熟肉制品中李斯特氏菌污染情况定性定量及血清型分析

单核细胞增生李斯特氏菌(L.monocy togenes,LM)是一种革兰氏阳性人畜共患病的病源菌。近年来,欧美因食品感染的李斯特氏菌病患者呈上升趋势,特别是免疫力低下的孕妇和儿童容易被感染,1981-1992年10年间即发生4次世界范围的大流行。它能引起败血症、脑膜炎以及孕妇流产等,且临床死亡率高达20%~70%,WHO将其列为20世纪90年代食品中4大致病菌之一。由于它广泛存在于动植物食品中,并且该菌在食品中繁殖温度范围较宽(1~45℃),能抵抗强光、嗜冷(在4℃条件下仍能生长)、能耐受高盐和硝酸盐等部分防腐剂,极易引起冷藏即食食品食物中毒的暴发流行,…     

应用PCR检测单核细胞增生性李斯特氏菌

单核细胞增生性李斯特氏菌（Listeria Monocytogenes，LM0）简称单增李氏菌，是一种重要的人畜共患病和食源性病原菌之一，可引起人和多种动物的脑膜炎、败血症及流产等症状，死亡率达30％～40％，对畜牧业生产和人类健康构成严重威胁。传统的分离鉴定方法检测周期长、操作繁琐，不能满足食品快速检测和疾病暴发时诊断的需要。而PCR方法具有检测速度快、操作简便和特异性强等优点。本试验通过扩增hly基因部分片段，建立单增李氏菌PCR检测方法。     

单核细胞增生性李斯特氏菌hly基因的克隆表达

以单核细胞增多性李斯特氏菌（Listeria Monocytogengs,LMO）LMO-0586基因组DNA为模板,运用PCR扩增得到片段大小为1646bp的致病基因李氏溶血素（hly）基因,并克隆到pMD18-T载体上,构建克隆载体pMD18-T-hly。经测序正确后,将hly基因克隆至表达载体pGEX上构建表达质粒pGEX-6P-1-hly。在IPTG诱导下,携带pGEX-6P-1-hlyA的E．coli BL21（DE3）高效表达分子量约为82KDa的可溶性蛋白及包涵体形式的蛋白。为进一步研究溶血素蛋白的结构、功能,LMO的分子流行病学调查、诊断试剂盒的开发提供依据。     

欧盟成员国多种食源性细菌性人畜共患病传播情况报告

本文总结了欧盟成员国中多种食源性细菌性人畜共患病,如弯曲杆菌病、沙门氏菌病、李氏杆菌病和产肠毒素性大肠埃希氏菌病的发生情况,为评价动物源性食品对人类健康的危害、制定防治措施提供了一定的参考。     

李斯特氏菌因子血清的制备及食品检测的免疫磁性分离——PCR（MI …

首先进行了李斯特氏菌因子血清的研制,制备出了可对所有李斯特氏菌分型的１５个Ｏ抗原因子和４个Ｈ抗原因子的因子血清。利用复合因子血清的多克隆抗体包被磁性球、对食品中的单核细胞增多性李斯特氏菌进行免疫磁性分离,并与ＰＣＲ方法相结合,建立了检测食品中单核细胞增多性李斯特氏菌的ＭＩＰＡ样品的检测表明,本方法能够有效地克服食品基质、培养基成分和杂菌对ＰＣＲ检验的干扰作用。食品样品在ＥＢ增菌液中增菌１２ｈ后,检     

应用PCR方法鉴别绵羊致病性单核细胞增多症李氏杆菌

动物李氏杆菌病病原主要有两种,分别是单核增多症李氏杆菌和伊氏李氏杆菌(仅引起动物发病),前者是主要的,它是一种危害严重的人畜共患病病原体。人畜感染后主要表现脑膜炎、败血症、流产及单核细胞增多。近几年来,新疆先后有5个地区的3个牧区、4个农区养羊场爆发以神经症状为主要特征的李氏杆菌病,造成1 300余只羔羊死亡,经从绵羊实质器官和饲草中分离培养和形态学观察,初步确定为7株李氏杆菌,分别命名为90SB1、90SB2、90SB5、90SS1、125SL1、G1和饲草李。结合溶血试验、动物试验,再进行PCR特异性扩增,确定前5株为单核细胞增多症李氏…     

欧洲人畜共患传染病的来源与流行趋势

近几十年来,人畜共患传染病在全世界呈多发趋势,原有的人畜共患传染病没有减少,新的人畜共患传染病又不断发生。在近30年中,已经确     

应用PCR技术调查市售猪肉产单核细胞李斯特菌

产单核细胞李斯特菌(LM)为李斯特菌属中的一个种,在病原学上作为一种人畜共患病和食源性疾病的致病菌已得到世界范围的普遍公认。LM在自然界中分布广泛,具有耐热(60℃)、耐低温(4℃)、耐盐、耐干燥、耐化学试剂等特性,食用被LM污染的食品而引起人体感染发病易感人群如新生儿、孕妇、老人及免疫抑制病人等,临床上表现为恶心、呕吐、腹痛、腹泻,发烧、头疼、类似感冒样,脑膜炎、败血症、心内膜炎,孕妇感染后流产,致死率高达30%以上,对免疫缺损的病人,致死率甚至高达70%。LM本身的生物学特点及其致病性及突出的公共卫生学重要性引起了国际…     

动物防疫和防疫监督的工作用语及含义浅析(五)

(接上期)10动物源性食品和食品安全广义的“食品”范围甚宽,凡供人类食用的物品都可以叫食品,如糖、酒、酱、醋、茶、饮料、蔬菜、水果、动物产品、水产品等等。动物源性食品是指来源于动物的食品,如肉、肉制品、蛋、蛋制品、奶、奶制品、血、油、蜜等,其中包括生鲜的和已经加工熟制的两个方面。《动物防疫法》有关于动物产品“经检疫合格作为食品的,……”等表述,这里应当是指经检疫或检疫处理对人类已无病害作用、可直接供人类食用或烹饪的动物产品。所谓“放心”、“安全”的动物源性食品,不但包括了这类无病害作用的动物产品,还包括兽药…     

三种食源性致病菌多重荧光PCR检测方法的建立

根据沙门氏菌、空肠弯曲杆菌和单核增生李斯特氏菌的保守基因序列,设计特异性引物和以不同荧光素标记的探针。通过对荧光PCR反应体系和反应条件的优化筛选,建立了检测沙门氏菌、空肠弯曲杆菌和单核增生李斯特氏菌的三重荧光PCR检测方法。为了评价所建立的实时PCR检测体系的特异性,试验中选取了阳性菌株及干扰菌株进行特异性验证。同时对梯度稀释的纯化DNA和不同浓度引物探针进行检测以确定方法的灵敏度。结果表明,该方法有效、特异、敏感、稳定,对于动物产品中沙门氏菌、空肠弯曲杆菌和单核增生李斯特氏菌的快速检测具有重要应用价值。     

李斯特氏菌因子血清的制备及食品检测的免疫磁性分离-PCR(MIPA)方法的建立

首先进行了李斯特氏菌因子血清的研制,制备出了可对所有李斯特氏菌分型的 １５ 个 Ｏ 抗原因子和４ 个 Ｈ 抗原因子的因子血清。利用复合因子血清的多克隆抗体包被磁性球,对食品中的单核细胞增多性李斯特氏菌进行免疫磁性分离,并与 Ｐ Ｃ Ｒ 方法相结合,建立了检测食品中单核细胞增多性李斯特氏菌的 Ｍ Ｉ Ｐ Ａ方法（免疫磁性分离—聚合酶链反应方法,ｍ ａｇｎ ｅｔｉｃ ｉｍ ｍ ｕｎｏｐｏｌｙｍ ｅｒａｓｅ ｃｈａｉｎ ｒｅａｃｔｉｏｎ ａｓｓａｙ）。对菌液、模拟样品的检测表明,本方法能够有效地克服食品基质、培养基成分和杂菌对 Ｐ Ｃ Ｒ 检验的干扰作用。食品样品在 Ｅ Ｂ增菌液中增菌 １２ ｈ 后,检测的敏感度达 ５ Ｃ Ｆ Ｕ／ｍ Ｌ,可以在 ２０ ｈ 内完成检测。本方法对实际食品样品的检测结果,与国家标准检验方法检测的结果一致。     

单核细胞增多性李斯特菌hlyA基因序列及溶血素活性测定

从3株不同来源的单核细胞增多性李斯特菌中PCR扩增溶血素编码基因hlyA,连接到T克隆载体转化到受体菌DH5α中,经菌落PCR和提取质粒酶切鉴定后测序,对测定的hlyA基因核苷酸序列及推导的氨基酸序列进行分析,结果表明,从3个菌株克隆的hlyA基因具有完整的开放阅读框,同源性在96.9%以上;其推导的LLO氨基酸序列同源性在97.9%以上,N端存在相同的PEST基序,C端存在相同的保守性11肽结构.建立和运用分光光度法对3个试验菌株的溶血素活性进行了检测,结果表明,在pH5.6时LLO溶血活性最高,在pH7.0时LLO溶血活性基本丧失.本试验单核细胞增多性李斯特菌的流行病学分析和基因工程疫苗载体研究提供了依据.     

预防食源性人畜共患病的全球专业技术

沙门氏菌是全世界中最常见的食源性人畜共患病,且食用动物是非伤寒(人畜共患病)沙门氏菌感染的贮库。通过减少鸟类内脏器官的定植,防止鸡蛋污染,减少粪便脱落,沙门氏菌疫苗可降低公共健康风险,从而减少环境污染。德国罗曼动物保健有限公司推出的最新产品——AviPro沙门氏菌疫苗通过饮用水安全、方便地进入鸟类体内,并避免了自然路径的沙门氏菌交叉感染,深受消费者信赖。     

专家支招如何科学防控畜禽疫病

本届论坛的主题为人畜共患病与动物源性食品安全,论坛分为大会报告、人畜共患病与动物源性食品安全论坛、畜禽疫病防控技术论坛等三个部分,本文仅撷取部分专家报告中的精彩部分以飨读者。     

专家支招如何科学防控畜禽疫病

本届论坛的主题为人畜共患病与动物源性食品安全,论坛分为大会报告、人畜共患病与动物源性食品安全论坛、畜禽疫病防控技术论坛等三个部分,本文仅撷取部分专家报告中的精彩部分以飨读者。     

西宁市郊奶牛"两病"的现状与分析

奶牛“两病”是指奶牛的结核病和布鲁氏菌病(以下简称布病),是世界动物卫生组织(OIE)规定强制报告的两种疫病,均属于人畜共患病。人的牛型结核感染主要是通过饮用生奶引起,尤其是儿童常因喝生牛奶被感染而患肠结核杆菌病。奶牛“两病”严重威胁着人民的身体健康和畜牧业持续稳定发展。随着人民生活水平的提高,奶产品在人们饮食结构中的比例将越来越大,     

人兽共患病的综合防控措施

SARS、禽流感的恐慌渐渐远去,近期人兽共患病又有抬头趋势,布鲁杆菌病、炭疽病的死灰复燃,给我们敲响了警钟,人类与疾病的斗争从来没有停止,我们要时刻提醒自己,任何时候都不能忽视人兽共患病的存在,并与之斗争到底。     

家畜的李氏杆菌病探讨

家畜的李氏杆菌病是由单核细胞增生、李斯特氏菌引起的一种人畜共患的散发性传染病。发病时以出现脑膜脑炎、败血症、心内膜炎为其特征。临床上,病畜大多出现中枢神经系统机能障碍,目光呆滞,视力障碍或失明,头、颈部肌肉痉挛,病畜初期出现运动失常,做圆圈运动,严重则卧地不起,四肢呈游泳样的划动,阵发型。病程最急性的几小时就死亡。