花溪古茶树离体繁殖技术研究初报

为了建立花溪古茶树的组培快繁体系,以花溪古茶树单株为试验材料,对其带芽茎段最佳灭菌时间、腋芽启动、增殖及生根培养条件进行研究。结果表明,最佳灭菌时间为0.1% HgCl_2消毒6 min;最有利于腋芽启动和增殖的培养基是MS+6-BA 1.5 mg/L+NAA 0.5 mg/L,所得最佳增殖系数高达1.5;适宜的生根培养基为1/2 MS+1.0 mg/L IBA+0.5 mg/L NAA,所得生根率为56.7%。     

不同生长调节剂对金丝梅组培快繁的影响

本研究以云南野生金丝梅(Hypericum patulum)带休眠芽的茎段为外植体,研究了不同植物生长调节剂对其离体培养的影响,以建立金丝梅离体快繁技术体系。研究结果表明,腋芽诱导的适宜培养基为MS+6-BA 2.0 mg/L+NAA 0.1 mg/L,诱导率可达90%;适合腋芽增殖的培养基为MS+6-BA 1.0 mg/L+NAA 0.1 mg/L+GA30.1 mg/L,增殖系数可达5.12;最佳生根培养基为1/2MS+IBA 0.5 mg/L+活性炭0.1 g/L,生根率为96.69%。炼苗移栽到草炭土∶珍珠岩=2∶1的基质中,成活率达100%,移栽到苗圃后成活率为100%。研究结果为金丝梅高效快速繁殖以及优良品种选育提供科学依据。     

药用植物穿心莲的组织培养

以带腋芽茎段为外植体,研究不同培养基对穿心莲芽增殖的影响、不同代数试管苗生长的差异以及试管苗生根的试验。结果表明:穿心莲生长的最适合基本培养基是MS培养基;丛生芽增殖最佳培养基为MS+KT1.0mg/L+NAA0.1mg/L;3代以内试管苗生长状况良好;试管苗生根最佳培养基为1/2MS+NAA1mg/L。     

伊贝母鳞茎和茎段的组织培养

以新疆野生伊贝母鳞茎和茎段为试验材料,比较了外植体消毒方法、生长调节剂种类和浓度对伊贝母组织培养的影响,建立了伊贝母组织培养再生体系。结果表明:鳞茎的最佳消毒方式为70%乙醇+0.5%次氯酸钠一次消毒后用2%次氯酸钠进行二次消毒;基本培养基为MS+2.0mg/L 6-BA+0.2mg/L NAA;增殖培养基为MS+1.0mg/L 6-BA+0.2mg/L NAA。茎段以70%乙醇+2%次氯酸钠一次消毒效果最好,基本培养基为MS+1.0mg/L 6-BA+0.2mg/L NAA,增殖培养基为MS+0.5mg/L 6-BA+0.1mg/L NAA。生根培养基以1/2MS+0.05mg/L 6-BA+0.05mg/L NAA最佳。     

‘中黄1号’茶树带腋芽茎段组培快繁体系建立

本研究以‘中黄1号’茶树带腋芽茎段为外植体,探索外植体的取样时间和消毒条件、最佳萌发和增殖培养基、生根和壮苗培养基配方以及炼苗移栽条件。结果表明:最佳外植体取样时间为4月份,茎段经75%酒精浸泡60 s,0.1%升汞浸泡12 min,外植体存活率为91.3%,污染率为2.7%,以MS+2 mg/L 6-BA+1 mg/L GA_3作为腋芽萌发培养基,培养40 d出芽率为91.7%,以MS+4 mg/L 6-BA+1 mg/L IBA作为增殖培养基,培养45 d增值系数可达3.8。以MS+1 mg/L 6-BA+0.5 mg/L IBA作为壮苗培养基进行壮苗,经45 d可培养至约4～5 cm后诱导生根,在50 mg/L IBA无菌溶液中浸泡5 min后,转至1/2MS+1.5 mg/L IBA生根培养基中,生根率可达82.5%。自然光条件下开瓶室温炼苗5 d,移栽到以营养土和蛭石2∶1比例基质中,成活率最高,移栽成活率为66.7%。本研究建立‘中黄1号’带腋芽茎段组培快繁体系,为‘中黄1号’茶树工厂化育苗提供技术支持。     

铁线莲‘Polish Spirit’组培快繁体系的建立

本研究以铁线莲波兰精神(Clematis viticella‘Polish Spirit’)为实验材料,以带芽茎段为外植体,利用正交试验,完成‘Polish Spirit’初代培养消毒方式筛选并对其叶片、叶柄和无芽茎段进行愈伤组织诱导研究。通过研究不同外植体、不同消毒方式、不同激素种类和浓度配比对腋芽诱导、增殖培养及不定根诱导的影响,建立了铁线莲波兰精神的组培快繁体系。实验结果表明最佳的外植体为带芽茎段,最好的消毒方法是2%洗衣粉溶液浸泡10 min流水冲洗1 h,75%的酒精消毒20 s,0.1%HgCl2消毒6 min。诱导腋芽的最佳培养基为1/2MS+0.2 mg/L 6-BA+0.5 mg/L KT+0.05 mg/L NAA+1.5%蔗糖,pH值为5.8,增殖培养基添加椰汁150 m L/L可有效提高丛生芽诱导率,添加20 mL/L香蕉泥可有效壮苗,生根最适诱导培养基为1/2MS+0.02 mg/L NAA,生根率为85%,组培苗移栽成活率达90%以上。本研究结果为铁线莲优良品种‘Polish Spirit’快速扩繁提供了理论基础。     

环草石斛离体培养的研究

环革石斛当年生带腋芽茎段是获得再生植株的较佳材料,消毒处理以4-6 min效果最好,腋芽在MS培养基上萌发生长最好,芽的继代增殖培养基为Ms+6-BA4.0mg/L+NAA0.2mg/L,芽的增殖系数达到3.8;1/2MS培养基中添加NAA0.5 mg/L有利于生根壮苗,生根率达100%.     

耐寒美国红枫的组织培养体系的建立

本试验以美国红枫带芽茎段为外植体,通过筛选外植体消毒方式,筛选出适宜的初代诱导培养、继代增殖培养、壮苗培养、生根培养的培养基,建立美国红枫组织培养体系,从而为美国红枫工厂化育苗提供技术支持。研究结果表明：最佳的消毒处理方式是先后用75%酒精消毒30 s及10%次氯酸钠消毒10 min,平均存活率为64.15%;适宜的腋芽诱导培养基为改良MS+1.0 mg/L 6-BA+0.2 mg/L IBA。在改良MS培养基中添加0.005 mg/L TDZ+0.1 mg/L 6-BA+0.1 mg/L GA₃+0.1 mg/L IBA适用于美国红枫继代增殖培养,增殖系数为6.91;筛选最佳的壮苗培养基为MS+1.0 mg/L ZT+0.3 mg/L IBA;生根培养基为1/2MS+1.0 mg/L GA₃+2 mg/L 2,4-D,平均生根数量为5条。     

无籽罗汉果组培无菌系的构建

【研究目的】研究无籽罗汉果组培快繁技术要点,为无籽罗汉果再生体系建立和工厂化生产提供技术支持。【方法】以幼嫩茎段为试验材料,探讨不同灭菌时间,不同激素组合以及浓度对启动培养、增殖培养、生根培养等的影响。【结果】无籽罗汉果带芽茎段最佳消毒方法为1% HgCl2溶液消毒8 min。最适宜的无籽罗汉果茎段启动培养基为MS+1.0 mg/L 6-BA+1.5 mg/L KT,无籽罗汉果继代增殖培养基为MS+1.0 mg/L 6-BA+0.5 mg/L IBA,增殖系数可达6.8;较适合生根的培养基为1/2MS+1.0 mg/L IBA+0.5 mg/LNAA,新稍平均生根数达7.4条,生根率可达95%。【结论】可为无籽罗汉果大规模组织培养和快速繁殖提供理论基础,并为组织培养高效体系的建立及外源基因导入提供参考。     

金叶络石组培快繁技术体系的建立

以金叶络石[Trachelospermum asiaticum 'Ougonnishiki']带腋芽的茎段为外植体,研究了植物生长调节剂种类及浓度对金叶络石组培苗增殖及生根的影响,建立金叶络石组培快繁技术体系。结果表明:金叶络石组培苗适宜继代增殖培养基为MS+BA3.0mg/L+NAA0.05mg/L,增殖系数为7.63;适宜生根培养基为1/2MS+IBA0.05mg/L,生根率达到95%以上,根数5.2,根长4.4cm;采用"塑料杯单株一步移栽技术",移栽成活率97%。     

南美天胡荽无菌快速繁殖技术研究

旨在研究不同培养条件对南美天胡荽不定芽再生和生根状况的影响并筛选出最适培养条件。以南美天胡荽带腋芽茎段(约1.0 cm)为外植体,进行腋芽诱导、丛生芽增殖及植株再生研究。结果表明生长调节剂种类及质量浓度对南美天胡荽不定芽的出芽时间和再生率以及生根率有明显影响。所做结果分化率高达89%,生根率高达98%。培养条件为光照强度1500 lx,光照时间12 h/d,温度25℃。南美天胡荽诱导不定芽分化的最佳培养基为MS+6-BA 0.12 mg/L+NAA 0.3 mg/L;生根的最佳培养基为MS+6-BA 0.3 mg/L+NAA 0.15 mg/L。     

附子茎段组培快繁体系的建立

为探讨附子丛生芽的诱导、增殖及不定根诱导条件。本研究以附子带腋芽茎段为外植体,以MS和1/2MS为基本培养基,添加不同浓度的6-BA、NAA、TDZ、IBA等植物生长调节剂,观察附子丛生芽的诱导、增殖、生根情况。结果发现,附子茎段经75%乙醇处理30 s后,0.1%Hg Cl2灭菌10 min,污染率为27.78%,存活率可达84.61%。附子第三个腋芽,诱导率为53.34%,死亡外植体少。丛生芽在MS+6-BA 2 mg/L+NAA0.3 mg/L条件时诱导率为86.67%,芽长1.947 cm,植株茎干粗壮。增殖培养时添加TDZ 2 mg/L+NAA0.3 mg/L,增殖系数达到4.029,苗粗壮,叶片浓绿。生根培养基条件为1/MS+IBA 0.5 mg/L时,15 d的生根率可达100%,平均根长0.906 cm,平均根数10.5条,叶色翠绿,生长旺盛。研究表明,最佳的取材部位为第三个腋芽,丛生芽诱导的最佳培养基为MS+6-BA 2 mg/L+NAA 0.3 mg/L,丛生芽增殖培养基中添加TDZ 2 mg/L+NAA 0.3 mg/L的增殖效果最好,适宜的生根培养基为1/2MS+IBA 0.5 mg/L。本研究为附子快繁体系的建立和工厂化育苗提供了理论依据。     

黄花倒水莲(Polygala fallax Hemsl)组培快繁技术研究

以当年生黄花倒水莲幼嫩带腋芽茎段作为外植体,开展组织培养试验研究.结果表明:最佳外植体诱导培养基为1/2 MS+ BA 2.0 mg/L+ NAA 0.1 mg/L,诱导率可达95.1％;最佳增殖培养基为WPM+ BA 1.5 mg/L+ NAA0.1 mg/L,增殖系数为6.12,周期为25 d,不定芽生长状况好;最佳生根培养基为1/2 WPM+ IBA 0.1 mg/L+ ABT0.4 mg/L,生根率为95.67％;以泥炭土∶黄泥土∶珍珠岩(2∶1∶1)为移栽基质,移栽成活率可达92.6％,苗木长势好,叶色绿.     

银木的组织培养及植株再生技术研究

以银木2年生小苗的茎段为外植体,建立银木的组织培养和再生体系。研究不同种类、不同浓度生长调节剂、光照条件等因素对银木组培各阶段产生的影响。结果表明：适合嫩茎段腋芽初诱导与生长对培养基的选择不甚严格,在基本培养基MS中即可诱导;增殖培养基为MS+ BA 0.5 mg/L+ NAA 0~ 0.05 mg/L,增殖系数可达3.5以上;生根的最佳培养基为1/2MS+ NAA 0.1 mg/L + IBA 0.2 mg/L,生根率达98%以上。银木的高效快繁体系建立为银木的开发利用和工厂化育苗提供可靠技术依据。     

麻栎的组织培养与快速繁殖

以麻栎幼苗茎段为外植体,以MS为基本培养基,研究了不同种类和不同浓度生长调节物质对麻栎组织培养的影响。结果表明,芽诱导最佳培养基为MS+6-BA1.0 mg?L-1,培育21天左右,腋芽可长至1～2 cm,展叶3～4片,发芽率达83.3%;芽增殖最佳培养基为MS+6-BA1.0 mg?L-1+NAA0.02 mg?L-1,增殖系数为4.6;最佳生根培养基为1/2MS+NAA0.5 mg?L-1,培养4周后生根率可达87%。     

鞑靼忍冬和疏花蔷薇组培快繁体系的建立研究

以西天山野果林中的重要伴生种鞑靼忍冬和疏花蔷薇带芽茎段为外植体,研究不同培养基及激素配比对芽分化、增殖及再生的影响。结果表明:腋芽诱导的最适宜培养基为MS培养基,鞑靼忍冬和疏花蔷薇诱导率分别可达99.12%和100%;适合鞑靼忍冬腋芽增殖的培养基为MS+6-BA 2.0 mg·L-1+NAA 0.2 mg·L-1+GA 31.0 mg·L-1,增殖系数可达5.37;而疏花蔷薇腋芽增殖的最佳培养基为MS+6-BA 1.0 mg·L-1+NAA 0.2 mg·L-1+GA 31.0 mg·L-1,增殖系数高达3.0;适合鞑靼忍冬组培苗生根的最佳培养基为1/2 MS+NAA 1.5 mg·L-1+6-BA 0.05 mg·L-1+活性炭1.0 g·L-1,生根率为100%;而疏花蔷薇组培苗生根最佳的培养基为1/2 MS+NAA 1.5 mg·L-1+6-BA 0.1 mg·L-1+活性炭1.0 g·L-1,生根率为66.67%。移栽到单独的珍珠岩基质中的鞑靼忍冬和疏花蔷薇组培苗成活率最高,成活率分别达90.00%和75.00%。     

甜叶菊离体培养快繁体系的建立

本试验以大田甜叶菊为试验材料,通过研究不同外植体、不同激素种类和浓度配比对丛生芽诱导、增殖培养及不定根诱导的影响,建立了甜叶菊组培快繁体系。结果表明:带腋芽茎段是甜叶菊组培快繁最适外植体;诱导丛生芽的最佳培养基为MS+6-BA 1.5 mg/L+NAA 0.1 mg/L,平均诱导率为88.1%;继代增殖培养基为MS+6-BA 0.5 mg/L+KT 4.0 mg/L+NAA 0.05 mg/L+GA30.2 mg/L,单芽平均增殖个数为4.1;不定根最适诱导培养基为1/2 MS+NAA 0.2 mg/L,生根率为95%;组培苗移栽成活率达70%以上。本试验研究结果为甜叶菊组培苗的产业化生产提供了一定的理论基础。     

观赏性小苹果“特丽”的组织培养及快速繁殖技术

以MS为基本培养基，以观赏性小苹果“特丽”的茎段为外植体，建立了无菌培养体系，研究了不同的激素配比和不同茎段类型对增殖培养的影响以及不同的生长素组合对试管苗生根的影响。结果表明：MS+BA0.5 mg/L~2.0mg/L+NAA0.1mg/L均为适合的芽萌发培养基；MS+BA1.5mg/L+IBA0.1mg/L是最适合的茎段增殖培养基；继代增殖培养取留顶芽无侧芽和去顶芽带有1~2个侧芽两种类型的茎段有利于提高增殖系数；1/2MS+0.2mg/L IAA是最佳生根培养基。试管苗增殖系数达到5.6，生根率达91.9%。     

铁线莲‘水晶喷泉’茎段组培再生体系的建立

本研究以铁线莲品种‘水晶喷泉’(Clematis Crystal Fountain’Fairy Blue’)的带芽茎段为初始外植体,通过研究灭菌时间、激素浓度配比、基础培养基类型等因素对茎段腋芽的诱导、增殖、再生苗生根的影响,从而建立该品种从外植体—腋芽诱导—不定芽增殖—生根得到完整的植株再生体系。结果表明：最佳灭菌条件为5%次氯酸钠溶液灭菌10 min,污染率为22.2%,成活萌芽率为44.5%;带芽茎段诱导腋芽最适培养基为MS+6-BA 1.0 mg/L+NAA 0.05 mg/L+蔗糖30 g/L pH值为6.0～6.2,6-BA/NAA比值为20,诱导率为100%,此时苗生长良好且株高较高;腋芽增殖最适培养基为DKW+6-BA 2.0 mg/L+NAA 0.05 mg/L+蔗糖30 g/L pH值为6.0～6.2,6-BA/NAA比值为40,增殖系数为5.6;最佳生根培养基为DKW+IBA 1.0 mg/L+蔗糖30 g/L pH值为5.7,生根率可达94.4%,本研究可为铁线莲品种‘水晶喷泉’的组织培养、规模化种植提供相关资料和遗传转化体系建立提供了科学依据。     

山苦茶组织培养与快速繁殖研究

为了给山苦茶（Mallotus oblongifolius）大规模繁殖和推广种植打下技术基础,以山苦茶当年生带芽茎段为试验材料,研究了山苦茶离体茎段培养和快速繁殖的影响因素。结果表明山苦茶带芽茎段最佳消毒方法为70%的酒精浸泡30 s,0.1% HgCl2溶液消毒8 min。最适宜的山苦茶茎段启动培养基为MS+2.0 mg/L 6-BA+1.5 mg/L KT。1/2MS为基本培养基,细胞分裂6-BA和KT组合有利于嫩茎增殖。山苦茶较好的继代增殖培养基为1/2MS+2.0 mg/L 6-BA+1.5 mg/L KT,生根培养基为1/2MS+2.0 mg/L IBA+2.0 mg/L NAA。利用本试验所得出的结果,可实现山苦茶种苗的离体无性快速繁殖,增殖率可达3。