小型猪特异性麻醉颉颃剂对小型猪肝肾功能的影响

为研究小型猪特异性麻醉颉颃剂对小型猪肝肾功能的影响,以复合麻醉剂(XFM)麻醉的中国试验用小型猪为试验模型,采用小型猪特异性麻醉颉颃剂进行催醒,检测催醒过程中血清谷草转氨酶(GOT)、谷丙转氨酶(GPT)、碱性磷酸酶(ALP)、尿素氮(BUN)、肌酐(CREA)的变化。结果发现:不同时间点小型猪血清中各项指标与麻醉前相比,差异不显著(P>0.05),均在生理范围内波动。表明临床剂量的XFM特异性麻醉颉颃剂对小型猪肝肾功能无明显影响。     

小型猪特异性麻醉颉颃剂对小型猪血清一氧化氮一氧化氮合酶丙二醛超氧化物歧化酶的影响

本试验旨在观察小型猪特异性麻醉颉颃剂对小型猪的氧化损伤程度,及对小型猪特异性麻醉剂(XFM)的特异性颉颃效果。选用中国试验用小型猪14头,体重50kg左右,随机分为试验组和对照组,每组7头,均使用XFM肌肉注射进行麻醉,试验组使用小型猪特异性麻醉颉颃剂进行催醒,对照组则注射等量生理盐水,观察催醒效果,并检测血清中一氧化氮(NO)、一氧化氮合酶(NOS)、超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)浓度。结果表明,小型猪特异性麻醉颉颃剂后缩短了各项生理反射(夹耳反射、眼睑反射、痛觉等)的恢复时间(P0.05);血清MDA及SOD呈现无规则变化,且变化趋势不明显(P0.05),血清NOS及NO在注射XFM 30min后极明显降低(P0.01),然后逐渐回升,60min后恢复正常,差异不显著(P0.05)。表明小型猪特异性麻醉颉颃剂能够很好的拮抗XFM麻醉效果,产生较快的苏醒效果,在催醒过程中对小型猪没有产生明显的过氧化损伤,临床安全性较好。     

小型猪特异性麻醉颉颃剂对XFM麻醉下大鼠海马c-jun基因mRNA转录的影响

本试验旨在研究小型猪特异性麻醉颉颃剂对小型猪特异性麻醉剂(XFM)麻醉下大鼠海马脑区c-jun基因mRNA转录的影响,藉以探究其催醒机制.90只成年SD大鼠被随机分成XFM麻醉组、XFM麻醉+生理盐水组、XFM麻醉+小型猪特异性麻醉颉颃剂组,每组分为5个不同采样时间点的亚组.采用实时荧光定量PCR技术检测样品中c-jun基因mRNA转录量.结果显示,XFM麻醉诱导大鼠海马脑区c-jun基因mRNA转录,各时间点海马脑区c-jun基因mRNA转录与0 min比较显著升高(P＜0.01),XFM麻醉大鼠腹腔注射生理盐水后各时间点海马脑区c-jun基因mRNA转录与XFM对照组间无显著差异(P＞0.05),注射小型猪特异性麻醉颉颃剂后抑制了XFM诱导大鼠海马c-jun基因mRNA的转录,与XFM对照组比较差异显著(P＜0.01或P＜0.05).结果表明,小型猪特异性麻醉颉颃剂抑制了XFM麻醉诱导大鼠海马脑区c-jun基因mRNA的转录,这可能与小型猪特异性麻醉颉颃剂催醒机制相关.     

3种复合麻醉剂对小型猪心电图的影响

通过对麻醉过程中的心电图进行监测来比较3种复合麻醉剂对小型猪心电图的影响.将中国实验用小型猪分成3组,每组6头,第一组肌肉注射小型猪复合麻醉剂(XFM);第二组氯胺酮和安定联合肌肉注射;第三组速眠新Ⅱ和戊巴比妥钠联合肌肉注射,在麻醉后对心电图进行动态监测.氯胺酮组和速眠新Ⅱ组中的动物心电图波形发生了明显变化,XFM组动物在整个监测过程中未出现波形异常.3种药物麻醉后小型猪的心电图都发生了改变,与氯胺酮复合麻醉剂和速眠新Ⅱ复合麻醉剂相比,XFM对小型猪心电图影响轻微,安全性较高.     

小型猪特异性麻醉颉颃剂对小型猪血浆RAAS的影响

为了研究小型猪特异性麻醉拮抗剂对小型猪血浆肾素-血管紧张素-醛固酮系统(RAAS)的影响,将14头中国实验用小型猪,随机分为单纯麻醉组(X/S组)和麻醉-催醒组(X/W组),肌肉注射小型猪特异性麻醉剂(XFM),记录麻醉前及麻醉后5 min、10 min、20 min、30 min无创血压和心率(HR);麻醉后30 min即刻,麻醉-催醒组肌肉注射小型猪特异性麻醉颉颉抗剂,单纯麻醉组肌肉注射相同量的生理盐水,并记录麻醉后32 min、35 min、40 min、60 min、90 min、120 min小型猪的无创血压及心率(HR),并于以上时间点采取前腔静脉血样。采用ELISA方法测定小型猪血浆中RAAS含量,并分析它们与心率和血压之间的相关性。结果显示,与对照组相比,在肌肉注射小型猪特异性麻醉颉颃剂后,无创血压、HR均明显的升高(P<0.01或P<0.05);小型猪血浆血管紧张素(AⅡ)浓度发生明显变化(P<0.05);血浆AⅡ的浓度与HR呈现显著负相关(P<0.05)。表明血浆中R-A-A-S参与了小型猪血流动力学变化的调节。     

小型猪特异性麻醉颉颃剂对XFM麻醉大鼠不同脑区去甲肾上腺素和5-羟色胺的影响

为探讨去甲肾上腺素和5-羟色胺在小型猪特异性麻醉颉颃剂催醒过程中的作用,40只Wistar大鼠随机均分为单纯麻醉组和麻醉-催醒组。这两组又随机均分为恢复翻正反射即刻和恢复直线爬行即刻2个小组。采用高效液相色谱法检测麻醉大鼠不同脑区去甲肾上腺素和5-羟色胺含量变化。结果显示,注射颉颃剂后,麻醉大鼠各脑区内去甲肾上腺素呈现升高趋势,5-羟色胺呈现降低的趋势,与大鼠苏醒过程行为学变化基本吻合。研究表明小型猪特异性麻醉颉颃剂催醒作用可能与大脑皮层、丘脑内去甲肾上腺素和5-羟色胺的变化有关,这可能是XFM麻醉与催醒的靶位之一。     

小型猪复合麻醉颉颃剂对大鼠各脑区p-p38蛋白及c-myc mRNA表达的影响

旨在研究小型猪复合麻醉颉颃剂对大鼠不同脑区p-p38蛋白及c-myc mRNA表达的影响,探讨小型猪复合麻醉颉颃剂的催醒机制。将18只大鼠随机分为C组(对照组)、J组(麻醉颉颃剂组)。J组又分为2个亚组,即J1组(注射小型猪专用复合麻醉颉颃剂5min)、J2组(注射小型猪专用复合麻醉颉颃剂1h)。各组大鼠到达相应的时间点后断头处死,分离大脑皮层、小脑、海马、脑干和丘脑,用Western blot的方法检测p-p38蛋白的表达量,实时荧光定量PCR方法检测c-myc基因mRNA的转录量。试验结果显示大鼠大脑皮层、丘脑和脑干的p-p38蛋白和c-myc mRNA的相对表达量显著升高,而小脑和海马的p-p38蛋白和c-myc mRNA的相对表达量显著降低。综合试验结果,小型猪复合麻醉颉颃剂能够影响p-p38蛋白和c-myc mRNA的表达,这可能是其产生催醒作用的机制之一。     

三组麻醉药物对小型猪麻醉效果的比较

本试验将小型猪特异性麻醉剂(XFM)、氯胺酮复合安定及速眠新Ⅱ联合戊巴比妥钠三组麻醉药,对小型猪麻醉效果进行比较,将18头中国试验用小型猪随机分成3组,第一组肌肉注射猪小型猪复合麻醉剂(XFM)0.15 mL/kg体重;第二组氯胺酮(8 mg/kg体重)复合安定(1 mg/kg体重),肌肉注射;第三组速眠新Ⅱ0.1 mL/kg体重、戊巴比妥钠10.5 mg/kg体重,联合肌肉注射.试验结果表明,XFM组和速眠新Ⅱ组与氯胺酮组相比对体温和呼吸影响小;XFM组与其他两组比较麻醉诱导时间短,麻醉时间长,苏醒期短;氯胺酮组和XFM组与速眠新Ⅱ组相比麻醉镇痛、镇静、肌松效果好.综合评价XFM组与其他两组比具有对小型猪体温(T)、心率(HR)、呼吸频率(RR)影响小,麻醉时间适中,麻醉效果确实,镇静、镇痛、肌松效果均衡等优点.     

阿替美唑对小型猪特异性麻醉剂诱导大鼠大脑皮质c-jun蛋白表达的影响

研究阿替美唑对小型猪特异性麻醉剂(XFM)麻醉下大鼠大脑皮质c-jun蛋白表达的影响,探讨阿替美唑颉颃XFM催醒大鼠与脑皮质c-jun基因的关系.将78只SD纯种大鼠随机分为XFM对照组、XFM+阿替美唑组、XFM+生理盐水组.采用蛋白质印迹法检测大脑皮质内c-jun蛋白表达量.结果表明,XFM麻醉大鼠大脑皮质内c-jun蛋白表达量逐渐增加,与给药前0 min比较差异显著(P＜0.01或P＜0.05);XFM麻醉大鼠腹腔注射生理盐水,各时间点c-jun蛋白表达与对照组间比较无显著差异(P＞0.05);阿替美唑注射后引起XFM麻醉大鼠大脑皮质c-jun蛋白表达减少,与XFM对照组比较差异显著(P＜0.01或P＜0.05).结果提示,大脑皮质c-jun基因参与了阿替美唑颉颃XFM麻醉作用.阿替关唑抑制XFM诱导大鼠大脑皮质c-jun蛋白表达,可能是阿替美唑催醒XFM麻醉大鼠的重要机理之一.     

小型猪特异性麻醉颉颃剂对大鼠不同脑区Na+,K+-ATP酶活性的影响

为探讨Na+,K+-ATP酶在小型猪特异性麻醉颉颃剂催醒过程中的作用,144只Wistar大鼠随机分为对照组和试验组,对照组和试验组再分为早期催醒组、中期催醒组和晚期催醒组.用分光光度法测定不同脑区Na+,K+-ATP酶活性.结果显示,大鼠在不同时期注射小型猪特异性麻醉颉颃剂后,大鼠不同脑区的Na+,K+-ATP酶活性均被激活,且Na+,K+-ATP酶活性的这种变化趋势与大鼠行为学的变化相一致.表明小型猪特异性麻醉颉颃剂催醒作用可能与激活大脑皮层和海马等脑区的Na+,K+-ATP酶活性相关.     

阿替美唑对小型猪特异性麻醉剂诱导大鼠大脑皮质内Fos蛋白表达的影响

研究阿替美唑对小型猪特异性麻醉剂(XFM)麻醉下大鼠大脑皮质Fos蛋白表达的影响,探讨阿替美唑颉颃XFM催醒大鼠与大脑皮质c-fos基因的关系。将72只SD纯种大鼠随机分为XFM对照组、XFM+阿替美唑组、XFM+生理盐水组,每组又按采脑时间点分成4个亚组。采用蛋白质印迹法检测大脑皮质内Fos蛋白表达量。结果表明:XFM麻醉大鼠大脑皮质内Fos蛋白表达量逐渐增加,与给药后10min比较差异显著(P<0.01或P<0.05);XFM麻醉大鼠腹腔注射生理盐水,各时间点Fos蛋白表达量与对照组间比较无显著差异(P>0.05);阿替美唑注射后引起XFM麻醉大鼠大脑皮质Fos蛋白表达量减少,与XFM对照组比较差异显著(P<0.01或P<0.05)。结果提示,大脑皮质c-fos基因参与了阿替美唑颉颃XFM麻醉作用。阿替美唑抑制XFM诱导大鼠大脑皮质Fos蛋白表达,可能是阿替美唑催醒XFM麻醉大鼠的重要机理之一。     

小型猪复合麻醉剂及其特异性颉颃剂交互作用对大鼠不同脑区iNOSmRNA转录的影响

为研究小型猪专用复合麻醉剂（XFM）及其特异性颉颃剂交互应用对大鼠不同脑区iNOS mRNA转录的影响,将48只SD大鼠随机分为生理盐水对照组（C）和XFM与颉颃剂交互作用组（MJ）,MJ组分为早期交互（MJ1、MJ2）和晚期交互（MJ3、MJ4）2个亚组。各组大鼠到达预定时间点后分别采取脑组织,应用实时荧光定量PCR技术检测各组织中iNOS mRNA表达量。结果显示,XFM及其特异性颉颃剂交互应用时,大脑、小脑、海马、脑干和丘脑中iNOS mRNA转录均受到显著抑制（P〈0.01）,虽能逐渐回升,但在试验选取时间点内只有小脑与海马中iNOS mRNA转录恢复正常。结果表明,XFM及其特异性颉颃剂在交互作用时能够显著抑制中枢神经系统中iNOS mRNA的转录,部分脑区可以完全恢复,这可能与XFM及其特异性颉颃剂交互作用机制有关。     

小型猪特异性麻醉颉颃剂对大鼠脑NO/cGMP信号转导系统的动态影响

为探讨NO/cGMP信号转导系统对小型猪特异性麻醉颉颃剂催醒分子机理的调控,144只Wistar大鼠随机分为对照组和试验组,对照组和试验组再分为早期催醒组、中期催醒组和晚期催醒组。用分光光度法测定脑NOS活性和NO产量,ELISA测定脑cGMP含量。结果显示,小型猪特异性麻醉颉颃剂能明显地激活大鼠相关脑区的NOS活性和NO及cGMP产量,并且大鼠不同脑区NOS活性、NO产量和cGMP含量的变化趋势不仅与大鼠行为学变化相平行,还与不同时期表现出的催醒效果基本吻合。这表明小型猪特异性麻醉颉颃剂的催醒可能与激活特定脑区的NO/cGMP信号转导系统相关。     

Phylogenetic analysis for the Seoul National University (Minnesota) miniature pig by mitochondrial DNA sequence polymorphism

Seoul National University (SNU) miniature pigs are originated from the Minnesota miniature pig. This study was conducted to investigate the maternal origin of SNU (Minnesota) miniature pigs and their phylogenetic relationships by analyzing the mitochondrial DNA (mtDNA) D‐loop (control region) sequence. Two mtDNA D‐loop sequences of the SNU miniature pigs were identified. On an unweighted pair‐group method with an arithmetic mean (UPGMA) phylogenetic tree analysis, the large white was the pig breed closest to the SNU miniature pig, and the pairwise distance analysis showed the same result. While mtDNA sequences of 4 pig breeds which were used to establish Minnesota miniature pig were not known, our result might be different from the history of the Minnesota miniature pig development. In conclusion, we thought that some haplotypes of the Minnesota miniature pig maternally were originated from the Large white pig, or that wild pigs had similar mtDNA sequences to the Large white pig, and all SNU miniature pigs were derived from this colony.     

小型猪作为人类疾病动物模型在生物医学研究中的应用

与啮齿类小型实验动物模型相比,小型猪因其解剖学、生理学、疾病发生等方面与人类极为相似,且价廉、无伦理问题等方面的原因,在生物医学研究领域中具有广阔的应用前景,尤其在人类疾病动物模型制作、新药安全性评价、异种器官移植等领域应用更广.论文主要综述了国内外小型猪作为心血管疾病、消化系统疾病、皮肤烧(烫)伤、口腔疾病、异种器官...     

Production of transgenic and non-transgenic clones in miniature pigs by somatic cell nuclear transfer

Miniature pigs have been recognized as valuable experimental animals in various fields such as medical and pharmaceutical research. However, the amount of information on somatic cell cloning in miniature pigs, as well as genetically modified miniature pigs, is much less than that available for common domestic pigs. The objective of the present study was to establish an efficient technique of cloning miniature pigs by somatic cell nuclear transfer. A high pregnancy rate was achieved following transfer of parthenogenetic (3/3) and cloned (5/6) embryos using female miniature pigs in the early pregnancy period as recipients after estrus synchronization with prostaglandin F2 alpha analog and gonadotrophins. The production efficiency of the cloned miniature pigs using male and female fetal fibroblasts as nucleus donors was 0.9% (2/215 and 3/331, respectively). Cloned miniature pigs were also produced efficiently (7.8%, 5/64) by transferring reconstructed embryos into the uteri of common domestic pigs. When donor cells transfected with the green fluorescent protein (GFP) gene were used in nuclear transfer, the production efficiency of the reconstructed embryos and rate of blastocyst development were comparable to those obtained by non-transfected cells. When transfected cell-derived reconstructed embryos were transferred to three common domestic pig recipients, all became pregnant, and a total of ten transgenic cloned miniature pigs were obtained (piglet production efficiency: 2.7%, 10/365). Hence, we were able to establish a practical system for producing cloned and transgenic-cloned miniature pigs with a syngeneic background.     

荣昌猪和两种小型猪遗传背景的微卫星分析

荣昌猪是我国优良地方品种,巴马香猪和贵州小型香猪为我国独特小型猪品系。本研究采用美国猪基因组协作计划推荐的19个微卫星标记对荣昌猪、荣昌猪B系、巴马香猪、贵州小型香猪及外来猪种大白猪进行了遗传学检测和分析。结果表明:19个微卫星位点在群体中均表现为多态,每位点等位基因数10~23个。5个猪种中荣昌猪B系的遗传多样性最高,荣昌猪次之;2种小型猪的遗传多样性较低,其中巴马香猪的等位基因数(121个)略大于贵州小型香猪(114个),但其遗传多样性指数(平均期望杂合度0.6535±0.0347)小于贵州小型香猪(0.6919±0.0227),反映了巴马香猪较低的基因杂合度和较小的遗传变异;大白猪的遗传多样性最低。从品系的共有等位基因来看,荣昌猪B系基因背景组成中其亲本品系荣昌猪所占比例(30.22%)要大于大白猪(24.37%);大白猪和其他4个猪群体的共享等位基因数均较低(21.24%~25.12%);巴马香猪和贵州小型香猪之间共有等位基因数最高(45.06%)。采用基于遗传距离的NJ法和基于基因频率的最大似然法进行系统聚类,除了大白猪明显为独立分支及荣昌猪B系表现出较远的聚类关系外,其他3个猪种间的聚类有所不同。