德国牧羊犬冷冻精子超微结构的研究

运用电子显微镜技术观察了２头德国牧羊犬冷冻精子超微结构的变化，结果表明，冷冻的犬精子畸形率明显上升，表现出不同程度的质膜破损或脱落，精核膨胀，中段膨胀，顶体膨胀、部分脱落或全部脱落，螺旋线粒体膨胀、断裂、剥离和丢失。犬精子的原生质膜、顶体、线粒体在冷冻过程中最易受到损害，２头公犬冷冻精子的顶体完整率分别为３６．９％和２５．８％。     

德国牧羊犬精子超微结构及超低温冷冻对精子超微结构的影响

为了研究超低温冷冻前后德国牧羊犬精子超微结构的变化,采用扫描电镜和透射电镜对冷冻前后德国牧羊犬精子超微结构变化进行研究,结果显示在扫描电镜下,鲜精整体呈“蝌蚪状”,头部呈扁卵圆形.在透射电镜下精子纵切面头部呈“楔形”,头部细胞膜由外向内分别由质膜、顶体外膜、项体内膜和核膜组成.精子尾部中段横切面由外向内可见线粒体鞘膜、9束外周致密纤维,9对轴丝和2根中央微管.精子头长约为5.40 μm,头宽3.26 μm,颈长1.25 μm,颈宽0.55 μm,尾部中段长11.34 μm,中段直径0.87 μm,尾部长55.70 μm,线粒体螺旋数为44旋.鲜精和冷冻前精子头部、颈部和尾部形态变化差异均不显著(P＞0.05).超低温冷冻后精子头部、颈部和尾部发生形态变化的精子数极显著高于鲜精和冻前精子数(P＜0.01).冻后顶体发生明显形态变化的精子占54.21％,高于发生颈部形态变化(10.61％)和尾部形态变化(28.83％)的精子数.结果表明鲜精和冻前精子形态变化不显著,而超低温冷冻后精子头部、颈部和尾部发生形态变化的精子数显著高于鲜精和冻前精子数.     

德国牧羊犬精液冷冻保存研究

用手握法采９条德国纯种牧羊犬（２～８岁）精液,在卵黄Ｔｒｉｓ和卵黄－葡萄糖稀释液中添加保护剂甘油和ＤＭＳＯ,液氮熏蒸制作颗粒冻精。结果表明,卵黄－Ｔｒｉｓ稀释液优于卵黄－葡萄糖稀释液。ＤＭＳＯ单独加和与甘油混合加均不利于解冻后精子活率,最佳甘油浓度为４％～６％,始冻温度－１５０℃热平衡温度－１０５℃,入氮温度－１１８℃,保持了正常的冷冻温度曲线,干解冻法解冻后活率高于湿解法（Ｐ〈０．０５）。在最优     

不同家禽卵黄对德国牧羊犬精液冷冻的影响

为了探索不同家禽卵黄在德国牧羊犬精液冷冻中的应用效果,分别在精液冷冻稀释液中添加不同家禽(鸽、鸡、鸭、鹅和鹌鹑)和不同浓度(10%、15%、20%、25%和30%)的卵黄,并分别对冷冻前和解冻后的精子活率、顶体完整率和畸形率进行比较分析。结果:在德国牧羊犬精液冷冻稀释液中加入相同浓度的5种不同家禽卵黄,家鸽组冻后活率、顶体完整率和畸形率分别为(52.0±2.1)%、(54.3±3.7)%和(27.7±1.8)%,对德国牧羊犬精液冷冻有最佳的保护效果,其最佳浓度为20%。因此,鸽卵黄可替代鸡卵黄,作为冷冻稀释液的组成成分,用于德国牧羊犬的精液冷冻。     

梅花鹿精子冷冻前后形态和超微结构的研究

采用光学显微镜和电子显微镜对冷冻前后的梅花鹿精子的形态和超显微结构进行了观察。结果表明：梅花鹿精子全长６１．６±２．７０μｍ,其中头长７．１９±０．４７μｍ,中段长１２．０８±０．７５μｍ。线粒体的螺旋数是６３．６８±４．６６旋,中段线粒体每个螺旋约由３～５个线粒体组成。梅花鹿精子超微结构有３个特点：一是头部的厚度为牛、羊、猪精子的１／２;二是在中环处的质膜未见反折现象,并且主段与中段的联接是以套管式镶嵌;三是末段以９＋２结构变成２０根（１２＋７＋１）单丝管形式排列。冷冻处理可使梅花鹿精子顶体膨胀,顶体内容物丢失,顶体内发生空泡,顶体外膜自身囊泡化,线粒体发生断裂和丢失,末段纤维束因质膜丢失而分散成扫帚状。冷冻后的梅花鹿精子畸形率极显著增高（Ｐ＜０．０１）,冷冻解冻是致使梅花鹿精子顶体完整率和活力降低的主要原因。     

精子形态的实验室检查

准确预测公猪精液中精子的受精能力 ,对于实行人工授精的种猪群来说具有重要的经济意义。遗憾的是 ,当前传统的精子检测法并不能很好地反映精子的受精能力 ,因为采用这种方法只能检出质量最低的精液样品。但由于新的、更好的技术正在不断地被开发出来 ,所以在采精后进行常规精液检查还是能够有所作为的。将精子在精液中的浓度、精子的持续运动力、活精子所占的百分比以及精子的形态或结构等测定结果加在一起 ,就可得到宝贵的信息 ,使我们能够将质量明显较差的样品剔除。在各种各样的这些检测中 ,本文集中讨论形态学评定方法可能是比较有用的…     

奥系西门塔尔种公牛精子顶体形态畸形的研究

精子顶体在受精过程中的重要作用曾有异议。但通过受精时期配子形态学的研究,已经得到充分证实。顶体完整率的重要性,先是从顶体维持力与公牛90天不返情率有肯定的相关关系得到证实(r=0.81,P<0.01),以后Saccke(1980)和Garner(1984)用混合精液输精进一步证实了完整顶体百分     

德国牧羊犬肠套叠的诊治

犬肠套叠是一段肠管套入邻近相接肠管中的疾病。动物医院接诊了一例以腹痛为主要症状的德国牧羊犬,经过流行病学调查、临床检查、血液检查、犬瘟热病毒及犬细小病毒检查、B超检查及腹腔探查,诊断病犬为肠套叠。对病犬采用手术疗法获得治愈。     

利木赞种公牛精液冷冻中精子顶体和精清内酶的变化

对三头法车引进利木赞公牛的精液进行了冷冻过程中顶体变化民政部和精清内谷草转氨酶ＧＯＴ和乳酸氢酶ＬＤＨ的变化进行了研究，结果表明，（１）精子的平均活力与Ｉ类顶体率无显著相关关系；（２）冷冻会使精了Ｉ类顶体率下降；（３）冷冻会使ＧＯＴ和ＬＤＨ显著上升（Ｐ〈０．０５）。     

猪精子冷冻损伤的研究

冷冻保存后的猪精子，结构受到损伤，妊娠率下降。其超微结构变化与正常鲜精的顶体反应非常相似，包括质膜膨胀碎裂，顶体外膜泡状化。我们提议上述变化称为假顶体反应。     

顶体反应的结构变化及影响顶体完整率因素初探

综述了不同动物的精子发生顶体反应时顶体的结构变化，研究者对此不同的观点，影响顶体完整的四种因素：冷冻，抗精子抗血清，培养液，磁场。     

德国牧羊犬的免疫系统缺陷

相比其它品种犬,德国牧羊犬倾向于发生相当频繁的问题是免疫系统缺陷综合症。该品种有许多个体带有称作IgA的一种特殊免疫球蛋白缺乏症,这个缺陷基因可能与染色体上通常控制免疫的基因非常接近。一些兽医对此类问题的出现并不很了解,忽略了涉及免疫系统的缺陷和对症治疗,导致错误的开出处方药品,或根本无法处理。因此,有必要对犬的免疫介导疾病有所了解和认识。     

冷冻保存对绵羊精子顶体蛋白酶活性的影响

为了检测冷冻保存对绵羊精子顶体蛋白酶活性的影响,试验采用改良的明胶膜片法对冷冻保存前后小尾寒羊精子顶体蛋白酶的活性进行研究。结果表明:冷冻保存后精子顶体蛋白酶阳性反应率[(47.00±2.55)%]和平均成环直径[(23.89±0.22)μm]与冷冻前精子顶体蛋白酶阳性反应率[(77.00±2.00)%]和平均成环直径[(37.26±0.47)μm]相比差异极显著(P<0.01)。说明冷冻保存对绵羊精子顶体蛋白酶活性造成显著性损伤。     

用台盼兰—姬姆萨染色检测家畜精子顶导反应的研究

本文探讨了用台盼兰—姬姆萨染色检测家畜精子顶体反应的可行性。用肝素或钙离子载体诱发精子顶体反应。根据染色结果将精子分为四类:a)核后帽部不着色或淡青色,顶体不着色或部分紫红色(有顶体反应活精子);b)核后帽部暗青色.顶体部不着色或部分暗红色(有顶体反应死精子);c)核后帽部不着色或淡青色,顶体部紫红色(无顶体反应活精子);d)核后帽部暗青色,顶体部暗紫红色(无顶体反应死精子)。有顶体反应活精子百分率与仓鼠卵穿透率呈强正相关。从而证明台盼兰—姬姆萨染色是检测家畜精子顶体反应的有效手段,并能预测获能处理后精子的受精能力。     

猪精液冷冻技术的研究

以解冻后的精子活率、活力、质膜完整率、顶体完整率和人工授精结果为判定指标 ,比较了几种冷冻稀释液、解冻液及冷冻 -解冻程序对猪精液冷冻的效果 ,并对所筛选出的最佳稀释液和冷冻程序做了改进。结果如下 :(1) 号稀释液冷冻解冻后的精子活力 (32 .4± 7.3) %、活率 (4 2 .2± 3.2 ) %、顶体完整率 (6 2 .3± 0 .8) %和弯尾率 (4 2 .6± 7.5 ) %均显著高于 、 、 号稀释液 (P<0 .0 5 )。 (2 )在 号稀释液中添加 0 .5 %、1%和 2 %的 O.E.P(氨基 -钠 -十二烷硫酸酯 )使精子活率提高 5 %、弯尾率提高 6 %、顶体完整率提高近 10 % ,与对照组相比差异显著 (P<0 .0 5 )。 (3)应用改进的稀释液 ( 液加 1% O.E.P) ,细管法比颗粒法冷冻精子活率提高近 7个百分点 ,活力提高 6个百分点 (P<0 .0 5 )。(4 )室温预平衡 4h的精子活力和活率都比对照组 (0 h)有显著提高 (P<0 .0 5 ) ,而预平衡 2、6 h的精子活力和活率与对照组差异不显著 (P>0 .0 5 )。 (5 ) 号解冻液解冻后精子活力 (4 2 .9± 2 .6 ) %显著高于 、 、 号解冻液 (P<0 .0 5 )。 (6 )用 5 0℃水浴解冻精子的活力 (4 6 .3± 2 .6 ) %显著高于 39℃ (4 2 .9± 2 .6 ) %和 70℃水浴 (4 1.1± 5 .7) %解冻的精子活力 (P<0 .0 5 )。 (7)精清和 号解冻液     

不同染色与冷冻方法对关中奶山羊X、Y精子的分离及应用效果研究

为探究不同Hoechst 33342的染色浓度与冷冻方法对关中奶山羊X、Y精子进行分离及应用效果的影响,本实验采集6只关中奶山羊精液,使用浓度分别为10、11、12、13μL/m L的Hoechst 33342(5 mg/m L)染色液对精液样本进行染色,以流式细胞仪分离X精子和Y精子,应用3种不同冷冻程序冷冻精液,应用体外受精与胚胎发育技术评估关中奶山羊X、Y精液的分离准确性。结果表明：12μL/m L Hoechst 33342染色条件下,奶山羊X、Y精子分离效率达到91.02%,高于10μL/m L和13μL/m L(P<0.01),最高分选速度为4 134个/s(P<0.05);公羊个体的精液品质越好,其精子的分离速度越快,但对分离准确率的差异不显著;使用冷冻程序2进行关中奶山羊的X、Y精子冷冻的效果较好（P<0.05）;体外受精48 h后,使用Y精子进行受精的卵细胞的卵裂率高于使用X精子（P<0.05）,在胚胎培养第9天,使用Y精子进行受精的卵细胞的囊胚发育率高于使用X精子（P<0.05）。总之,当Hoechst 33342浓度为12μL/m L...     

银狐精子冷冻前后超微结构的研究

采用按摩法采集银狐精液，将鲜精和冷冻解冻精液离心、固定，制备电镜样品，通过电镜观察，研究精子冷冻前后超微结构变化，并进一步研究受精机理和精子冷冻的基础理论，以推动狐狸人工授精技术的发展。     

一例德国牧羊犬输精管结扎手术

公犬避孕方法有手术法、药物法和冷冻法.利用手术法进行睾丸摘除,为目前宠物临床上公犬避孕最常用的方法.但利用手术法对公犬进行输精管结扎避孕的报道则十分少见.2007年9月,笔者实施了一例德国牧羊犬输精管结扎手术.现将手术情况报告于后.     

不同保存条件对猪精子质膜、顶体及线粒体损伤的研究

探明体外保存过程中精子的损伤机制对精液体外保存效果的提高具有重要意义。因此,通过研究旨在探讨不同温度及稀释液对保存过程中精子结构及功能的影响。采用联合荧光染色方法,用流式细胞仪分别对Ⅰ液(葡萄糖-卵黄-蔗糖-柠檬酸钠)(17℃和4℃)和Ⅱ液(葡萄糖-卵黄-蔗糖)(17℃)保存条件下的猪精子的质膜、顶体及线粒体的功能进行检测。结果表明,Ⅰ液保存条件下,17℃保存组的精子质膜完整率[5 d,(83.07±1.64)%]、活精子质膜磷脂酰丝氨酸(PS)未外翻比率[5 d,(84.00±2.64)%]、活精子顶体完整率[5 d,(76.72±1.07)%]和活精子高能线粒体比率[5 d,(52.01±0.37)%]显著高于4℃保存组[5 d,(21.84±0.49)%;5 d,(16.53±1.67)%;5 d,(15.44±1.25)%;5 d,(12.02±0.36)%](P0.01);17℃保存条件下,Ⅱ液保存的精子质膜完整率[5 d,(85.24±2.66)%]、活精子高能线粒体比率[(5 d,(58.93±0.65)%]和活精子PS未外翻的比率[5 d,(87.86±0.88)%]显著优于Ⅰ液[5 d,(83.07±1.64)%;5 d,(52.01±0.37)%;5 d,(84.00±2.64)%],但在活精子顶体完整率方面[Ⅱ液,5 d,(80.57±0.52)%;Ⅰ液,5 d,(76.72±1.07)%]两者差异不显著(P﹥0.05)。可得出结论:精液体外保存过程中,精子的质膜、顶体和线粒体功能随保存时间的增加而降低;4℃比17℃保存对精子质膜、顶体和线粒体结构损伤更大;在精子质膜、顶体和线粒体方面,Ⅱ液比Ⅰ液具有更好的体外保护效果。