北疆部分地区马新孢子虫病血清学调查初报

为了解新疆北疆地区马匹感染新孢子虫病的情况,课题组成员运用自制新孢子虫病r ELISA抗体试剂盒,对采自阿勒泰富蕴县4个乡镇的160份马血清和伊犁地区3个马场的270份马血清进行了血清学检测。结果表明:阿勒泰富蕴县4个乡镇的马新孢子虫病阳性率分别为15.00%、13.85%、13.30%、8.00%,其总感染率为13.13%(21/160);伊犁地区3个马场马新孢子虫病阳性率分别为5.68%、9.82%、11.43%,其总感染率为8.89%(24/270)。经SPSS软件统计分析,两个地区之间的感染率差异显著(P0.05)。     

温泉县部分奶牛的新孢子虫病和布氏杆菌病血清学调查

为了探究温泉县奶牛流产病因,对采自温泉县4个不同地区的81份血清样品分别进行新孢子虫病和布氏杆菌病检测,其中新孢子虫病应用rELISA方法检测,布氏杆菌病的检测参照国标,被检的81份血清样品中8份血清呈新孢子虫抗体阳性,阳性率为9.88%。其中安格里格乡感染率为18.75%,哈日布呼镇感染率为7.14%,蒙进感染率为0%,塔秀乡感染率为13.04%。没有检出布氏杆菌阳性血样和新孢子虫和布氏杆菌病二者混合感染的流产奶牛血样。检测结果表明:新孢子虫是导致该地区奶牛流产的重要原因之一。     

河南省清丰县奶牛新孢子虫病感染情况调查

为初步了解河南省清丰县奶牛新孢子虫病流行情况,于2017年3-9月应用ELISA技术对清丰县6个奶牛养殖场按20.0%比例随机采集438份血液样品进行奶牛新孢子虫病血清抗体检测。结果显示,438份血液样品中有63份检测为新孢子虫病血清抗体阳性,平均阳性率为14.38%,6个奶牛场血清抗体阳性率为8.06%-19.05%;不同年龄阶段奶牛新孢子虫病血清抗体阳性率存在一定差异,流产奶牛较未流产奶牛阳性率高。结果表明,奶牛新孢子虫病感染在清丰县广泛存在,应引起养殖场(户)的重视。     

绵羊3种胞内寄生原虫感染情况调查

为了解绵羊住肉孢子虫、新孢子虫和弓形虫流行情况,从河南省焦作市某绵羊饲养村,采集了114个心脏、61个食道肌和131份血清样品。应用镜检法对心脏和食道样本进行住肉孢子虫包囊检测,PCR扩增18S rRNA进行住肉孢子虫虫种鉴定;应用间接ELISA法检测新孢子虫和弓形虫血清抗体。结果显示,分离的住肉孢子虫均为柔嫩住肉孢子虫;住肉孢子虫阳性率为39.47%(45/114),新孢子虫血清阳性率为57.25%(76/131),弓形虫血清阳性率为21.37%(28/131),三者混合感染率为7.89%(9/114)。表明3种原虫感染在该绵羊群体中普遍流行,提示在绵羊饲养时要制定有效的防控措施。     

川西北牦牛新孢子虫感染血清流行病学调查

目的 了解川西北牦牛新孢子虫的感染情况.方法 采用间接ELISA方法对川西北阿坝州8个县1 070份待屠宰牦牛血清中新孢子虫抗体进行检测.结果 被检1 070份血清样品中65份血清新孢子虫抗体呈阳性,样品来源的8个县都检测到了新孢子虫抗体,被检牦牛的血清抗体平均阳性率为6.1％,其中理县(12.2％)的抗体阳性率显著高于平均水平(p＜0.01),马尔康的最低为2.7％.结论 川西北阿坝州各县广泛存在牦牛新孢子虫感染.     

吉林省延边地区宠物犬与牧场家犬的新孢子虫病流行病学调查

为了调查宠物犬和牧场内家犬的犬新孢子虫病的感染情况,以新孢子虫Nc GRA2t为诊断抗原,应用间接酶联免疫吸附试验(ELISA)对采自吉林省延边地区部分宠物医院的23份宠物犬血清和牧场内家犬的4份血清进行了检测。结果,宠物犬的犬血清感染率为0%,牧场内家犬的感染率为75%。牧场内家犬的新孢子虫病感染率较高,牧场内饲养牛存在感染新孢子虫的风险。     

牛新孢子虫病和弓形虫病的流行病学调查

为了调查我国牛新孢子虫和弓形虫的感染情况，应用新孢子虫酶联免疫吸附试验（ELISA）和弓形虫间接血凝试验（IAT）分别检测了来自国内10个省（市、自治区）的262份乳牛、10份肉牛和40份水牛血清。结果显示，乳牛新孢子虫的抗体阳性率为17．2％，弓形虫的抗体阳性率为2．3％，没有检测到既有新抱子虫抗体又有弓形虫抗体的乳牛血清。各牛场所检乳牛血清的新孢子虫抗体阳性率在0～34．4％之间。在水牛和肉牛血清中未检测到新孢子虫抗体和弓形虫抗体。流产乳牛血清的新孢子虫抗体阳性率为20．2％，未流产乳牛为16．1％，其中血清抗体阳性乳牛主要在妊娠中晚期流产。各个年龄段乳牛血清的抗体阳性率差异不显著（P〉0．05）。不同妊娠胎次的乳牛血清抗体阳性率差异不显著（P〉0．05）。确认新孢子虫病在国内大部分牛场存在。     

上海地区奶牛犬新孢子虫病血清学抗体检测

为了掌握上海地区奶牛新孢子虫病的流行情况，应用酶联免疫吸附试验对上海地区奶牛血清样品进行新孢子虫病抗体检测。结果表明，被检的41个奶牛场1239份奶牛血清中有63份抗体阳性，阳性率为5．08％。各场阳性率变幅较大（0-44．23％）。     

云南省荷斯坦牛及奶水牛犬新孢子虫血清学调查研究

为了解云南省荷斯坦牛和奶水牛犬新孢子虫感染情况,本研究应用酶联免疫吸附试验(ELISA)对血清样品进行犬新孢子虫抗体检测.结果显示,68份荷斯坦牛血清样品中,抗体阳性7份,阳性率10.3％,2份可疑;106份奶水牛血清样品中,未检出抗体阳性血清,2份可疑.检测结果表明,云南省荷斯坦牛存在犬新孢子虫感染,奶水牛可能存在犬新孢子虫感染.     

小尾寒羊犬新孢子虫病血清学诊断

应用酶联免疫吸附实验,对民和县引进小尾寒羊224份血清样品进行了犬新孢子虫病的检测。结果,被检的224份血清中,检出犬新孢子虫抗体阳性血清16份,阳性率分别为7.14%。表明引入青海省的小尾寒羊中存在犬新孢子虫病。     

牛新孢子虫病在新疆地区流行情况调查

为了调查新疆各地区牛新孢子虫病的流行情况,试验应用地方虫株重组蛋白NcSRS2t作为包被抗原建立了rELISA方法,对新疆16个地区41个牛场1 613份牛(包括牦牛)血清样品进行了血清学调查。结果表明:在所采集的1 613份血清中检出阳性血清212份(应用美国IDEXX公司等的商品化试剂盒进行了验证);其中具有流产史的奶牛新孢子虫病感染率为20.4%;不同地区的感染率为4.0%～41.0%,平均感染率为13.1%。说明新疆地区的牛类动物均不同程度地感染了新孢子虫,应该加强综合防治措施。     

福建省部分地区奶牛新孢子虫病血清学抗体检测

新孢子虫是造成怀孕母牛流产等繁殖障碍和新生犊牛运动障碍的重要寄生虫之一,目前尚未有有效的药物和疫苗来治疗和预防牛新孢子虫病。本研究使用新孢子虫抗体检测试剂盒对采自福建省漳州、南平、三明和龙岩4个地区规模化奶牛场的1 472份奶牛血清样品进行抗体检测,并通过SPSS 22.0软件进行生物统计学分析。结果表明,血清样品新孢子虫抗体总阳性率为7.47%,4个地区样品阳性率分别为5.57%、5.12%、7.41%和12.97%;不同年龄阶段奶牛阳性率范围为2.93%～9.56%,不同胎次阳性率范围为4.83%～9.50%。经统计学分析,不同年龄阶段奶牛阳性率差异显著（P<0.05）。这表明福建省奶牛普遍存在新孢子虫感染,奶牛场应采取综合防控策略和制定有效的管理措施控制奶牛新孢子虫病。     

青海省格尔木市乳牛新孢子虫病的血清学调查

用重组蛋白GST-NcSAG1t作为ELISA诊断抗原,对格尔木市乳牛犬新孢子虫病进行了调查.结果,从 35份乳牛血清样品中检出犬新孢子虫抗体阳性血清4份,阳性率为11.42%.检测结果说明,青海省格尔木市饲养的乳牛牛群中存在犬新孢子虫感染.     

乌鲁木齐市部分宠物犬犬新孢子虫病的流行病学调查

为了调查乌鲁木齐市部分宠物犬犬新孢子虫病的感染情况,应用新孢子虫间接酶联免疫吸附试验(ELISA)检测新农大动物医院、自治区畜科院动物医院、乌鲁木齐市宠美康动物医院等3家动物医院的共29份犬血清,结果显示5份犬血清呈临床阳性,感染率为17%,说明在乌鲁木齐市的家养宠物犬中存在新孢子虫病感染。因本区以畜牧业为主,该病对畜牧业的危害较严重,并且犬新孢子虫是否感染人类,目前尚无定论,但国外曾有人感染犬新孢子虫病的报道[1],所以更加重视犬新孢子虫的检疫工作。     

鹦鹉隐孢子虫血清流行病学调查

为调查河北省鹦鹉隐孢子虫的流行情况,本试验对311只原产地在北京和潍坊2个地区的4种鹦鹉采集血液样本,离心取血清,通过酶联免疫吸附试验(ELISA)检测隐孢子虫抗体的情况。试验结果显示,鹦鹉的隐孢子虫总阳性率是3.22%。在163份雄性鹦鹉血清样本当中,共检测出6份阳性血清,抗体阳性率为3.68%,而在148份雌性鹦鹉血清样本当中,共检测出4份阳性血清,抗体阳性率为2.70%,两者之间的差异性不显著(P0.05)。在105份小于5月龄鹦鹉血清样本中,检出6份阳性血清,血清抗体阳性率为5.71%;在100只6~12月龄鹦鹉血清样本中,检出4份阳性血清,血清抗体阳性率4.00%;在106只13~18月龄鹦鹉血清样本中,检出0份阳性血清,不同年龄之间的阳性率差异性不明显(P0.05)。本次调查证实鹦鹉可以成为养殖业中隐孢子虫感染的潜在影响因素,对鹦鹉隐孢子虫的预防和控制是必要的。     

奶牛新孢子虫重组蛋白NcSRS2t间接ELISA方法的建立及初步应用

以纯化的犬新孢子虫(Neospora caninum)重组蛋白 NcSRS2t为抗原包被酶标板,通过对间接ELISA 各反应条件的优化,确定了最佳反应条件.采用已建立的间接ELISA反应条件,对218份阴性血清的检测结果进行统计学分析,确定了间接ELISA的判定标准,即OD450nm值大于等于O.32为阳性,小于O.32为阴性.应用建立的间接ELISA方法对128份阴性血清和50份阳性血清(经IDEXX公司新孢子虫抗体检测试剂盒证实)进行检测,结果表明,闻接ELISA方法的特异性为93.0%,敏感性为90.0%.采用本试验建立的新孢子虫间接ELISA 诊断方法对黑龙江省克山、海林、双城、甘南、克东、富裕、牡丹江、大庆等8个县(市)奶牛场的540份奶牛血清进行了检测.结果表明,被检的540份奶牛血清样本中奶牛新孢子虫的抗体阳性率为13.33%.该间接ELISA 诊断方法的建立及初步应用为新孢子虫病诊断试剂盒的研制和新孢子虫病的预防研究奠定了基础.     

新孢子虫IFAT方法的建立及吉林省部分地区羊新孢子虫病的血清学调查

本实验建立了羊新孢子虫间接荧光抗体试验方法 (IFAT),并采用该方法检测了310份来自吉林省部分地区的成年羊血清。结果检出羊新孢子虫抗体阳性血清30份,阳性率为9.68%。结果表明吉林省某些地区存在羊新孢子虫的感染。     

散养鸡新孢子虫、弓形虫血清与分子流行病学调查及风险因素分析

通过调查河南省散养鸡新孢子虫病和弓形虫病的血清与分子流行病学情况,评估该地区土壤受新孢子虫和弓形虫污染的程度。分别采用IFAT和MAT方法检测散养鸡血清中的新孢子虫和弓形虫的抗体,PCR方法检测部分血清阳性样品消化液的弓形虫抗原。结果发现,新孢子虫病的阳性率为23.26%(150/642;滴度1∶25;CI 95%=20.25~26.79),弓形虫的感染率为18.86%(132/700;滴度1∶25;CI 95%=16.13~21.93)。PCR检测弓形虫的结果为16%(4/25)。弓形虫感染与散养鸡的性别有关,公鸡感染率显著高于母鸡感染率(P<0.05)。结果表明,散养鸡的新孢子虫病和弓形虫病的感染率均较高,该地区人畜面临着较高的新孢子虫和弓形虫卵囊污染的风险,公共卫生安全形势严峻。散养鸡的新孢子虫病流行情况在国内首次报道。     

新疆和静县黑头羊犬新孢子虫的检测及分子鉴定

犬新孢子虫是一种细胞内原生动物寄生虫,可导致包括绵羊和山羊在内的多种哺乳动物流产和新生胎儿死亡。本研究为了预估巴音郭楞蒙古自治州和静县黑头羊中犬新孢子虫的流行情况,采集了8 个乡镇的165 份血样,运用聚合酶链式反应（PCR）扩增犬新孢子虫Nc5基因片段,并对部分阳性产物进行基因测序。结果显示,在165 只黑头羊中有13 只（7.9%）检测到犬新孢子虫阳性;年龄、流产史、饲养犬只与感染率有统计学差异（P< 0.05）;2 岁以上的母羊感染率最高,有流产史的母羊,新孢子虫感染率较高。饲养场地周边犬的存在对感染率也有所影响,有饲养犬的羊群感染率11.4%,高于未饲养犬的羊群。将Nc5 基因的部分序列与GenBank 上传的基因序列进行比对,结果显示同源性为92%~100%。本研究是首次对和静县黑头羊犬新孢子虫进行系统进化分析,为犬新孢子虫病防控方案的制订提供参考,对减少畜牧业的经济损失具有实际意义。     

新疆地区牛新孢子虫病血清抗体检测及结果分析

为了解新疆地区牛新孢子虫病的流行情况,用ELISA方法对采自新疆6个地区327份的牛血清进行了新孢子虫病的抗体检测,并以第一次检测结果为依据,对20头牛进行了5次连续采样检测,每次间隔30～40天。检测结果表明,该病在新疆不同地区都有不同程度的发生和流行,平均阳性率为24.5%,且在年龄大和流产牛群中阳性率偏高,血清抗体阳性持续时间至少半年以上。