鸡白细胞介素-6活性MTT检测方法的建立

采用白细胞介素-6依赖细胞株B9建立了鸡白细胞介素-6活性的MTT检测方法。每孔培养细胞数在2.5×103~4×104范围内D值与细胞数显示有良好的线性关系,MTT的最佳保留时间为4 h,最低检测限为0.1 U/mL。应用该方法检测了健康艾维茵肉鸡25例,血清chIL-6活性为(4.33±0.75)U/mL,而25例葡萄球菌病患鸡血清chIL-6的活性为(14.05±6.87)U/mL,与健康肉鸡比较差异极显著(P<0.01),为该方法进一步临床应用奠定了基础。     

鸡白细胞介素-2研究进展

白细胞介素－2（interleukin-2,IL-2)主要是由激活的T淋巴细胞产生的一类重要的细胞因子，具有激活淋巴因子活化的杀伤细胞（LAK）和自然杀伤细胞，刺激T辅助细胞和自然杀伤细胞产生细胞因子和促进细胞因子的繁殖以及刺激γδT细胞在体外生长等功能，因此它是免疫学研究的热点。近年来鸡IL－2基因克隆成功，使鸡IL－2的研究及应用得到一定的发展，同时也使鸡IL－2作为免疫佐剂和构建新型的基因工程疫苗呈现出一定的应用前景，本文主要对鸡IL－2研究取得的进展作一综述。     

基因工程白细胞介素2的复性条件和检测方法比较

从表达重组IL—2的E.coli中纯化IL—2,可因变性剂作用而使IL—2失去生物活性.本实验研究了IL—2浓度和复性剂浓度对复性的影响.结果表明,在IL—2浓度为0.05mg/mL、CuCl_2浓度为0.05mmol/L时,复性效果较好.本实验还比较了3种检测IL—2活性的方法,应用CTLL细胞检测,特异性高,但维持细胞费时费力;应用小鼠胸腺细胞和活化的小鼠脾细胞检测,简便易行,但敏感性远不如CTLL细胞检测.     

重组牛白细胞介素－2对不同种属动物淋巴细胞的作用

以重组牛白细胞介素－２作用于ＣｏｎＡ活化的不同种属动物的淋巴细胞，结果发现重组牛白细胞介素－２对人、犬、猪、绵羊以及鸡淋巴细胞没有作用；对山羊、豚鼠及小鼠淋巴细胞具有显著作用；对牛、驴和兔淋巴细胞具有极显著的作用。     

猪外周血T淋巴细胞增殖反应MTT检测方法的建立

T细胞增殖反应是宿主T细胞识别病原的结果,也是宿主细胞免疫应答的重要指标之一。为了便于检测猪群在病原感染或者疫苗免疫过程中产生的细胞免疫应答,本研究应用MTT法建立了体外检测猪外周血T细胞增殖反应的研究方法。通过密度梯度离心法从外周血分离得到外周血单个核细胞（PBMC）,然后利用单核细胞和淋巴细胞不同的生长特性（贴壁与否）,弃掉贴壁的单核细胞,获得外周血淋巴细胞(PBL)。外周血淋巴细胞的流式分析结果显示,分离获得的PBL中T细胞所占比例达到了80%以上。应用MTT法分析了非特异性刺激物刀豆蛋白A（ConA）的浓度和细胞培养密度对T细胞增殖的影响。结果显示,ConA的工作浓度为5 μg/mL、细胞培养密度为2×106/mL时T细胞的增殖反应最强烈。本研究所建立的猪外周血T细胞增殖反应检测法可以为研究猪针对病原或疫苗的细胞免疫反应提供参考。     

鸡白细胞介素-2的分子生物学研究进展

对鸡白细胞介素 - 2近年来在分子生物学方面取得的研究进展作一综述 ,内容涉及鸡白细胞介素 - 2的基因表达、蛋白纯化、基因组结构、突变分析、种属特异性和活性检测。     

白细胞介素—2的研究进展及应用

随着分子生物学、免疫学理论和技术的发展 ,运用重组表达技术来生产预防和治疗疾病的制品已成为近几年研究的热点。白细胞介素 - 2是一种具有广泛生物学活性的细胞因子 ,它能够有效地提高免疫功能 ,医学上已用于预防和治疗一些常规方法难以治疗的疾病 ,如肿瘤等。在兽医方面因其能提高疫苗的免疫效果 ,尤其是在基因工程亚单位苗的免疫效果而倍受重视 ,展现出广阔的应用前景。1　白细胞介素 - 2的受体及其生物学功能白细胞介素 - 2 (ＩＬ - 2 )是一种最早发现的具有广泛生物活性的细胞因子 ,在 1 979年第二届国际淋巴因子会议上正式命名 ,它…     

重组白细胞介素-2增强免疫力效果好

南京农业大学李祥瑞博士研制成功的一种新的免疫增强剂———白细胞介素－２（IL－２），它是由多个氨基酸组成的糖蛋白。IL－２具有促进体液免疫和细胞免疫的双重功能，其主要生物学活性有以下几个方面：１直接作用于B细胞促进其增殖、活化、产生抗体。２能显著促进T细胞活化、增殖，并增加杀伤性T细胞的作用。３刺激自然杀伤细胞，并增强其溶细胞活性。４可诱导杀伤性T细胞、淋巴因子激活的杀伤细胞等杀伤细胞的分化和效应，并诱导这些杀伤细胞产生干扰素、肿瘤坏死因子等细胞因子。５能活化巨噬细胞，增加吞噬病原体功能。大量试验证…     

家禽白细胞介素2的研究进展

白细胞介素2（Interleukin-2，IL-2）是一种T细胞生长因子，它还兼有很多免疫调节功能和其他生物学活性。家禽IL-2的结构与哺乳类动物IL-2的结构不同，其功能也有一定差异。目前对于家禽IL-2的认识还远落后于哺乳类动物IL-2。     

用 MTT 比色分析法检测牛白细胞介素-2的研究

以伴刀豆蛋白 A(Con A)活化的牛外周血单个核细胞(PBM)作应答细胞,对四甲基偶氮唑盐(MTT)比色分析法检测牛白细胞介素-2(IL-2)的各项参数作了系统探讨,首次建立了检测牛 IL-2的 MTT 比色分析法。结果表明,活化应答细胞时的细胞密度以2.5～5×10~6个/ml、Con A 浓度以12.5μg/ml、活化时间以48～72小时为宜;MTT 比色分析的最适条件为:应答细胞密度1～2×10~5个/孔,α-甲基-D-甘露糖苷(α-mM)终浓度为12.5mg/ml,样品与应答细胞作用时间为36～48小时,MTT 用量为50μg/孔,MTT 作用时间为2.5小时,结果证明,本方法可检出少至390个活应答细胞、0.03个单位(U)的重组人 IL-2(rhIL-2)和2~(-5)稀释的含牛 IL-2培养上清.本方法避免了传统~3H-胸腺嘧啶核苷(TdR)掺入法的诸多不便,是一种方便、敏感、可靠和安全的牛IL-2检测法.     

重组牛白细胞介素—2生物活性单位的测定及其理化性质的分析

本研究对大肠杆菌表达的重组牛白细胞介素－２的生物活性单位进行了测定,以已标定的人白细胞介素－２为标准品,ＭＴＴ比色法测出重组牛白细胞介素－２的生物活性单位约为４×１０＾５ｕ／Ｌ菌液。同时,以ＳＤＳ－ＰＡＧＥ法测出表达的重组牛白细胞介素－２分子量约为１５．５ＫＤ,理化性质分析结果表明,重组牛白细胞介素－２生物活性酸碱适应范围为２～１０,对胰蛋白酶和木瓜蛋白酶的作用敏感,而对核酸酶的作用则不敏感,重组     

重组白细胞介素-2用于猪链球菌病治疗试验

猪链球菌病是猪的一种常见病。由于链球菌血清型繁多 ,抗药菌株普遍存在 ,因此 ,治疗较为困难。重组白细胞介素 2(ＩＬ 2 )是新型免疫增强剂 ,可以全面提高动物机体的免疫力。据国外报道 ,ＩＬ 2和抗生素联合使用 ,可以明显提高乳牛乳房炎的治疗效果。我们将重组ＩＬ 2 (科研中试产品 ,由南农大提供 )用于猪链球菌病的治疗 ,取得了很好的效果 ,现将有关情况报道如下。1　发病情况病猪来源于洛阳某大型养猪场。 2 8～ 40日龄 ,体重 3 0ｋｇ左右。病猪精神沉郁 ,体温 40 5～ 41 5 0℃ ,食欲减退或废绝 ;大便干 ;两耳、四肢等末梢部位发红或…     

重组牛白细胞介素-2生物活性单位的测定及其理化性质的分析

本研究对大肠杆菌表达的重组牛白细胞介素－２的生物活性单位进行了测定。以已标定的人白细胞介素－２为标准品,ＭＴＴ比色法测出重组牛白细胞介素－２的生物活性单位约为４×１０６ｕ／Ｌ菌液。同时,以ＳＤＳ－ＰＡＧＥ法测出表达的重组牛白细胞介素－２分子量约为１５．５ＫＤ。理化性质分析结果表明,重组牛白细胞介素－２生物活性酸碱适应范围约为２～１０;对胰蛋白酶和木瓜蛋白酶的作用敏感,而对核酸酶的作用则不敏感;重组牛白细胞介素－２对温度变化敏感,表现为不耐高温。