高温对甘蓝型油菜隐性上位互作核不育稳定性的影响

为深入了解生产中出现的微粉现象,研究了人工高温和分期播种情况下甘蓝型油菜隐性上位互作核不育纯合型不育系9012A和杂合型不育系12-204A的不育稳定性。结果表明,两种类型不育系在一定高温胁迫下,均出现育性转换现象,但对高温的敏感性有明显差异。对于9012A系,育性转换临界温度介于30~35℃之间;40℃持续处理16~32h,或者间歇处理3h/d×6d、6h/d×5d、9h/d×4d、12h/d×3d、15h/d×2-4d(累计40℃处理18~60h),或35℃间歇处理15h/d×2-4d(即35℃累计30~60h)均发生育性转换,其中35℃时15h/d×3d(即35℃累计45h)处理育性转换最为明显,说明高温对9012A育性转换具有累加效应。自然条件下6个播期(从2014年10月16日到2015年2月9日,即秋冬播种,避开30℃以上持续高温)的不育性彻底稳定。对于12-204A系,育性转换临界温度为29℃,不低于29℃时育性发生转换,其中35℃15h连续处理育性转换效果最为明显;自然条件下6个播期均发生育性转换。当高温胁迫下育性发生转换时,9012A和12-204A均可自交结实,但是结实性差。     

豆浆脂肪氧合酶测定方法的优化及酶动力学的研究

本文以前人所确定的大豆中LOX酶活力测定方法为基础,对生豆浆中LOX活力测定方法进行稳定性方面的优化,研究热处理过程、不同浓度豆浆对LOX活力的影响,并确定LOX的最大反应速率、米氏速率常数和不同金属离子抑制剂及激活剂等酶反应动力学参数,研究结果表明:待测样品稀释300倍时,LOX活力值的变化趋势较为明显,且结果稳定;对10个不同地域大豆进行制浆,在300倍稀释倍数下测定不同加热温度的豆浆发现,LOX活力在40℃时最高,当加热至80℃时完全失活,故选择对LOX测定方法进行样品稀释300倍,加热至40℃的优化处理。优化后的方法较其它已报到方法相比,能够快速、准确地测出不同豆种所制豆浆中LOX活力值,且试验结果重复性好,稳定性高。通过对LOX酶促反应动力学的研究,确定了LOX酶促反应最大反应速率V_(max)=1. 99ΔA·min~(-1),R~2=0. 942 8,米氏速率常数K_m=452. 49μmol·L~(-1);金属离子中,钙离子、镁离子对LOX起抑制作用,当锌离子在浓度为0. 002 mol·L~(-1)时,对LOX起抑制作用,而当锌离子浓度大于0. 004 mol·L~(-1)时,则对LOX起激活作用。     

测定生姜蛋白酶活性的新方法

通过对生姜蛋白酶进行分离纯化,并将其加热使酶失活作为参照,用考马斯亮蓝染色法测定蛋白酶活力。研究了pH值、温度、EDTA和金属离子(Na+,Mg2+,Cu2+,Ca2+)等因素对生姜蛋白酶活性的影响。结果表明,以失活的生姜蛋白酶为参照,可以简洁的测定出生姜蛋白酶的活性,与已往测定生姜蛋白酶活性相比较,具有方法简单,消除腐蚀危害,可望简洁而环保的测定出生姜蛋白酶的活性。     

大豆萌发过程中谷氨酸脱羧酶活性变化研究

研究了大豆在浸泡、萌发两个过程中谷氨酸脱羧酶(GAD)的活力变化。通过测定大豆中γ-氨基丁酸(GABA)的含量变化,间接测定大豆中GAD的活性。结果表明,大豆在25℃,浸泡10h,大豆中的GAD活性达到浸泡中最高水平,酶活性为2.45U。浸泡后的大豆在30℃,萌发40h时,酶活性达到萌发中最高水平,为1.28U。大豆在浸泡和萌发两个状态下,GAD活性较储藏期都有很大提高,且浸泡时酶活总体水平高于萌发期酶活总体水平,其中大豆GAD在25℃,浸泡10h时活性最高,为2.45U。     

果胶裂解酶PelC基因在原核和真核细胞中的表达

对原核E.coliBL21(DE3)-pET28a-PelC和真核GS115-pPIC9K-PelC工程菌的表达效果进行初步研究。结果表明:原核E.coliBL21(DE3)-pET28a-PelC工程菌表达果胶裂解酶,分子量约44ku;诱导表达19h后,果胶裂解酶活性在温度50℃、pH值5.4时,达到峰值,胞内表达酶活为24.01U/mL。真核GS115-pPIC9K-PelC工程菌分泌表达果胶裂解酶,分子量为43ku;诱导表达60h后,果胶裂解酶活性在温度50℃、最适pH值5.4时达到峰值,活力最高为14.2U/mL。两种表达系统的酶活比较,为以酶法脱胶方式改进传统酸碱脱胶工艺,推动绿色菠萝叶麻纺织产业打下基础。     

向日葵锈菌胞外金属蛋白酶的特性分析

为进一步了解锈菌侵染向日葵的致病机制,对向日葵锈菌(Puccinia helianthi)分泌的一种新型的金属蛋白酶(metalloproteinase,Mep)水解活性和生物学特性进行了表征。使用偶氮酪蛋白法测定蛋白酶的活性,在波长280 nm下测吸光度。结果表明,该蛋白酶对偶氮酪蛋白具有水解活性,纯酶最适温度和pH分别是50℃和7.0,在pH 5.0～9.0和温度50℃以下保持稳定。蛋白酶受到抑制剂乙二胺四乙酸二钠(EDTA)、乙二醇双(2-氨基乙基醚)四乙酸(EGTA)、1,10-菲咯啉的显著抑制;Ca²⁺、Zn²⁺、Mg²⁺可以显著提高该蛋白酶的活性,表明该酶为金属蛋白酶。另外,利用qRT-PCR试验测定了基因Mep在锈菌侵染向日葵的过程中的表达情况,结果显示,在接菌48 h时,基因表达量达到高峰,后逐渐降低,表明该蛋白酶参与了锈菌对向日葵的早期侵染过程。     

不同青贮方式对菠萝茎叶饲用品质的影响

分析添加尿素和废糖蜜对青贮菠萝茎叶营养成分的影响,并测定青贮后菠萝茎叶养分的瘤胃降解率。为提高菠萝茎叶的饲料化利用提供理论依据。试验以直接青贮菠萝茎叶为对照组,分别添加10 g/kg尿素、20 g/kg废糖蜜、10 g/kg尿素+20 g/kg废糖蜜为试验组,青贮45 d后进行营养成分、养分的瘤胃降解分析。结果表明:与对照组相比,添加10 g/kg尿素青贮菠萝茎叶可以显著降低单宁含量,提高粗蛋白(CP)、氨态氮(NH3-N)含量(p0.05);添加20 g/kg废糖蜜,CP、单宁含量显著提高(p0.05);添加10 g/kg尿素+20 g/kg废糖蜜,CP、NH3含量提高,乙酸含量降低,差异显著(p0.05);3个试验组中,DM、CP、中性洗涤纤维(NDF)在瘤胃内经72 h后的降解率均显著高于对照组(p0.05)。本试验中,添加10 g/kg尿素+20 g/kg废糖蜜可以显著提高青贮菠萝茎叶的品质,并提高青贮菠萝茎叶养分的瘤胃降解率。     

福建主要乌龙茶品种PPO酶活特性的研究

对四种乌龙茶茶树鲜叶的多酚氧化酶(PPO)进行粗提,测定并比较不同品种酶的特性。结果表明:在邻苯二酚与被测酶液的反应体系中,当底物邻苯二酚(C6H6O2)量为0.3~0.9ml时,毛蟹、铁观音、黄旦、肉桂酶活力随底物浓度的增加呈曲线增长,含量太高会产生抑制作用,当底物含量∶酶含量=1.5∶1时,酶活力表现最高;毛蟹、铁观音、黄旦、肉桂酶活力在45~65℃范围内均呈ω型变化趋势,依次在45℃、55℃、65℃时出现高峰。在50~90℃下水浴处理1h,毛蟹、铁观音、黄旦、肉桂酶活力分别丧失34.66%~55.91%,22.68%~50.89%,23.14%~53.57%,31.58%~57.89%;酶活力的适宜pH相对偏碱,在pH8.6时表现为一个活力高峰。相同浓度的五种抑制剂对酶均有一定的抑制效果,其中NaHSO3对酶活力的抑制作用最强,L-半胱氨酸其次,NaCl的抑制效果最差。     

大豆脂氧酶的热失活动力学与其二级结构的圆二色谱表现

应用大豆脂氧酶的变温圆二色谱图研究了大豆脂氧酶(LOX)的热失活与二级结构变化过程.结果表明:在50一65℃条件下,10 min内,LOX的酶活随热处理时间延长而下降,其热失活过程遵循一级动力学,活化能Ea值为217 kJ.mol-1.在相同的热处理条件下,LOX中二级结构a-螺旋和β-折叠的相对含量均在20%左右浮动...     

大花蕙兰苗期叶面积的估算方法

采用叶长叶宽常数的方法估算大花蕙兰苗期叶面积,其中常数K由最小极差平方和法求得。结果表明:叶片长分成10-20,20-30,30-40cm3个等级,其常数分别为0.840,0.783,0.797。若不分等级,其共同常数为0.797。通过K值方差同质性测验,对叶估算面积与实际面积之间的相关分析和协方差分析进行检验。统计分析结果证明:X(估算面积)=0.797×L(叶长)×W(叶宽)公式适用于叶长40cm以下苗期的叶面积估算,建立此方法测定叶片生长速率具有不破坏性,且迅速、准确等优点,可在大花蕙兰生产上应用。     

Optimization of enzymatic treatment of polyamide fabrics by bromelain

In this study, we investigated the effects of enzymatic hydrolysis on polyamide fabrics by using bromelain as an enzyme. The hydrolytic activity of bromelain was evaluated on the basis of the number of carboxylic groups formed on the surface of the polyamide fabrics, and it was measured using the reactive dye absorbance. In addition, 2,4,6-trinitrobenzenesulfonic acid was added as an indicator to measure the number of amino groups released into the treatment liquid by the changes in color of the liquid. The optimum treatment conditions were bromelain pH of 6.0, treatment time of 120 min, temperature of 50 °C, concentration of 10 % (owf), and L-cysteine concentration of 70 mM. The weight loss in the fabric after treatment with bromelain facilitated by L-cysteine significantly improved; however, the tensile strengths of the polyamide fabrics did not show any differences. Bromelain hydrolysis of the polyamide fabrics thus improved hydrophilicity without damaging the fabrics’ strength.     

3种保鲜剂对月季萨蔓莎的保鲜生理效应

以月季萨蔓莎(Rosehybridacv.Samantha)为材料,用3种保鲜剂,即:蔗糖、8-羟基喹啉、柠檬酸质量分数分别为2.0%、6×10-4、1×10-4的水溶液,Ca(NO3)2、8-羟基喹啉、柠檬酸质量分数分别为0.05%、2×10-4、1×10-4的水溶液及KNO3、8-羟基喹啉、柠檬酸质量分数分别为0.05%、4×10-4、1.2×10-4的水溶液分别对萨蔓莎切花花枝进行保鲜处理,旨在研究不同保鲜剂对月季萨蔓莎的作用效果及生理效应。结果表明:3种保鲜剂均可提高月季切花花枝的含水量,增加花枝鲜重,使体内细胞相对膜透性减小,可溶性蛋白含量增加,丙二醛含量减少,超氧阴离子自由基生成速率变小、含量降低,保护酶活性增强,从而延缓了切花的衰老,延长了月季切花的寿命,提高了切花的观赏品质;其中,以含蔗糖的保鲜效果最好。      

Modulation of Lipopolysaccharide Stimulated Nuclear Factor kappa B Mediated iNOS/NO Production by Bromelain in Rat Primary Microglial Cells

Background:

Microglial cells act as the sentinel of the central nervous system .They are involved in neuroprotection but are highly implicated in neurodegeneration of the aging brain. When over-activated, microglia release pro-inflammatory factors, such as nitric oxide (NO) and cytokines, which are critical in eliciting neuroinflammatory responses associated with neurodegenerative diseases. This study examined whether bromelain, the pineapple-derived extract, may exert an anti-inflammatory effect in primary microglia and may be neuroprotective by regulating microglial activation.

Methods:

Following the isolation of neonatal rat primary microglial cells, the activation profile of microglia was investigated by studying the effects of bromelain (5, 10, 20, and 30 µg/ml) on the levels of NO, inducible nitric oxide synthase (iNOS), and nuclear factor kappa B (NF-κB) in microglia treated with lipopolysaccharide (LPS) (1 µg/ml). Data were analyzed using Student''s t-test. P values less than 0.05 were considered to be statistically significant, compared with the LPS-treated group without bromelain.

Results:

Results showed that pretreatment of rat primary microglia with bromelain, decreased the production of NO induced by LPS (1 µg/ml) treatment in a dose-dependent manner. Bromelain (30 µg/ml) also significantly reduced the expression of iNOS at mRNA level and NF-κB at protein level. Moreover, the study of mitochondrial activity in microglia indicated that bromelain had no cytotoxicity at any of the applied doses, suggesting that the anti-inflammatory effects of bromelain are not due to cell death.

Conclusion:

Bromelain can be of potential use as an agent for alleviation of symptoms in neurodegenerative diseases.     

苯醚甲环唑和噻呋酰胺在香蕉上的残留消解及膳食风险评估

为分析苯醚甲环唑和噻呋酰胺在香蕉上的残留消解行为和膳食摄入风险,于2016年在云南进行了规范残留试验,研究了全蕉、蕉肉和土壤中的消解过程并进行了长期膳食暴露风险评估。结果表明：苯醚甲环唑标准曲线线性方程为y=1.45×10 ⁷x+4.14×10 ⁴,R ²=0.9962;噻呋酰胺标准曲线线性方程为y=2.99×10 ⁶x+1.43×10 ⁴,R ²=0.9954。在0.04~ 1 mg/kg添加水平下,苯醚甲环唑的平均回收率为75%~110%,相对标准偏差（RSD）为0.9%~6.2%;噻呋酰胺的平均回收率为76%~114%,RSD为3.0%~9.5%。苯醚甲环唑与噻呋酰胺在土壤、全蕉、蕉肉中的最低检测浓度（LOQ）均为0.04 mg/kg,最小检出量（LOD）均为5 pg。苯醚甲环唑和噻呋酰胺的消解基本符合一级动力学方程,苯醚甲环唑在全蕉和土壤中的半衰期分别为16、20 d,噻呋酰胺在全蕉和土壤中的半衰期分别为20、27 d。风险评估研究表明,香蕉中残留苯醚甲环唑长期膳食摄入风险可以接受,而噻呋酰胺长期膳食摄入则具有一定的风险。     

大豆幼苗根和叶片原生质的分离与纯化

研究了大豆幼苗根和叶片原生质体的分离、纯化方法及其影响因素.结果表明:适宜大豆根和叶片原生质体分离的酶种类、浓度分别为CPW-13M{CPW(细胞清洗液)+13%(W/V)甘露醇}+3%纤维素酶(cellulose R10)+1.1%果胶酶(macerozyme R-10)+1.0%半纤维素酶(hemicellulase)和0.15%CaCl2·2H2O+9%甘露醇+1%cellulase R-10+0.20%pectolase Y-23,pH 5.8,酶解温度为28℃.在根酶解时间为16 h时,原生质体产量可高达1.46×105个·g-1FW,活力达57.8%;叶片酶解时间为4 h时,原生质体产量可高达1.74×106个·g-1FW,活力达70.3%.对于根而言,从产量和活力两方面考虑,其原生质体用23%蔗糖和CPW-18M混合后的下沉法纯化效果较好,而叶片用25%蔗糖的上浮法纯化效果较好.     

芸薹属远缘杂交试管苗快繁培养基的优化

为了优化芸薹属远缘杂交试管苗的快繁培养基,探讨基因型、培养时间等因素对试管苗分化率的影响,实验对甘蓝型油菜与甘蓝以及白菜型油菜与甘蓝两种远缘杂交方式的试管苗,在10种添加了不同浓度的6-BA和NAA的培养基上进行快繁培养。采用SAS软件对培养后第20d和第30d的分化率进行分析处理,结果如下：（1）白菜型油菜与甘蓝5个杂交组合间,以及白菜型油菜与甘蓝、甘蓝型油菜与甘蓝两种杂交类型间的试管苗分化率无显著差异;除甘蓝型油菜与甘蓝杂交的试管苗在培养第30d时的分化率无显著差异外,其它情况下培养基间的诱导分化率差异均达到显著或极显著水平;（2）添加3.0 mg&;#8226;L-1 6-BA（6-苄基嘌呤）和0.2 mg&;#8226;L-1 NAA（萘乙酸）的MS培养基对试管苗的诱导分化效率显著或极显著高于其它快繁培养基;（3）不同培养基培养的试管苗在培养20d和30d时的分化率呈高度正相关,但前20d的日平均分化率显著高于20~30d的日平均分化率。     

不同激素处理对刺玫果春季扦插的影响

刺玫果具有很大的经济价值和产业化前景,在退耕还林工程中刺玫果是土地瘠薄沙化严重地区的首选经济林树种。笔者用不同药剂(2×10-5g/mL,2×10-4g/mL,2×10-3g/mL的IBA和1×10-3g/mL,1×10-4g/mL的ABT2)对不同地区的刺玫果插穗进行春季扦插试验,结果表明用浓度为2×10-5g/mL的IBA浸泡16小时的处理方法最佳,生根率比对照高16.7﹪以上。     

离子注入对花生的生物学效应

取山东烟台选育的鲁花10号花生（Arachishypogaea L．）种子,用离子注入机分别注入0（即对照组）、1×10^12 Cu、1×10^11 Cu、4×10^11 P、9×10^11 P。结果发现,注入9×10^11 P的花生,其植株的叶片数目、开花数目等均优于其他组;注入1×10^12 Cu的花生,单株结实数、百粒湿重、单株产量等最优;聚丙烯酰胺凝胶电泳对幼苗叶片进行的酯酶同工酶分析表明,注入1×10^11 Cu、9×10^11 P、4×10^11P的花生幼苗的酯酶活性增大。综合分析的结果显示,以9×10^11P和1×10^11Cu组所诱导产生的优良生物学性状较多,可以进一步对其进行选育。     

实时荧光定量PCR检测转基因玉米MON863的测量不确定度分析

应用四川省农业科学院分析测试中心实验室建立的转基因玉米MON863品系特异实时定量PCR方法,测定含量为1%的转基因玉米MON863样品(CRM)中旁侧片段(品系特异片段)的含量,并从扩增反应、数据处理以及微量移液器等不确定度来源评定测量的不确定度。结果表明,uA=1.9×10-2,uB=9.3×10-4,uC=1.9×10-2,U95=0.04,测量结果为1.108%±0.04。MON863品系特异实时定量PCR方法检测结果的主要不确定度来自检验过程中的随机效应。     

Determination of Mass Transfer Parameters During Deep Fat Frying of Rice Crackers

The accuracy of the knowledge of mass transfer parameters(effective moisture diffusivity,mass transfer Biot number and mass transfer coefficient) in the case of frying food,is essential and important for designing,modeling and process optimization.This study is undertaken to develop an approach for determining mass transfer parameters during frying of spherical rice cracker in sunflower oil at 150,170 and 190 ℃.These parameters were evaluated from the plots of dimensionless concentration ratios against time of frying.Effective moisture diffusivity,mass transfer Biot number and mass transfer coefficient ranged between 1.24×10-8 to 2.36×10-8 m2/s,1.96 to 2.34 and 5.51×10-6 to 9.70×10-6 m/s,respectively.Effective moisture diffusivity and mass transfer coefficient were found to increase with an increasing frying temperature,whereas mass transfer Biot number decreased.An Arrhenius-type relationship was found between effective diffusivity coefficient and frying temperature.