巴马拟缨鱼源嗜水气单胞菌分离鉴定及其致病力分析

[目的]明确巴马拟缨鱼暴发性死亡的原因,为该病的临床诊断和科学防治提供参考依据,进而为巴马拟缨鱼健康养殖提供保障.[方法]从病源地采集患病巴马拟缨鱼样本,采用常规的细菌分离纯化方法从心脏、肝脏和脾脏等组织病料中分离优势菌株,经形态特征观察、API 20NE生理生化鉴定及16S rRNA序列和gyrB基因PCR扩增分析后,进行人工感染试验及毒力基因检测以确定其致病力,最后采用K-B药敏纸片扩散法检测其药敏性.[结果]从患病巴马拟缨鱼的心脏、肝脏和脾脏等组织中分离获得1株优势菌株(命名为BM178),综合其形态特征、API 20NE生理生化鉴定谱及分子生物学鉴定结果,可确定为嗜水气单胞菌(Aeromonas hydrophila).经腹腔注射感染BM178菌株后,巴马拟缨鱼的胸鳍、腹鳍和臀鳍基部不同程度出血,肛门红肿,剖检可观察到内脏团有点状出血、肝脏充血、脾脏肿大和肠道充血等症状,与自然发病巴马拟缨鱼的症状基本一致;BM178菌株对健康巴马拟缨鱼的半数致死剂量(LD50)为1.26×102 CFU/g.在BM178菌株中6种常见毒力基因(hly、aer、act、alt、ahp和ahal)的检出率为100.0%,即毒力基因型为hly+aer+act+alt+ahp+ahal+.药敏试验结果显示,BM178菌株对头孢曲松、头孢哌酮、庆大霉素、多西环素、诺氟沙星、复方磺胺甲噁唑和氟苯尼考等7种抗菌药物高度敏感,而对青霉素G已产生较强的耐药性.[结论]嗜水气单胞菌是引起巴马拟缨鱼暴发性死亡的主要病原菌,具有较强的致病性,实际生产中可选用多西环素、复方磺胺甲噁唑或氟苯尼考进行防治.     

温度对光泽黄颡鱼幼鱼呼吸代谢的影响

[目的]为光泽黄颡鱼的养殖结构优化及其运输提供理论依据。[方法]利用静水方法研究温度变化对光泽黄颡鱼幼鱼耗氧率和窒息点的影响,探索鱼类呼吸代谢受环境变化影响的生理机制。[结果]不同体重光泽黄颡鱼幼鱼的耗氧率存在差异,体重较小的鱼的平均耗氧率较高,且白天平均耗氧率高于晚上。在11~29℃温度范围内,光泽黄颡鱼幼鱼耗氧率与温度呈显著的线性正相关,并且呈现曲线上升的趋势,其曲线回归方程为y=0.002 7x2-0.067 4x+0.516 5。光泽黄颡鱼幼鱼窒息点与体重和温度有一定关系。[结论]当温度为23~26℃时,光泽黄颡鱼幼窒息点最低,此时其生理代谢状态最佳,耐氧能力增强。     

温度和体重对南海野生紫海胆(Anthocidaris crassispina)呼吸代谢的影响

采用封闭静水式呼吸装置对紫海胆(Anthocidaris crassispina)的耗氧率和排氨率与温度及体重的关系进行研究,结果表明,温度和体重对紫海胆耗氧率和排氨率有明显影响,且两因子之间存在交互作用。在17~32℃范围内,耗氧率随温度的升高而增加,排氨率则呈现先升高后降低的趋势;相同温度下,随着个体体重的增加,耗氧率和排氨率均下降。22~27℃之间可能存在紫海胆呼吸代谢的转折点,在该温度下,其排氨率最高、代谢速率最快。     

温度和饥饿对中华(鱼旁)(鱼皮)耗氧率的影响

探讨了中华(鱼旁)(鱼皮)在不同温度和饥饿时间下的耗氧率的变化.试验表明:中华(鱼旁)(鱼皮)的耗氧率随着温度的升高而增大.在9:00、19:00时耗氧率达到低峰,而高峰则出现在23:00,温度越高其耗氧率变化越大,在温度为26℃时耗氧率最高;中华螃鲅耗氧率随着饥饿天数的增加耗氧率变化的幅度也相应的变小,耗氧率最大值从第2天的0.160 1 mg/kg·L下降到第17天的0.049 8 mg/kg·L,但是其最小值变化不大.     

温度对吉富罗非鱼呼吸的影响

在10-30℃条件下,测定呼吸室内吉富罗非鱼(Oreochromis niloticus,GIFT)呼吸频率、水体溶解氧、pH、游离二氧化碳以及氨氮的变化。结果表明,吉富罗非鱼耗氧率(Y_cr)和排氨率(R_an)随着温度(t)的升高而增大,线性回归方程分别为Y_cr=0.0038t²-0.0023t+0.0312(R²=0.9549),及R_an=0.0009t²-0.0027t+0.0037(R²=0.9475);氨熵(Q_a)为0.065-0.099(<0.33),蛋白质供能比为5%~30%,表明吉富罗非鱼主要由脂肪和碳水化合物供能。当温度在15~30℃时,随着温度的降低,二氧化碳排放率从0.0684mg/(g·h)下降至0.0114mg/(g·h)。出水pH明显低于进水pH,且进出水口pH的降低幅度随温度升高而增大。试验期间,10~30℃的呼吸商(Q_r)为0.55±0.10(<1),吉富罗非鱼主要进行有氧呼吸。     

温度对豹纹鳃棘鲈幼鱼呼吸代谢的影响

研究了温度为15、20、25、30、35℃时豹纹鳃棘鲈幼鱼的代谢情况,并分析了幼鱼利用蛋白质、脂肪和糖类作为能源物质的供能情况。试验结果表明,在15~30℃范围内,各试验组耗氧率、排氨率和二氧化碳排出率均随温度的升高而升高,且差异显著(P0.05);在15~30℃范围内,各试验组呼吸熵、氨熵、代谢率和排泄率均随温度的升高而升高,35℃时均下降。根据氧氮比的分析结果可知,豹纹鳃棘鲈幼鱼主要利用脂肪和蛋白质供能,且随着温度的升高,脂肪和碳水化合物供能的比例逐渐增大。Q10的变化规律反映出豹纹鳃棘鲈幼鱼的适温范围为15~30℃,且温度显著影响豹纹鳃棘鲈幼鱼的代谢率。     

温度及体质量对黄鳝耗氧率和排氨率的影响

采用静水式研究方法,探讨了不同温度(15、20、25、30、35℃)对7种不同规格黄鳝的耗氧率和排氨率的影响。实验结果表明:温度、体质量对黄鳝的耗氧率和排氨率有显著的影响(P<0.05),但温度和体质量的综合效应对这2个指标没有显著影响(P>0.05);黄鳝的耗氧率(OR)与体质量(W)呈显著的幂函数回归关系OR=aWb。在15～35℃范围内,黄鳝的标准代谢耗氧率变化范围为6～75 mg/(kg·h),耗氧率随温度的升高而升高,随体质量的增加而降低;黄鳝的排氨率变化范围为0.31～6.34 mg/(kg·h),排氨率随温度的升高呈先上升后降低再上升的变化,随体质量的增加而降低。     

体重和温度对中国蛤蜊耗氧率和排氨率的影响

采用室内实验生态学方法研究了不同软体部干重（0．9901g±0．540g、0．5244g±0．0257g、0．2886g±0．0421g）和温度（13、18、23、28℃）对中国蛤蜊Mactra chinensis耗氧率和排氨率的影响。结果表明：温度、个体大小对中国蛤蜊耗氧率影响极显著（P〈0．01）,二者的交互作用均对中国蛤蜊的耗氧率影响显著（P〈0．05）;中国蛤蜊单位体重耗氧率（O）与软体部干重（形）之间呈负相关关系,符合幂函数方程0=αW^-b,其中口的取值为0．695—1．762,平均为1．449,b的取值为0．446～0．587,平均为0．542。温度、个体大小对中国蛤蜊的排氨率影响极显著（P〈0．01）;随着中国蛤蜊个体的增大,其单位体重排氨率（N）逐渐降低;排氨率与其软体部干重呈负相关,它们之间可以用幂函数N=α0W^-b0咖表示。单位体重耗氧率和排氨率与温度（T）、软体部干重（形）满足以下方程：0=0．258＋0．561W＋0．239T（R=0．680,F=19．342,P〈0．01）;N=2．973＋38．361W＋16．897T（R=0．736,F=26．535,P〈0．01）。     

温度和盐度对栉江珧耗氧率和排氨率的影响

[目的]探讨温度和盐度对栉江珧耗氧率（OR）和排氨率（NR）的影响。[方法]设置5个温度梯度和5个盐度梯度,测定温度和盐度对栉江珧OR和NR的影响。[结果]在18～34℃范围内,栉江珧单位体重OR和NR均随温度升高而增加,分别为260．82～585．90μg/（g·h）和26．32～42．19μg/（g·h）,OR和NR与温度的相关方程分别为：ORT=-16．14lt^2＋197．58t＋89．29l（R^2=0．9738）;NRT=-0．6981t^2＋8．4677t＋17．792（R^2=0．9733）：在21～41盐度范围内,栉江珧单位体重OR和NR先随盐度增加而降低,在盐度31时达最小值,然后随盐度增加而升高,其变化分别为：575．82～734．40μg/（g·h）和36．78～54．45μg/（g·h）,0R和NR与盐度之间的相关方程分别为：ORs=37．929s^2一214．27s＋867．6（R^2=0．9872）;NRs=3．5442s^2-19．748s＋62．08（R^2=0．9461）;表明在正常盐度下,贝体能量消耗较低。[结论]温度和盐度对栉江珧OR和NR均有显著影响,     

体重和温度对中国蛤蜊耗氧率和排氨率的影响

采用室内实验生态学方法研究了不同软体部干重(0.9901 g±0.540 g、0.5244 g±0.0257 g、0.2886g±0.0421 g)和温度(13、18、23、28℃)对中国蛤蜊Mactra chinensis耗氧率和排氨率的影响。结果表明:温度、个体大小对中国蛤蜊耗氧率影响极显著(P<0.01),二者的交互作用均对中国蛤蜊的耗氧率影响显著(P<0.05);中国蛤蜊单位体重耗氧率(O)与软体部干重(W)之间呈负相关关系,符合幂函数方程O=aW-b,其中a的取值为0.695¹.762,平均为1.449,b的取值为0.4461.762,平均为1.449,b的取值为0.446⁰.587,平均为0.542。温度、个体大小对中国蛤蜊的排氨率影响极显著(P<0.01);随着中国蛤蜊个体的增大,其单位体重排氨率(N)逐渐降低;排氨率与其软体部干重呈负相关,它们之间可以用幂函数N=a0W-b0表示。单位体重耗氧率和排氨率与温度(T)、软体部干重(W)满足以下方程:O=0.258+0.561W+0.239T(R=0.680,F=19.342,P<0.01);N=2.973+38.361W+16.897T(R=0.736,F=26.535,P<0.01)。     

温度对紫黑翼蚌耗氧率和排氨率及其昼夜变化的影响

采用静水呼吸法测定了在3个不同温度条件下紫黑翼蚌耗氧率及排氨率的变化,比较了雌雄蚌的呼吸代谢差异,并研究了其昼夜变化规律。结果表明:在17~27℃条件下,紫黑翼蚌的耗氧率和排氨率均随温度的升高而升高;雄蚌耗氧率高于雌蚌,但无显著性差异;而雄蚌排氨率低于雌蚌,且在22℃、27℃条件下排氨率差异显著(P=0.014,P0.01);在27℃条件下,雄蚌的氧氮比显著高于雌蚌(P=0.019),这可能与紫黑翼蚌雌雄生理差异有关;22℃时,紫黑翼蚌耗氧率和排氨率均存在明显的昼夜节律,夜间显著高于白天,雌雄蚌的呼吸代谢高峰均出现在凌晨1:00~3:00,除雄蚌的排氨率低谷出现在9:00~11:00,其他低谷均出现15:00~17:00。在22℃条件下,雄蚌一昼夜平均耗氧率高于雌蚌,而平均排氨率低于雌蚌,但均无显著性差异(P0.05)。本结果初步揭示了温度对雌雄紫黑翼蚌呼吸代谢的影响及昼夜变化规律,为提高其人工驯养成活率、池塘合理放养及雌雄生长差异研究提供理论参考。     

温度对河川沙塘鳢幼鱼耗氧率和排氨率的影响

进行了温度(10、14、18、22、26、30、34℃)对河川沙塘鳢Odontobutis obseura幼鱼呼吸和排泄的影响试验.结果表明:河川沙塘鳢幼鱼的耗氧率和排氨率均随水温的升高呈直线上升,且都具有良好的直线回归关系(r2分别为0.972和0.971);18 ～22℃时河川沙塘鳢的氧氮比(0:N)明显高于26～34℃时的比值(P＜0.05);10～ 34℃时的热能效系数(Q10)值为1.734,最低Q10值(1.069～1.161)出现在22 ～30℃时.研究表明,河川沙塘鳢幼鱼的可耐受温度为10 ～34℃,适宜生长温度为22 ～30℃.     

温度对不同体质量红鳍东方鲀幼鱼耗氧率和排氨率的影响

在实验室条件下,进行了3种温度(15、20、25℃)对体质量分别为(23.9±2.0)、(30.1±1.5)、(43.8±1.6) g的红鳍东方鲀Takifugu rubripes幼鱼呼吸和代谢的影响试验。结果表明：在温度为15~25℃时,红鳍东方鲀幼鱼的耗氧率( RO )和排氨率( RN )均随着温度的升高而增大, RO和RN与温度( T)之间的关系符合指数函数关系;红鳍东方鲀幼鱼的耗氧率和排氨率均随着鱼体质量的增加而减少, RO和RN与体质量( W)之间的关系符合幂函数关系;红鳍东方鲀幼鱼的O/N值随温度的升高而降低,随体质量的增加而升高。研究表明,在试验温度范围内,红鳍东方鲀幼鱼对温度的敏感性相对较弱,温度变化对其代谢的影响较小,且红鳍东方鲀幼鱼摄取的主要能源物质是蛋白质。     

温度对溪红点鲑耗氧率、排氨率和窒息点的影响

2008年11—12月,在室内采用实验生态学方法,研究了不同水温（5．5、8．5、11．5、14．5、17．5℃）条件下,体重为（26．5±2．0）g的溪红点鲑Salvelinus fontinalus饥饿状态下的耗氧率、排氨率和窒息点。结果表明：溪红点鲑的耗氧率、排氨率和窒息点均与温度呈正相关关系,其回归方程分别为R0=13．723t^0.9738（R^2=0．9974）、RN=0．1687t^1.0896（R^2=0．9977）、PS=0．23641n t＋0．8529（R^2=0．9960）;氧氮比为58．1～66．6,氧氮比与温度呈负相关关系,其回归方程为O：N=81．36t^-0.1158（R^2=0．9915）,说明在本试验温度范围内,饥饿状态的溪红点鲑的代谢物质以脂肪和碳水化合物为主。     

水温对香港巨牡蛎摄食和代谢的影响

为了探明香港巨牡蛎(Crassostrea hongkongensis)的摄食和代谢生理与水温的关系,在实验室条件下采用流水系统研究了不同水温(T)条件下香港巨牡蛎的滤水率(FR)、摄食率(IR)、吸收率(AE)、耗氧毕(OR)和排氨率(NR)的变化规律,结果显示:(1)在13～33℃范围内,水温对香港巨牡蛎的滤水率、摄食率和吸收率的影响都极显著(P<0.01),滤水率、摄食率和吸收率与水温之间的关系方程分别为:FR=-0.027T2+1.1967T-7.8537(R2=0.8902);IR=-0.147T2+6.5202T-42.845(R2=0.9009);AE=-0.1783T2+8.1846T-12.304(R2=0.9757).(2)在13～33℃范围内,水温对香港巨牡蛎的耗氧率和排氨率的影响极显著,耗氧率和排氨率与水温之间的关系方程分别为:OR=1.283Ln(T)-2.332(R2=0.9599);NR=0.1022Ln(T)-0.2136(R2=0.9743).根据研究结果可以判断,香港巨牡蛎生长的最适水温为22℃,其摄食和代谢存水温18～28℃之间处于较适宜水平.     

养殖水温对金钱鱼幼鱼耗氧率、排氨率和窒息点的影响

【目的】研究不同养殖水温对金钱鱼幼鱼呼吸和代谢活动规律的影响,为其适宜养殖水温的确定提供依据。【方法】采用静水密闭式方法,在盐度5条件下,以体质量（8.84±0.32） g/尾的金钱鱼幼鱼为试验对象,设置15,20,25,30和35 ℃不同养殖水温处理,测算并分析不同处理金钱鱼幼鱼的耗氧率、排氨率、代谢率、排泄率、氧氮比、呼吸温度系数（Q₁₀值）、排泄Q₁₀值、窒息点及其变化规律,以明确金钱鱼幼鱼适宜的养殖水温。【结果】养殖水温为 15~30 ℃时,金钱鱼幼鱼的耗氧率、排氨率、代谢率和排泄率均随着水温的升高而增加,在30 ℃时达到峰值,分别为0.46 mg/(g·h)、3.81 μg/(g·h)、6.29 J/(g·h)和0.09 J/(g·h),35 ℃时均开始下降。在15~35 ℃养殖水温内,金钱鱼幼鱼窒息点随着水温上升而升高,氧氮比为71.76~261.04;呼吸Q₁₀值平均为2.50,20~25 ℃的呼吸Q₁₀值为1.22;排泄Q₁₀平均为2.23,25~30 ℃养殖水温的排泄Q₁₀值为1.10。【结论】盐度5条件下,金钱鱼幼鱼主要由碳水化合物和脂肪提供能量,15~30 ℃为其适宜养殖水温,其中最适养殖水温为20~30 ℃。     

西施舌耗氧率和排氨率的研究

分别采用流水法和静水法测定了西施舌的耗氧率和排氨率.结果表明,西施舌夜间耗氧率高于白天,在流水状态下2个耗氧率高峰期出现在21:00和6:00,在静水状态下2个耗氧率高峰期出现在18:00～21:00和3:00～6:00,两种状态下的昼夜耗氧率平均值分别为(0,84±0.32)mg(O2)·g-1·h-1和(0.92±0.40)mg(O2)·g-1h-1;西施舌流水和静水状态下的昼夜排氨率无明显的差异,其排氨率平均值分别为(0.19±0.03)μmol·g-1·h-1和(0.22±0.01)μmol·g-1h-1.     

尖紫蛤体质量和海水温度对其耗氧率和排氨率的影响

采用室内实验生态学方法对尖紫蛤的耗氧率和排氨率进行了研究.结果表明,在16 ～ 32℃时,尖紫蛤的耗氧率和排氨率与体质量呈负相关的幂函数关系,可分别表示为OR=aW-b和NR=cW-b,其中b的取值范围为0.488 ～0.874,平均值为0.620;a的取值范围为0.362 ～1.371;d的取值范围为0.454 ～0.747,平均值为0.591;c的取值范围为44.678 ～121.158.在16～32℃时,尖紫蛤的耗氧率和温度之间的关系可以用指数函数OR =c1ed1T表示,耗氧率随着温度的升高而增加,在32℃时达到峰值,当温度超过32℃时,耗氧率下降.在16 ～36℃时,尖紫蛤的排氨率和温度之间的关系可以用二次多项式NR=-c2 +d2T-d3T2表示,在28℃时排氨率达到峰值.尖紫蛤呼吸Q10值的范围为0.547～3.660,排泄Q10值的范围为0.235～2.515,水温对耗氧率和排氨率的影响均显著.尖紫蛤的呼吸氧原子数与排出的氨态氮原子之比O∶N值的范围为4.312 ～21.874,各种规格的尖紫蛤O∶N随温度的升高而升高.