应用间接血凝试验检测血吸虫抗体

本试验以日本血吸虫水溶性虫卵抗原致敏醛化红血球,建成了检测日本血吸虫抗体的间接血凝试验。应用该法观察血吸虫抗体的消长规律,结果表明:抗体最早于人工感染血吸虫尾蚴后25天出现;吡喹酮治疗后5个月转阴。     

三种免疫血清学方法检测弓形虫抗体的比较

用斑点酶联免疫吸附试验、金萄菌A蛋白酶联免疫吸附试验及间接血球凝集试验二种血清学方法检测弓形虫感染鼠血清及健康鼠血清各100份,平均阳性率分别为96.0％、94.0％和88.0％,平均假阳性率分别为4.0％、7.0％及8.0％;检测10份阿米巴肝脓肿病人血清及20份日本血吸虫感染兔血清,平均交叉反应率分别为3.3％、10.0％及13.3％。结果表明,三法对弓形虫特异性抗体的检测均有较好的敏感性、特异性、重现性及较低的交叉反应率。三法中,以斑点酶联免疫吸附试验的敏感性最好,且有省试剂、反应快、操作简便等优点,是一种很有实用价值前景的免疫诊断方法。     

应用间接血凝试验检测牛肺疫抗体

自制1.5％绵羊红细胞诊断液并用于检测牛肺疫抗体,结果如下:(一)三批标准阳性血清(批号为8601、8301、8001)凝集价均在160倍以上,标准阴性血清(批号为8601)凝集度仅为10倍。15份被检血清IHA的阳性检出率(8/15)高于补体结合反应(CF,6/15)且凝集价均在40倍以上。(二)用牛肝片吸虫病、布氏杆菌病和附红细胞体病阳性血清作类症鉴别诊断,凝集度仅为10倍。(三)把牛肺疫CF8502抗原作倍比稀释,加2个凝集单位牛肺疫阳性血清8601和8301进行间接血凝抑制试验,分别被32倍和16倍稀释的抗原所抑制,本项试验结果表明IHA用于检测牛肺疫,具有检出率高、特异性强、设备要求简单、容易操作等特点,适于在现地推广应用。     

荧光抗体对水貂链球菌病诊断的研究

为了把荧光抗体诊断法应用于水貂链球菌病的诊断,用兔抗水貂链球菌荧光抗体检测了20例人工感染,10例自然感染和10例健康水貂的实质脏器。人工感染水貂脾脏检出率为100％(20/20),肝脏和心脏各为55％(11/20),自然感染水貂脾脏、肝脏和心脏检出率均为100％(10/10),其他脏器不易检出病原体。对照组建康水貂各实质脏器均呈阴性反应。试验结果表明:水貂的脾脏、肝脏和心脏可作为直接免疫荧光抗体检测的首选器官。应用此法检测病料可在2小时内报告病原学诊断结果。     

应用酶联免疫吸附试验检测牛肺疫血清抗体的研究

本文用普通ELISA和BA--ELISA检测牛肺疫血清抗体并与间接血凝试验和补体结合试验作比较,结果表明阳性检出率BA--ELISA(86.7%,13/15)>普通ELISA(80%,12/15)>间接血凝(53.3%,8/15)>补反试验(40%,6/15)。8种类症鉴别血清中6种呈现ELISA阴性。故认为ELISA是一种特异、敏感、快速、简便的血清学检测牛肺疫的方法,适于在现地检验时应用。     

牛日本血吸虫病5种血清学诊断技术比较

为找寻特异性强、敏感性高,且操作简便、费用低廉,并能大规模应用于临床的日本血吸虫病血清学诊断方法,以疫区黄牛为研究对象,应用环卵沉淀试验(COPT)、血清法间接血凝试验(sIHA)和血纸法间接血凝试验(bpIHA)、胶乳凝集试验(PAPS)、三联斑点酶联免疫吸附试验(三联Dot-ELISA)5种血清学诊断方法与粪检方法检测牛日本血吸虫病,并对5种血清学检测结果进行评价.检测分析结果表明,用血清学方法COPT,sIHA,三联Dot-ELISA对疫区黄牛进行血吸虫病检测,与三粪九检结果符合率高,具有灵敏度高、特异性好、简捷方便、费用低等特点,特别适用于疫区家畜血吸虫病的诊断、普查,是比较理想的现场检测方法,值得推广.血清学方法bpIHA和PAPS检测血吸虫病,尽管方法简便、费用低廉,但其灵敏度、特异性与三粪九检结果符合率低于血清学方法COPT,sIHA,三联Dot-ELISA,易造成漏检,假阳性,故在普查时,不建议采用.     

用间接血凝试验检测牛肺疫血清抗体的研究

本文试验结果表明:1、不同个体绵羊红细胞对间接血凝的敏感性有很大影响,在实际工作中应给予充分注意。2、间接血凝诊断液置4℃冰箱保存30d 效价无明显改变。3、用间接血凝方法检测85份血清样本,检出率为8/85,高于补体结合反应(2/85),重复性试验结果稳定。     

应用正向间接血凝试验检测山羊痘抗体

采用硫酸铵盐析、Sephadex G-200柱层析的方法纯化山羊痘病毒,以病毒抗原致敏绵羊红细胞建立了山羊痘正向间接血凝试验,并进行了最佳试验条件的摸索.结果表明,试验所制备的诊断液能与山羊痘参考阳性血清发生特异性凝集,其凝集现象能被山羊痘阳性抗原特异性抑制,与其它常见的动物病阳性血清无交叉反应.用本方法及琼脂扩散试验对山羊痘血清进行检测,IHA阳性检出率为89.1%（41/46）;而AGP阳性检出率为34.8%（16/46）.表明正向间接血凝试验比琼脂扩散试验敏感性高.本次试验制备的正向间接血凝试验诊断液可用于兽医临床上进行快速诊断.     

鱼病诊断技术

鱼病防治技术是水产养殖业的重要组成部分,鱼病诊断技术又是鱼病防治的基础,近年来国内随着鱼病防治工作的加强,人类医学上和动物医学上的一些技术用于鱼病的诊断。鱼病诊断技术正在向健康、快速、准确的方向发展。目前主要有以下几种诊断技术。1.荧光抗体技术(FAT、免疫荧光技术)在免疫学、生:是物化学和显微镜的基础上建立起来的一项技术。以荧光色素标记病鱼的抗原或抗体,与其相应的抗原或抗体相结合,在荧光显微镜下呈现一种特异性的荧光反应。该技术的优点是:特异性强,敏感性高,检出速度快。缺点是:非特异性染色尚未完全解决,结果判断…     

基于正向间接血凝试验评估口蹄疫抗体水平

有效控制口蹄疫关键在于早期检测,准确检测是防制口蹄疫的重要环节。本文采用正向间接血凝试验对某地乡镇散养户和规模化养殖场经猪O型口蹄疫苗免疫后的抗体水平进行了检测。结果表明:所抽检的70份样品血清中,免疫抗体效价达到1:32以上的共45份,合格率为64.3%,其中免疫抗体效价不合格的血清样品多来自散养户。结论 :从本试验来看,样本合格率仍不理想,有待于进一步改进免疫方法和条件。     

正向间接血凝试验监测家畜O型口蹄疫抗体

有效控制口蹄疫关键在于早期监测,准确监测是防制口蹄疫的重要环节。特对某地方乡镇散养、规模化养殖场采取牛、羊、猪的血清,利用正向间接血凝试验对家畜O型口蹄疫疫苗免疫抗体进行监测,了解家畜免疫效果。监测结果显示,该地方牛羊的口蹄疫疫苗免疫合格率平均为76%,猪的口蹄疫疫苗免疫合格率平均为60%;规模化养殖场较个体散养户免疫抗体效果好;牛口蹄疫O型灭活苗的免疫抗体效果好于牛口蹄疫AsiaⅠ-O型双价灭活疫苗的免疫抗体效果。     

间接血凝试验检测鸡传染性法氏囊病抗体研究

本试验用鸡传染性法氏囊病(IBD)弱毒抗原致敏绵羊红细胞(SRBC),通过间接血凝试验(IHA)检测了10份接种 IBD 疫苗后第35日龄鸡的血清,10份高免血清,10份未免疫健康鸡血清,并辅以对流免疫电泳(CIEP)相对照。结果 IHA 与 CIEP 的阳性符合率为94.7％,并通过鉴别试验和间接血凝抑制试验,证明此法具有很高的特异性。     

猪瘟免疫监测中微量间接炭凝与间接血凝的对比试验

猪瘟是一种常见病、多发病,临床发病较多,检测抗体仍然是实验室中常用的检测方法。为了验证微量间接炭凝集试验在监测猪抗体水平上的作用,我们进行了微量间接炭凝和间接血凝的对比试验。本试验采用炭凝抗原与血凝抗原,在U型板上检测待检血清。通过对比发现,微量间接炭凝集试验与在实践上推广应用的间接血凝有类似的效果,而微量间接炭凝集试验的抗原制作成本低廉,可以长期保存,经验证后有望在基层推广应用。     

新城疫免疫雏鸡抗体动力学的研究

本实验以血凝抑制(HI)试验和酶联免疫吸附试验(ELISA)为检测手段,对以点眼和滴鼻途径接种新城疫B_1系疫苗的无特定病原(SPF)雏鸡(1日龄首免、14日龄二免)进行血清抗体消长规律的测定,同时对两种试验结果进行比较,力图为制定合理的免疫程序提供理论依据,为ELISA在我国鸡新城疫群体免疫中的应用提供新资料。实验结果表明:新生雏鸡抗体产生系统发育迅速,4日龄即可在血液中检测到HI抗体,经两次免疫后,27日龄达最高值,HI抗体在2~4以上的持续期为50d。14日龄前,ELISA未能检测到ND特异性抗体,而HI试验能准确地反映ND抗体的消长规律,两试验无相关性。二免之后,两试验所反映的抗体消长规律基本相同,二者检测的血清抗体水平具有相对平行的关系,且ELISA的敏感性高于HI试验。在SPF雏鸡14日龄进行第二次免疫接种后的免疫应答中,Ig~G是其主要免疫球蛋白。     

应用酶联免疫吸附试验诊断猪痢疾的初步研究

以猪痢疾密螺旋体超声裂解冻融物作抗原进行酶联免疫吸附试验,测定了感染猪血清中的抗猪痢疾密螺旋体抗体。酶联免疫吸附试验最适条件为:抗原10微克蛋白/毫升,血清稀释度100倍左右,酶标结合物1000倍左右。对103份感染猪血清用酶联免疫吸附试验和平板凝集试验对比测定表明,两法呈高度正相关,而且前法多检出8.74%的阳性样品。酶联免疫吸附试验比平板凝集试验更敏感,有可能成为猪痢疾诊断的一种快速方法。     

抗麦草畏多克隆抗体的制备及其间接竞争ELISA检测方法的建立

为建立麦草畏的免疫分析方法,采用碳化二亚胺法将麦草畏(DIC)与卵清蛋白(OVA)和牛血清蛋白(BSA)偶联,分别合成免疫原与包被原;用合成的免疫原免疫新西兰大白兔获得抗麦草畏多克隆抗体,该抗体效价为1∶1.28×105,且该抗体与麦草畏的结构类似物2,3,5-三氯苯甲酸、2,3,6-三氯苯甲酸、2-氨基-3,5-二氯苯甲酸的交叉反应率均小于0.1%。以包被原1∶8 000和多抗溶液1∶80 000的稀释倍数为工作浓度,建立麦草畏间接竞争ELISA(ciELISA)检测方法,此方法检测麦草畏的线性范围为1～100ng.mL-1,线性回归方程为y=8.684 4ln x+15.001,R2=0.994 4,最低检测限为IC20=1.779ng.mL-1;玉米粉和面粉空白样品的麦草畏添加回收实验表明,麦草畏添加值为5～30μg.kg-1时,玉米粉中的麦草畏回收率为53.08%～92.37%,面粉的回收率则分别为66.5%～94.63%。