昆明市奶牛部分饲料霉菌毒素污染状况调查

[目的]为掌握昆明市部分奶牛饲料霉菌毒素污染状况,采集了昆明市部分奶牛场（养殖小区）的饲用玉米面、全株玉米青贮,全混合日粮（TMR）共80 批次进行分析。[方法]采用酶联免疫吸附试剂盒测定80 批饲料中黄曲霉毒素B₁（AFB₁）、赭曲霉毒素A（OTA）,玉米赤霉烯酮（ZEN）、伏马毒素（FB₁+FB₂）、T-2毒素、呕吐毒素（DON）6 种霉菌毒素含量,超标情况按照《GB 13078—2017 饲料卫生标准》判定。[结果]玉米面中ZEN检出率88.2%,平均值为（1 047.2±935.5）μg/kg,超标率达到76.4%; DON检出率82.3%,平均值为（1 375.2±635.2）μg/kg,FB₁+FB₂+FB₃检出率35.3%,平均值为（277.4±490.9）μg/kg,AFB₁检出率为35.3%,平均值为（8.6±2.9）μg/kg;OTA、T-2毒素均未检出。TMR中DON检出率25%,平均值为（1 047.2±935.5）μg/kg,AFB₁检出率为16.7%,平均值为（2.3±1.2）μg/kg,ZEN检出率16.7%,平均值（120.1±112.6）μg/kg,均未超标;OTA、T-2毒素、FB₁+FB₂+FB₃均未检出。全株玉米青贮饲料中DON检出率47.1%,平均值为（1 375.2±635.2）μg/kg,ZEN检出率为29.4%,平均值为（142.5±191.1）μg/kg,均未超标;AFB₁、OTA、T-2毒素、FB₁+FB₂+FB₃均未检出。[结论]霉菌毒素检出率：DON>ZEN>AFB1>FB₁+FB₂+FB₃ >T-2毒素和OTA;污染程度：玉米面>全株玉米青贮>TMR。三类饲料中霉菌毒素都有不同程度的污染,其中玉米面霉菌毒素污染风险最大,在运输、存储、使用时要予以高度关注,避免造成经济损失。     

蒙古族传统奶酪中8种脂溶性维生素和β-胡萝卜素高效液相色谱检测方法的建立

[目的] 建立同时测定蒙古族传统奶酪中VA、VD₂、VD₃、α-生育酚、β-生育酚、γ-生育酚、δ-生育酚、VK₁共8种脂溶性维生素及天然色素β-胡萝卜素含量的高效液相色谱方法（high performance liquid chromatography,HPLC）。[方法] 选取蒙古族传统奶酪为试样,经无水乙醇提取,酶解后用正己烷萃取,旋蒸浓缩,复溶过滤膜。经Agilent poroshell 120 EC-C18（150 mm×4.6 mm,4 μm）色谱柱分离,以甲醇和水（体积比为95∶5）为流动相,采用FLD和VWD检测器检测,外标法定量。[结果] VA、α-生育酚、β-生育酚、γ-生育酚、δ-生育酚、VK₁、β-胡萝卜素在0.1~1.0 μg/mL浓度范围内线性关系良好,VD₂、VD₃在0.05~1.00 μg/mL浓度范围内线性关系良好,相关系数R²均大于0.998。[结论] 建立的HPLC方法具有简便、快捷、灵敏度高、回收率高、分析时间短等优点,可为蒙古族传统乳制品中多种脂溶性维生素及天然色素的快速检测提供技术支撑。     

粤西某市液态奶中壬基酚的污染调查

[目的]了解液态奶中壬基酚的污染水平和健康风险,为食品中壬基酚的标准测定和风险管理提供参考。[方法]从各大市场随机抽取液态奶,采用超高效液相色谱-质谱联用法测定壬基酚含量。[结果]共检测销售量较高的巴氏杀菌乳和UHT灭菌乳两类液态奶,共100 件样品,壬基酚检出率为80.00%,平均检测值为82.43 μg/kg。其中,巴氏杀菌乳中壬基酚平均检测值较高,为87.06 μg/kg。壬基酚的膳食暴露风险处于可接受范围之内。[结论]分析100 件市售液态奶中壬基酚的检测结果,对市售液态奶中壬基酚的安全性进行了风险分析,结果显示市场上液态奶相对比较安全,对人体健康存在较低风险。     

不同品种牛乳营养成分含量及脂肪酸含量和组成测定比较研究

[目的] 比较中国荷斯坦奶牛、荷斯坦奶牛和西门塔尔牛乳中常规营养成分含量、矿物质元素含量及脂肪酸含量和组成的差异。[方法] 选取中国荷斯坦奶牛、荷斯坦奶牛和西门塔尔牛各6头,每头奶牛收集200 mL生鲜乳样品,利用乳成分分析仪测定乳中常规营养成分含量,通过原子吸收分光光度计测定乳中矿物质元素含量,应用气相色谱仪测定乳中脂肪酸含量和组成。采用统计学方法对不同品种牛乳中的营养成分含量及脂肪酸含量和组成进行比较。[结果] 中国荷斯坦奶牛生鲜乳中乳脂含量显著（P<0.05）高于荷斯坦奶牛,乳蛋白含量显著（P<0.05）高于荷斯坦奶牛和西门塔尔牛;中国荷斯坦奶牛生鲜乳中乳钙含量显著（P<0.05）高于荷斯坦奶牛,乳锌含量显著（P<0.05）高于荷斯坦奶牛和西门塔尔牛。中国荷斯坦奶牛生鲜乳中豆蔻酸含量显著（P<0.05）低于荷斯坦奶牛,油酸和亚油酸含量显著（P<0.05）高于西门塔尔牛;中国荷斯坦奶牛生鲜乳中饱和脂肪酸含量显著（P<0.05）低于西门塔尔牛,不饱和脂肪酸含量显著（P<0.05）高于西门塔尔牛。[结论] 中国荷斯坦奶牛乳中部分营养成分和矿物质元素含量接近或优于荷斯坦奶牛和西门塔尔牛,脂肪酸含量和组成与荷斯坦奶牛相近,脂肪酸组成优于西门塔尔牛。     

山豆根多糖对猪圆环病毒2型感染小鼠体内外炎性因子分泌水平的影响

旨在探究山豆根多糖对猪圆环病毒2型（porcine circovirus 2,PCV2）感染小鼠体内外炎性因子分泌水平的影响。通过PCV2感染小鼠脾淋巴细胞建立体外炎症模型,用不同浓度（100、200、400 μg/mL）的山豆根多糖作用细胞,采用ELISA法测定细胞分泌IL-1β、IL-8、MCP-1水平和细胞内COX-1活性;利用PCV2体内感染昆明种小鼠建立氧化胁迫模型后,腹腔注射低、中、高浓度[100、200、400 mg/（kg·BW）]的山豆根多糖,应用ELISA法测定小鼠脾脏、肺脏组织和血清中炎性因子IL-1β、IL-8、MCP-1分泌水平和COX-1活性。结果显示,与PCV2感染模型细胞相比,经不同浓度山豆根多糖处理的小鼠脾淋巴细胞中炎性因子IL-1β、IL-8、MCP-1水平和细胞内COX-1活性均不同程度降低,其中,400 μg/mL的山豆根多糖作用最佳（P<0.01）;利用不同浓度的山豆根多糖腹腔注射PCV2感染小鼠后,均能抑制PCV2感染小鼠的脾脏、肺脏组织和血清中炎性因子IL-1β、IL-8、MCP-1分泌水平和COX-1的活性,其中,高浓度[400 mg/（kg·BW）]的山豆根多糖作用最佳（P<0.01）。综上提示,山豆根多糖能够抑制PCV2感染小鼠炎性因子分泌,从而发挥抗炎作用。     

茉莉酸甲酯对匍枝筋骨草细胞生长和β-蜕皮甾酮积累的影响

匍枝筋骨草悬浮细胞中含有较高β-蜕皮甾酮,为了进一步提高其β-蜕皮甾酮含量,通过添加茉莉酸甲酯(MeJA)进行一系列试验研究。以4~10代筋骨草悬浮细胞为试验材料,测定不同处理浓度和处理时间的MeJA对细胞生长、β-蜕皮甾酮积累的影响,细胞生长量采用称量计数,β-蜕皮甾酮含量则使用高效液相进行检测。结果表明:匍枝筋骨草悬浮细胞生长曲线及β-蜕皮甾酮积累曲线符合Logistics模型。在细胞快速生长的初始期(第4天)或中期(第7天)添加不同浓度的MeJA,对细胞生长影响相对较小,生长曲线均有小高峰,分别出现在处理后第5天和第3天,干物质积累量分别达到0.60和0.62 g。而在细胞快速生长的高峰期添加MeJA,细胞生长曲线呈下降趋势,细胞鲜重和干重显著低于CK(P<0.05)。在细胞快速生长的初始期或中期添加MeJA后细胞鲜重与β-蜕皮甾酮积累量呈显著相关。在细胞快速生长的初始期或中期添加10~50 μmol·L^-1 MeJA后,细胞鲜重与CK对比表现为显著增加,其中添加50 μmol·L^-1 MeJA后细胞鲜重最佳,最高可达到35.90 g,显著高于其他处理(P<0.05)。而同样条件下β-蜕皮甾酮表现为积累量小幅增加,最高量为0.5095 mg·g^-1。添加100~200 μmol·L^-1 MeJA均会抑制细胞的生长,其中添加200 μmol·L^-1 MeJA细胞鲜重与CK相比显著下降,抑制率最高可达到38.88%。而添加100~200 μmol·L^-1 MeJA后β-蜕皮甾酮积累量表现为大幅提升,最高可达3.5315 mg·g^-1,为同期CK的14.44倍(P<0.01)。在细胞快速生长的高峰期添加10~200 μmol·L^-1 MeJA后,细胞鲜重与CK相比都表现为下降,说明在此时添加这些浓度MeJA可抑制细胞的生长,最高抑制率可达31.01%。而在细胞快速生长的高峰期添加10~50 μmol·L^-1 MeJA后,β-蜕皮甾酮积累量可在短时间内大量激增,β-蜕皮甾酮积累量最高达到1.4136 mg·g^-1,是CK的5.06倍(P<0.01)。添加100~200 μmol·L^-1 MeJA则积累量较少。在细胞快速生长的中期添加100 μmol·L^-1 MeJA条件下对细胞的刺激较小,β-蜕皮甾酮积累量最高,达到3.5315 mg·g^-1。     

γ-聚谷氨酸对断奶犊牛血清生化指标的影响

[目的] 研究γ-聚谷氨酸对断奶犊牛血清生化指标的影响。[方法] 将体重相近的荷斯坦断奶犊牛16头,按同质原则分为对照组和试验组,每组8头。两组犊牛每天每头饲喂3 kg颗粒饲料,玉米秸秆随意采食。试验组颗粒饲料中按照千分之五的比例加入γ-聚谷氨酸（膏状液体,含量为20%）。试验时间70 d,预试期10 d,正试期60 d。在试验最后一天采集血液样品测定血清生化指标。[结果] 对照组犊牛血清中IgG、IgA和IgM含量显著（P<0.05）高于试验组;对照组犊牛血清中SOD、GSH-Px活性显著（P< 0.05）高于试验组;两组AST与ALT活性差异不显著（P>0.05）;对照组和试验组犊牛血清中TP、ALB、BUN、NEFA、GLU、Ca、P、Fe、Zn含量差异不显著（P>0.05）,试验组断奶犊牛血清中Cu、VA和VC含量显著（P<0.05）低于对照组。[结论] ①γ-聚谷氨酸会降低断奶犊牛血清中免疫球蛋白（IgG、IgM、IgA）的含量;②γ-聚谷氨酸有提高断奶犊牛机体抗氧化能力的可能;③γ-聚谷氨酸可能会促进断奶犊牛对Cu、VA和VC的吸收与利用;④γ-聚谷氨酸未对断奶犊牛肝脏功能、能量代谢、能量平衡、蛋白质利用产生负面影响。     

RFRP-3对大鼠采食行为和生长性能的影响

为了探讨RFRP-3对大鼠采食行为以及生长性能的影响,选取体重相近的清洁级SD大鼠30只,随机分为3组,分别为对照组[腹腔注射生理盐水200 μL/(次·只)]、RFRP-3低剂量组[腹腔注射1 μg/100 μL RFRP-3,200 μL/(次·只)]和高剂量组[腹腔注射10 μg/100 μL RFRP-3,200 μL/(次·只)],每组10只,雌、雄各半,每天注射2次,连续腹腔注射14 d。观察和记录大鼠的采食量、采食行为和体重变化,计算料肉比及Lee指数,分离血清并检测血脂相关指标,并对下丘脑食欲相关因子的表达水平进行检测。结果表明,与对照组相比,仅在光照环境中腹腔注射高剂量RFRP-3会导致大鼠采食量极显著(P<0.01)增加;采食行为方面主要表现为采食频率极显著(P<0.01)增高和饱腹率明显下降;生长性能方面主要表现为体重增长极显著(P<0.01)加快以及料肉比显著(P<0.05)降低;在肥胖指标中,Lee指数显著(P<0.05)增加,血清中甘油三酯和总胆固醇的含量极显著(P<0.01)升高;下丘脑NPY mRNA表达水平显著(P<0.05)上升,而POMC mRNA表达水平显著(P<0.05)下降。试验表明,腹腔注射RFRP-3可促进大鼠的采食行为并提高其生长性能,且这种生理功能的发挥可能是通过调节下丘脑食欲相关因子的变化完成的。     

腹腔注射GnIH对雄性小鼠采食、体重和血糖稳态的影响

目的 探究促性腺激素抑制激素（gonadotropin-inhibitory hormone,GnIH）对雄性小鼠采食、体重和血糖稳态的影响。方法 选取体重及日龄相近的雄性小鼠20只,随机分为2组,分别为对照组[腹腔注射生理盐水100 μL/（次·只）]和试验组[腹腔注射20 μg/100 μL GnIH,100 μL/（次·只）],每组10只,每天注射2次,连续注射21 d。观察和记录小鼠的采食情况;对小鼠的体重、空腹血糖、葡萄糖耐量、胰岛素耐量进行测定;利用实时荧光定量PCR（qPCR）方法对小鼠胰腺中胰岛素转录因子基因（NeuroD1）、胰岛素基因（Ins）、胰高血糖素基因（Gcg）、胰岛素转录调控因子基因（Pdx1）mRNA相对表达量进行检测。结果 与对照组相比,试验组小鼠平均日增重和平均日采食量极显著（P<0.01）升高;试验组小鼠空腹血糖曲线下面积极显著（P<0.01）增加,葡萄糖耐量的血糖曲线下面积极显著（P<0.01）增加,胰岛素耐量的血糖曲线下面积极显著（P<0.01）增加;试验组小鼠胰腺Gcg基因mRNA相对表达量显著（P<0.05）升高,Ins基因mRNA、Pdx1基因mRNA和NeuroD1基因mRNA相对表达量均显著（P<0.05）下降。结论 慢性腹腔注射GnIH会引起雄性小鼠采食量和体重增加,并引起机体血糖紊乱。     

内蒙古部分地区牛肉和绵羊肉色度测定比较

[目的]研究内蒙古牛肉和绵羊肉的色度参数,评价以色度值建模判别放牧和舍饲牛肉以及放牧羊肉产地的可行性。[方法]对采集自内蒙古鄂温克族自治旗的39份放牧牛肉、呼和浩特市南郊的14份舍饲牛肉,以及鄂温克族自治旗、新巴尔虎左旗、新巴尔虎右旗、阿巴嘎旗、苏尼特左旗5个旗（县）的117份放牧绵羊肉,用Hunter Lab色差仪检测了其股二头肌、背最长肌和脂肪的色度值,并进行了差异检验和主成分分析（PCA）。[结果]鄂温克族自治旗放牧牛背最长肌a^*值（15.93±0.75）极显著（P<0.01）高于呼和浩特舍饲牛（12.81±0.84）,颜色更深;放牧牛脂肪b^*值（27.86±1.55）为舍饲牛（8.94±0.57）的3.1倍,呈柠檬黄至橙黄色;PCA分析放牧和舍饲牛肉有明显的聚类分离。5个旗（县）绵羊股二头肌a^*和b^*值（18.14±0.64和9.02±1.22）高于背最长肌（17.00±0.78和8.14±1.71）,差异显著（P<0.05）;阿巴嘎旗绵羊肉色度与其他4个旗（县）有显著差别,PCA分析阿巴嘎旗绵羊色度单独聚类;5个旗（县）绵羊脂肪色度存在差异,可用脂肪色度来对绵羊产地进行鉴别。[结论]结果提示,以肌肉和脂肪色度值建模判别放牧牛和舍饲牛可行,以绵羊脂肪色度值建模判别绵羊产地可行。制定内蒙古放牧和舍饲牛羊肉颜色标准,有助于内蒙古特色牛羊肉产业,特别是放牧牛羊肉产业的品牌化发展,但建立相关标准尚需进行更系统和更细致的检测分析。     

戈壁草原蒙古羊春季羔羊铜缺乏症的研究

[目的] 确定内蒙古苏尼特左旗北部地区春季发生的戈壁草原蒙古羊羔羊发病、死亡现象的主要原因。[方法] 选取3户羔羊发病情况最为严重的牧户采样,每户各采集5只发病羔羊的血液样本、放牧草场的饮用水样本,以及羔羊所处环境中3种主要牧草（红砂、珍珠猪毛菜和盐爪爪）样本和土壤样本,同时采集当地种羊场15只相同品种健康羔羊的样本作为对照,测定上述样本中的10种矿物质元素（钙、磷、铁、锰、铜、锌、镁、钼、硒、钴）的含量。[结果] 发病羔羊血液中铜和镁的含量显著（P<0.05）低于同品种健康羔羊,钼的含量显著（P<0.05）高于同品种健康羔羊,其他矿物质元素的含量差异不显著（P>0.05）。发病羔羊所处环境中饮用水的镁和钙含量较高。发病羔羊所处环境中红砂的钼、铁、锰和硒含量均高于文献报道值,其他矿物质元素含量均处于正常范围;盐爪爪的钼、铁、锰、硒、镁和钴的含量高于文献报道值,其他矿物质元素含量均处于正常范围;珍珠猪毛菜、红砂和盐爪爪的铜钼比分别为15.96∶1、0.23∶1和2.34∶1。发病羔羊所处环境中土壤样本的铜、铁、锰、硒、钴含量均低于文献报道值,镁、钙和磷含量均高于文献报道值,钼和锌含量在正常范围内。[结论] 该地区戈壁草原蒙古羊羔羊发病、死亡的原因主要是放牧羊摄入铜不足、钼超标、铁和锰等矿物质元素摄入量过多,导致羔羊对铜的吸收发生障碍,最终引起继发性铜缺乏症。     

羊肉中多黏菌素A和多黏菌素B液相色谱—串联质谱检测方法的建立

[目的] 建立一种液相色谱—串联质谱同步测定羊肉中多黏菌素A和多黏菌素B的方法。[方法] 样品经10%三氯乙酸水溶液—乙腈溶液提取,WCX固相萃取柱净化,0.1%甲酸水溶液作为流动相进行梯度洗脱,流速0.30 mL/min,多反应监测（MRM）正离子模式扫描,用液相色谱—串联质谱仪检测,基质添加标准溶液外标法定量。[结果] 多黏菌素A和多黏菌素B在5.0~110.0 μg/L浓度范围内呈良好线性关系,线性相关系数R>0.996,方法的定量限为0.50 μg/kg,3个添加水平的平均回收率为73.2%~115.6%,RSD≤10.0%。[结论] 该方法高效、准确,适用于羊肉样品中多黏菌素A和多黏菌素B的定量及确证检测。     

氟苯尼考对人工感染多杀性巴氏杆菌小白鼠的防治效果研究

[目的]观察抗菌药物氟苯尼考对多杀性巴氏杆菌的体外抑菌效果,评价其对人工感染多杀性巴氏杆菌小白鼠的防治效果。[方法]采用微量肉汤稀释法测定临床常用的9种抗菌药物对多杀性巴氏杆菌的抑菌效果,筛选敏感抗菌药物,进一步选择小白鼠开展预防试验和治疗试验,观察抗菌药物对人工感染多杀性巴氏杆菌小白鼠的防治效果。[结果]在9种常见的抗菌药物中,对多杀性巴氏杆菌抑菌效果最好的是氟苯尼考和多西环素,2种药物的MIC为1 μg/mL,MBC为2 μg/mL;抑菌效果最差的是延胡索酸泰妙菌素,MIC为64 μg/mL,MBC为128 μg/mL。利用多杀性巴氏杆菌人工感染小白鼠,治疗试验与预防试验均设置阴性对照组（注射生理盐水）、阳性对照组（攻毒细菌）以及药物治疗或预防组（攻毒细菌+氟苯尼考）;治疗试验获得氟苯尼考的保护率为78.6%,预防试验的保护率为84.6%。[结论]氟苯尼考对人工感染多杀性巴氏杆菌小白鼠有较好的防治效果。     

内蒙古四子王旗草原土壤—牧草—放牧绵羊生态系统微量元素的季节变化研究与盈亏分析

[目的]对内蒙古四子王旗荒漠草原土壤—牧草—放牧绵羊生态系统中的微量元素含量进行分析,研究不同季节放牧绵羊体内矿物质元素的盈亏状况,评定矿物质元素营养限制因子。[方法]选取6只体况良好的体重为（39.65±2.25）kg的放牧蒙古羊母羊作为试验羊,测定该地区牧草嫩草期（6月）、生长期（9月）和枯草期（11月）放牧绵羊的体重、采食量、排粪量和排尿量;检测牧草3个生长时期草原土壤、牧草以及放牧绵羊血清中的7种矿物质元素（铁、铜、锰、锌、硒、钼、钴）含量;借助采食量模型预测放牧绵羊在牧草不同生长时期的矿物质元素摄入量;利用代谢试验测定从粪、尿中排出的矿物质元素含量,计算放牧绵羊体内矿物质元素沉积量。[结果]放牧绵羊的体重和采食量在牧草3个生长时期之间差异均极显著（P<0.01）,枯草期排粪量极显著（P<0.01）高于嫩草期和生长期。草原土壤、牧草及绵羊血清中的铁元素含量在牧草不同生长时期之间差异均不显著（P>0.05）,铁元素含量均不存在缺乏情况。枯草期牧草的铜元素含量极显著（P<0.01）低于嫩草期和生长期,枯草期绵羊体内沉积的铜元素含量极显著（P<0.01）低于生长期,并出现了负沉积。草原土壤、牧草以及绵羊采食和体内沉积的锰、钼元素含量在牧草不同生长时期之间存在极显著（P<0.01）差异,但两种元素不存在缺乏情况。嫩草期绵羊血清中的锌元素含量显著（P<0.05）高于生长期和枯草期;草原土壤、牧草、绵羊体内沉积的锌元素含量在牧草不同生长时期之间虽无显著（P>0.05）差异,但存在缺锌的情况。草原土壤中的硒元素含量在牧草生长期最高,极显著（P<0.01）高于嫩草期和枯草期,嫩草期和生长期牧草中的硒元素含量低于正常水平下限,而枯草期牧草中未检测到硒元素;绵羊血清中硒元素的含量在牧草不同生长时期之间差异不显著（P>0.05）,但均处于正常水平的下限。草原土壤中的钴元素含量在牧草不同生长时期之间差异不显著（P>0.05）,但均低于标准值;枯草期和嫩草期绵羊体内沉积的钴元素含量极显著（P<0.01）低于生长期。[结论]建议在该地区全年以适当形式为放牧绵羊补锌和硒元素,冬季或春季可适当补饲含铜和钴的微量元素制剂。     

乳粉溶解度测定的不确定度评定

[目的]研究乳粉溶解度的不确定度评定。[方法]根据《GB 5413.29—2010 食品安全国家标准婴幼儿食品和乳品溶解性的测定》中的第二法溶解度的测定来测定乳粉的溶解度。通过分析不确定度的来源,建立完整的数学模型,对模型中的各影响因素的不确定度进行评定和计算,合成相对标准不确定度,计算相对扩展不确定度。[结果]当取置信度为95%时,得到的乳粉溶解度：X=（99.97±1.60） g/100 g,取k=2,扩展不确定度为U=1.60 g/100 g。[结论]该方法可以为乳粉溶解度的不确定度评定提供参考依据。