B型副鸡嗜血杆菌的分离鉴定

从辽宁某公司鸡场疑似鸡传染性鼻炎的病鸡眶下窦分离到一株副鸡嗜血杆菌，用Page程序和Kume程序对其进行血清型鉴定，确认为B型副鸡嗜血杆菌，这是首次在我国分离到B型副鸡嗜血杆菌。     

一株A型副鸡嗜血杆菌的分离鉴定

从山东省某蛋鸡场发病鸡群中分离到一株细菌,经培养特性观察、生化试验、V因子生长试验、致病性试验和PCR试验,证实分离菌为一株致病性副鸡嗜血杆菌,血清型鉴定该菌为A型。药物敏感性试验表明分离菌对头孢噻肟、头孢曲松、丁胺卡那霉素高度敏感,对硫酸新霉素、强力霉素中度敏感,对磺胺间甲氧嘧啶钠、环丙沙星、庆大霉素耐药。     

副鸡嗜血杆菌的初步分离与鉴定

从某鸡场发病鸡中分离出一株细菌，经过病原的分离培养、生化鉴定试验、动物回归试验等实验室方法，初步鉴定为副鸡嗜血杆菌。通过药敏试验筛选敏感药物，对该病的防治起到了积极的效果。     

B型副鸡嗜血杆菌北京株的分离与鉴定

鸡传染性鼻炎(IC)是由副鸡嗜血杆菌引起的一种上呼吸道传染病，本病主要影响蛋鸡的产蛋(下降10％～40％)和肉鸡的肉质，给养鸡业造成较大的经济损失。     

浙江地区副猪嗜血杆菌分离株的生物学特性

为明确浙江地区副猪嗜血杆菌(HPS)病的流行特点,提高对该病的免疫防控能力,本研究对HPS分离株进行生物学鉴定。结果表明,HPS在含有2%小牛血清和16μg/mL NAD的TSB培养基中生长良好,在TSB液体培养基中培养16 h～18 h后,活菌数达到峰值;6个分离株对小鼠的LD50分别为2.03×109、5.3×109、1.34×1010、7.0×109、1.17×1010和1.62×109;可在感染HPS豚鼠的心血中分离到该菌;ERIC-PCR指纹图谱分析结果表明,4个分离株与4型、5型和9型标准菌株图谱一致,但有2个分离株与15个血清型标准菌株图谱不吻合。研究提示浙江地区内HPS的散发、流行的原因可能是由于该细菌血清型复杂性造成的。     

副鸡嗜血杆菌分离株致病性和生长特性试验

为研究副鸡嗜血杆菌河北省分离株W菌株致病性及生长特性,以不同剂量对80日龄公鸡进行致病性试验.对W菌株16 h培养物进行100倍稀释,采用微量点板计数法在不同培养时间进行细菌计数以绘制生长曲线.结果表明,试验鸡接菌量在1.11×104cfu/只时发病率可以达到100%,由生长曲线计算W菌株的世代时间为25.33 min.W菌株可能成为研制优良鸡传染性鼻炎疫苗的候选菌株.     

副鸡嗜血杆菌B型分离株免疫原性的比较和疫苗株的筛选

利用分离自我国不同地区的3株B型副鸡嗜血杆菌菌株及0222标准株分别制作油乳剂灭活疫苗免疫无鸡传染性鼻炎病史的鸡群，通过攻毒保护试验和HI抗体测定，分析比较了其免疫原性，以筛选适用于制备疫苗的菌株。结果表明：不同地区的分离株在致病性和免疫原性上存在-定的差异，TJ-1株疫苗免疫鸡对TJ-1和DL-1株的保护作用可达90％和91．7％，对BJ-1株的保护率为63．6％，具有相对较好的保护作用，目前可以作为疫苗株使用。在各免疫组试验鸡中，0222株和BJ-1株免疫鸡群的血清抗体水平较高，但这可能与血凝抑制试验所采用的抗原是由0222株制备的及BJ-1株在抗原性上可能更接近于0222株有关。DL-1和TJ-1株疫苗免疫鸡的抗体水平都很低，但其免疫保护却要强于0222和BJ-1株疫苗免疫鸡。由此说明B型株因菌株之间免疫原性的差异使得HI抗原的选择难度增加。     

副鸡嗜血杆菌种特异性的核酸探针

副鸡嗜血杆菌种特异性的核酸探针陈小玲Ｊ．Ｋ，Ｍｉｆｌｉｎ张培君Ｐ．Ｊ．Ｂｌｅｃｋａｌｌ（北京市农业科学院畜牧兽医研究所北京，１０００８１）鸡传染性鼻炎（ＩＣ）是由副鸡嗜血杆菌（Ｈｐｇ）引起的呼吸道传染病。其危害主要在于影响鸡的生长和使鸡产蛋率下降。诊...     

副鸡嗜血杆菌在疫苗生产中生长特性的研究

通过测定培养期内副鸡嗜血杆菌C-Hpg-8的种子液活菌数和制苗菌液的活菌数及总菌数，分别绘制了种子液和制苗菌液的生长曲线，计算出C-Hpg-8种子液的世代时间为37.7min.在本试验条件下，C-Hpg-8种子液培养时间不应超过8h，制苗菌液的培养时间应控制在9-11h为宜。     

副鸡嗜血杆菌的分离鉴定及我国鸡传染性鼻炎的流行状况分析

从不同地区免疫失败鸡场的鸡传染性鼻炎疑似鸡体内共分离到19株细菌，经回归试验、PCR等方法鉴定为副鸡嗜血杆菌。又将分离株用血清平板凝集试验、血凝抑制试验和型特异性单抗进行了血清型的鉴定，结果表明分离菌有15株为A型，4株为B型，说明我国鸡传染性鼻炎的流行已经出现了新的特点，在疾病预防和控制中应加以注意。另外大多数鸡场的免疫失败是由于免疫效果不良所致，但也有相当一部分鸡场的免疫失败是由于B血清型的出现引起的。     

鸡副嗜血杆菌(HPG-A221、C668)对10个家系BWEL-SPF鸡胚的感染试验

用鸡副嗜血杆菌国际标准株（HPGA-221、C668）分别接种1-10个家系的BWEL-SPF鸡6日龄鸡胚,观察攻毒后16-30小时鸡胚死亡的情况。结果,第5、7、8家系死亡率为100％;1、4、6家系死亡率为90％;2、3、9、10家系死亡率为80％-85％,10个家系HPG平均死亡率为90.5％。对照组（HWL-SPF鸡胚）平均死亡率为90％。从而评估BWEL-SPF鸡群每个家系对鸡副嗜血杆菌（HPG-A221、C668）的敏感性。     

广西地区副猪嗜血杆菌ERIC-PCR指纹图谱分型研究

为探讨肠道细菌基因间重复序列(ERIC)的聚合酶链反应(PCR)技术用于副猪嗜血杆菌基因分型的可行性,对分离自广西地区不同猪场的22株副猪嗜血杆菌进行ERIC-PCR指纹图谱分型研究.结果发现,22株分离株显示出12种指纹图谱,可以区分无法进行血清分型的菌株.表明ERIC-PCR可适用于对副猪嗜血杆菌进行分子流行病学调...     

两株不同地区副猪嗜血杆菌的分离及分子生物学鉴定

本试验从浙江和河南部分地区的送检的疑似患多发浆膜炎与关节炎猪的病料中分离到2株疑似副猪嗜血杆菌,进行了细菌形态观察、培养特性和生化特性鉴定,根据已报道的副猪嗜血杆菌16SrRNA序列特异性引物进行PCR扩增,得到预期的822bp的基因片断,最终证实为副猪嗜血杆菌。     

副猪嗜血杆菌流行病学调查及两株分离株耐药性和致病性分析

为了解山东地区副猪嗜血杆菌病的流行情况和流行菌株的生物学特性及致病性,将2016-2018年山东省12个地区送检的103个发病猪的病料进行细菌分离,并对疑似菌株进行形态学观察、PCR鉴定及血清型鉴定,对两株流行菌株进行了培养特性观察、生化特性鉴定、药敏试验及致病性研究。最终分离获得29株副猪嗜血杆菌,分离率为28.16%,其中血清型4型和5型最为流行,其次是1型和12型。该病多发于春秋两季,31~50日龄的仔猪感染率最高。两株流行菌株LZ株和LC株均对青霉素类、头孢类等药物高度敏感,LZ株对庆大霉素、卡那霉素等中度敏感,对林可霉素、链霉素不敏感,LC株对庆大霉素、林可霉素等中度敏感,对卡那霉素、链霉素不敏感;生化特性试验结果显示,LC株和LZ株的硝酸盐还原试验、接触酶试验、葡萄糖发酵试验以及果糖发酵试验的结果均为阳性,吲哚试验、氧化酶试验、甘露醇发酵试验的结果均为阴性;动物致病性试验表明LZ株和LC株均具有较强的毒力,最小发病剂量分别为4.5×10^9 CFU和6.0×10^9 CFU。该研究为副猪嗜血杆菌病的防治提供了重要的参考依据。     

2013－2019年贵州省副猪嗜血杆菌分离株耐药性及其演变

试验旨在揭示贵州省副猪嗜血杆菌（Haemophilus parasuis,Hps）的耐药性及其变化趋势,指导Glasser's病临床防控用药,减缓Hps耐药菌株出现。通过K-B纸片琼脂法,检测2013－2019年分离自贵州省9个地区517株Hps对15种常用抗菌药的耐药性,分析不同分离时期和分离地区的菌株的耐药性差异。结果显示,针对15种抗生素分别有14.36%~70.58%的分离菌株表现耐药,其中耐头孢噻呋菌株的比例最低,耐复方新诺明菌株的比例最高;与2013年相比,2019年分离的Hps菌株对13种抗生素的耐药率分别升高了4.52%~324.68%,其中耐头孢噻呋菌株比例上升速度最快,达324.68%,耐链霉素菌株比例上升最慢,仅4.52%,耐土霉素和四环素菌株的比例分别下降2.21%和8.63%,出现负增长。相对于凯里、毕节和兴义地区,安顺、遵义、贵阳地区流行的菌株对头孢噻呋、替米考星、多西环素等在全省范围内耐药菌株比例较低的药物耐药率相对较高,而对复方新诺明、阿莫西林、链霉素等在全省范围内耐药菌株比例较高的药物耐药率相对较低。这一结果说明,贵州省Hps菌株对15种常用药物的耐药性较为严重,且总体呈现上升趋势,不同地区分离株对部分抗菌药的耐药率呈现明显的地区差异性。     

Drug Resistance and Evolution of Haemophilus parasuis Isolates from Guizhou Province During 2013 to 2019

This study was aimed to reveal the trend of drug resistance about Haemophilus parasuis (Hps) in Guizhou province and guide clinical use of Glasser's disease then slow the emergence of drug-resistant Hps strains.K-B slip-agar diffusion method was used to test the 15 common antibiotics resistance of 517 Hps strains isolated from 9 districts in Guizhou province from 2013 to 2019.The drug resistance differences of strains isolated from different time and districts were analyzed.The results showed that 14.36% to 70.58% isolates indicated drug resistance to 15 antibiotics,the proportion of EFT resistant strains was the lowest and SXT resistant strains was the highest.Compared with 2013,the resistance rate of Hps strains isolated in 2019 to 13 antibiotics increased by 4.52% to 324.68%.Among them,the proportion of drug-resistant strains of 13 drugs increased which EFT resistant strains increased at the fastest rate to 324.68% while STR resistant strains slowest rate to only 4.52%.The rate of TET resistant strains showed negative growth which decreased by 2.21% and 8.63%,respectively.Compared with Kaili,Bijie and Xingyi of Guizhou,the strains isolated from Anshun,Zunyi and Guiyang districts showed higher drug resistance rate of EFT,MC and DO which with low resistance in Guizhou province,but lower of SXT,AML and STR which with high resistance in Guizhou province.The results indicated that the resistance of Hps strains to 15 commonly antibiotics in Guizhou province was serious with rising tendency and the resistance rate of certain strains showed obvious differences between different districts.     

华南地区两株副猪嗜血杆菌的生物学特性与致病性研究

本试验旨在对来源于广东省的两株副猪嗜血杆菌的生化特性、血清型、耐药性、生长特性以及毒力和免疫原性进行研究。试验结果表明,两株菌分别为血清4型和5型;两株菌均具有较好的生长能力,培养10 h活菌含量都能达到10⁹以上;其LD₅₀分别是1.52×10⁹ CFU和9.3×10⁸ CFU;分离菌株对喹诺酮类和磺胺类抗生素有较强的抵抗力;免疫试验结果表明,两株菌具有较好的免疫原性。以上试验结果表明,这两株菌可以作为疫苗的基础候选菌株。     

间接法Dot－ELISA检测副鸡嗜血杆菌的研究

本文首次成功地建立了检测副鸡嗜血杆菌（ｈｐｇ）抗原的间接法Ｄｏｔ－ＥＬＩＳＡ。Ｈｐｇ抗原的最低检出量为３．９１×１０￣５ＣＦＵ／ｍｌ。Ｈｐｇ人工感染样本的抗原阳性检出率为：口咽试子９５．５％；鼻窦及眶下分泌物拭子９０．９％。经统计学分析，二者在５％显著水平无显著差异。人工感染后４天及８天口咽拭子的抗原阳性检出率分别为１００％和９５．５％。经统计学分析，二者在５％显著水平无显著差异。Ｈｐｇ自然感染样本的抗原检出率为：口咽拭子８１．７％，鼻分泌物拭子７７．８％，眶下窦分泌物拭子７６．９％。间接法Ｄｏｔ－ＥＬＩＳＡ检测抗原经济、快速、操作简便，有较好的敏感性、特异性和重复性，能有效检出Ｈｐｇ人工及自然感染病鸡的带菌菌况，适合于大规模抗原样本的检测，可以用作疫病早期诊断和进行流行病学调查。     

从野外昆虫体内分离的5株微孢子虫的生物学特性与分子系统发育研究

从广西蚕区的野外昆虫菜粉蝶(Pieris rapae)、桑尺蠖(Hemerophila atrilineata)、斜纹夜蛾(Spodoptera litura)的体内收集到5株对家蚕有一定食下感染力的微孢子虫,通过生物学性状、分子系统发育研究,为其分类鉴定提供依据。来自野外昆虫的5株微孢子虫均具有Nosema属的生物学特性:显微镜下观察形状均呈长卵圆形,与家蚕微孢子虫(Nosema bombycis,Nb)有较明显差异;在生活史的各发育阶段均为双核,以二分裂方式增殖,最后形成双核成熟孢子;与Nb抗血清均产生阳性凝聚反应;超微结构观察均具双核,极丝圈数在12～14圈之间,极丝倾斜角与Nb有差异。根据5株野外昆虫微孢子虫与其它昆虫微孢子虫基于SSU rRNA基因序列构建的系统发育树,以及基于SSU rRNA和rRNA ITS基因序列进行的相似性和遗传距离分析,初步认为5株野外昆虫微孢子虫与家蚕微孢子虫同属异种。     

猪乙型脑炎乳胶凝集试验与血凝抑制试验方法的比较

用血凝抑制试验 (HI)和乳胶凝集试验 (LAT)两种方法检测乙型脑炎弱毒疫苗免疫猪血清 ,结果均呈阳性反应。用LAT对来自 12个猪场的 94份猪血清进行了乙型脑炎病毒 (JEV)抗体检测 ,并与HI进行了对比 ,两种方法检测结果阳性符合率和总符合率分别为 90 .3% (5 6 /6 2 )和 88.3% (83/94 ) ,两种方法检测结果差异不显著 (p >0 .0 5 )。对来自无乙型脑炎的 12头健康猪血清进行检测 ,两种方法检测结果均为阴性。结果表明 ,用LAT与HI检测乙型脑炎结果符合 ,前者更为简便和实用。