仔猪猪瘟母源抗体消长规律研究

为合理制定仔猪的免疫程序,用正向间接血凝试验研究了仔猪母源抗体消长规律。结果表明:仔猪出生后1～28d血清抗体水平较高,其中7～14d血清抗体水平最高,保护率达到了100%,14d以后血清抗体水平降低,42d时血清抗体保护率已经降到了55%。在仔猪28日龄断奶的猪场,若不进行超前免疫,30日龄是较佳的首免日期。     

仔猪口蹄疫母源抗体消长规律监测

在贵阳某规模化养猪场,随机选取20头仔猪,采用正向间接血凝试验（IHA）、液相阻斯ELISA（LPB—ELISA）两种血清学方法,对O型口蹄疫母源抗体的消长规律进行监测和分析。结果表明,13日龄左右抗体效价最高。IHA、LPB—ELISA监测的抗体平均效价分别是2．76、2．74,母源抗体免疫合格率分别为90％、85％,在23日龄左右平均效价均为为2．45,母源抗体免疫合格率均为75％,大部分仔猪仍被母源抗体保护,随着日龄的增加,抗体效价呈明显的线性下降,到36日龄左右抗体平均效价分别是1．98、1．95,母源抗体免疫合格率均为55％。45％的仔猪抗体效价低于保护临界值。因此,36日龄确定为仔猪首次免疫时间。两种方法监测的结果无显著差异（P〉0．05）。     

规模猪场不同日龄仔猪O型口蹄疫母源抗体消长规律及免疫试验

为确定仔猪口蹄疫疫苗首次免疫时间,以规模化养猪场经猪口蹄疫O型灭活疫苗免疫后母猪所生产的仔猪为研究对象,利用液相阻断ELISA诊断试剂盒对仔猪母源抗体消长情况进行检测.结果表明,10、20、30、40日龄仔猪99％以上被保护的分别占该日龄组的60％、80％、80％、50％,50、60、70、80日龄仔猪99％以上被保护的分别占该日龄组的40％、0、0、0,60％以上仔猪未被充分保护.随着日龄的增加,抗体效价明显下降.对检测猪O型口蹄疫抗体小于1∶45的45日龄仔猪10头进行猪O型口蹄疫免疫试验,结果O型口蹄疫一免后14 d抗体效价≥27的有10份,达到100％保护.因此,对规模化猪场的仔猪进行口蹄疫疫苗的最佳首免时间为45～50日龄.     

仔猪O型口蹄疫母源抗体消长试验

[目的]为制定科学合理的仔猪口蹄疫免疫程序提供依据。[方法]以规模化养猪场和散养户中经猪口蹄疫O型灭活疫苗免疫后母猪所生产的仔猪为研究对象,利用液相阻断ELISA诊断试剂盒对仔猪母源抗体消长情况进行检测。[结果]仔猪通过母乳获得被动保护,在21日龄母源抗体达到高峰,规模化猪场和散养户母猪的平均效价分别达1∶142和1∶89。规模化猪场场仔猪21~30日龄保护率在80%以上,45日龄下降到65%,60日龄时基本无保护;而农户仔猪21日龄保护率为60%左右,30日龄仅为40%左右。农户饲养母猪免疫抗体水平远低于规模化猪场。[结论]对规模化猪场的仔猪进行口蹄疫疫苗的最佳首免时间为45~50日龄,而对散养户仔猪的最佳首免时间应为30日龄左右。     

猪乳中猪瘟IgG、IgM抗体与仔猪猪瘟母源抗体变化规律

研究了猪乳中猪瘟IgG、IgM抗体与仔猪猪瘟母源抗体水平变化规律.结果表明:免疫组母猪乳清中IgG、IgM抗体效价的最高值均出现在分娩后1d,随后抗体效价迅速降低,泌乳7d后免疫组母猪乳中各种抗体效价与常乳基本一致;初生仔猪猪瘟母源抗体在5～10日龄达到高峰,10日龄后开始下降,至25日龄保护率已不+到100％,抗体水平接近保护线.     

2种疫病感染情况下猪瘟母源抗体消长规律的测定

为了确定2种疫病感染情况下仔猪猪瘟疫苗的首免日龄,采用ELISA方法,测定了不同日龄仔猪的猪瘟母源抗体,并分析其消长规律.结果显示,隐性感染PRRSV的免疫猪瘟疫苗(6头份/头)母猪所产仔猪的猪瘟母源抗体阳性水平在10～14 d为100.0%(25/25),15～19 d为81.5%(22/27),20～24 d为77.8%(21/27),25～29 d为67.7%(21/31),30～34 d为58.6%(17/29),35～39 d为50.0%(16/32);而感染过SFV的猪场的母猪所产仔猪母源抗体阳性水平在5 d、10 d、15 d和20 d均为100.0%(20/20),至30 d抗体阳性水平骤降为80.0%(16/20).根据母源抗体消长规律,确定了隐性感染PRRSV的猪瘟疫苗免疫母猪所产仔猪的首免日龄为20～24 d;而感染过SFV猪场的母猪所产仔猪为30～35 d.     

禽流感母源抗体消长规律和免疫保护抗体临界值的测定

对初生雏鸡的AI母源抗体进行了动态观察 ,并在HI效价为 6 (Log2 )和 4 (Log2 )、2 (Log2 )左右时 ,分别应用禽流感病毒进行攻毒。结果显示 :初生雏鸡AI母源抗体HI效价的峰值在 7日龄时 (7.85 (Log2 ) )出现 ,比 1日龄 (6 .8(Log2 ) )时高出 1个倍比滴度 ;7日龄后HI效价即随雏鸡日龄的增加而迅速下降 ;至 2 8日龄时 ,已趋于消失。攻毒试验中 ,当HI效价为 6 (Log2 )左右时 ,其保护率为 10 0 % ;在 4 (Log2 )时 ,保护率仅为 5 0 % ;在 2 (Log2 )左右时 ,保护率只有2 0 %。由此说明 ,能使雏鸡对AIV的攻击获得完全保护的临界值应在 4 (Log2 )～ 6 (Log2 )之间 ,且必须大于 4 (Log2 )。     

浅谈母源抗体在仔猪疾病防治中的应用

本文对母源抗体进行了详细的分析,对母源抗体的作用、消长规律进行了探讨,并且对母源抗体在仔猪疾病防治中的应用进行了具体的介绍。     

猪瘟和蓝耳病母源抗体消长规律及疫苗免疫的干扰作用

为了制定合理的猪瘟和蓝耳病免疫程序,试验测定了猪瘟和蓝耳病母源抗体消长规律和疫苗免疫相互干扰作用。结果表明,猪瘟母源抗体从28日龄开始下降加剧,半衰期为17 d左右;蓝耳病母源抗体21日龄开始下降加剧,半衰期9 d左右;高致病性蓝耳病灭活苗对猪瘟弱毒苗免疫无干扰作用,两者可以同时免疫;蓝耳病弱毒苗与猪瘟弱毒苗同时免疫,对猪瘟疫苗的免疫有极显著干扰作用,猪瘟抗体合格率仅为60%,未达免疫保护要求;两者疫苗间隔7 d免疫仍有显著干扰作用,但猪瘟抗体能达到免疫保护要求;蓝耳病免疫效果较差。     

仔猪猪瘟母源抗体消长规律测定

选择福建省南平市某规模化猪场猪瘟抗体检测合格的10头能繁母猪,分别从每头母猪所生的仔猪中随机抽取2头,共20头,25日龄断奶,不注射猪瘟疫苗,分别于l日龄、5日龄、10日龄、15日龄、20日龄、25日龄、30日龄、35日龄、40日龄用猪瘟病毒抗体ELISA检测试剂盒检测猪瘟抗体水平,通过检测数据掌握母源抗体的消长规律。结果表明,哺乳仔猪出生后5~10日龄血清抗体阳性率达到了100%,为最高。抗体水平于15日龄以后开始降低,至25日龄左右达到保护临界值(80%阳性率),40日龄时降低到5%。     

猪O型口蹄疫母源抗体消长规律及疫苗免疫的干扰作用

[目的]制定科学合理的免疫程序,从根本上控制仔猪O型口蹄疫的发生。[方法]采用ELISA抗体检测试剂盒对涪陵某规模化养殖场母猪和仔猪进行了母源抗体和免疫抗体检测。[结果]仔猪在10日龄左右抗体效价最高,平均效价为2.62。随着日龄的增长,仔猪母源抗体水平迅速下降至不完全保护水平。不同日龄首免仔猪口蹄疫疫苗免疫抗体检测结果表明母源抗体效价对试验猪的免疫应答有较大的影响。[结论]30～45日龄是仔猪接种FMD疫苗的最佳时间,这与母源抗体的消长规律相一致。     

ELISA法检测猪瘟抗体消长规律的试验研究

本试验采用间接ELISA方法,对猪瘟（CSF）常规免疫的仔猪CSF抗体水平进行检测。试验分A、B两组,A组首免注射4头份猪瘟兔化弱毒疫苗,B组首免注射2头份猪瘟兔化弱毒疫苗;二免两组均注射2头份猪瘟兔化弱毒疫苗。试验结果表明,注射疫苗后10d,开始产生抗体,20~30d抗体达到峰值,二免后抗体峰值维持40d以上。首免4头份的仔猪比首免2头份的仔猪CSF抗体峰值出现的早,维持的时间长。     

非洲猪瘟病毒P30蛋白单克隆抗体制备、鉴定及阻断ELISA方法的建立

【背景】非洲猪瘟（ASF）于2018年8月在中国首次出现,对养猪业造成了巨大危害,损失惨重。目前尚无安全有效的疫苗用来预防ASF,于是建立快速特异的检测方法对于防控ASF提供了有效的手段。【目的】制备非洲猪瘟病毒（ASFV）特异性单克隆抗体,建立ASF快速特异性的检测方法。为ASF的检测和防控提供借鉴技术手段。【方法】构建表达载体pET-28a-P30,通过原核表达系统获得ASFV P30重组蛋白,以纯化的P30蛋白为抗原免疫BALB/c小鼠,经过细胞融合和细胞亚克隆制备出ASFV P30蛋白特异性杂交瘤细胞株;对P30蛋白进行截短表达,利用Western Blot和间接酶联免疫吸附试验（iELISA）鉴定单克隆抗体所对应的抗原表位;并利用制备的单克隆抗体建立非洲猪瘟阻断ELISA抗体检测方法。【结果】通过双酶切和PCR验证,结果显示构建出重组载体pET-28a-P30,经测序其序列未发生突变;IPTG诱导后,P30重组蛋白主要表达在包涵体中,分子量约为33 kD。纯化的P30蛋白与弗氏佐剂1﹕1混合免疫小鼠,3次免疫后,小鼠血清效价达到1﹕102 400,说明表达的蛋白具有良好的免疫原性。经细胞融合和亚克隆,获得8株P30蛋白特异性杂交瘤细胞,Western Blot和间接免疫荧光试验（IFA）检测获得的8株单抗均具有良好的反应性。叠加试验显示8株单克隆抗体均针对相同的抗原位点;截短表达P30蛋白不同片段,选取制备的2-12B单克隆抗体与不同的截短P30蛋白反应,显示单克隆抗体的抗原表位区为187—194aa。利用2-12B单克隆抗体并经过条件优化,成功建立了ASF阻断ELISA抗体检测方法,检测了190份临床样品,并与商品化非洲猪瘟ELISA抗体检测试剂盒进行对比,两方法阳性符合率为90.91%,总符合率为96.32%。【结论】本研究成功获得ASFV P30蛋白,经过iELISA、Western Blot和IFA筛选出反应性良好的特异性单克隆抗体8株,抗原识别表位区为187—194aa。并利用制备的单克隆抗体建立了特异性高,敏感性好的ASFV阻断ELISA抗体检测方法,为ASF的检测及其防控提供了手段和支撑。     

AA鸡禽流感母源抗体和免疫抗体消长变化的研究

[目的]为AA鸡的禽流感预防提供依据。[方法]用不同剂量的2种禽流感疫苗免疫8日龄AA鸡,通过血凝抑制(HI)试验研究AA鸡禽流感母源抗体和免疫抗体的消长变化。[结果]AA鸡禽流感母源抗体在1~7日龄时缓慢下降,之后迅速下降,表明其半衰期约为2 d。2种禽流感疫苗均可用于AA鸡的预防接种,免疫后15 d,免疫抗体HI效价达到保护临界值,20 d时达到峰值,然后缓慢下降,43日龄时仍在临界值以上。2种不同剂量的禽流感灭活油乳剂疫苗接种后所产生的HI抗体效价的峰值差异极显著。[结论]选用禽流感灭活油乳剂疫苗,免疫剂量为0.5 ml/只,免疫时间为8日龄,整个饲养期免疫1次,即可预防商品代AA鸡禽流感。     

淮南猪种质特性的研究与利用(Ⅲ)

<正>2.10 淮南猪主要经济性状遗传特性的利用研究 2.10.1 淮南猪断奶窝重综合选择指数的制订 (1)性状间的相关系数     

太湖猪保种及其利用现状的考察

作者在对我国著名地方优良品种猪—太湖猪全面考察的基础上,系统论述了太湖猪的保种、选育、利用的现状及成功的经验,提出了我省地方良种猪—淮南猪今后的先育目标和方向。     

鸭肝炎病毒单克隆抗体的研究

[目的]研制鸭肝炎病毒的单克隆抗体。[方法]将DHV-W株的鸭胚尿囊液经冻融、氯仿处理和超速离心纯化后,免疫BALB/c小鼠,取其脾细胞与SP2/0骨髓瘤细胞融合,探讨DHV特异性强、敏感性高、简便快速的DHV抗原诊断方法。[结果]经间接ELISA筛选获得1株能稳定分泌DHV的单克隆抗体的杂交瘤细胞株5G8。特性鉴定结果表明该株单抗ELISA效价较高且特异性好,中和特性稍差。杂交瘤细胞冻存6个月和12个月后复苏能稳定分泌特异性抗体。[结论]HDV的McAb成功制备为DHV的快速诊断、筛选特定基因探针等技术奠定了基础。     

盐渍肠衣猪瘟病毒实验室检测的相关性研究

参考GenBank中发表的猪瘟病毒（CSFV）序列,设计一对CSFV特异性引物;从CSFV感染猪盐渍小肠中提取总RNA,经逆转录后进行PCR扩增,在盐渍小肠中成功扩增出与预期大小（168bp）一致的特异性条带,而正常猪和感染猪伪狂犬病病毒的猪小肠扩增结果均为阴性．用此方法对40例盐渍猪肠衣样本进行检测,结果与经典抗原检测方法（抗原捕获ELISA法）一致,而兔体交叉反应试验的阳性检出率为RT-PCR的66．7％,表明本RT-PCR技术能应用于盐渍猪肠衣的CSFV检测．     

应用ELISA检测我国猪病的研究进展

ELIsA技术具有操作简便、快速准确、易于标准化、特异性强、敏感性高、重复性好、经济实用等优点,已被广泛应用于畜牧业、临床医学、环境污染控制、食品安全监测、生物、化学等领域。文章综述了应用ELISA检测我国猪病的研究进展。