3种中药提取液对鸡艾美耳球虫卵囊孢子化的影响

为探讨中药提取液对体外球虫卵囊孢子化的影响,将3种不同艾美耳球虫未孢子化卵囊与不同浓度(25%,50%,100%)的中药商陆、白头翁、常山提取液共培养24 h和48 h,显微镜观察球虫卵囊的孢子化情况,计算孢子化率。结果发现各种中药浓度为50%的条件下,24 h后,柔嫩、毒害、堆型艾美耳球虫的孢子化率在商陆培养下分别为26.20%、4.74%、24.09%,在白头翁培养下分别为57.95%、10.74%、20.74%,在常山培养下分别为64.65%、20.53%、18.03%;48 h后,柔嫩、毒害、堆型艾美耳球虫在商陆培养下分别为58.41%、40.89%、31.45%,在白头翁培养下分别为64.81%、19.42%、60.90%,在常山培养下分别为64.18%、39.70%、63.16%。与对照组比较,药物组球虫培养24 h和48 h后,卵囊孢子化率显著降低,100%浓度的药物抑制效果最好,50%浓度药物次之。3种中药提取液对鸡艾美耳球虫卵囊体外孢子化均有一定的抑制作用,且随着药物浓度增加,对球虫孢子化的抑制作用增强;但抑制程度有差异,其中商陆抑制作用最好。     

夏秋季肉鸡球虫病多发的原因与对策

一、球虫病多发的原因 1．温度、湿度适宜。鸡感染球虫后，球虫在肉鸡消化道内经过一段时间的多次裂殖生殖，所产生的裂殖子进行配子生殖，最后形成卵囊，随粪便排出体外。球虫卵囊本无感染性，但在一定的条件下（温度8～35℃、最适温度为22～30℃，湿度60％～75％，氧气充足等）完成孢子生殖，就形成了具有感染力的孢子化卵囊。这种卵囊一旦被鸡大量食入，就会造成球虫病发作。夏秋季节温度、湿度适宜均有利于球虫的繁殖，是球虫病的多发季节。     

中药复方对鸡柔嫩艾美尔球虫病的疗效观察

通过人工感染预防试验和治疗试验,对由常山、青蒿、柴胡、苦参、苦楝根、黄芪等13种中草药按不同组成和配比组成的5个不同中药复方的抗球虫效果进行了试验观察。结果在5个中药复方中,预防试验复方4(0.5 mL/d)的抗球虫指数最高(ACI=110.07),是阳性对照组的193.0%,存活率为100%,卵囊值较低,为20;治疗试验复方4高剂量组(1.0 mL/d)的存活率相对较高,为95%;预防试验复方1和复方3存活率较高,均为93.33%,在预防试验和治疗试验复方1和复方3的卵囊值均为20,相对于其他中药复方和阳性对照组较低。结果表明,常山配比高的复方可明显降低鸡球虫感染后的卵囊值,青蒿配比高的复方可明显提高鸡球虫感染后的存活率。     

浅谈鸡传染性法氏囊病的诊断与防治

正鸡传染性法氏囊病是由传染性法氏囊病毒引起的一种急性、接触性、传染性疾病。一、病毒特性鸡传染性法氏囊病病毒属于双股RNA病毒科,禽双股RNA病毒属,病毒含单层衣壳,无囊膜,病毒粒子直径55～65纳米。该病毒能在鸡胚内繁殖,7～8日龄胚做卵黄囊接种,或9～11日龄胚做绒毛尿囊膜或尿囊腔接种,接种后鸡胚通常在感染5天左右死亡,出现胚体发育停滞,水肿及出血。病毒在外界环境较为稳定,圈舍内可长期存     

对铜绿丽金龟幼虫有活性的苏云金芽孢杆菌菌株的分离及鉴定

为了发掘新的斑资源,从3种不同土壤类型的样品中分离得到了285株苏云金芽孢杆菌菌株。采用杀虫活性测定方法从中获得了13株对铜绿丽金龟幼虫具有高毒力的菌株。利用PCR—RFLP鉴定体系和SDS-PAGE蛋白分析法,研究了这13株苏云金芽孢杆菌的杀虫晶体蛋白基因类型和晶体蛋白表达情况。结果显示,有12株均含有编码毒杀铜绿丽金龟幼虫毒素蛋白的cry8Ca基因,而FTL53没有鉴定到已有的基因类型。这13株菌的伴孢晶体都含有分子量为130kDa的蛋白。本研究为不断发现新型的、具有高毒力的cry毒素基因奠定了基础。     

不同生境Bt分离株晶体含量与靶标昆虫生物活性关系分析

通过醋酸钠-抗生素筛选法从6个不同生境中筛选得到了苏云金芽孢杆菌新菌株W14、ZY1、3346、TMQ2、B31和P91,镜检可观察到它们的伴孢晶体呈小菱形和不规则形状。SDS-PAGE分析结果表明6个菌株表达的晶体蛋白分子量为130 kDa,对其杀虫晶体蛋白的测定,结果发现这些菌株晶体蛋白含量均不高,仅为0.20%-0.29%,而B31则无晶体含量。同时对这6个Bt菌株进行了生物测定,发现所有菌株对棉铃虫杀虫活性均较低。由此可见,特殊生境获得的Bt菌株与常规菌株晶体含量不同,且晶体含量过低是其杀虫活性不高的根本原因。     

柔嫩艾美耳球虫杨凌株对几种抗球虫药的抗药性研究

用柔嫩艾美耳球虫杨凌株(YLt)对14日龄雏鸡进行感染,检测了该虫株对几种常用抗球虫药(三九球痢灵、地克珠利、氯苯胍和地克珠利氯苯胍合剂)的敏感性.以最适抗球虫活性百分率、抗球虫指数、相对卵囊产量和病变记分减少率为指标,进行综合评定,其抗药程度分为无抗药性、轻度抗药性、中度抗药性和完全抗药性4个等级.结果表明,该虫株对地克珠利氯苯胍合剂有轻度抗药性,对三九球痢灵和地克珠利有完全抗药性,对氯苯胍无抗药性.     

家兔13种球虫卵囊形态观察

经调查,在河南省家兔粪便中.共发现有13种艾美尔球虫.它们是:盲肠艾美尔球虫、小型艾美尔球虫、佛氏艾美尔球虫、肠艾美尔球虫、无残艾美尔球虫、大型艾美尔球虫、纳格浦尔艾美尔球虫、马氏艾美尔球虫、中型艾美尔球虫、新兔艾美尔球虫、穿孔艾美尔球虫、梨形艾美尔球虫和斯氏艾美尔球虫.对上述球虫孢子化后的卵囊进行了观察,并描述其形态、大小、颜色和内部构造特征,阐明它们之间的区别.依据显微照相绘图,列出包括国内稀见报道的佛氏艾美尔球虫在内的13种球虫已孢子化的卵囊的检索表.     

苏云金芽孢杆菌肠毒素的研究进展

苏云金杆菌含有多种毒素,与人畜条件病原菌—蜡质芽孢杆菌有紧密的联系。研究表明用PCR等方法可检测到很多苏云金杆菌含有与蜡质芽孢杆菌类似的多种肠毒素基因,而且,商用肠毒素试剂盒也能检测到有些苏云金杆菌肠毒素的产生,基因核苷酸序列分析表明苏云金杆菌肠毒素基因同蜡质芽孢杆菌肠毒素基因有较高的相似性。该文对苏云金杆菌毒素的基因检测、基因序列分析、活性检测及其安全性方面进行了综述。     

鸡球虫病免疫学研究进展

摘要：鸡球虫病是严重危害养鸡业的一种原虫病。长期以来本病防治主要依赖于药物,但由于耐药虫株的频繁出现、药物残留,研制开发新药成本高、周期长等问题的存在,用免疫方法来控制鸡球虫病日益受到重视,并有望成为主要的技术手段。文章从体液免疫和细胞免疫等方面综述了鸡球虫免疫原性,并概述了鸡球虫免疫学的研究进展。     

中药鱼腥草注射液鸡胚接种抗新城疫病毒的研究

用鸡胚培养法和血凝试验,测定了鱼腥草对鸡新城疫病毒的抑制作用。试验共分为4组,第1组接种病毒尿囊液与中药鱼腥草混合液,HA滴度0。第Ⅱ组接种新城疫病毒尿囊液与盐酸金刚烷胺混合液,HA滴度5 log₂。第Ⅲ组接种新城疫病毒尿囊液与生理盐水混合液,HA滴度9log₂。第Ⅳ组不接种病毒尿囊液,不给药,HA滴度0。试验结果表明：鱼腥草对鸡胚无毒性作用;鱼腥草与病毒同时接种鸡胚,能完全抑制鸡新城疫病毒在鸡胚中的增殖。     

培养基对小麦单倍体胚成苗率的影响

为筛选出适宜小麦单倍体幼胚生长的培养基,提高小麦单倍体胚成苗率,将小麦×玉米远缘杂交得到的小麦单倍体幼胚接种在8种培养基上,每种培养基上接种2个材料,平均值用于数据分析。8种培养基中幼苗平均产生率分别为：46.07%、45.90%、34.11%、41.15%、37.99%、36.91%、37.70%和52.51%。结果表明1/2MS +1.0 mg/L KT+3.0 mg/L多效唑+100 mg/L肌醇+5%蔗糖+0.6%琼脂,pH 5.8培养的幼胚成苗率最高,白化苗率低,且单倍体苗的长势较好,有利于培育壮苗。以1/2MS为基本培养基,加入微量的多效唑、KT、肌醇以及较高浓度的蔗糖可以有效促进幼胚生长。     

影响棉花幼胚(珠)离体培养及植株建成的因素分析

幼胚(珠)离体培养是棉花远缘杂交胚挽救的重要手段,也是研究棉花胚胎发育和纤维发育机理的基础技术。自1935年以来,棉花离体幼胚(珠)培养取得了一定的进展,但目前形成的幼胚培养技术较为复杂,需要在不同胚胎发育阶段变换使用不同的培养基,才能实现幼胚发育成熟和植株形态建成。常用培养基为BT和MS培养基,幼胚的基因型、多种激素(IAA,KT,GA)、碳源和氮源及不同的NO3-/NH4 比例等诸多因素均对培养效果有着重要影响。     

冬小麦遗传再生体系及根癌农杆菌介导的转化研究

摘要:以冬小麦品种临优145的幼胚为外植体,消毒后用解剖刀挑取幼胚,盾片朝上接种于MS+2,4-D 2 mg/L+肌醇100 mg/L＋MES 400 mg/L＋CH 100 mg/L[7]＋40g/L麦芽糖＋8g/L琼脂的培养基中诱导愈伤组织, 每两周继代一次,将诱导出的淡黄色、颗粒状Ⅱ型胚性愈伤组织接种于分化培养基（MS+ZT 1 mg/L+IAA 1mg/L+ MES 400 mg/L＋CH 100 mg/L+麦芽糖40g/L+gelrite 2.6g/L,PH5.8）上培养2－3周,然后转接到再生培养基(1/10MS+NAA 0.5mg/L+KT 0.5mg/L+蔗糖30g/L+ gelrite 2.6g/L,PH5.8)中进行再生成苗。接种1229块幼胚,得到987块愈伤组织, Hyg抗性愈伤组织123块,抗性再生植株34株。在建立了再生体系的基础上,用根癌农杆菌介导法将GUS基因导入幼胚愈伤组织,抗性植株的PCR检测呈阳性。X－gluc染色表明, 少部分愈伤组织出现肉眼可见的蓝色晕斑,说明GUS基因已经在小麦幼胚愈伤组织中表达。     

冬小麦幼胚一步成苗技术优化研究

为实现冬小麦幼胚一步苗移栽于夏季大田加代,本试验以‘济麦20’、‘烟优361’、‘泰农18’、‘中优9507’以及（‘济麦20’ב烟优361’）F1的幼胚为材料,分别选用11~13天、14~16天和17~19天3种胚龄的幼胚接种在MB、A和B三种培养基上,经离体培养一步成苗。研究结果表明,在9种接种试验处理中,11~13天接种于A培养基上出苗率最高,平均出苗率为98.30%,14~16天幼胚接种于MB培养基上,获得较高的出苗率（平均95.80%）,17~19天幼胚接种于B培养基上,出苗率最高,平均出苗率为95.20%;17~19天幼胚接种于MB培养基上,出苗率最低（平均16.20%）。14~16天幼胚接种于MB培养基上,不仅出苗率较高,而且胚苗根较长,侧根较多,表明14~16天幼胚适宜接种于MB培养基。     

棉花胚性愈伤组织的转化及转基因胚状体的有效萌发与成苗技术研究

以棉花胚性愈伤组织作受体,用农杆菌介导法(农杆菌菌株为A1)将质粒载体pSG529上的异戊烯基转移酶（ipt）基因导入4个陆地棉品种,研究了不同基因型的遗传转化效率并建立了转基因再生植株的有效成苗技术体系。结果表明,在相同的转化条件下,不同基因型的转化效率差异较大,豫早1号和珂字201的遗传转化效率及植株再生能力显著高于豫棉4号和鄂棉23。降低培养基无机盐浓度,用Phytagel固化,能够提高胚萌发成苗率,降低畸形苗频率,在生根培养中添加少量活性碳提高了根系活力。再生植株长到3~5片真叶时,可以切除发褐根系,转移到新鲜的低盐培养基中,重新生根。在试管苗移栽过程中,采用逐步揭开封口膜,炼苗的措施,可以提高试管苗的环境适应能力,显著提高移栽成活效率。     

不同因素对牛IVF胚胎体外发育影响的研究

为进一步完善牛胚胎体外发育体系,以体外受精胚胎为研究对象,对精子获能液、胚胎培养液、血清与BSA添加浓度、卵丘细胞共培养等影响体外胚胎发育体系的各个因素进行筛选优化。结果表明,BO获能液比普通获能液能够获得更高的卵裂率;添加葡萄糖、BSA以及不同浓度血清的牛胚胎培养液比未添加组有更好的发育效果,卵裂率、囊胚率分别达到(79.85±0.74)%、(28.69±1.45)%;在此基础上,牛卵丘细胞与牛胚胎共培养可将囊胚率进一步提高至(32.70±1.73)%,并用免疫荧光染色验证其卵丘细胞未发生凋亡。本研究进一步优化了牛胚胎体外发育体系,提高了体外胚胎的囊胚发育率。     

棉花高效体细胞胚发生及同步控制培养体系研究

棉花体细胞胚胎发生的频率低, 且体细胞胚的发育存在着不同步性, 给体细胞胚胎发生发育过程的生理学、生物化学和分子生物学的研究带来许多困难。本研究以陆地棉品种Coker201为材料, 建立了一种简单有效的棉花体细胞胚高频率发生和同步发育的培养体系。经过多次继代获得的胚性愈伤, 首先在液体培养基中振荡培养2 d使其分散, 然后过30目筛去除大的颗粒, 重新悬浮于同样的液体培养基中。悬浮培养14 d后, 过50目筛, 将筛上的胚性愈伤重悬浮于新鲜的培养基中, 并用吸管吸取悬浮液, 将其均匀地接种在表面垫有滤纸的同成分固体培养基(附加2.46 mmol L^-1 IBA和0.70 mmol L^-1 kinetin)上。培养21 d后, 用垫有滤纸的相同的固体培养基继代培养。利用这种培养体系, 获得的体细胞胚数量分别是单纯悬浮培养和固体培养(不垫滤纸)的16.5倍和4.0倍。其中, 球形胚、鱼雷形胚和子叶胚的同步发生率分别为70.2%、52.3%和73.0%。     

胚胎移植技术在扩繁德系西门塔尔牛核心群中的应用

13头德系西门塔尔供体牛连续4次重复超排,生产胚胎654枚（头均50.31枚）,可用胚胎335枚（头均25.77枚）;4次冲胚的平均回收胚数,可用胚数差异均不显著（P>0.05）。移植受体牛278头次（鲜胚移植115头,冻胚移植118头,双半胚移植45头）,妊娠率55.04%（153/278）,共获得犊牛137头。其中鲜双半胚和鲜胚移植妊娠率显著高于冻胚（64.44%,60.87% vs 45.76%）（P<0.05）。45枚鲜胚二分后移植到45头受体牛,29头妊娠,其中11头产双胎,双犊率为37.93%（11/29）,存活犊牛29头。     

胚挽救技术创造无核抗病葡萄新种质

为提高无核抗病、优质葡萄新种质的选育效率,以无核欧洲葡萄品种作母本,中国野生刺葡萄‘塘尾’、‘雪峰’、山葡萄‘双优’及欧山杂交品种‘北醇’做父本,利用胚挽救技术对取样时间和培养基进行优化;用分子标记筛选后代的无核与抗病性状。结果表明：（1）15个杂交组合中共获得杂交果实13341个,接种幼胚珠8589枚,幼胚发育胚1338枚,平均胚发育率15.59%,正常成苗234株,平均成苗率2.73%,‘红宝石无核’ב塘尾’组合胚挽救效果最好,胚发育率为40.17%、成苗率7.76%和成苗植株数178株。（2）‘火焰无核’×北醇’授粉后42天取样,胚发育率(11.37%)和萌发率(3.52%)为最高。‘京可晶’ב北醇’授粉后38天取样,胚发育率(4.3%)和萌发率(1.08%)为最高。（3）以MM3为基础培养基,外源添加3 mmol/L的腐胺,‘红宝石无核’ב塘尾’获得胚发育率(55.83%)和成苗率(20%)为最高。（4）4个自然授粉的品种（‘昆香无核’、‘美丽无核’、‘红宝石无核’、‘赫什无核’）,其胚珠在E20A培养基中更有利于幼胚发育率提升。（5）使用葡萄无核标记SCF27-2000和GSLP1-569、抗霜霉病标记S294-369和S382-615及抗白粉病标记OPY13-661进行筛选,杂种后代中有16株同时携带无核且抗霜霉病与抗白粉病特异性条带。该试验为无核葡萄抗病育种提供了新材料,将为进一步开展中国野生葡萄育种相关研究奠定基础。