微型月季花粉离体萌发培养基组分的优化

采用液体培养法研究了不同培养基组分对微型月季Unconditional Love花粉萌发和花粉管生长的影响,旨在为微型月季花粉活力检测和杂交育种提供参考。结果表明,在液体培养基内添加蔗糖、硼酸、硝酸钙、硫酸锌、硫酸镁和硝酸钾,均能促进微型月季Unconditional Love花粉萌发和花粉管生长;在一定范围内,花粉萌发率和花粉管生长长度均随培养基组分添加量的增加而增加,但超过一定添加量时,则出现抑制作用;在此基础上通过正交试验,比较了蔗糖、硼酸和硝酸钙对花粉萌发和花粉管生长的影响,结果表明,最适合微型月季花粉萌发的蔗糖、硼酸和硝酸钙3种组分的培养基配方为蔗糖150 g/L+H_3BO_3125 mg/L+Ca(NO_3)_2·4H_2O 100 mg/L。     

‘保罗兰’睡莲花粉离体萌发及花粉管生长的研究

【目的】研究不同培养基组分、不同培养时间对‘保罗兰’睡莲花粉萌发和花粉管生长的影响,为睡莲杂交育种提供科学的依据。【方法】采用花粉离体萌发法,用显微镜观察花粉离体萌发情况。【结果】20和40 mg/L的硼酸(H_3BO_3)处理均能促进花粉萌发,适宜浓度的蔗糖和低浓度的Ca~(2+)处理能显著提高花粉的萌发率;睡莲花粉在培养的4 h之内,花粉萌发率上升较快,4～6 h萌发率趋于稳定。花粉管生长在前2 h生长较快,2～6 h生长趋于稳定。【结论】10%蔗糖+20 mg/L或40 mg/L H_3BO_3+20 mg/L氯化钙(CaCl_2)是‘保罗兰’睡莲花粉最适萌发培养基组分,最佳镜检时间为4 h。     

澳洲石斛花粉离体萌发液体培养基研究

以澳洲石斛(Dendrobium kingianum)新鲜花粉为试验材料,在单因素试验基础上,设计正交试验,比较蔗糖、H_3BO_3、CaCl_2对澳洲石斛花粉萌发的影响,旨在筛选出适合澳洲石斛花粉离体萌发的液体培养基配比,为澳洲石斛花粉离体培养及杂交育种提供参考依据。结果表明,单因素试验中,在一定浓度范围内的蔗糖、H_3BO_3、CaCl_2,对澳洲石斛花粉萌发具有一定促进作用,超过一定浓度则起抑制作用;正交试验中,蔗糖、H_3BO_3和CaCl_2对澳洲石斛花粉萌发的影响都极显著,适宜的花粉离体萌发培养液为10 g/L蔗糖+40 mg/L H_3BO_3+30 mg/L CaCl_2,花粉萌发率为37.02%。     

月季花粉离体萌发液体培养基组分的优化

以月季品种‘Sorbet fruite'的花粉为材料,通过单因子试验比较了液体培养基中蔗糖及B、Ca、Mg、K对月季花粉离体萌发的影响,以此为基础利用L_(25)(5~6)的正交试验,比较了蔗糖、Ca(NO_3)_2·4H_2O、H_3BO_3对月季花粉萌发的影响。结果表明:蔗糖、Ca(NO_3)_2·4 H_2O和蔗糖×H_3BO_3的交互作用对‘Sorbet fruite'花粉萌发有极显著影响。适宜培养液为蔗糖20%+H_3BO_3(50～100)mg/L+Ca(NO_3)_2·4 H_2O(100～200)mg/L。在适宜的培养液中加入30%的PEG-4000,萌发率和花粉管长度均有极显著增加。     

PEG-4000、蔗糖及pH值对七子花花粉萌发的影响

莱用花粉液体培养法研究PEG-4000(聚乙二醇4000)、蔗糖和pH值对七子花花粉萌发及花粉管生长的影响.结果表明,最适的培养基组分浓度为:H3BO3 10mg·L-1,Ca(NO3)2 O.03%,PEG-4000 15%,蔗糖15%,最适pH值为7.在该培养基内花粉萌发率约为73.26%,净萌发率约为64.49%.PEG-4000对七子花花粉萌发有促进作用,但蔗糖也是必不可少的.     

温度对三种常见木本花卉植物花粉萌发的影响

本试验以3种常见木本花卉植物花粉为试材,探究了温度对花粉萌发的影响。将花粉均匀分散涂抹在含0.1 mM CaCl_2、Ca(NO_3)_2、KCl、MgCl_2、H_3BO_3和18%蔗糖、0.5%琼脂粉的培养基上,分别在20℃、28℃、35℃和42℃条件下培养1 h。结果表明,在28℃时,3种花粉的萌发率和花粉管生长达到最优状态,花粉萌发和花粉管生长随温度变化的趋势近于一致,随温度升高花粉萌发率相应提高,直到达到最适温度后再随温度的升高而降低。     

牛角瓜花粉萌发及花粉管生长研究

运用方差分析、多重比较、正交实验和极差分析方法,对牛角瓜花粉的萌发和花粉管生长进行研究,结果表明,培养基内硼酸、硝酸钙、蔗糖、硫酸镁在一定浓度范围内,对花粉萌发及花粉管生长起促进作用,但浓度过高或过低时,则有抑制作用;钾对花粉萌发及花粉管生长影响不显著;蔗糖和硝酸钙对牛角瓜花粉萌发有显著影响,蔗糖和硫酸镁对牛角瓜花粉管生长有显著影响;牛角瓜最适花粉液体培养基为:15%蔗糖+350mg/L Ca(NO_3)2·4H_2O+60 mg/L H_3BO_3+150 mg/L MgSO_4·7H_2O;在30~35℃温度条件下,牛角瓜花粉块萌发和花粉管生长最好。     

响应面法对大豆花粉离体萌发主要影响因子的优化

以辽宁省审定的大豆品种辽豆15号花粉为材料,探讨大豆花粉在离体培养条件下萌发、生长的主要影响因子。采用单因素试验筛选出大豆花粉萌发培养基最佳碳源为蔗糖,Ca~(2+)源为CaCl_2,有效植物生长调节剂为GA_3。通过Plackett-Burman设计法对影响大豆花粉管生长的8个因素进行了评价,筛选出具有显著效应的3个因素:初始pH值、蔗糖、GA_3。用最陡爬坡路径逼近花粉管长度响应区域,通过响应面法确定主要影响因素的最佳水平组合。结果表明,大豆花粉离体萌发的各影响因子的最佳水平组合为蔗糖浓度19.2%、GA_3 68.9 mg/L、初始pH值6.47、H_3BO_40.015%、Ca Cl20.05%、PEG-4000 7.5%、温度25℃、时间3 h。优化后离体培养花粉管长度达391.95μm,比优化前提高32.68%。     

4个苹果观赏品系开花、授粉习性及花粉管萌发的荧光显微观察

花量大、亲和性好的授粉品种对于苹果的连年丰产和果实品质有重要意义。本试验以4个观赏性好的杂交后代品系为试材,观察其开花、授粉习性,并通过花粉管原位萌发及坐果率调查,评价其与‘嘎啦’、‘富士’苹果的亲和性,以期筛选高效的授粉品种。结果如下:4个品系花量大、颜色鲜艳,始花期均比‘富士’、‘嘎啦’等栽培品种早4~6 d,开花持续时间15~20 d。4种花粉给‘嘎啦’和‘富士’授粉后,花粉在富士苹果柱头上的萌发率及在花柱中的生长速度优于‘嘎啦’苹果,表现出更好的亲和性。授粉24 h后,4种花粉在柱头上均有大量花粉萌发,萌发率均在72%以上,萌发量由大到小为S14S69R15S44。授粉72 h后花粉的萌发率均达到最大值,S44和R15花粉管生长到花柱长度的1/2处,S14和S69花粉管生长至花柱3/4处。授粉120 h后,S44和R15花粉的花粉管长至花柱3/4处,而S14和S69花粉几乎到达了花柱的基部。168 h后,4种花粉均生长至柱头最基部胚囊内。4个品系与‘嘎啦’、‘富士’授粉的坐果率均在62.4%以上,S14和S69花粉授粉后坐果率较高,其次为S44,R15坐果率最低。‘富士’苹果坐果率优于对应的‘嘎啦’苹果。以上结果初步表明4个品系可以作为观赏苹果以及授粉品种,有较好的推广应用前景。     

8种果树花粉量及花粉萌发与生长的差异

以梨、苹果、桃等8种11个品种果树为试材，研究了花药内花粉量、花粉萌发及花粉管生长特性，结果表明：不同树种每朵花的花药数及花粉粒数不同，因而花粉量也有显著的差异，如苹果每个花药的花粉粒数平均为8428粒，而李仅有1197粒；同一树种不同品种间也存在显著差异，如梨品种‘丰水’每个花药有花粉10745粒，而‘新高’仅有1622粒；花粉萌发率和花粉管生长长度因树种、品种及培养基种类不同而异，以含10％蔗糖 1％琼脂 0．01％硼酸的培养基最适宜，在该培养基上，苹果、葡萄、桃、杏等的花粉萌发率为60％～90％，花粉管生长长度为1000～1600μm。     

蜂糖李花粉离体萌发及活力保存研究

【目的】明确蜂糖李花粉活力影响因素和贮藏特性,为蜂糖李花粉的保存提供支持。【方法】以蜂糖李花粉为研究对象,青脆李花粉为对照,采用离体培养萌发法,研究不同质量浓度蔗糖、H_3BO_3、植物生长调节剂(NAA、GA_3和6-BA)以及不同贮藏方式(4℃低温干燥、-20℃冷冻干燥及蔗糖密封保存)对2种李花粉活力的影响。【结果】蜂糖李和青脆李花粉萌发及花粉管生长的最佳培养基组合为150 g/L蔗糖+0.10 g/L H_3BO_3+10 g/L琼脂,在此条件下花粉萌发率分别为53.68%和57.06%,花粉管长度分别为1 554.70和1 353.43μm,均无较大差异。10～30 mg/L NAA能极显著提高蜂糖李的花粉萌发率;但所有NAA处理均极显著抑制其花粉管的生长;不同质量浓度GA_3均可极显著促进蜂糖李花粉的萌发,且20和50 mg/L GA_3可极显著促进其花粉管生长;5～10 mg/L 6-BA能极显著提高蜂糖李花粉萌发率,质量浓度达20 mg/L时会极显著抑制其花粉管伸长。蔗糖密封保存能有效减缓2种李花粉活力的下降速度,延长花粉贮藏时间;贮藏至20 d时,蔗糖密封保存的蜂糖李花粉萌发率(39.54%)分别是4℃低温干燥保存、-20℃冷冻干燥保存的2.11和1.94倍。【结论】蜂糖李最适花粉萌发和花粉管生长培养基组分为150 g/L蔗糖+0.10 g/L H_3BO_3+10 g/L琼脂;GA_3是最适宜的植物生长调节剂,20和50 mg/L GA_3能同时促进蜂糖李花粉萌发和花粉管生长;花粉保存以蔗糖密封保存方式为宜。     

苹果花柱蛋白质对其花粉萌发及生长的影响

[目的]研究花柱蛋白质对苹果(Malus domestica)花粉萌发及生长的影响,为克服苹果自交不亲和提供重要依据。[方法]以6个苹果品种(红奥、早红香、嘎拉、富士、金冠和夏光)的花柱和花粉为试验材料,花柱蛋白质浓度分别为0.5、1.0、2.0、3.0、5.0μg/μl,以不添加花柱蛋白质为对照。[结果]培养基中加入不同浓度苹果花柱蛋白质对其自花花粉萌发和生长均有抑制作用,并且同一品种花粉萌发受抑制程度随培养基中花柱蛋白质浓度的提高而加强。培养基中加入花柱蛋白质后对自交亲和的苹果品种早红香花粉萌发和花粉管生长的抑制程度较自交不亲和苹果弱,花粉萌发率均在76.46%以上,花粉管长度在770.16μm以上。[结论]花柱蛋白质对苹果花粉萌发及生长均有抑制作用,且对自交亲和品种的抑制程度较自交不亲和品种弱。     

4种木兰属植物花粉萌发特性

以望春玉兰Magnolia biondii,长花玉兰Magnolia ‘Changhua’,丹馨玉兰Magnolia ‘Danxin’,黄山木兰Magnolia cylindrica等4种木兰属Magnolia植物为试验材料,运用不同质量浓度蔗糖、硼酸、分子量为4000的聚乙二醇(PEG-4000)对花粉进行单因子及正交试验处理,研究不同培养基、培养温度及培养时间对4种植物花粉萌发率的影响。结果表明:①蔗糖、硼酸、PEG-4000对4种木兰属植物花粉萌发均有显著影响(P < 0.05)。不同植物所需适宜的离体培养基组分质量浓度不同,望春玉兰为50 g·L-1蔗糖+50 mg·L-1硼酸+200 g·L-1PEG-4000;长花玉兰为100 g·L-1蔗糖+200 mg·L-1硼酸+200 g·L-1PEG-4000;丹馨玉兰为100 g·L-1蔗糖+100 mg·L-1硼酸+150 g·L-1PEG-4000;黄山木兰为50 g·L-1蔗糖+100 mg·L-1硼酸+250 g·L-1PEG-4000。②4种植物花粉萌发最佳培养温度均为25 ℃,温度过高会抑制花粉萌发。③随着处理时间的延长,4种植物花粉萌发率增加,但达到最大萌发率所需时间有所不同,其中望春玉兰和黄山木兰在培养9 h时萌发率最高,萌发率分别为71.19%和59.82%,而长花玉兰和丹馨玉兰在培养12 h时萌发率最高,萌发率分别为44.50%和23.43%。     

茶树花粉的离体萌发研究

选用无性系茶树品种龙井长叶花粉为材料,通过离体条件下花粉的萌发来探讨茶树离体花粉萌发的最适条件及最适保存方法.取蕾白期茶树花苞,干燥15 h后取花粉,以30 mmol/L的MES缓冲液(pH值5.5)为母液配制0.01% H3BO4+0.03% Ca(NO3)2+10% 蔗糖+15% 聚乙二醇4000(PEG-4000)溶液(pH值6.5),作为基本培养基,统计不同组分的浓度、不同pH值和不同碳源对25 ℃处理1 h的花粉萌发率的影响.结果表明,茶树花粉萌发和花粉管生长的最适液体培养基是:0.01% H3BO4+0.05% Ca(NO3)2+5% PEG-4000+5%麦芽糖,pH值在5.0~6.0之间(30 mmol/L MES).在此条件下的萌发率为82.24%,花粉管生长长度为492 μm.     

Effects of Apple(Malts domestica) Style Protein on Its Pollen Germination and Growth

[目的]研究花柱蛋白质对苹果(Molus domestica)花粉萌发及生长的影响,为克服苹果自交不亲和提供重要依据.[方法]以6个苹果品种(红奥、早红香、嘎拉、富士、金冠和夏光)的花柱和花粉为试验材料,花柱蛋白质浓度分别为0.5、1.0、2.0、3.0、5.0 μg/μl,以不添加花柱蛋白质为对照.[结果]培养基中加入不同浓度苹果花柱蛋白质对其自花花粉萌发和生长均有抑制作用,并且同一品种花粉萌发受抑制程度随培养基中花柱蛋白质浓度的提高而加强.培养基中加入花柱蛋白质后对自交亲和的苹果品种早红香花粉萌发和花粉管生长的抑制程度较自交不亲和苹果弱,花粉葫发率均在76.46％以上,花粉管长度在770.16μm以上.[结论]花柱蛋白质对苹果花粉萌发及生长均有抑制作用,且对自交亲和品种的抑制程度较自交不亲和品种弱.     

凤丹白牡丹花粉活力测定

为充分利用东北地区适应性牡丹品种凤丹白进行杂交育种,采用离体萌发法研究其花粉活力,比较蔗糖及H_2BO_3浓度对花粉萌发率的影响,并在适宜培养浓度条件下观察花粉的萌发动态。结果表明:在凤丹白花粉离体萌发试验中硼酸与蔗糖有着重要的影响,0.05g·L~(-1) H_2BO_3+90g·L~(-1)蔗糖浓度培养基为凤丹白最佳花粉培养基,花粉萌发率可达73.7%,花粉萌发出现高峰时段在离体培养的2h后,因培养基浓度不同出现的时间也不相同。     

3个紫薇品种花粉离体培养与萌发研究

[目的]探讨3个紫薇品种的花粉离体培养与萌发。[方法]以3个紫薇品种（‘红蝶飞舞’、‘翠盘堇薇’和‘紫爪银薇’）的盛花期花粉为材料,对花粉离体培养及花粉管萌发进行了研究。[结果]筛选出紫薇花粉萌发的最适培养基为150g/L蔗糖＋60mg/L硼酸＋20mg/LCaCl2＋20mg/LMgSO4＋100mg/LKNO3,其中蔗糖和硼酸的浓度对紫薇花粉萌发有明显影响。紫薇的长、短花丝萌发力存在差异,其中‘紫爪银薇’和‘红蝶飞舞’短花丝的花粉萌发力高于长花丝,而‘紫爪银薇’相反。在荧光显微镜下观察,自交授粉后2～6h内花粉萌发形成花粉管,花粉管生长速度由快到慢。[结论]为培育紫薇新品种提供了理论依据。     

三个李品种花粉离体萌发特性与条件筛选试验

为了提高李树液体授粉的效率,以3个李品种的花粉为试材,研究了不同培养基和不同培养条件对花粉萌发率和花粉管生长的影响。结果表明:花粉萌发率均随蔗糖浓度、硼酸浓度和培养温度的升高呈现先升后降的抛物线曲线,最佳培养组分为10%蔗糖+100μL·L-1硼酸,最适培养温度25℃;李花粉萌发较快,培养2h花粉萌发率达到28%以上,培养4h花粉萌发率达最高值,此后随培养时间延长花粉萌发率不再增长。在筛好的离体培养条件下测定3个李品种花粉萌发率和花粉管长度,金红李花粉萌发率最高为42.89%,花粉管长度以金艳最高为35.97μm,早美丽花粉萌发率和花粉管长度在3个品种中最低。     

贮藏和液体培养条件对文冠果花粉萌发的影响

[目的]优化改善文冠果花粉离体萌发培养基。[方法]以新鲜文冠果花粉为试验材料,采用液体培养法,测定蔗糖、硼酸和钙对文冠果花粉离体萌发特性及花粉管长度的影响,筛选适合文冠果花粉离体培养液体培养基成分的最佳浓度。测定不同贮藏温度(-70、-20、4、25℃)及不同贮藏时间(2、5、10 d)下,文冠果花粉萌发率的变化。[结果]通过控制单一因素变量试验,文冠果花粉离体萌发的液体培养基最佳组分为15%蔗糖+0.02%硼酸+0.01%钙离子(硝酸钙),萌发率达92.5%,花粉管长达1.61 mm;而在花粉管生长过程中需要的钙离子浓度为0.04%。-70℃超低温贮藏花粉有利于保持花粉生活力,-20℃冷冻贮藏次之,4℃低温贮藏不利于保持花粉生活力,25℃恒温贮藏会大大降低花粉生活力。[结论]该研究可为文冠果花粉离体培养的液体培养基最佳组分配方提供参考依据,也为文冠果花粉贮藏研究奠定基础。     

3个紫薇品种花粉离体培养与萌发研究

[目的]探讨3个紫薇品种的花粉离体培养与萌发。[方法]以3个紫薇品种（‘红蝶飞舞’、‘翠盘堇薇’和‘紫爪银薇’）的盛花期花粉为材料,对花粉离体培养及花粉管萌发进行了研究。[结果]筛选出紫薇花粉萌发的最适培养基为150 g/L蔗糖＋60 mg/L硼酸＋20 mg/L CaC l2＋20 mg/LMgSO4＋100 mg/L KNO3,其中蔗糖和硼酸的浓度对紫薇花粉萌发有明显影响。紫薇的长、短花丝萌发力存在差异,其中‘紫爪银薇’和‘红蝶飞舞’短花丝的花粉萌发力高于长花丝,而‘紫爪银薇’相反。在荧光显微镜下观察,自交授粉后2～6 h内花粉萌发形成花粉管,花粉管生长速度由快到慢。[结论]为培育紫薇新品种提供了理论依据。