不同贮藏温度对东北红豆杉花粉寿命的影响

设定了－１０,３,１５,２５,３５℃和自然温度６个水平贮藏东北红豆杉花粉．在贮藏期间采用氯化２,３,５三苯基四唑（ＴＴＣ）染色法每隔３ｄ测定１次花粉生活力．测定结果表明,东北红豆杉花粉寿命因贮藏温度不同而存在显著差异,温度越高花粉寿命越短．在自然温度下贮藏２周后,５０％东北红豆杉花粉便丧失了生活力,７周后全部丧失生活力．而在－１０℃冰柜中和３℃冰箱中分别贮藏４个月和２个月后,仍有２０％的花粉具有生活力．低温可延长东北红豆杉花粉的贮藏寿命．     

温度及GA3处理对东北红豆杉种子贮藏物质的影响

采用低温层积、暖温层积和变温层积方法,结合4种不同浓度的GA3处理方法对东北红豆杉种子进行催芽试验,研究了不同催芽方法对东北红豆杉种子贮藏物质中可溶性糖含量、粗脂肪含量、可溶性蛋白质含量的变化影响,结果表明变温处理(20℃/10℃昼夜各12小时)结合GA3 200毫克/升处理最有利于东北红豆杉种子贮藏物质的转化,有利于种子萌发。     

不同培养基对东北红豆杉愈伤组织诱导的影响

[目的]研究不同培养基对东北红豆杉（Taxus cuspidate Sied.et Zucc.）愈伤组织诱导的影响。[方法]研究了不同基本培养基、不同植物生长调节剂种类及水平对东北红豆杉愈伤组织诱导的影响。[结果]东北红豆杉愈伤组织诱导最好的基本培养基是WPM培养基,其次是B5培养基;生长素2,4-D的诱导效果在MS培养基上优于NAA,而在B5培养基上不如NAA;在MS培养基上,细胞分裂素KT对愈伤组织诱导起促进作用,2,4-D＋0.1mg/L KT、NAA＋1.0mg/L KT的诱导效果最好,6-BA不利于东北红豆杉叶片愈伤组织的诱导。[结论]该研究可为进一步研究东北红豆杉的组织和细胞培养以及快速繁殖提供依据。     

不同浓度GA_3处理和不同温度层积对东北红豆杉种子胚形态变化的影响

以东北红豆杉种子为试验材料,采用两因素试验,通过不同浓度GA3处理、不同温度层积处理,研究东北红豆杉种子胚形态变化,以探讨打破东北红豆杉种子休眠的有效途径,保护东北红豆杉资源。试验结果表明：结合GA3处理进行不同温度层积处理,东北红豆杉的种胚长度和宽度与处理前相比都有明显增加,GA3200mg/L处理结合变温层积效果最好,说明赤霉素处理结合变温层积能有效的促进东北红豆杉种胚形态后熟。     

IBA处理对东北红豆杉嫩枝扦插的影响

[目的]开展东北红豆杉扦插繁育试验,为实现其人工栽培提供技术支持。[方法]以清水处理为对照,研究IBA对东北红豆杉嫩枝扦插生根的影响。[结果]经过IBA处理的插穗生根效果均高于对照,其中以IBA浓度为150mg／L处理16h效果最好,生根率达到72％,生根效果指数为2．245。[结论]在吲哚丁酸作用卞,东北红豆杉生根率明显改善。采用生根效果指数指标能综合反映扦插苗的质量。     

东北红豆杉抗寒性分析

[目的]分析东北红豆杉在引种地新疆石河子的抗寒性。[方法]通过5个低温处理试验,测定叶片叶绿素含量、丙二醛(MDA)、游离脯氨酸(Pro)、超氧物歧化酶(SOD)活性、质膜透性、可溶性糖(SS)指标。[结果]随着温度降低,东北红豆杉叶片内叶绿素含量和SOD活性依次降低,而质膜透性、Pro、MDA和SS含量递增。[结论]东北红豆杉对-30℃低温具有较好的抗逆性。     

东北红豆杉开花结实的规律

东北红豆杉雌雄异株，雌、雄花芽多着生于树冠外部1年生枝条叶腋处，在一定范围内较高的温，湿度有利于花芽的分化，在花粉形成过程中，尤其是减数分裂期遇到低温或持续低温，会导致大量花粉败育；而低温可以延长成熟后的风干花粉寿命，东北红豆杉结实量少，但不同年份间结实量的重复力却较高，单株间结实量重复力较小，说明年份间结实较稳定，而个体间结实量变异较大。     

谈东北红豆杉扦插繁殖技术

根据东北红豆杉生物学特性,运用常规及非常规无性繁殖手段进行育苗试验,较全面地研究了影响东北红豆杉愈伤组织形成、生根的因子及育苗的繁殖技术。     

东北红豆杉抗炎作用研究

[目的]研究东北红豆杉的抗炎作用。[方法]采用二甲苯致小鼠耳廓肿胀、甲醛致小鼠足肿胀的方法,以阿司匹林为阳性药对照,将东北红豆杉水煎液分为低、中、高剂量组（0．5、1．0、2．0g／ml）,观察东北红豆杉水煎液对小鼠的抗炎作用及其与剂量的关系。[结果]东北红豆杉水煎液低剂量组对二甲苯致小鼠耳廓肿胀及甲醛致小鼠足肿胀没有显著抑制作用（P〉0．05）;中、高剂量组对二甲苯致小鼠耳廓肿胀及甲醛致小鼠足肿胀均有显著抑制作用（P〈0．05）。[结论]东北红豆杉水煎液具有一定的抗炎作用。     

东北红豆杉RAPD反应体系的优化

[目的]研究东北红豆杉RAPD反应体系的优化条件.[方法]以东北红豆杉叶片为材料,用改进CTAB法提取DNA,分别从模板DNA浓度(10、20、30、40、50 ng)、引物浓度(5、10、15、20、25 pmol/μl)、dNTP浓度(0.1、0.15、0.2、0.25、0.3 mmol/L),Taq DNA聚合酶量(0.5、1.0、1.5、2.0、2.5 U)及镁离子浓度(0.5、1.0、1.5、2.0、2.5 mmol/L)5个方面对东北红豆杉RAPD扩增效果的影响进行分析.[结果]用改良的CTAB法提取红豆杉基因组DNA,所得DNA质量较好,无杂质存在,条带整齐一致,而且能够取得比较理想的RAPD扩增效果.通过各因子的比较分析,建立了东北红豆杉RAPD优化体系:20 μl PCR反应总体积中含模板DNA 10 ng,Mg2+ 2.0 mmol/L,引物15 pmol/μl,dNTP 0.2 mmol/L,Taq DNA聚合酶1.0 U,10×buffer缓冲液2 μl,以双蒸水补充至20 μl.[结论]为进一步探索与东北红豆杉性别鉴定相关的研究提供技术支持.     

两株东北红豆杉内生真菌的生理特性

采用接种法，对两株东北红豆杉内生真菌散囊菌（Eurotium sp.,1001)和曲霉（Aspergillus sp.,1003)在不同温度、pH、碳源、氮源、培养基及糖质量浓度下进行了生理实验研究。结果表明：温度对两种菌株的生长和孢子的产生具有明显的影响；pH6－7时菌株生长良好，且可以保持较高的菌液质量浓度；两种菌株均以蔗糖为主要碳源，菌丝干质量与培养基质量浓度呈正向关系。     

东北红豆杉种胚形态发育调控技术和育苗研究

以东北红豆杉(Taxus cuspidata Sieb.et Zucc.)果实成熟后的种子为供试材料,通过多因子交叉重复试验对影响东北红豆杉种胚发育的主要因素及其水平进行了探讨,旨在筛选并确定调控东北红豆杉种胚形态发育的主要因素及其适宜水平。结果表明,东北红豆杉种胚发育的调控方法和主要因素及其水平为以饱和碳酸钠溶液浸泡种子20~30 min除油脂后用粗沙去除部分种皮,再用1.80 mg/L 6-苄氨基腺嘌呤(6-BA)、2.20 mg/L赤霉素(GA3)和0.30 mg/L 2,4-二氯苯氧乙酸(2,4-D)混合溶液浸泡36 h,将种子与河沙(1∶3)混合,进行155 d的变温处理,变温幅度和时间:白天温度为(23±2)℃,处理10 h,夜间温度为(15±2)℃,处理14 h,子叶胚完全分化率98.0%,种子发芽率95.0%以上。     

东北红豆杉种子休眠机理与解除技术探讨

采用酶联免疫吸附分析法测定了东北红豆杉种子内源激素 (赤霉素、脱落酸、玉米素、吲哚乙酸 )含量 ,并结合形态解剖、变温层积、种子吸水性和种皮透气性等试验 ,探讨了东北红豆杉种子的休眠机理及解除休眠的技术 .秋季采收的东北红豆杉种子 ,虽然种胚结构完整 ,但体积小 ,不具备萌发能力 ,需要后熟 .风干种子形成大量脱落酸(ABA) ,种皮角质化、坚硬 ,阻碍了水气交换 ,幼小种胚被迫进入深度休眠状态 .解除休眠的技术是 ,机械磨损种皮 ,可通气、透水和减少萌发障碍 .流水冲洗 1周 ,将种子内的ABA含量降低到可以萌发的程度 .用赤霉素或赤霉素与细胞分裂素混合处理种子 ,可提前萌发 ,提高发芽率 .变温 (15～ 2 0℃ 3～ 5℃ )层积 ,可缩短种子休眠时间 ,层积前期暖温可加速胚的发育 ,低温是萌发成苗的必要条件 .经过 4～ 6个月暖温和 3～ 4个月低温层积 ,种子萌发     

东北矮紫杉组织、细胞培养及其紫杉醇生成的研究

 东北矮紫杉系灌木型东北红豆杉人工栽培品种 ,其株形矮、分枝多、生长快 ,可采收大量红豆杉枝条 ,也是园林常绿观赏树种 ,但其繁殖困难。本研究通过茎段腋芽培养建立了试管苗再生体系 ,为快速繁育红豆杉苗木创造条件。从茎、叶诱导出愈伤组织 ,建立了细胞悬浮培养系 ,为生物反应器生产紫杉醇打下基础。实验中对矮紫杉茎、叶、愈伤组织及细胞悬浮培养物中的有效成分进行薄层层析和高效液相色谱检测 ,发现它们中均有紫杉醇存在 ,而且细胞培养物中的含量高于茎、叶。该研究结果表明 ,东北矮紫杉是理想的解决紫杉醇来源的红豆杉人工栽培品种 ;研究还观察到 PVP是组培中解除培养物褐化的较好抗氧化剂     

紫杉种子形态解剖的初步研究

该文借助于立体解剖镜、显微镜对紫杉种子的形态及构造进行了观察和描述，同时，利用扫描电子显微镜拍摄了种子外形、种子纵切面和种皮层次的电镜照片，初步摸清了紫杉种子的外部形态和内部构造，目的为紫杉资源的开发、利用及遗传育种方面提供理论上的依据。     

东北红豆杉配子形成与胚胎发育解剖观察1）

利用显微技术观察了东北红豆杉雌、雄配子形成和胚胎发育过程。结果表明：直生胚珠3月份恢复发育,5月中旬大孢子母细胞形成,下旬减数分裂,6月中、下旬雌配子体形成。3月中旬花粉母细胞减数分裂,经过1个月左右发育为成熟的单核花粉,4月底至5月初散粉。传粉后约2个月受精,受精后的原胚经历球形胚、卵形胚、柳叶形胚、棒槌形胚,进而发育成具有胚芽、胚根、胚轴和子叶的胚体。     

东北红豆杉种子发育过程生理特性研究

文章对红豆杉种子发育形态学、物质积累以及内源激素水平等进行调查。结果表明,种子在12 WAP（Weeks after pollination,发育周数）时含水量约为22%。种子可溶性糖含量在发育过程中变化较大,在2 WAP时为19%,达到整个发育过程的峰值。而可溶性蛋白质含量则随着种子发育逐渐增加,在12 WAP时达到峰值,为17%。10 WAP时,总脂肪酸含量最高,为干重的31.98 mg·g-1。在内源激素方面,种子中ABA水平在12 WAP降至最低,而GA含量呈总体下降趋势。     

东北矮紫杉细胞悬浮培养的研究

对东北矮紫杉进行了愈伤组织的诱导,并建立了细胞悬浮培养系.研究表明,茎、叶均可诱导出愈伤组织,愈伤组织诱导培养基以MS＋2,4-D 1.0 mg/L＋NAA 1.0 mg/L＋KT 0.1 mg/L为佳,愈伤组织继代培养基以B5＋2,4-D 2.0 mg/L＋KT 0.1 mg/L为佳.以嫩枝为外植体,愈伤组织的诱导率较高、状态较好,且较适于悬浮培养.悬浮培养的接种量2.0 g/瓶为最佳密度,细胞生长周期为20 d,对数生长期为10~16 d,细胞收获期为16 d.试验中还发现,聚乙烯吡咯烷酮是东北矮紫杉组培中解除培养物褐化的较好抗氧化剂,使用浓度为1mg/L.     

东北红豆杉的微繁技术

利用芽苞、茎尖和茎段为外植体,在ＭＳ培养基中加入不同质量浓度的６－苄基氨基腺嘌呤（６－ＢＡ）、萘乙酸（ＮＡＡ）、吲哚丁酸（ＩＢＡ）,对东北红豆杉进行了微繁技术的研究。在诱导不定芽时,以芽苞为外植林,不定芽发生数量较茎类和茎段多。在ＭＳ培养基中单独加入萘乙酸（ＮＡＡ）质量浓度为２．０ｍｇ／Ｌ时芽体增殖最多。不定根发生形式有愈伤组织生根型与皮层生根型２种。不定根发生率因母树年龄的增大而降低。当培养基中ＩＢＡ含量较高时（４～６ｍｇ／Ｌ）不定根发生率也较高。组培苗驯化时,以苔藓为基质较好,同时控制适宜的温湿度可以提高成活率。