，免疫印渍技术，用抗柔嫩艾美耳球虫抗体分析了第二代型殖子、子孢子和未孢子化卵囊的蛋白质。ＳＤＳ－ＰＡＧＥ电泳银染表明第二代裂殖子主要蛋白质为：１７．６ＫＤ，２９．９ＫＤ，３８．９ＫＤ和５３．７ＫＤ，但用抗Ｅ．ｔｅｎｅｌｌａ抗体免疫印渍法检测出的主要抗原为：７８．０ＫＤ，８３．２ＫＤ和９５．５ＫＤ，这说明并不是含量高的蛋白质就是产生抗体的抗原；子孢子蛋白质含     

柔嫩艾美耳球虫早熟株免疫剂量研究

为了确定柔嫩艾美耳球虫（Eimenatenella）早熟株合适的免疫剂量,本文设立7个早熟株免疫攻虫组、1个不免疫攻虫组和1个不免疫不攻虫组,免疫组的免疫剂量为孢子化卵囊100、200、400、600、800、1000和2000个／羽,经嗉囊感染,7日龄首次免疫,14日龄以同等剂量进行第二次免疫,21日龄以8×10^4个／羽的同源母株进行攻虫,28日龄结束试验,以存活率、增重、肠道病变记分、血便数量、卵囊减少率为观测指标。对免疫保护效果较好的3个免疫剂量进行重复试验,同时设置商品化球虫疫苗对照组,免疫方法、试验周期、试验指标同第一批试验。结果显示：攻虫后,不免疫攻虫组出现5％死亡,而各免疫组来出现死亡;各免疫组卵囊减少率在61．57％～69．52％;200～2000免疫组的增重与不免疫不攻虫组差异不具备显著统计学意义（P〉0．05）;600～2000免疫组的肠道病变记分和血便数量均明显少于不免疫攻虫组（P〈0．05）。用600、800和1000进行重复试验,三个免疫组攻虫期间均来出现死亡,而不免疫组和疫苗对照组均出现5％死亡;三个免疫组的增重均明显高于不免疫攻虫组和疫苗对照组（P〈0．05）;早熟株免疫组的肠道病变记分和血便数量明显低于不免疫攻虫组（P〈0．05）,而疫苗对照组与不免疫攻虫组的相当（P〉0．05）;卵囊减少率在66.30％-78．75％,高于疫苗对照组的51．82％。结果表明,该柔嫩艾美耳球虫早熟株保持了良好的免疫原性,不同免疫剂量均能诱发鸡产生免疫保护力,其中600、800和1000个／羽的免疫效果均优于疫苗对照组,可考虑以600个／羽作为该早熟株在疫苗制备中的推荐免疫剂量。