4种葡萄卷叶伴随病毒多重RT-PCR检测

 葡萄受卷叶伴随病毒侵染后,树势减弱,抗逆性变差,果穗着色不良,成熟期推迟,含糖量降低。目前已报道11种葡萄卷叶伴随病毒(Grapevine leafroll-associated virus,GLRaV)。为提高检测效率,降低检测费用,本文在研究单个卷叶伴随病毒RT-PCR检测技术基础上,对4种葡萄卷叶伴随病毒的多重RT-PCR模板浓度、引物浓度和退火温度进行优化,建立了同时检测葡萄卷叶伴随病毒-1(GLRaV-1)、葡萄卷叶伴随病毒-3(GLRaV-3)、葡萄卷叶伴随病毒-4(GLRaV-4)和葡萄卷叶伴随病毒-5(GLRaV-5)的多重RT-PCR技术体系。模板浓度、引物浓度、Taq DNA聚合酶浓度、退火温度和循环次数对多重RT-PCR检测结果均有较大影响,而在一定范围内改变延伸时间和dNTP浓度对检测结果影响较小。对4种葡萄卷叶伴随病毒的PCR产物进行克隆和测序,扩增基因片段与GenBank中登录的基因序列同源性为95%~99%。所建立的多重RT-PCR技术检测田间样品效果良好。     

利用酵母双杂交研究葡萄卷叶伴随病毒2号 p24与寄主互作的初步结果

葡萄卷叶病(grapevine leafroll disease,GLRD)是一种世界性病毒病害,严重影响葡萄生产和葡萄酒产业.至今已报道11种具不同血清学关系的葡萄卷叶伴随病毒(Grapevine leafroll-asso-ciated virus,GLRaV)均可引起葡萄卷叶症状,其中GLRaV-2为长线形病毒属(Closterovirus)成员[1].     

基于DPO引物的SYBR Green Ⅰ实时荧光RT-PCR检测葡萄卷叶伴随病毒3号

正葡萄卷叶病是葡萄上一种重要的病毒病,在国内分布较为普遍,引起该病的葡萄卷叶伴随病毒(Grapevine leafroll-associated virus,GLRaV)是由多种病毒单独或复合侵染造成。已报道的GLRaVs至少有5种,其中GLRaV-3是葡萄卷叶病毒属Ampleovirus典型成员(Ling et al.,2004)。目前,检测GLRaV-3的方法主要有指示植物法、酶联免疫吸附法、     

福建省葡萄病毒病的调查和研究

１９９０～１９９２年作者对福建省葡萄产区进行了抽样调查，发现该省约３１％的果园有葡萄扇叶病（ＧＦＬＶ）和葡萄卷叶病（ＧＬＲＶ）。在调查的１１３００株葡萄中（６０２亩），ＧＦＬＤ株发病率为１３．２７％，造成葡萄减产２７．２％；ＧＬＲＶ株发病率为７．３％，减产２１．５％。病株表现为不同程度的种性退化，生长赢弱、停滞，果实品质下降，果粒成熟不齐。     

福建省葡萄病毒病的调查和研究

１９９０～１９９２年作者对福建省葡萄产区进行了抽样调查，发现该省约３１％的果园有葡萄扇叶病（ＧＦＬＶ）和葡萄卷叶病（ＧＬＲＶ）。在调查的１１３００株葡萄中（６０２亩），ＧＦＬＤ株发病率为１３．２７％，造成葡萄减产２７．２％；ＧＬＲＶ株发病率为７．３％，减产２１．５％。病株表现为不同程度的种性退化，生长赢弱、停滞，果实品质下降，果粒成熟不齐。     

5种杀虫剂对葡萄十星叶甲的防治效果

<正>葡萄是红花岗区大力发展的鲜果产业,种植面积约680 hm2。十星叶甲是葡萄上的主要害虫,以成虫和幼虫取食葡萄叶片和嫩芽,大发生时,将叶肉食尽,仅留叶脉。大部分种植户对葡萄十星叶甲的防治意识差,乱用药现象普遍,防治效果差,影响了葡萄的产量和品质。为此,我们于2014年6月16—23日,选用5种杀虫剂对葡萄十星叶甲进行田间药效试验,以筛选出防治效果好、适合在全区大面积推广应用     

土耳其在葡萄上发现草莓潜环斑病毒

1983年晚秋,在调查蔬菜、大田作物、果树病毒病时发现,在土耳其西部Gaziantep 地区的商品葡萄园内一种从国外引进的葡萄品种 Alicante Bouchet 表现严重卷叶症状,生长受抑制,叶片轻度畸形。从这些葡萄上采集插条,插植于温室中,取其新生叶片磨擦接种草本鉴别寄主,结果发现了一种病毒,经鉴定为草莓潜环斑病毒(SLRV)的一个株系,并与从意大利葡萄上分离的草莓潜环斑病毒进行了比较研究。鉴定依据如下:     

土耳其黑海西部首次报道由Cylindrocladium pseudonaviculatum引起的黄杨疫病

锦熟黄杨(Buxus sempervirens)在土耳其马尔马拉海和黑海沿岸种植面积约为1000hm2。在2011年12月,在黑海西部地区发现了严重的疫病及落叶症状。叶片上出现灰白色圆形病斑,散布在叶片表面。粗枝     

葡萄卷叶伴随病毒4和5简并引物和多重PCR检测

研究建立了葡萄卷叶伴随病毒4和5(Grapevine leafroll associated virus 4and 5,GLRaV-4and 5)的简并引物及多重PCR检测方法。比较了单一PCR、多重PCR和简并引物检测方法的灵敏度,并对简并引物的特异性进行了分析。结果表明,采用简并引物和多重PCR对这两种病毒进行检测,其灵敏度与单一PCR相同,且简并引物仅对葡萄卷叶伴随病毒4和5具有特异性。本研究建立的方法能够同时、快速、灵敏地检测上述2种葡萄卷叶病毒,提高了检测效率,降低了检测费用。     

葡萄卷叶伴随病毒2号和3号辽宁分离物部分基因组的序列分析

 将采自辽宁兴城地区在生长期间具典型卷叶病症状的金星无核(Venus Seedless)葡萄品种休眠枝条,用RT-PCR检测4种葡萄卷叶伴随病毒(Grapevine leafroll-associated viruses,GLRaVs),扩增得到了葡萄卷叶伴随病毒2号(GLRaV-2)和葡萄卷叶伴随病毒3号(GLRaV-3)两种病毒的主要外壳蛋白(major coat protein,CP)基因的完整序列(GenBank登录号分别为FJ786017和FJ786016)。这表明该葡萄植株受到了GLRaV-2和GLRaV-3辽宁分离物(GLRaV-2-LN和GLRaV-3-LN)的复合侵染。根据检测结果,克隆了GLRaV-2-LN基因组3'端CPm (minor capsid protein)、p19(19-kDa protein)和p24(24-kDa protein)基因(GenBank登录号分别为FJ786018、FJ786019和FJ786018)。序列分析表明,GLRaV-3-LN的CP基因全长942 nt,与已报道的国内外其它分离物CP基因全序列相比,核苷酸序列同源性为89.8%~91.8%,由此推导的氨基酸序列同源性为94.9%~97.4%。GLRaV-2-LN的CP、CPm、p19和p24基因全长分别为597 nt、672 nt、486 nt和618 nt。与国外报道的几个分离物的相应蛋白基因全序列相比,核苷酸序列同源性分别为88.3%~100.0%、78.7%~99.9%、75.1%~99.4%和87.5%~99.5%;由此推导的氨基酸序列同源性分别为92.9%~100.0%、89.2%~100.0%、73.9%~99.4%和89.3%~99.0%。     

基于DPO引物的SYBR Green I实时荧光RT-PCR检测葡萄卷叶伴随病毒3号

葡萄卷叶病是葡萄上一种重要的病毒病,在国内分布较为普遍,引起该病的葡萄卷叶伴随病毒(Grapevine leafroll-associated virus,GLRaV)是由多种病毒单独或复合侵染造成.已报道的GLRaVs至少有5种,其中GLRaV-3是葡萄卷叶病毒属Ampleovirus典型成员(Ling et a1.,2004).目前,检测GL-RaV-3的方法主要有指示植物法、酶联免疫吸附法、分子生物学检测法等,而这几种技术均存在不足.SYBR Green Ⅰ实时荧光RT-PCR技术关键要避免引物之间、引物与其它模板之间的非特异性互作干扰.由于DPO引物自身以及引物之间很少形成二级结构且对退火温度不敏感等特点(Chun et al.,2007),因此,本研究结合SYBR Green和DPO引物的各自优点,建立一种特异性强、灵敏度高的GL-RaV-3检测方法,以期为葡萄卷叶病毒的快速检测及预防提供技术支持.     

咸阳地区2002年葡萄炭疽病流行原因分析及防治对策

随着种植业结构调整,咸阳地区新增葡萄种植面积约2600hm2,主栽品种主要是美国红提、美人指、户太8号、巨峰等,约占葡萄栽培面积的95%。2002年,本地区葡萄炭疽病重发生面积2400hm2,一般果园发病12%,重发生果园发病达30%,造成大量烂果,给果农造成了严重的经济损失。为此,笔者经调查研究,已找出葡萄炭疽病在本地区的流行原因,并提出相应的防治对策。1流行原因1)气象条件适宜。葡萄炭疽病菌侵染的最低温度为15℃,最适温度为28～30℃,若这时降雨超过15mm,24～48h即可完成侵染。本地区2002年5～8月份,降水量超过15mm有9次,最大降水在6月9日,为57.1…     

葡萄卷叶相关病毒2号在美国密苏里州杂交葡萄“Vidal Blanc”品种上的首次报道

葡萄卷叶病是在世界范围内普遍发生的病毒病害之一。目前已知至少有10种葡萄卷叶相关病毒(GLRaV 1～7号,9号,10号,11号)与这种病害有关。葡萄卷叶相关病毒2号(GLRaV-2)有许多不同的分离物,它们不仅能引起卷叶症状,还会引起嫁接不亲和、葡萄幼树衰退、砧木茎部枯死等。     

大棚番茄几种卷叶病的发生与防治

近年来,大棚番茄栽植成为夏县蔬菜生产的主导品种,产量大,效益好,2006年栽植面积400hm^2,2007年面积达667hm^2,667m^2效益1万～1.2万元,农民种植积极性较高,但近年来番茄上出现的卷叶病,影响叶片正常的光合作用,从而严重影响番茄产量和品质的提高。一般常见的卷叶病有生理性卷叶、病毒性卷叶和茶黄螨引起的卷叶3种情况，在生产中应区别对待，加强防治。     

日本发生的葡萄病毒类病毒病

目前,被认为是病毒或病毒性的葡萄病害有３０多种,从葡萄上检测出病毒约３０种（Ｂｏｖｅｙ等,１９８０）,并已弄明,其中的２０种病毒的传播媒介为昆虫、线虫、土壤菌（表１）。其中,世界性广泛发生、危害严重的有葡萄扇叶病、葡萄卷叶病,尤其在欧美,以扇叶病为代...     

番茄田常见卷叶型病害的识别及防治方法

随着农业种植结构的变革,我市日光温室大棚番茄的种植面积也逐年有所增加。在诸多番茄病害中,植株表现卷叶的病虫害主要有番茄生理卷叶病,番茄病毒病,茶黄螨危害症状。近几年,这几种病害的发生日趋严重,重发病田发病率高达90％以上,严重影响番茄的产量和品质。茶黄螨由于螨体极小肉眼难以观察识别,易于被误认为是生理病害或病毒病害,上述3种卷叶症状较难区别,     

淳安县枣疯病的分布调查

枣疯病是枣树上一种灭毁性病害。多年来在淳安主要枣产区日趋流行,使大批枣树枯死,造成青枣减产,经济严重损失。据统计,全县枣树种植面积为20967亩,约147万多株。已投产面积为4668亩,占种植面积的22.26%。几十年来,枣树种植面积逐年扩大,但因受枣疯病危害,产量一直徘徊在500～600吨之间。为了有效地控制枣疯病流行蔓延,我们组织有关技术人员调查,摸索本县枣疯病分布     

沿河县萄葡霜霉病的发生及防治

<正>葡萄产业是沿河县水果生产中的一项新兴优势产业。近年来,随着农业产业结构的调整,规模化葡萄种植面积逐年增加,沿河县现有葡萄种植面积800 hm2,其中,规模化种植面积566.7 hm2,投产面积293.3 hm2,年产量在300 t左右。葡萄霜霉病影响葡萄的正常生长,一般年份葡萄产量损失72 t,大发生年份产量损失达150 t以上,对葡萄产业生产安全构成严重威胁。为了有效防治葡萄霜霉病的发生为害,笔者介     

沿河县葡萄霜霉病的发生及防治

葡萄产业是沿河县水果生产中的一项新兴优势产业。近年来,随着农业产业结构的调整,规模化葡萄种植面积逐年增加,沿河县现有葡萄种植面积800 hm2,其中,规模化种植面积566.7 hm2,投产面积293.3 hm2,年产量在300 t左右。葡萄霜霉病影响葡萄的正常生长,一般年份葡萄产量损失72 t,大发生年份产量损失达150 t以上,对葡萄产业生产安全构成严重威胁。为了有效防治葡萄霜霉病的发生为害,笔者介绍葡萄霜霉病发生规律及防治技术,以供生产上参考。     

基于VAR模型的鄯善绿洲葡萄种植区的时空分布模拟及预测

借助遥感技术对多时相遥感影像进行信息提取分析,结合野外调查、统计资料等研究新疆鄯善绿洲葡萄种植区的时空分布格局与农作物用地的VAR模型关系,模拟和预测鄯善绿洲葡萄种植区的发展趋势。结果表明:1990—2000年葡萄种植面积增速较快,增长率高达121.18%,2000—2013年增速减缓,增长率仅为20.81%;葡萄种植面积呈现南少北多的现象,其中山南地区在全县占比为31.34%;1990—2013年间葡萄在农作物用地中占比由17.02%增至29.52%,鄯善绿洲农业种植结构日趋平衡;VAR模型显示2014—2023年的葡萄种植面积及农作物用地面积均以较稳定比例扩张,未来鄯善县应加大葡萄产业转型升级,进一步提高核心竞争力,创造更高的绿色GDP。