鸳鸯茉莉不同外植体诱导愈伤组织研究初探

以鸳鸯茉莉花瓣、叶片、茎段为外植体,MS为基本培养基,探索外植体取材季节和部位对污染的影响;分析植物生长调节剂的种类、浓度对不同外植体诱导愈伤组织的影响和最适组合。结果表明:在34、月取材比5、6月好,12月取材效果较差;通过花瓣能成功诱导出健康的愈伤组织,但诱导率较低(27.1%),平均出愈时间为23~25 d,3种外植体中以嫩叶诱导愈伤组织的效果最好(87.1%),平均出愈时间最短,为18~20 d;茎段愈伤组织诱导率其次(68.1%),平均出愈时间为21~23 d;2,4-D6、-BA对以花瓣为外植体诱导愈伤组织的影响达显著水平,花瓣诱导愈伤组织的最适培养基为MS+6-BA 1.0 mg/L+NAA 1.5 mg/L+2,4-D 1.0 mg/L,2,4-D对叶片诱导愈伤组织的影响达显著水平,叶片诱导愈伤组织的最适培养基为MS+6-BA 2.0 mg/L+NAA 1.0 mg/L+2,4-D 1.0 mg/L,2,4-D、6-B对茎段诱导愈伤组织的影响达到极显著水平;MS+6-BA 3.0 mg/L+KT 3.0 mg/L+NAA 1.0 mg/L+2,4-D 1.0 mg/L最适合茎段诱导愈伤组织。     

白首乌愈伤组织的诱导与增殖

以白首乌的叶片、茎段、种子为外植体,进行愈伤组织诱导与增殖研究。结果表明:白首乌叶片、茎段、种子均能诱导出愈伤组织;茎段是诱导愈伤组织的最佳外植体,诱导率可达100%,最适培养基为:MS+2,4-D2.0 mg/L+6-BA1.0 mg/L+NAA1.0 mg/L;愈伤组织在蔗糖浓度为30 g/L、pH5.8～5.9、光照12 h/d的培养条件下,增殖最快,并且褐化时间最慢。     

防风愈伤组织培养研究

以防风为试材,研究不同外植体、激素组合对愈伤组织诱导及不定芽分化的影响。结果表明:茎段是防风组织培养较为合适的外植体。茎段在添加2,4-D 2.0 mg/L+6-BA 1.0mg/L的MS培养基上愈伤组织诱导率最高可达100%,叶片在添加2,4-D 1.0 mg/L+6-BA 1.0mg/L的MS培养基上愈伤组织诱导率可达75%;继代后的愈伤组织转到6-BA 1.0 mg/L+NAA0.5 mg/L的MS分化培养基上进行分化,其分化率达72%。     

太行菊组织培养技术研究

以太行菊叶片、叶柄、茎尖和茎段为试材,采用MS培养基,在其中添加不同的激素对太行菊的不同外植体进行培养,研究了濒临灭绝的太行菊再生植株的方法。结果表明:太行菊的叶片、叶柄作为外植体诱导出愈伤组织的诱导率分别为44.44%和44.11%,所需时间较长,而茎尖、茎段作为外植体诱导愈伤组织诱导率分别为48.44%和68.75%,培养时间较短。茎段最适合作为诱导愈伤组织的繁殖材料。为了使茎段能更好的诱导出愈伤组织,课题组又对诱导茎段愈伤组织的激素浓度组合进行了研究,A组:MS+6-BA 1.0 mg·L^-1+NAA 0.5 mg·L^-1+2,4-D 0.1 mg·L^-1,B组:MS+6-BA 1.0 mg·L^-1+NAA 1.0 mg·L^-1+2,4-D 0.1 mg·L^-1,C组:MS+6-BA 2.0 mg·L^-1+NAA 0.5 mg·L^-1+2,4-D 0.1 mg·L^-1,D组:MS+6-BA 2.0 mg·L^-1+NAA 1.0 mg·L^-1+2,4-D 0.1 mg·L^-1。试验表明,C组激素浓度组合最适合太行菊茎段的愈伤组织诱导。35 d后愈伤组织不再增加后进行继代培养,45 d后将植株转移至生根培养基1/2MS+NAA 0.12 mg·L^-1中进行生根培养。     

绿花重瓣铁线莲愈伤组织诱导研究

以绿花重瓣铁线莲茎段为外植体,MS为基本培养基,研究了2,4-D与6-BA对绿花重瓣铁线莲愈伤组织诱导效应的影响。结果表明:2种生长调节剂单独使用时,均能诱导出愈伤组织,且2种愈伤组织诱导的部位及形态有明显的不同,2,4-D诱导的部位为茎段中部,愈伤组织白色膨松,6-BA诱导的部位为茎段顶端,愈伤组织浅绿色疏松;2,4-D与6-BA配合使用时,相互存在拮抗作用,不利于愈伤组织的诱导。     

不同生长调节剂对白刺花叶片愈伤组织诱导质量分析

以白刺花无菌苗叶片为试材,利用双因素正交实验设计,研究了不同生长调节剂对愈伤组织诱导效果的影响,以期筛选最佳的诱导培养基,为白刺花组培研究提供参考基础。结果表明:在MS培养基上,2,4-D与6-BA组合可诱导出较疏松型的愈伤组织,愈伤组织表面有瘤状突起且部分愈伤上有绿色芽点;2,4-D与KT组合也可诱导形成愈伤组织,但愈伤组织的生长及疏松度不及2,4-D与6-BA组合效果明显;NAA与6-BA,NAA与KT组合早期培养时在叶片边缘看到部分愈伤的生长,培养45d后愈伤开始褐化;在基本培养基研究筛选上,MB和B_5均能诱导愈伤组织,愈伤组织颜色稍显淡绿。2,4-D有利于白刺花愈伤组织的诱导,最佳愈伤组织诱导培养基为MS+2,4-D 1.0mg·L~(-1)+6-BA 1.0mg·L~(-1)+蔗糖4%+琼脂0.7%,出愈率75.58%,愈伤组织出愈早,疏松,生长旺盛。     

草地早熟禾高频再生体系建立

研究了草地早熟禾愈伤组织的诱导和分化的最适培养基,建立了早熟禾高频率的再生体系.结果表明:品种优异的胚性愈伤诱导率最高,其中含2.0 mg/L 2,4-D和0.2 mg/L6-BA的培养基处理胚性愈伤组织的诱导频率最大,可以达到65.26%.早熟禾品种肯塔基、午夜、优异与新哥莱德最适分化激素浓度与配比分别为6-BA 1.0 KT 0.2、6-BA 2.0 2,4-D 0.1、6-BA1.0 2,4-D 0.2、KT 2.0,愈伤组织分化率分别达到27.93%、52.38%、66.67%和60%.早熟禾再生芽在1/2 MS 0.2 NAA培养基上生根率可达到100%.     

桤叶唐棣愈伤组织的诱导分化及影响因素

以经过3次继代培养的桤叶唐棣茎尖组培苗的茎段和叶片为外植体,研究了不同培养基类型、不同浓度2,4-D、不同浓度NAA和6-BA配比对愈伤组织诱导的影响。结果表明,MS、H、White、N6、1/4 MS 5种基本培养基均能诱导桤叶唐棣茎段和叶片产生愈伤组织,以MS、H培养基诱导的愈伤组织生长快、光泽好;添加适量的2,4-D能够缩短愈伤组织出愈时间,浓度应低于0.5mg/L;向H基本培养基中添加NAA是必要的,其浓度应在1.0 mg/L以上,同时6-BA和NAA浓度比值不宜过高。     

结缕草愈伤组织诱导及植株再生

 以日本结缕草种子为外植体，2份材料在附加2,4-D 2.0 mg/L水平的Ms培养基上愈伤组织诱导率较高；在含不同水平2,4-D的培养基中添加6-BA对非胚性愈伤组织转变成胚性愈伤组织起重要作用，其中2,4-D 2.0 mg/L配合6-BA 0.1mg/L的Ms培养基诱导出的胚性愈伤组织比例较高；胚性愈伤组织在2,4-D为0.1mg/L的分化培养基上分化率和生根率最高，为46.8％~ 48.1％。     

“东方蜜一号”甜瓜组织培养与快速繁殖研究

选取"东方蜜一号"甜瓜的新生叶片为外植体,接种于含有不同激素配比的MS培养基中,诱导愈伤组织、不定芽与不定根的形成,比较不同激素浓度对外植体脱分化和再分化的影响。结果表明:"东方蜜一号"甜瓜叶片离体培养的最佳愈伤组织诱导培养基为MS+2,4-D0.10mg/L+6-BA 1.50mg/L,诱导率达91%,最佳不定芽诱导培养基为MS+2,4-D 0.01mg/L+6-BA 1.50mg/L,平均不定芽个数为3.52个;最适生根诱导培养基为MS+2,4-D 0.05mg/L+NAA 0.20mg/L+IBA 0.60mg/L,生根率达85%。     

镜面草叶片和叶柄愈伤组织诱导

以镜面草( Diels)叶部器官为研究对象,分别以叶片、叶柄作为外植体,研究不同激素种类及其浓度配比对镜面草愈伤组织诱导过程的影响.结果表明,镜面草的叶片和叶柄均可在2,4-D、NAA、6-BA的诱导下产生愈伤组织,但激素单独使用和不同种类不同浓度组合对镜面草愈伤组织的诱导效果不同:2,4-D单独使用且浓度为0.5 mg/L时,愈伤组织诱导率达到95%以上,NAA 1.0 mg/L虽也有相当的效果,但NAA浓度达到0.5 mg/L时,叶片和叶柄均会产生不定根;试验设计细胞分裂素6-BA分别与2,4-D和NAA不同浓度组合处理叶片、叶柄,诱导愈伤组织产生的最佳激素组合为2,4-D 0.5 mg/L+6-BA 1.0 mg/L.     

红掌组织培养技术研究

对影响红掌愈伤组织诱导及芽分化的几个因素进行了研究.结果表明:同一成熟度的外植体,其叶柄愈伤组织诱导率明显优于叶片和花柄.诱导愈伤组织形成的培养基为MS+2 mg/L 6-BA+0.1 mg/L 2,4-D;芽分化和增殖培养基为MS+1 mg/L 6-BA+0.1 mg/L NAA;生根与增殖同步.     

扶芳藤组织离体培养的研究

以扶芳藤带芽茎段为外植体,基本培养基为MS,附加不同浓度的6-BA、2,4-D、IBA和NAA.最佳愈伤组织诱导培养基为:MS 6-BA 1.0 mg/L 2,4-D 0.05 mg/L;最佳芽诱导培养基为:MS 6-BA 1.4 mg/L;再生苗增殖的培养基为:MS 6-BA 1.0 mg/L NAA 0.1mg/L.生根采用试管外盆插生根的方法.     

不同激素配比对白及愈伤组织诱导、增殖和分化的影响

以白及为试材,以MS和1/2MS为基本培养基,研究了愈伤组织诱导、增殖和分化培养基中的最佳激素种类和浓度配比。结果表明:在MS中添加6-BA 1 mg·L~(-1)和2,4-D3mg·L~(-1)时白及愈伤的诱导率最高,达89.89%。2,4-D是诱导白及愈伤生成的关键激素,而在基本培养基中单添加6-BA时并不能诱导愈伤组织的生成,同时添加2,4-D和6-BA能有效促进愈伤的诱导,且愈伤诱导率随着2,4-D浓度的增加而逐渐增加,但优质愈伤率也随之降低。添加6-BA 0.1mg·L~(-1)和2,4-D 2mg·L~(-1)的增殖培养基中愈伤细胞的增殖率最高,30d的增殖倍数达7.457。在分化培养基中添加NAA和TDZ有利于白及愈伤组织分化,分化率随着二者浓度的增加而增加,且NAA的促分化效果优于TDZ。MS+2,4-D 2mg·L~(-1)+NAA 1mg·L~(-1)为最佳分化培养基,分化30d时其分化率为86.67%。     

藿香植物组织培养技术研究

选用藿香健壮枝条和叶片作为试验材料,进行组培技术的研究.结果表明:藿香取材季节以夏季较好,适宜的外植体种类为茎段.诱导愈伤组织形成的激素组合为6-BA 1.0mg/L NAA 0.3 mg/L 2,4-D 0.3 mg/L,具有愈伤组织生长速度快并易于分化;不定芽分化激素组合为6-BA 0.5 mg/L NAA 0.1 mg/L,继代培养组合6-BA 0.1 mg/L NAA 0.5 mg/L B90.3mg/L,增殖在8倍以上;生根培养组合1/2MS NAA0.6 mg/L,一般20 d左右生根,平均根量4～5条,生根率达92%.     

南果梨不同外植体诱导黄色愈伤组织的影响因素

研究了南果梨不同外植体诱导黄色愈伤组织的最佳培养基.结果表明:以子房为外植体诱导愈伤组织的最佳培养基为MS 0.5 mg/L 6-BA 0.5 mg/L IAA 1.0 mg/L 2,4-D;以茎段为外植体诱导愈伤组织的最佳培养基为MS 2.5 mg/L 6-BA 0.5 mg/L IAA 2.0 mg/L 2,4-D;以叶片为外植体诱导愈伤组织的最佳培养基为MS 1.5 mg/L 6-BA 0.5 mg/L IAA 1.0 mg/L 2,4-D.     

龙芽楤木体细胞胚状体发生及成苗的调控研究

利用龙芽楤木叶片、叶柄、嫩茎及根为试材,研究了2,4-D、6-BA、NAA、糖种类对胚性愈伤组织及胚状体的诱导、芽分化和成苗的影响。以2,4-D1.0 mg/L,确定诱导胚性愈伤组织及胚状体的最适外植体为嫩茎,诱导的胚性愈伤组织及胚状体质量、数量均高于叶片、叶柄和根;经直观分析、方差分析和多重比较,结合对比试验,结果表明:6-BA是龙芽楤木芽分化及成苗的主要因素。以蔗糖30 g/L作碳源,芽分化最适培养基为MS+6-BA1.0 mg/L+NAA0.02 mg/L;成苗最适培养基为MS+6-BA1.0 mg/L+NAA0.04 mg/L,芽分化率和成苗率达88.02%和79.62%。     

广东道地中药何首乌的组织培养

以广东德庆何首乌为试材,研究叶片的愈伤组织诱导分化及茎尖的增殖快繁技术。结果表明:以MS为基本培养基,2,4-D是诱导愈伤组织的必需激素,1～2 mg/L有利于叶片愈伤组织诱导;分化培养基BA1～2 mg/L+NAA0.5～1 mg/L浓度组合分化能力低,未分化成芽;培养基BA2 mg/L+NAA0.5 mg/L对茎尖不定芽的诱导效果较好;生根培养基1/2 MS,生根率100%。     

桂花花梗与叶片的愈伤组织诱导研究

以桂花幼嫩花梗和叶片为外植体,通过植物组织培养技术,研究了桂花无菌体系的建立,不同品种群的桂花花梗在不同培养基配方下的出愈情况和植物生长调节剂、蔗糖浓度及暗处理时间等因素对不同桂花品种群的叶片愈伤组织诱导培养的影响。结果表明:桂花花梗最佳消毒方式为5%NaClO消毒3min,叶片最佳消毒方式为0.1%HgCl2消毒5min。花梗愈伤组织的诱导培养结果表明,"波叶金桂"的最佳配方为MS+2.00mg/L 6-BA+0.40mg/L 2,4-D;"紫梗籽银桂"为B5+2.00mg/L 6-BA+0.40mg/L 2,4-D;"雨城丹桂"为B5+1.00 mg/L 6-BA+0.10mg/L 2,4-D;"日香桂"为B5+2.00mg/L 6-BA+0.10mg/L 2,4-D。叶片愈伤组织的诱导培养结果表明,最佳蔗糖浓度为25g/L,最适宜的暗培养天数为22d;最利于"雨城丹桂"叶片愈伤组织诱导培养基的配方为MS+3.00mg/L 6-BA+1.00mg/L 2,4-D,当6-BA浓度为2.00mg/L为"天香台阁"的最佳诱导配方。     

不同外植体和生长调节剂对猕猴桃愈伤组织形成与再分化的影响

本试验以金魁猕猴桃试管苗为试材，外植体选用茎段，叶柄和叶片，分别置于培养基MA（MS＋ZTlmg/L),MB(MS 2,4-D2mg/L）和MC（MS＋6－BA3mg/L)诱导愈伤组织，后转入分化培养基MD（MS＋蔗糖800mg/L 玉米素1mg/L)和（MS 蔗糖800mg/L 6-BA2mg/L NAA0.1mg/L)进行植株再生诱导。试验结果表明：外植体以茎段的出愈率和分化率最高，分别为90．2％和94．4％；叶柄次之，叶片最低；生长调节剂以加有ZT的培养基出愈率最高，2，4－D次之，6－BA最低，愈伤组织的再分化率以培养基中加入ZT中加入6－BA＋NAA效果好。