菌糠中高产纤维素酶优良菌株的筛选与鉴定

本研究旨在从菌糠中筛选高产纤维素酶的菌株用于发酵菌糠制备生物饲料。以活菌数和纤维素酶活性为指标,经富集培养,初筛、复筛,得到高产纤维素酶的菌株S-4,纤维素酶活性可达67.5U/mL。通过菌落形态、菌体形态、生理生化特征和16SrDNA分子测序进行优良菌株鉴定。结果表明,菌株S-4为芽孢杆菌属的枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis),可以应用于菌糠的发酵制备发酵饲料。     

纤维素酶产生菌的筛选

从自制腐烂稻草及附近土壤筛选分离到一株高纤维素酶活性的纤维素分解菌ZJ-8,经初步鉴定为根霉菌.经紫外诱变后,该菌羧甲基纤维素酶活性最高达11.07～14.5 IU/mL,对滤纸有较强的降解能力,并且具有稳定的遗传性.该菌最适生长条件温度为30 ℃,pH值为5.     

纤维素酶产生菌的鉴定与筛选

用马铃薯葡萄琼脂（ＰＤＡ）板和察氏培养基（ＣＣＭ）,从自然界和饲料中分离出６种８株霉菌,分别是产黄青霉１株（９９０８）,米根霉１株（９９１７）,米曲霉１株（９９３５）,高大毛霉１株（９９３９）,黑曲霉２株（９９３０,９９３４）,绿色木霉２株（９９１６、９９４２）。其中产Ｃｘ酶高的菌株是９９３０、９９３４,产Ｃ１高的菌株是９９３０、９９３４、９９４２。     

枯草芽孢杆菌C-36纤维素酶的纯化及酶学性质

枯草芽孢杆菌C-36纤维素酶经硫酸铵、SephadexG-75、SephadexG-100分离纯化后,得到一个电泳纯的葡聚糖内切酶。SDS-PAGE结果表明,该酶分子量约为35kD。最适反应温度和pH分别为65℃和pH6.8,Zn2 、Pb2 、Fe3 对酶有抑制作用,Ba2 、Fe2 对酶有激活作用,在50℃,pH6.8条件下,酶对CMC-Na的米氏常数Km为0.34g/L,最大反应速度Vmax为0.17mg/(min.mL)。     

一株产纤维素酶细菌液体发酵条件的初步研究

我们引进1株产纤维素酶的枯草芽孢杆菌(Bacillus Subtilis).通过超声波细胞破碎的方法,确定该菌所产纤维素酶为胞外酶.采用麸皮为碳源,蛋白胨和硫酸铵为复合氮源,37℃,220 r/min摇瓶发酵48 h,最高酶活达6.99 u/ml.     

一株纤维素降解菌的鉴定及其对饲料粗纤维的降解效果

【目的】对本课题组分离的一株纤维素降解菌进行鉴定,优化其产酶条件并检测其对饲料粗纤维的降解效果,以期为该菌在饲料粗纤维降解中的应用提供理论依据。【方法】通过菌株形态特征和16SrDNA序列分析鉴定了实验室分离保存的一株纤维降解菌;研究该菌所产纤维素酶的部分酶学性质和酶谱,并优化其产纤维素酶的条件;利用体外发酵和尼龙袋法测定菌株N3所产粗酶液对3种饲料(麸皮、麦草、燕麦)粗纤维的降解率;利用RB亮蓝脱色试验检测该菌的木质素降解能力。【结果】经鉴定,该菌株为枯草芽孢杆菌,命名为Bacillus subtilis N3;N3菌株不产生漆酶,主要向胞外分泌分子质量70ku以上的纤维素酶组分;N3菌株所产纤维素酶的最适反应温度和pH分别为60℃和5.5;N3菌株以体积比1∶50接种至最适发酵培养基(碳源为麸皮、氮源为蛋白胨,初始pH为5),37℃培养24h时,所产纤维素酶活性最高,可达3.50U/mL;菌株N3所产粗酶液对麸皮的粗纤维降解率最高,对麦草秸秆的粗纤维降解率最低。【结论】分离到的纤维降解菌Bacillus subtilis N3主要分泌分子质量70ku以上、耐热的纤维素酶,对饲料粗纤维具有较强的降解能力。     

产纤维素酶枯草芽孢杆菌C-36的产酶条件研究

以产纤维素酶的枯草芽孢杆菌菌株C-36为研究对象,从碳源、氮源、接种量、培养基初始pH、温度等方面研究该菌株的产酶条件,结果表明该菌产酶的最适碳源为2%的CMC-Na,最适氮源为2.5%的蛋白胨+酵母粉复合氮源,最佳接种量为4%,最适起始pH为5.0,产酶最适温度为37℃。在此条件下,培养36 h后达到产酶高峰,CMC酶活为196.33 U/mL,是优化前的3倍。     

纤维素酶产生菌的筛选及其相互作用研究

从森林落叶土、腐烂的秸秆和农家堆肥等含有木质纤维素降解菌的样品中分离到能较好降解纤维素的菌株4株,初步判定为3株细菌,1株放线菌。各菌株产酶(CMCase)较适宜的温度均是37℃,培养基初始pH值7.0,接种量(V/V)2%,接种培养12 h的种子液酶活较高。对各菌株单独与混合培养研究表明:菌株组合D6/D7、D1/D7、D6/D7/B7和D1/D6/D7/B7在72 h的酶活均显著高于其单一菌株,其中最优组合D6/D7在72 h的酶活可达67.12 U/mL,相当于其菌株单独培养酶活的2倍。     

大熊猫源纤维素分解菌的筛选及产酶发酵条件优化研究

通过采集昆明野生动物园里大熊猫新鲜粪便,利用羧甲基纤维素钠培养基（CMC−Na）进行选择性培养,刚果红平皿浸染初筛和DNS法纤维素酶活复筛,对目标菌株进行形态学和16S rDNA同源性鉴定,并对高产纤维素酶的菌株进行单因素发酵条件优化试验。结果表明：从大熊猫新鲜粪便中筛选到2株高效的纤维素分解菌鉴定为枯草芽孢杆菌ZD1和MZ3（ZD1/MZ3）,2个菌株发酵液纤维素酶活分别为277.58 U/mL和255.22 U/mL,通过发酵条件优化后,ZD1和MZ3发酵液中纤维素酶最大活力分别达339.48 U/mL和293.65 U/mL,较优化前酶活可提高22.30%和15.06%,最佳产酶条件为：CMC−Na + P、37 ℃、pH 6.8～7.2、36～48 h。     

饲料中添加乳酸菌对肉鸡免疫器官的影响

乳酸菌是微生态制剂中的主要菌种,作为饲料添加剂具有促进动物生长、减少动物发病率和死亡率、增加动物抗应激能力等作用。试验采用单因素随机分组设计,将1日龄AA肉仔鸡96只随机分为4组,试验1组为对照组,试验2、3、4组为试验组,每组设3个重复,每个重复8只鸡。每隔10d分别灌服乳酸菌培养液0、200、300、400μL.只-1。对照组和试验组采用完全相同的日粮,自由采食和饮水。饲养至20和40d时分别宰杀。通过对免疫器官胸腺、脾脏和法氏囊重量、尺寸和发育情况判断添加重组乳酸菌对肉仔鸡免疫功能的影响。结果表明,20日龄时试验组免疫器官指标有所增加,但各免疫器官指标组间差异不显著(P>0.05)。而40d时第2组法氏囊重与其他各组间差异显著(P<0.05),第2组法氏囊指数与第3、4组相比差异显著(P<0.05)。第3、4组脾脏直径与第1组间差异显著(P<0.05)。试验结果表明,添加乳酸菌能够促进肉鸡后期的免疫器官发育。     

添加纤维素复合酶对肉仔鸡生长的影响

研究了高苜蓿粉日粮中添加纤维素复合酶对肉仔鸡生产性能、胴体品质、饲料利用率等常规指标的影响。饲养试验选择21日龄的艾维茵肉仔鸡(公母比1:1)80只,分为2个处理,每个处理4个重复,每个重复10只鸡。处理Ⅰ为对照,处理Ⅱ为添加0.01%的纤维素复合酶试验组。试验期22～42日龄。屠宰试验在42日龄进行,每处理组选4只鸡(公母比1:1)。代谢试验选42日龄雄性肉仔鸡8只,分为2个处理,每个处理4个重复,每个重复1只鸡。试验结果表明:试验组比对照组平均日增重、日采食量、皮肤颜色和胫颜色级别分别提高了5.05%,3.41%,0.7%和1.25%;腹脂率降低了0.67个百分点;能量的表观代谢率、粗蛋白的表观消化率均有所提高,但组间差异均不显著(P>0.05)。     

复合酶制剂对猪消化道中营养物质消化率的影响

该研究用１９２头冀合白猪杂优猪，测定了玉米豆饼型饲粮添加复合酶制剂对猪消化道中各营养物质消化率的影响。结果表明，可提高断乳仔猪和肉猪前期饲粮中粗蛋白质、粗纤维、粗脂肪以及肉猪后期饲粮中粗蛋白质的消化率。结合猪的消化生理特点及饲粮特性，认为：蛋白质酶是断乳仔猪酶制剂配方首要考虑成分，其次是淀粉酶等；粗纤维酶是肉猪酶制剂配方首要考虑成分。     

采食量及营养物质消化率对猪生长性能影响综述

饲料营养、采食量、消化吸收率是保证畜禽健康生长和高效生产的3个要素,从生理、营养角度系统综述了采食量和营养物质消化率对猪生长性能的影响。     

中草药添加剂对生长肥育猪饲料养分消化率的影响研究

 用20 kg左右的“杜长大”三元杂交猪16头,分成对照组、中药组、中药＋西药组、西药组4组,每组4个重复。分20～30 kg,30～70 kg,70～110 kg三个阶段进行消化试验,测定中草药添加剂对饲料养分消化率的影响。结果表明:与西药组和对照组相比,在20～30 kg,30～70 kg,70～110 kg阶段,中药组的CP的消化率均有所提高,其中30～70 kg阶段分别提高了3.33%（P＜0.05）和4.61%（P＜0.05）;EE消化率,分别提高了4.17%（P＜0.05）和11.63%（P＜0.01）,11.78%(P＜0.01)和16.06%（P＜0.01）,4.45%（P＜0.05）和6.58%（P＜0.05）; CF消化率,分别提高了3.99%（P＜0.05）和5.3%（P＜0.05）,5.73%(P＜0.05)和15.30%（P＜0.01）,8.76%（P＜0.05）和13.75%（P＜0.01）;中药组ASH,Ca^２＋的消化率,在不同的生长阶段,都与西药组无显著差异,但都比对照组有显著、极显著的提高。P的消化率在前期和后期的变化与ASH,Ca²⁺的相似,但30～70 kg阶段4个组的差异不显著。结果还表明,就消化率而言,中草药添加剂与抗菌素和化学合成药物之间,不存在累加作用。     

饲料中添加鸡粪对猪育肥效果的影响

主要研究在饲料中添加不同比例鸡粪对育肥猪生长性能的影响。试验结果表明：（1）通过试验表明利用晒干鸡粪再生饲料喂猪是可行的,虽然日增重稍低,但能降低饲料成本,经济效益显著提高。（2）日增重方面,对照组高于试验Ⅰ组、试验Ⅱ组,差异不显著（P〉0．05）,对照组高于试验Ⅲ组,差异显著（P〈0．05）,试验Ⅰ组和试验Ⅱ组与对照组间差异不显著（P〉0．05）,试验Ⅰ组和试验Ⅱ组高于试验Ⅲ组,差异显著（P〈0．05）。（3）饲料转化率方面,试验Ⅱ组高于试验Ⅰ组、试验Ⅲ组和对照组,差异均不显著（P〉0．05）。（4）节约饲料成本方面,试验Ⅰ组、试验Ⅱ组、试验Ⅲ组平均每头猪每天可节约1元,1．9元,2．3元。（5）从日增重、饲料转化率、饲料成本三方面综合分析考虑,用20％的晒干鸡粪替代11％的玉米和9％的豆饼饲喂效果最佳。     

复合酶和益生菌制剂对獐日粮中营养物质消化利用率的影响

采用单因子试验设计,选择24头健康成体獐,在基础日粮中添加复合酶（0.2％）、益生菌制剂（EM,0.1％）进行消化代谢试验。结果表明：复合酶单一添加,或与EM同时添加,均能够显著提高獐日粮中粗蛋白质、粗纤维及矿物质元素等营养物质利用率。复合酶＋EM处理组粗蛋白、粗纤维表现消化率最高,与对照组相比分别高于对照组5.21％、5.93％（P〈0.05）;复合酶＋EM处理组钙、铜、锌表观消化率分别高于对照组4.43％、4.67％、5.94％（P〈0.05）。而磷、镁、锰等元素表观消化率与对照组无显著差异（P〉0.05）。单一EM处理组对獐日粮中各营养物质利用率无显著影响（P〉0.05）。结果提示：复合酶和益生茵在獐日粮中营养物质利用存在加性效应。     

肉仔鸡饲料中添加消化酶制剂效果观察

近几年来,畜牧业生产的高成本已不利于其发展,特别是饲料价格的不断攀升,如何提高饲料的利用率、降低生产成本、提高经济效益是养殖者探索和追求的目标。饲料中添加有助于畜禽消化吸收的酶,来提高饲料的转化率,降低饲料及饲养成本,是现代养殖发展的一个途径。     

饲粮中添加调味剂对断奶仔猪增重效果的影响

试验期Ⅰ组、Ⅱ组和对照组30d 采食量分别为27.1kg、17.4kg 和20.10kg;日增重分别为381g、192g 和240g;料重比分别为2.37、3.03和2.79.结果表明:调味剂对断奶仔猪有明显的诱食作用,而小茴香有抑制采食作用.为此正确选择调味品种,合理掌握用量,对断奶仔猪减少断奶应激损失,增加采食,提高日增重,降低饲料消耗有积极作用。     

纤维素降解菌的分离、鉴定及其产酶特性研究

从纤维素富集的环境中分离到3株能以羧甲基纤维素钠(CMC-Na)为唯一碳源的纤维素降解菌,采用纤维素-刚果红染色法进一步筛选,获得透明圈较大的菌株1株,命名为为B1。经菌落、菌体形态观察、生理生化实验及分子生物学鉴定,初步确定为蜡样芽胞杆菌(Bacillus cereus),该菌株表现出了较高的滤纸崩解能力和较高的纤维素酶活力。通过培养条件的优化,发现该菌株在起始p H值为5.0的培养基中,37℃培养36 h,其纤维素酶活力可达64.22 U/m L。