小果型西瓜离体诱导四倍体的初步研究

[目的]为小果型西瓜三倍体的育种奠定基础。[方法]以二倍体小果型西瓜优良自交系MH-39-1的子叶为外植体进行离体诱导四倍体的研究。[结果]100 mg/L秋水仙素处理子叶的不定芽分化率达66.7%,平均分化不定芽6.7个。400 mg/L秋水仙素处理的四倍体诱导率为20.0%。秋水仙素处理12 h的不定芽分化率为83.3%,处理48 h的不定芽分化率为16.7%。秋水仙素处理24~36 h的四倍体诱导率为16.7%。4.0 mg/L 6-BA处理的不定芽分化率为83.3%,1.0 mg/L 6-BA处理的不定芽分化率为58.3%。再生芽在4种生根培养基上的生根率均在90%以上,在不添加植物生长调节剂的培养基上再生苗的平均生根数仅为6.5条,添加NAA的培养基上再生苗的平均生根数在10条以上,但根短而粗。[结论]初步确定秋水仙素离体诱导小果型西瓜四倍体的适宜浓度和处理时间为400mg/L和24 h。     

野生二倍体草莓叶片离体再生及四倍体诱导

以野生绿色草莓"5-9"试管苗叶片为外植体,研究了培养基中激素对叶片再生不定芽效率的影响及适宜的四倍体诱导方法.结果表明,当培养基中TDZ质量浓度为2.0 mg/L、2,4-D质量浓度为0.5 mg/L时,再生频率达96.3%;以附加50、100、150 mg/L秋水仙碱的液体和固体再生培养基处理叶片5 d,各个处理均诱导出四倍体植株,诱变率在15.1%～23.3%之间.诱变获得的四倍体试管苗表现出生长缓慢、叶色浓绿、叶片大、叶形指数变小等典型的四倍体植株特点,与普通二倍体试管苗相比具有明显差异.本研究揭示野生绿色草莓试管苗叶片具有极强的不定芽再生能力,叶片再生过程中进行秋水仙碱处理是获得四倍体的有效途径.     

Oryzalin离体诱导小果型西瓜四倍体及倍性鉴定研究

以3个二倍体小果型西瓜优良自交系048、032、047-1为试验材料,研究培养方式、Oryzalin浓度、处理时间对离体诱导西瓜四倍体的诱变效果,并对变异植株进行形态学比较、气孔测定及染色体鉴定。研究结果表明,采用液体培养的四倍体诱导率比固体培养高。在含50 mg/L Oryzalin的液体培养基中振荡处理2 d,四倍体诱导率最高达33.3%。变异植株通过染色体计数法鉴定得出染色体数为44,确定为四倍体植株。再生植株表现为叶片肥厚,叶色深绿,茎节缩短,株型紧凑矮小,茎蔓挺直,叶形指数变小;叶片气孔密度明显减小,保卫细胞体积增大,叶绿体数目增多;花瓣颜色深黄,且增宽、增厚。此结果说明Oryzalin对不同基因型的四倍体诱变效果存在一定差异。     

金荞麦的离体快繁及同源四倍体的诱导

该试验结果表明：金荞麦的快繁技术最适宜的培养为MS附加2mg/LBA,0．2mg／LIBA;同时,结合组织培养技术进行的多倍体诱导试验结果表明：在组织培养条件下,将其带绿色芽点的愈伤组织和无菌苗浸泡在不同浓度的秋水仙素溶液中或接种于添加一定浓度秋水仙素的培养基上处理一定时间后再进行培养,均可诱导金荞多倍体的产生,但以浸泡愈伤组织的效果较好,最高的诱导率可达43．3％。通过试管苗茎尖染色体显微观察,鉴定出同源四倍体,为今后优良的选育打下基础。     

氟乐灵在辣椒离体组织染色体加倍上的应用研究

[目的]为摸索一条更有效、更简便、更经济的辣椒四倍体诱导途径。[方法]以辣椒品种兴蔬201为试材,采用辣椒子叶离体组织培养技术,将分化出来的丛生芽使用抗微管除草剂氟乐灵（Trifluralin）进行辣椒四倍体的诱导试验。[结果]当氟乐灵使用浓度为10、50、100mg/L,处理时间为12、24、48h时,所有供试材料均出现明显的根尖加粗现象。利用根尖压片和保卫细胞气孔面积分析发现,当氟乐灵使用浓度为50mg/L,处理时间为24h时,获得的加倍效果最好,诱导率达到26.5%。[结论]利用氟乐灵处理辣椒离体组织可能成为获得四倍体辣椒的有效途径之一。     

二倍体和四倍体小白菜的胚胎学研究

在现蕾期和开花期对二倍体矮脚黄白菜自交、四倍体矮脚黄白菜自交和以四倍体矮脚白菜为母本、二倍体矮脚黄为父本杂交的白菜进行胚胎学观察。     

秋水仙碱离体诱导薄皮甜瓜四倍体的研究初报

以甜瓜组培苗茎尖为材料,研究了秋水仙碱诱导染色体倍性变异的最佳浓度、最适处理时间以及离体茎尖的最佳苗龄。结果表明：以8d苗龄的茎尖,在含有0．1mg／L秋水仙碱和较低浓度细胞分裂素的液体培养基中处理24-48h的诱导方法最有利于四倍体的产生,诱导染色体加倍的频率达30％～40％。变异株在田间表现出生长缓慢、叶片变宽加厚、茎增粗、节间变短、果皮变厚、种子变大增重的现象,显微镜观察变异后代根尖的染色体数目为2n=4x=48条。     

番茄同源四倍体离体诱导研究

[目的]利用组织培养技术与秋水仙素相结合进行番茄四倍体的离体诱导研究。[方法]以番茄品种渝粉109为试验材料,在建立番茄植株高效离体再生体系的基础上,以带绿芽生长点的子叶愈伤组织为诱导材料,利用秋水仙素分别采用混培法和浸渍法进行番茄同源四倍体的离体诱导。[结果]以带绿芽生长点的子叶愈伤组织为诱导材料,番茄同源四倍体离体诱导采用混培法,0.2%的秋水仙素处理48 h时获得了最高诱导率,为50.0%;浸渍法虽然诱导率较高,但对外植体的药害程度大。[结论]通过混培法获得了较高的诱导率,为番茄品种改良和种质资源的创新与丰富提供了一条新的途径。     

西瓜四倍体与二倍体正反交果实发育过程中内源激素的变化

为了探究西瓜四倍体与二倍体反交种子败育的原因,以蜜枚的二倍体和四倍体为材料,采用酶联免疫法(ELISA)对授粉后1~13 d果实内赤霉素(GA)、玉米素核苷(ZR)、脱落酸(ABA)和生长素(IAA)4种内源激素进行测定。结果表明:蜜枚二倍体与四倍体西瓜正交果实发育过程中,ZR和ABA呈现升高-降低-升高-降低的趋势,GA_3和IAA呈现降低-升高-降低-升高的趋势,蜜枚二倍体与四倍体西瓜反交授粉后3~4 d ABA含量较高,授粉后7 d GA和IAA含量较低,授粉后5 d GA_3平均水平低于正交。这样的差异可能就是反交种子败育的原因。     

马铃薯耐盐突变体的离体筛选

以4个马铃薯栽培品种的叶片为外植体进行耐盐突变体筛选,结果表明:不同品种愈伤组织的耐盐性存在差异,东农303、鄂1号两品种在细胞水平对NaCl的最大耐受质量浓度为8g/L,费乌瑞它为6g/L,夏波帝为4g/L。当继代次数低于10次,叶片耐盐愈伤组织在无盐胁迫诱导分化培养基上才有进一步诱导再生植株发生的能力;而在盐胁迫诱导分化培养基中,愈伤组织继代次数超过8次即很难继续分化再生。     

Studies on In Vitro Flowering and Fruiting of Perilla frutescens

Influences of PGR, sucrose, and ammonium nitrate on in vitro flowering and fruiting from cotyledon explants of P. frutescens were studied. The regenerated shoots at 2-4. cm from cotyledon explants on MS medium supplemented with 0.5 mg L^-1 BA and 1.0 mg L^-1IAA were excised and transferred to MS medium containing 30 g L^-1 sucrose, 8.25 g L^-1 ammonium nitrate, and 1.0 mg L^-1 BA. Following 40 d of culture, 86.2% of them flowered and set seeds. These seeds were germinable and developed into flowering plants in the fields. This study provides a simple system for rapid breeding of P. frutescens and studying the physiological mechanism of flowering of plants.     

佛手瓜下胚轴离体培养及再生植株

对佛手瓜下胚轴再生植株、试管苗移栽及大田定植进行了试验，结果表明：在ＭＳ＋ＩＡＡ０．１ｍｇ／Ｌ＋ＢＡ１．０ｍｇ／Ｌ＋ＬＨ２００ｍｇ／Ｌ培养基上容易形成下胚轴愈伤组织；愈伤组织分化芽的培养基为ＭＳ＋ＩＡＡ０．５ｍｇ／Ｌ＋ＢＡ０．５ｍｇ／Ｌ，诱导分化率可达５７５％；顶芽和带腋芽茎段生根的培养基分别为ＭＳ＋ＩＡＡ１．０ｍｇ／Ｌ和１２ＭＳ＋ＩＡＡ０．３ｍｇ／Ｌ，生根率分别为８１．８％和８３．３％；移栽培养土用土砂粪＝３２１的灭菌土，幼苗成活率达７５％；大田定值，平均单株结果８８．４３个，平均单果重２４０．２３ｇ．     

A Novel Three-Dimensional Mouse Embryonic Implantation Model In Vitro

To regenerate three-dimensional endometrium in vitro as a novel model for studying the mechanism of implantation of embryos, the luminal epithelial cells and stromal cells of the rabbit uterus were separated and cultured in vitro. The type Ⅰ mouse tail collagen was used as scaffolding material. The stromal cells were inoculated in the type I mouse tail collagen, and the luminal epithelial cells were inoculated on the type i mouse tall collagen to regenerate the endometrium in vitro. The regenerated endometrium was cultured in DMEM-F/12 media containing 100 nmol L^-1 progesterone, 10 nM β-estradiol, and 10% fetal bovine serum （FBS） for 3 d. The media were then replaced with CZB containing 100 nM progesterone, 10 nmol L-1 β-estradiol, and 10% FBS, and the mouse blastulas were co-cultured with it. The results of scanning electronic micrography showed that the epithelial cells on the surface of the reconstructed endometrium were covered with numerous slender microvilli and some epithelial cells protruded pinopodes. After culturing for 12 h with the mouse blastula, the shedding, attachment, and implantation of the blastula were observed. The blastula can escape from zona pellucida and attach to the three-dimensional endometrium and is then implanted into it. This study showed that the reconstructed three-dimensional endometrium can serve as a robust embryo implantation model in vitro.     

胡椒木叶片离体培养与植株再生

探讨了胡椒木(Zanthoxylum piperitum)叶片的离体培养.选取胡椒木幼嫩叶片作为外植体,接种在不同激素组合的培养基上进行诱导培养,结果表明,最适的诱导培养基为MS+6-BA1.0 mg/L+NAA0.7 mg/L,分化率为91.7%,最适的增殖继代培养基为MS+6-BA1.0 mg/L+NAA0.7 mg/L,所产生的不定芽在1/2MS+ NAA0.4 mg/L的培养基上可全部生根,长成完整植株.首次证明以胡椒木的叶片为外植体可以进行快速离体培养.     

Plant Regeneration from In Vitro Cultured Hypocotyl Explants of Euonymus japonicus Cu zhi

Adventitious shoots were successfully regenerated from hypocotyl explants of in vitro cultures of Euonymus japonicus Cu zhi. Hypocotyl slices were cultured on Murashige and Skoog （MS） and B5 basal medium supplemented with varied concentration of different plant growth-regulators, e.g., α-naphthaleneacetic acid （NAA） and indole-3-butyric acid （IBA） in combination with 6-benzylaminopurine （6-BA） and kinetin. The study showed that shoots could be directly regenerated from hypocotyl explants without the intervening callus phase; MS medium was more suitable for adventitious shoots regeneration. The ability of hypocotyls segments to produce shoots varied depending upon their position on the seedlings. The highest regeneration rate was obtained with hypocotyl segments near to the cotyledon cultured on MS basal medium supplemented with 1.5 mg L^-1 6-BA and 0.05 mg L^-1 NAA （63.64%）. The regenerated shoots were readily elongated on the same medium as used for multiplication and rooted on half-strength MS basal medium supplemented with 1.0 mg L^-1 IBA and 100 mg L^-1 activated carbon. After being transferred to greenhouse conditions, 96% of the plantlets were successfully acclimatized. This regeneration system is applied for genetic transformation now.     

应用体外法评定科威418的营养价值

科威４１８是作者通过特殊工艺研制而成的牛羊高蛋白复合添加剂，其中含有尿素、营养保护剂、酶及多种微量元素等。体外试验表明，以豆饼、尿素及科威４１８作为氮素饲料时，培养３ｈ的培养液中ＮＨ＿３Ｎ浓度依次为１４．５，２８．７及２２．３ｍｇ·（１００ｍＬ）￣（－１）（Ｐ＜０．０１）；培养１２ｈ的ＮＨ＿３Ｎ浓度依次为７．３，１１．４及１３．３ｍｇ·（１００ｍＬ）￣（－１）（Ｐ＜０．０５）；真蛋白氮浓度依次为３８．６，２９．８及３５．４ｍｇ·（１００ｍＬ）￣（－１）（Ｐ＜０．０５）；基质风干物消化率依次为５４．９７％，６１．４４％及６４．９１％（Ｐ＜０．０１）。     

替米考星长效注射液体外抑菌试验及对人工感染巴氏杆菌雏鸡的保护作用

研究替米考星长效注射液的体外抗菌活性及对仔鸡感染多杀性巴氏杆菌的保护作用.采用试管二倍稀释法,以红霉素、磷酸替米考星、泰乐菌素为对照,测定替米考星长效注射液对大肠埃希菌、金黄色葡萄球菌、鼠伤寒沙门氏菌、无乳链球菌、多杀性巴氏杆菌的最小抑菌浓度(MIC).将替米考星长效注射液以20、40、50 mg/kg 3个剂量,磷酸替米考星10 mg/kg,泰乐菌素10 mg/kg,红霉素5 mg/kg皮下注射,治疗人工感染多杀性巴氏杆菌的雏鸡.体外抑菌试验结果显示:替米考星长效注射液对革兰氏阳性菌抑菌效果与磷酸替米考星相当,强于泰乐菌素和红霉素.体内治疗试验结果表明,替米考星高、中、低剂量组疗效明显,均优于磷酸替米考星治疗组和泰乐菌素治疗组(P<0.01).     

NaCl胁迫下二倍体和同源四倍体西瓜幼苗DNA甲基化差异分析

【目的】研究二倍体和同源四倍体西瓜幼苗NaCl胁迫后形态学指标差异和DNA甲基化变化情况,分析不同倍性西瓜幼苗之间耐盐差异,结合形态学指标从表观遗传学角度解释二倍体和四倍体抗逆性差异机制。【方法】以3组不同倍性（二倍体、四倍体）西瓜幼苗为研究对象,待长至三叶一心时,用含有0、100、200、300和400 mmol·L^-1 NaCl的1/2 Hoagland营养液处理西瓜幼苗,NaCl处理8 d之后,鉴定西瓜幼苗受到的盐害指数,并运用甲基化敏感扩增多态性（methylation sensitive amplified polymorphism,MSAP）技术,分析NaCl处理8 d之后二倍体和四倍体西瓜幼苗叶片基因组DNA甲基化水平和模式的变化。【结果】NaCl处理后,形态学指标比较发现,随着NaCl浓度的增加,三组西瓜幼苗的受伤害程度都随着增加,在不同的西瓜品种之间受伤害程度有差异,但是同一品种内同一NaCl浓度下,西瓜幼苗受伤害程度二倍体大于四倍体;从甲基化水平看,西瓜幼苗基因组DNA全甲基化率、半甲基化率、总甲基化率都随着NaCl浓度的增加而降低,同一NaCl浓度处理下甲基化率二倍体大于四倍体,二倍体和四倍体西瓜甲基化水平与其受伤害程度呈正相关;从甲基化模式来看,NaCl胁迫后DNA的去甲基化比率降低,超甲基化比率升高,并且其变化幅度是四倍体大于二倍体,不同倍性西瓜幼苗的甲基化模式与其受伤害程度呈负相关。【结论】NaCl胁迫后西瓜幼苗基因组DNA的甲基化状态发生了变化,并且这种变化与NaCl胁迫程度高度线性相关,西瓜幼苗通过降低甲基化率和降低去甲基化比率来应对NaCl胁迫,四倍体较二倍体有更低的甲基化比率和去甲基化比率,抗逆性四倍体强于二倍体。     

四倍体与二倍体白桦的光合特性比较

以4年生四倍体白桦和二倍体白桦为试材,对其光合作用日变化、光响应曲线、CO2响应曲线和叶绿素荧光参数进行测定.结果表明:①四倍体和二倍体白桦均有光合作用"午休"现象,四倍体的全天最大净光合速率极显著高于二倍体(P＜0.01),较二倍体提高了24.81%.②光饱和点、光补偿点和羧化效率等指标在两者之间的差异也极显著(P＜...