苹果蠹蛾颗粒体病毒张掖株(CypoGV-zy)的室内毒力测定

对我国首次分离到的1株苹果蠹蛾颗粒体病毒本土株系,苹果蠹蛾颗粒体病毒张掖分离株(CypoGV-zy)进行了室内毒力测定研究。结果表明:1~4龄幼虫期的LD50分别为4.55×103、1.20×104、3.43×104、2.11×105PIB.mL-1。在0.50×105PIB.mL-1病毒浓度下,1~3龄幼虫在感染病毒7~9 d后校正死亡率达100%,LT50分别为3.59、4.074、.66 d;4龄幼虫LT50为7.60d,1~4龄幼虫的LT90分别为5.51、5.91、6.53、16.06 d。该病毒分离株对我国西北疫区的苹果蠹蛾具有较强的毒力,具有生防应用前景。     

3株苹果蠹蛾颗粒体病毒本土株的毒力测定与田间防效

【目的】通过与比利时商用病毒株系CypoGV-BG的对比,研究3株国内苹果蠹蛾(Cydia pomonella)颗粒体病毒株系CypoGV-ZY、CypoGV-KS1、CypoGV-KS2的毒力和田间防治效果,为我国苹果蠹蛾的生物防治和病毒杀虫剂的研制奠定基础。【方法】采用饲喂法研究3株病毒对苹果蠹蛾3龄幼虫的毒力大小。以性诱剂诱集的雄虫数量和受害果率为评价指标,检测3株苹果蠹蛾颗粒体病毒的田间防效。【结果】3株国内株系CypoGV-ZY、Cy-poGV-KS1和CypoGV-KS2对苹果蠹蛾3龄幼虫的LD50分别为3.43×104,8.81×104和1.04×105 OBs/mL,优于CypoGV-BG的5.31×105 OBs/mL;而病毒浓度为5×105 OBs/mL时,3株病毒株系的LT50分别为4.05,4.11和4.19d,与CypoGV-BG的4.98d差异不显著。田间防效结果表明,防治3个月后,从性诱剂诱集的雄虫数量看,3株本土病毒株防效均显著优于CypoGV-BG;从果实受害率看,CypoGV-ZY、CypoGV-KS1的果实受害率分别为39.5%和41.3%,与化学杀虫剂灭幼脲的防效(36.9%)接近,显著强于CypoGV-KS2和CypoGV-BG。【结论】CypoGV-ZY和CypoGV-KS1分离株对我国西北疫区的苹果蠹蛾具有较强的毒力及田间防治效果,防效明显优于国外商品病毒制剂。     

亚洲玉米螟颗粒体病毒利用研究

从亚洲玉米螟幼虫体内分离出一株“OFGV—01”病毒,该病毒颗粒体卵圆形,大小为295～356nm×250～305nm,平均为325.5nm×277.5nm。病毒粒子杆状,两端钝不弯曲或稍弯曲,大小为200～256nm×185～196nm,平均为228nm×190.5nm。该病毒对亚洲玉米螟幼虫致病力较强,在温度24～26℃,相对湿度73%～78%条件下,对3日龄、6日龄幼虫感病4～6天死亡率分别达100%和98.3%,9日龄、10日龄幼虫第8～9天死亡率分别为85.5%和83.5%。利用该病毒于山西省太谷县、祁县、榆次市田间防治亚洲玉米螟幼虫,防治效果一般为80%～85%.高的可达90%。该病毒对天敌无杀伤作用,对小白鼠(昆明种)、大白鼠(Wismr 种)、家免和豚鼠无致病性。     

木毒蛾颗粒体病毒的研究

木毒蛾组织病变观察，颗粒体病毒能侵染虫体的脂肪体、中肠及马氏管等组织，但不侵染气管．在透射电镜下，颗粒体呈圆形卵圆形，大小为３２０～８３０ｎｍ×２３０～５７０ｕｍ。超薄切片观察，卵圆形包涵体中具单杆病毒粒子．室内外感染试验表明，用颗粒体病毒粗提液１．２×１０６～１．２×１０９个／ｍＬ感染４～６龄幼虫，死亡率达８１．８％～１００％，杀虫力很强，是一种有价值的微生物杀虫剂．     

取食人工和天然饲料斜纹夜蛾对核多角体病毒敏感性的差异

通过室内生物测定 ,比较了取食人工饲料和天然饲料斜纹夜蛾对斜纹夜蛾核多角体病毒 (SlNPV)的敏感性。结果表明 ,从毒力来看 ,SlNPV对取食人工饲料斜纹夜蛾 3龄和 4龄幼虫的LC50 分别为 1.1× 10 8PIB/ml和2 .7× 10 8PIB/ml,对取食甘蓝叶片的LC50 分别为 6 .0× 10 8PIB/ml和 6 .4× 10 8PIB/ml,对取食大豆叶的LC50 分别为2 .4× 10 8PIB/ml和 1.9× 10 8PIB/ml,取食人工饲料斜纹夜蛾对病毒的敏感性高于取食甘蓝叶斜纹夜蛾 ,而与取食大豆叶的差异较小。从致死速度来看 ,病毒对取食大豆叶斜纹夜蛾的杀虫速度最慢。从斜纹夜蛾体重增长来看 ,取食人工饲料的体重增长最快 ,取食甘蓝叶的居中 ,取食大豆叶的体重增长最慢     

甜菜夜蛾颗粒体病毒毒力的生物测定

以甜菜夜蛾２—３龄幼虫为供试虫，对国内外首次发现的甜菜夜蛾颗粒体病毒（Ｌａｐｈｙｇｍａｅｘｉｇｕｅｇｒａｎｙｌｏｓｉｓｖｉｒｕｓ，ＬｅＧＶ）进行了生物测定．在２３—２５℃相对湿度７０％—８０％下其样品死亡机率值与浓度对数值的回归方程是ｙ＝０．４５ｘ＋３．７６（ｒ＝０．９９），ＬＣ５０＝５７２．４颗粒体·ｍＬ－１，ＬＣ５０的９５％置信区为１５８—２０８４颗粒体·ｍＬ－１．甜菜夜蛾不同龄期幼虫对ＬｅＧＶ的敏感性不同，初孵幼虫敏感性最强，２、３龄次之，４龄幼虫极不敏感．此外，贮藏期温度对ＬｅＧＶ感染力的影响也进行了初步研究．     

泡桐灰天蛾颗粒体病毒包涵体蛋白及其DNA的研究

为了充分利用泡桐灰天蛾颗粒体病毒资源，为开展害虫生物防治提供依据，对首次在湖南分离到的泡桐灰天蛾颗粒体病毒进行了研究。采用ＳＤＳ－ＰＡＧＥ垂直板依电泳，测得此病毒包涵体蛋白分子量为３×１０＾４ｕ；用电镜法观察，其ＤＮＡ呈松弛的闭环状双链，平均长度约为２３．９μｍ，分子量为４７×１０＾６ｕ；用ＤＮＡ限制性内切酶分析其分子量为４５．４×１０＾６ｕ。     

小菜蛾颗粒体病毒杀虫剂防治花椰菜小菜蛾田间药效试验

小菜蛾颗粒体病毒((Plutella xylostella granulovirus,PxGV))杀虫剂是一种专业防治小菜蛾的生物药剂。田间试验表明,PxGV对花椰菜小菜蛾防效较好,三个不同剂量处理药后7d的防效在75.9%-92.6%之间,可在绿色农产品生产中推广应用。     

亚致死质量浓度吡虫啉对苹果蠹蛾解毒酶的影响

【目的】探讨吡虫啉亚致死浓度对苹果蠹蛾体内解毒酶的影响,为深入研究苹果蠹蛾的抗药性机制及吡虫啉的合理使用提供理论依据。【方法】采用胃毒法测定吡虫啉对苹果蠹蛾敏感种群3龄幼虫的毒力,通过毒力回归方程计算苹果蠹蛾死亡率为10%和20%时吡虫啉的亚致死质量浓度LC_(10)和LC_(20)。用LC_(10)和LC_(20)质量浓度吡虫啉处理苹果蠹蛾,以丙酮水作对照,分析其体内多功能氧化酶(MFOs)、谷胱甘肽S-转移酶(GSTs)和羧酸酯酶(CarEs)的比活力及其米氏常数(Km)和最大反应速率(Vmax)的变化。【结果】与对照相比,LC_(10)和LC_(20)质量浓度吡虫啉处理后苹果蠹蛾CarEs比活力在48h以前均高于对照,48h时LC_(10)处理低于对照,LC_(10)和LC_(20)处理CarEs比活力分别在12和36h达到最大值。GSTs比活力LC_(20)处理6~60h均高于对照,36h时达到最大;LC_(10)处理除在6,12和60h低于对照外,其他时间点均高于对照,48h时达到最大。MFOs比活力LC_(10)和LC_(20)处理在12,24和36h高于对照,而48h时LC_(20)处理低于对照,LC_(10)处理与对照基本相同。CarEs和MFOs的Km值在各时间点均高于对照,Vmax均低于对照;GSTs的Km均低于对照,Vmax均高与对照。【结论】CarEs、MFOs和GSTs在苹果蠹蛾对吡虫啉的解毒代谢中均起作用,其中GSTs起主导作用。     

甘肃河西走廊苹果蠹蛾种群遗传分化研究:基于COI基因序列分析

【目的】揭示河西走廊苹果蠹蛾不同地理种群间的联系,分析地理种群间的序列变异、遗传多样性和遗传分化。【方法】采用PCR和基因测序技术,扩增并分析了河西走廊8个地理种群132个苹果蠹蛾个体的线粒体细胞色素氧化酶Ⅰ亚基(COI)基因片段,应用DnaSP 5.10计算单倍型多样性指数(Hd)、核甘酸多样性指数(Pi)和Tajima’s D值,采用ZT软件包进行Mantel检验,分析种群间遗传距离与地理距离的相关性,利用软件Arlequin 3.11计算成对种群间的固定系数(Fst)。【结果】在获得的132条序列中共发现了8个变异位点和5个单倍型,其中3个单倍型为种群共享单倍型。总体单倍型多样性指数为0.578,种群内单倍型多样性为0.000~0.700。各种群的Tajima’s D值中性检验符合中性突变,说明河西走廊苹果蠹蛾在历史上没有出现群体扩张,群体大小稳定。Fst值表明,河西走廊苹果蠹蛾种群间具有一定程度的遗传分化,而各地理种群的遗传距离与地理距离无显著的相关性。【结论】河西走廊苹果蠹蛾遗传多样性较低,且地理种群间有一定程度的遗传分化。     

苹果蠹蛾成虫触角感器的超微结构观察

【目的】研究苹果蠹蛾(Cydia pomonella(L.))成虫触角感器的形态、数量和分布特征,为进一步探索其各类感器的功能和感受机理、与外界的化学通讯机制等提供参考。【方法】应用扫描电镜,对苹果蠹蛾成虫触角感器的形态结构进行观察。【结果】苹果蠹蛾成虫触角上存在8种感器:毛形感器(Ⅰ型和Ⅱ型)、刺形感器、腔锥形感器、栓锥形感器、耳形感器(Ⅰ型和Ⅱ型)、锥形感器、鳞形感器、Bhm氏鬃毛。其中毛形感器数量最多,鳞形感器仅存在于触角背面,栓锥形感器分布于触角鞭节各亚节腹面远端,其他类型感器在触角腹面、背面均有分布。每种感器的形态和分布在两性间无明显差异。【结论】不同类型感器在苹果蠹蛾成虫触角上的分布具有一定的规律性。     

不同突变体异色瓢虫取食人工饲料的适合度研究

旨在研究两个稳定遗传的异色瓢虫体色突变体（黑化ML和浅色GR）在取食人工饲料后的生物学表现是否存在差异。以存活率、发育时间、新羽化成虫体质量及繁殖力作为适合度参数来进行评价,并与野生型（WT,对照）进行比较。结果表明：黑化型的异色瓢虫存活率在1龄高达100%,在4龄和蛹期均为77%,显著高于浅色型;此外,黑化型的蛹均能正常羽化,而浅色和野生型的羽化率分别为64.3%和78.8%,且部分新羽化成虫鞘翅畸形。黑化型3龄幼虫（5.5 d）及总发育历期（27.4 d）均显著长于浅色（4.8 d、25.9 d）和野生型（4.9 d、24.5 d）,所得新羽化雌雄成虫体质量均显著高于浅色型。3种表型异色瓢虫的日均产卵量和孵化率均无显著性差异。上述结果表明,异色瓢虫黑化突变体幼虫取食人工饲料后的适合度明显优于浅色突变体及野生型。     

血红扇头蜱的人工饲养及生活史观察

为了对血红扇头蜱的生活史、蜱媒疾病以及分子生物学特性的研究提供参考资料,建立一套规范完整的实验室血红扇头蜱人工饲养技术和方法。对采集的血红扇头蜱以家兔为供血动物,在(25±1)℃和RH(90±5)%恒温恒湿培养箱中于黑暗条件下人工饲养。结果表明,蜱在人工饲养的环境下能独立完成生活史,完成一个世代需要72~113d,卵、幼蜱、若蜱和成蜱各期均在兔体嗜血。     

PrGV多角体膜蛋白（PEP）的分析

【目的】对菜粉蝶颗粒体病毒(Pieris rapae Granulovirus,PrGV)多角体膜蛋白(polyhedron envelope protein,PEP)进行研究,为揭示PEP的功能及其在病毒生命过程中的作用提供参考。【方法】以PrGV PEP为对象,通过序列分析、原核表达、抗体制备、Western blotting、胶体金免疫定位、实时荧光定量PCR等方法初步确认该基因定位和表达时相。【结果】PrGV PEP与其他鳞翅目昆虫颗粒体病毒的PEP同源性达到50%左右,但未在核型多角体病毒(Nucleo polyhedro virus,NPV)中发现同源序列。定量PCR分析表明,菜青虫感染PrGV后24h可检测到PEP的存在,随后该基因的表达水平逐渐升高,并在72h达到峰值。通过Western blotting可以在感染PrGV的菜青虫体内检测到大小分别为23ku和15ku的清晰条带,说明制备的多克隆抗体具有较好的特异性。免疫金标记将PEP定位于椭圆型的颗粒体,证明PEP是GV包涵体的重要组成部分。【结论】PrGV PEP在颗粒体病毒中较为保守,可能是PrGV晚期表达的重要基因,参与病毒侵染后期颗粒体结构的形成。     

甜菜夜蛾人工饲料配方的改进研究

基于一种传统的甜菜夜蛾人工饲料配方,通过增加胆固醇、蜂蜜及琼脂组分,优选出甜菜夜蛾人工饲料新配方。饲养试验表明:改进后饲料配方饲喂的幼虫成活率平均为91.31%,化蛹率平均为89.43%,二者均显著高于原配方(P<0.05);且克服了原饲料随继代数增加,卵孵化率下降的缺点,明显延缓了甜菜夜蛾室内种群的种质衰退。     

杏鲍菇菌渣代料栽培对姬松茸不同潮次产量及品质的影响

为探究杏鲍菇代料栽培姬松茸的适宜比例,通过床栽试验研究了杏鲍菇替代不同比例稻草对姬松茸J2和J37菌株不同潮次子实体产量、营养品质的影响。结果表明：随着替代比例的增加,姬松茸J2和J37子实体产量呈现先升后降的变化趋势,替代比例为30%时产量最高,姬松茸J2产量可达2.038 kg·m^-2,姬松茸J37产量可达2.267 kg·m^-2。两种姬松茸子实体产量主要集中于第一潮和第二潮,且杏鲍菇菌渣替代栽培处理前两潮产量占比均高于传统栽培配方。随着潮次增加,姬松茸 J2和 J37子实体中多糖、粗蛋白和氨基酸的质量分数总体呈降低的趋势,但杏鲍菇菌渣替代处理多糖、粗蛋白和氨基酸质量分数随潮次增加降低的幅度小于传统栽培配方。杏鲍菇菌渣替代处理姬松茸子实体中粗蛋白、氨基酸和多糖的质量分数分别比传统栽培配方提高2.42%~10.44%、4.09%~12.00%和11.07%~23.70%,其中替代比例为30%时营养品质最优。从生产成本分析,杏鲍菇菌渣替代可降低姬松茸栽培原料成本35.08%~54.00%。研究表明,适宜比例的杏鲍菇菌渣和养殖场垫料组合代料栽培姬松茸的产量和品质优且不同潮次间相对稳定,而且该方式可以有效降低栽培材料的投入成本,综合效益比较高。     

炭化条件对黑沙蒿生物炭产率的影响

【目的】研究炭化温度、炭化时间和升温速率对沙蒿制备生物炭产率的影响,为沙蒿生物炭的应用提供依据。【方法】通过无氧炭化法,研究不同炭化温度(300,400,500,600,700,800和900℃)、炭化时间(5,15,30,60,90和150min)和升温速率(50,100,150,200和250℃/h)对沙蒿生物炭产率的影响,用傅里叶变换红外光谱仪获得红外光谱图,并据此分析生物炭产率变化的原因。【结果】沙蒿生物炭的产率随着炭化温度升高、炭化时间延长和升温速率的增加而降低。温度从300℃升高至900℃时,生物炭产率降低了75.47%,其中由300℃升高至400℃时降幅最大,为31.90%。由红外光谱图可知,沙蒿生物炭中官能团较炭化前发生变化,主要是由于物料中纤维素或半纤维素、脂肪组分和木质素等组分发生分解和转化;600℃下,炭化时间从5min延长到150min时,生物炭产率降低了6.68%;升温速率从50℃/h增至250℃/h时,生物炭产率降低了5.34%,炭化时间延长和升温速率的升高使木质素在整个生物炭分子中的比例下降,从而使生物炭产率下降。【结论】生物炭产率与炭化温度、炭化时间和升温速率均呈负相关,且炭化温度能够最大程度地影响生物炭产率;造成生物炭产率降低的原因是物料中各组分在不同炭化条件下相继分解和转化。