禽腺病毒琼扩抗原制备方法的研究

用鸡腺病毒Ⅰ型 Ote 株于尿囊腔接种9日龄鸡胚,直接采用感染鸡胚尿囊液原液制备琼扩反应抗原.用该抗原对人工感染腺病毒鸡群抗体的检测取得了满意的结果.对14个鸡场的15群鸡进行了调查.其中6群为腺病毒抗体阳性,阳性率为9～40%。     

应用琼扩试验检查鸡病毒性关节炎

用禽呼肠孤病毒 U.Conn.S.1133株进行的人工感染试验表明,该毒株可侵犯鸡的关节滑膜和腱鞘、跖关节和跗关节,在炎症的局部渗出有少量黄色或带血色的渗出物,少数病鸡出现脓性渗出物。用该毒株感染的鸡胚的尿液或尿囊膜成功地试制出了琼扩试验抗原,用于检查人工感染鸡有明显的特异性,感染鸡抗体的持续期也较长,人工感染后3个月内100%呈阳性反应。用琼扩试验对少数地区的一些鸡场进行血清学调查,证明在我国的某些鸡场中存在病毒性关节炎,污染场的阳性率为6～16%.     

禽呼肠病毒琼扩抗原和血清的制备

以禽呼肠病毒S1133毒株尿囊腔接种10日龄无特定病原体(SPF)鸡胚,无菌收集24 h～120 h的死胚尿囊液,加1 mL/L的甲醛灭活,浓缩制得琼扩抗原;用该抗原制成灭活苗两次免疫SPF鸡,无菌采血分离制备阳性血清;选用SPF鸡无菌采血分离制备阴性血清.经过效价测定制备16单位琼扩抗原,8单位阳性血清;取免后的SPF鸡血样4个20～2-5稀释分别与1单位～8单位琼扩抗原做琼扩试验,确定了应该用4单位或8单位琼扩抗原做工作抗原;并以血清中和试验为参照证明琼扩试验在血清抗体监测中的可行性.本研究成功制备了禽呼肠病毒琼扩抗原与血清,为用琼扩试验定量检测禽呼肠病毒感染禽和疫苗免疫禽的抗体奠定了基础.     

鸡痘琼脂扩散试验方法的研究

应用鸡痘弱毒感染的鸡胚尿囊液,经0.2％甲醛灭活后再加30％硫酸铵沉淀、离心、透析所制备的鸡瘟琼扩试验抗原,对7个鸡场的10个鸡群抽检256只鸡,其检出率人工感染鸡为25/25,自然发病鸡粘膜型为15/15,皮肤型为24/27,健康鸡为0/112,对鸡喉气管炎等7种病鸡的血清均为阴性反应,7个鸡场的10个鸡群中,有8群共89只鸡呈阳性反应。由此证明琼扩试验对鸡痘的诊断具有获高的敏感性和特异性.特别是对粘膜型鸡痘更具有鉴别诊断意义。     

应用血凝抑制试验和琼脂扩散试验检查减蛋综合症(EDS—76)

试验证明EDS-76“AV-127”株可在鸭胚中增殖。用含毒的鸭胚尿液研制的血凝抑制试验抗原和琼脂扩散试验抗原检查人工感染鸡证明,二种血清学方法均有明显的特异性,感染鸡抗体的持续期较长,人工感染后5天抗体上升,7天至6个半月100％呈阳性反应。用以对我国一些鸡场进行了调查,初步认为,在我国的鸡群中还未发现有此病污染,但在鸭群中有抗体存在。     

鸡传染性喉气管炎中和试验方法的研究

关于鸡传染性喉气管炎(ILT)的诊断,通常系采用临床观察、鸡胚接种、荧光抗体及包涵体等检查方法,这些方法应用于典型发病鸡虽不难达到确诊的目的,但对确诊临床表现不典型或感染耐过的鸡就较为困难。用琼扩方法诊断此病虽较快速简单,但检出率不高;而中和试验法具有高度的敏感性,但操作方法复杂,在一般条件下难以广泛应用。     

马立克氏病蛋黄琼脂扩散反应

鸡感染马立克氏病疱疹病毒后,血清出现沉淀抗体。应用琼脂扩散反应(下称琼扩反应)检查血清沉淀抗体,成为马立克氏病特异性诊断及流行病学调查的一种重要的血清学方法。但采血要捕鸡惊群,造成一种逆境,对蛋鸡会影响产卵率下降。蛋黄是否存在沉淀抗体,可否无需采血而用蛋黄作琼扩反应,是本试验所要探讨的问题。结合鸡场的马立克氏病流行病学调查,在做血清琼扩反应的同时,对比了蛋黄琼扩反应阳性结果的检出率,还对蛋黄的处理做了一些比较,现将试验结果报告如下:     

鸡传染性法氏囊病双抗体夹心Dot─ELISA诊断法的建立及应用

以醋酸纤维素膜作为固相载体，辣根过氧化物酶标记鸡抗传染性法氏囊病病毒抗体（ＩＢＤ—ＩｇＧ），饱和二氨基联苯胺为底物显色，建立了鸡传染性法氏囊病双抗体夹心Ｄｏｔ—ＥＬＩＳＡ诊断法。经方阵实验确定最佳反应条件为：ＩｇＧ的包被液为０．０５ｍｏｌ／Ｌ（ｐＨ９．６）碳酸盐缓冲液，包被浓度为１：５０；酶标抗体的工作浓度为１：１００；洗涤液为含０．０５％吐温—８０的０．０２ｍｏｌ／Ｌ（ｐＨ７．４）磷酸盐缓冲液；封闭液为含０．２％明胶的洗涤液；封闭时间、抗原及酶标抗体的作用时间均为３７℃３０ｍｉｎ。应用本方法和琼扩试验同步检测２０份已知阳性病料、１２０份待检病料和胚毒尿囊液、１０份正常鸡样品，结果表明，Ｄｏｔ—ＥＬＩＳＡ阳性率为９０％，而琼扩试验为４０％；凡琼扩试验阳性者，Ｄｏｔ—ＥＬＩＳＡ均呈强阳性，而在Ｄｏｔ—ＥＬＩＳＡ阳性样品中，只有４４％呈琼扩试验阳性，Ｄｏｔ—ＥＬＩＳＡ的敏感度为琼扩试验的１００倍。     

琼脂扩散试验检测鸡新城疫抗体的研究

本文报告了用NDV—Lasota株经鸡胚增殖病毒,收集含毒的鸡胚尿囊液,用乙醚脱脂、透析浓缩制成琼扩(AGP)抗原,应用本抗原和HI试验同步检测435份待检血清,结果AGP与HI试验的阳性符合率为91.6％(241/202),阴性复合率为100％(114/114),     

禽脑脊髓炎油乳剂灭活苗的现场应用试验

以分离到的禽离脑脊髓炎病毒（ＡＥＶ）野毒接种ＳＰＦ鸡胚，取其病料用福尔马林灭活并制成油乳剂苗。免疫种鸡的试验结果表明，这种灭活苗应激反应小，对产蛋时的鸡基本无影响，免疫后的鸡产生的抗体较快，用间接免疫荧光反应检测（ＩＦＡ），第５天即可检出特异的抗体，琼扩抗体可在２０～３０天查出。田间试验的初步结果表明，这种灭活苗的免疫效果稳定，３０天和４５天后的琼扩抗体检出率分别为４／４和６０／６０，免疫鸡的后代均被有效保护不发生ＡＥ。     

用卵黄代替血清净化鸡白痢病的应用试验

目前,国内外均用平板凝集试验(AGGP)检测血清中抗体净化鸡白痢病。国内亦有用琼扩试验(AGP)检验鸡白痢病的报导,但用卵黄代替血清进行鸡白痢病净化检疫的研究未见报导。从《鸡白痢病诊断方法特异性及敏感性的研究Ⅱ血清和卵黄平板法琼扩法及卵黄平板法与琼扩法符合率比较试验》(《黑龙江畜牧兽医》1990     

用琼扩试验监测鸡传染性法氏囊病卵黄抗体的研究

对郑州某鸡场两个父母代鸡群的种卵通过卵黄琼扩试验检测卵黄中的传染性法氏囊病抗体水平。结果证明,卵黄抗体效价与血清抗体效价基本相同,且以氯仿处理后的卵黄抗体效价与血清效价符合率最高,从而证实用卵黄琼扩试验替代血清琼扩试验监测鸡传染性法氏囊病的抗体水平是可行的,对本病是一种经济、省力、省时并有实用价值的抗体监测方法。     

犬瘟热病琼脂扩散诊断方法的建立

本文主要阐述了用鸡胚成纤维细胞培养的犬瘟热弱毒疫苗免疫绵羊制备琼扩抗体，用犬瘟热病貉肝脏制备琼扩抗原，建立了琼脂扩散诊断方法。用于犬瘟热死亡动物的肝、脾脏器病毒抗原检出，并初步检测送检病科１０份，与电镜检查结果比较，阳性符合率８５．７％，阴性符合率７５％，总体符合率为９０％。方法特异性强，敏感性高，操作易行，便于推广应用。     

番鸭"花肝病"病原的研究

文章对番鸭"花肝病"病原进行了研究,证实病原为番鸭呼肠孤病毒。该病毒大小为50nm-70nm左右,圆形,无囊膜;雏番鸭人工感染该病毒后可出现和自然病例相同的临床症状和病理变化,并能回收到病毒,鸡、麻鸭人工感染不发病;该病毒不凝集鸡、鸭的红细胞,能够在鸡胚、番鸭胚成纤维细胞上增殖并出现明显的细胞病变;核酸类型为RNA,琼扩试验表明与禽呼肠孤病毒有血清学交叉反应。     

胰酶分散抗原间接荧光抗体法检测鸡肾型传染性支气管炎病毒及抗体…

本文采用胰酶分散法制备抗原，建立了间接荧光抗体法。用此法对人工感染鸡、人工感染鸡胚及自然发病鸡的抗原进行了测定，结果人，人工感染鸡肾脏于７２－１６８ｈ１００％检测到特异性荧光，其余时间部分鸡检出特异性荧光。     

胰酶分散抗原间接荧光抗体法检测鸡肾型传染性支气管炎病毒及抗体的研究

本文采用胰酶分散法制备抗原，建立了间接荧光抗体法。用此法对人工感染鸡、人工感染鸡胚及自然发病鸡的抗原进行了测定，结果，人工感染鸡肾脏于７２～１６８ｈ１００％检测到特异性荧光，其余时间部分鸡检出特异性荧光；人工感染后病死鸡肾脏均１００％检测到特异性荧光；人工感染鸡胚于４８～１２０ｈ１００％检测到特异性荧光，其余时间部分检出特异性荧光；１７８例自然发病病例中检出抗原阳性病例１５３例。对抗原检测的结果与冰冻切片制备抗原建立的间接荧光抗体法完全一致。用胰酶分散法制备抗原，对已知阳性血清和待检血清进行检测，检测结果与用冰冻切片法制备抗原检测结果一致。该法将检测程序简化，检测时间明显缩短，适合于临诊应用及对鸡群进行抗体监测     

藏药"十三味红花丸+琼阿"对IBDV的抑制试验研究

试验利用藏药“十三味红花丸 琼阿”对鸡胚人工感染IBDV进行了抑制试验，试验结果显示，藏药药液（1g/mL）用2倍、4倍、6倍和8倍稀释，对鸡胚感染IBM强毒的保护率分别达100%、100%、90%和80%，IBDV强毒对照组分别提高80、80、70和60个百分点。试验结果表明，藏药“十三味红花丸 琼阿”对IBDV具有很强的抑制作用。     

鹅抗鸡法氏囊病高免血清的研制和应用

本试验利用自然发生法氏囊（ＩＢＤ）病鸡的法氏囊、脾脏和肾脏等制成ＩＢＤ灭活油乳剂苗，经二次免疫皖西白鹅后，可获得琼扩（ＡＧＰ）抗体效价为１：６４的鹅抗鸡ＩＢＤ高免血清。鹅体在第二次免疫后１５天，抗体效价可达高峰，并至少可维持１０天以上。用鹅源抗血清对自然发生ＩＢＤ的病鸡群进行肌注１．０ｍｌ／只，其有效治愈率为９５％，对人工感染３０日龄雏鸡的保护率为１００％。     

禽流感琼脂扩散试验抗原制备方法的研究

禽流感琼脂扩散试验(AGP)是用禽流感病毒的内部抗原(RNP)检查相应的抗体,是特异性血清学诊断方法,它较鉴定亚型特性的血凝抑制试验(HI)方法具有较广泛的应用价值。目前普遍应用它检查禽流感。一些国家制作禽流感的琼扩试验抗原主要是用人工接种鸡胚的尿囊膜,将其制成乳剂,经反复冻融后作为抗原,其中混有尿膜组织及血液成分,因此,在一定程度上干扰试验结果。我们在试验中,用接种的鸡胚尿液制造抗原,获得了良好的结果,现报告如下。     

血清琼扩与羽囊琼扩诊断鸡马立克氏病的比较试验

目前对鸡马立克氏病(MD)的实验室诊断主要是用血清琼脂扩散试验来检测MD抗体。该方法虽然特异可靠,但抓鸡采血比较困难,而且也影响鸡的产蛋性能。利用羽囊琼扩试验来检测MD病毒虽有报道,但实际应用不多,其特异性和检出率与血清琼扩究