微小RNA对肠道健康的影响及作用机制

肠道既是机体营养物质消化吸收的主要场所,也是防御肠道微生物感染的先天性屏障,肠道健康是机体正常生长发育的关键。微小RNA(miRNAs)是基因转录后调控的重要因子。本文主要对肠道miRNAs表达情况,miRNAs在肠道细胞中的增殖、分化、凋亡,miRNAs在营养代谢、肠道屏障功能、肠道相关疾病进程调控中的作用以及肠道对外源miRNAs摄取等方面的研究进行综述,以期为相关研究的开展提供参考。     

丁酸钠调控畜禽动物肠道健康的作用机制

丁酸钠有效成分为丁酸,丁酸是大肠中产丁酸细菌的主要代谢物,是结肠上皮细胞的主要能量来源.丁酸钠可通过上调结肠表皮细胞生长因子的表达来促进上皮细胞增殖分化.在维持肠道黏膜结构完整、加强肠道免疫功能、促进肠道吸收功能等方面具有积极作用.此外,丁酸钠在调节肠道菌群、维持肠道微生态平衡方面也具有重要作用.本文主要综述了丁酸钠的...     

幼畜肠道miRNAs鉴定及其调控功能的研究进展

新生幼畜肠道是吸收初乳中免疫球蛋白等营养物质的主要器官,了解幼畜肠道发育的分子调控机制,对于改善幼畜肠道营养物质吸收和保障肠道生长、发育及健康等具有极其重要的意义。文章综述了幼畜肠道miRNAs的研究进展,特别关注了与幼畜肠道发育、免疫功能以及与肠道微生物间关系方面相关miRNAs的研究现状,以期为今后幼畜肠道miRNAs的研究和早期培育提供参考。     

金荞麦提取物对猪肠道上皮屏障因子和炎症因子的影响

为了解金荞麦提取物对猪肠道上皮屏障因子和炎症因子的影响,试验用60%乙醇提取金荞麦茎叶有效成分,培养猪小肠上皮细胞(IEC),用不同浓度金荞麦茎叶提取物(10、50、100、250μg/mL)处理IEC,48 h后刮取IEC,提取RNA,实时荧光定量RT-PCR测定肠道炎症因子TNF-α、IL-6、IL-8、IL-22、IL-10和肠道屏障相关因子ZO-1、Occludin的表达。结果:金荞麦茎叶提取物为黑色粉末或块状物,提取率为13.1%;不同浓度金荞麦提取物均可下调炎症相关基因的表达并显著升高抗炎因子IL-10的表达,肠道屏障相关因子ZO-1、Occludin的表达升高。结果表明:金荞麦茎叶乙醇提取物浓度为250μg/mL时可显著抑制肠道炎症因子,并强化肠道上皮细胞的紧密连接屏障。     

紧密连接蛋白在鱼类肠道屏障损伤中的研究进展

紧密连接（Tight junction,TJ）蛋白是一类构成细胞紧密连接结构的蛋白,主要包括跨膜蛋白和闭合小环蛋白（ZOs）,它们共同参与TJ的组成并发挥功能。TJ蛋白在肠道组织中表达广泛,在肠道机械屏障中发挥重要作用。文章通过对国内外报道进行梳理,在了解TJ蛋白结构与功能的基础上,分析影响TJ蛋白异常表达的因素,并基于TJ蛋白途径探究调控鱼类肠道损伤的策略,以期为调控鱼类等水产动物肠道健康提供参考。     

罗伊氏乳杆菌对仔猪空肠miRNAs表达谱的影响

试验旨在研究罗伊氏乳杆菌对仔猪空肠miRNAs表达的影响。选用1日龄健康约克×荣昌仔猪6窝,随机分为两组,每组3窝（共27头）。即对照组（每天每头灌喂0.1%的无菌蛋白胨溶液）,LR组（每天每头灌喂活菌总数为1.0×10¹⁰CFU的罗伊氏乳杆菌）,分别在10和20日龄,每组选取6头进行屠宰,采集空肠样品。通过Solexa高通量测序技术检测空肠miRNA的表达谱,利用生物信息学技术进行靶基因预测和功能分析。结果显示：1）试验构建了8个文库,共获得187 103 840条纯净reads序列,其中22 nt长度序列占的比例最大;2）10和20日龄分别鉴定出354和352个已知的miRNAs,其中有329个miRNAs共表达;3）灌喂罗伊氏乳杆菌组仔猪空肠miRNA差异表达,10和20日龄分别获得7和9个差异显著的miRNAs,ssc-miR-218在两个日龄中都差异表达;4）对差异表达的miRNAs进行靶基因预测和KEGG通路分析,发现有10 221个靶基因富集到293条通路上,有66条通路显著富集（P<0.05）,包括与肠道发育及免疫调控相关的MAPK和PI3K-Akt信号通路;5）随机挑选6个差异表达miRNAs进行荧光定量PCR验证,验证结果与测序结果基本一致。本研究表明,罗伊氏乳杆菌可能通过影响空肠miRNAs表达来调控有关肠道健康的信号通路。     

Occludin基因在猪肠道屏障中的研究进展

紧密连接蛋白与肠道疾病密切相关,由Occludin基因编码的蛋白质是紧密连接蛋白中具有代表性的蛋白之一,在维持肠道屏障功能完整中发挥重要作用。在猪肠道中,Occludin基因表达的下降会导致细胞膜通透性增加,使肠道屏障功能受损,从而引发多种肠道疾病。文章综述了肠道屏障的构成、紧密连接蛋白的分类及Occludin基因编码蛋白质的结构和生物学功能,介绍了Occludin基因在猪肠道中的表达情况和营养调控的研究进展,为预防猪腹泻、肠道炎症等疾病提供参考。     

表皮生长因子在荥经长毛兔肠道中的表达特征

应用免疫组化技术检测荥经长毛兔肠道各部位表皮生长因子(EGF)的表达水平和在各部位分布的位置,从而观察EGF在荥经长毛兔肠道的分布情况及其分布意义.结果显示,在荥经长毛兔的十二指肠、空肠、回肠、盲肠、结肠、直肠均发现有EGF表达,但在各部位的平均光密度值存在差异,在盲肠和结肠处的平均光密度值最高,回肠处最低.EGF主要分布在各肠道的固有层细胞的胞质中,除十二指肠的其他肠道部位均发现有部分EGF分布在肠黏膜上皮细胞胞质中,只有在空肠肠腺上皮发现有极少量的EGF分布.在肠道中EGF细胞的形态主要以圆形、椭圆形和不规则形为主,还有一部分为梭形.研究结果提示,EGF在荥经长毛兔肠道各部位表达水平和分布位置与其在肠道的作用相关.     

肉鸡肠道PepT1 mRNA表达的肠段差异性与发育性变化

选用遗传背景相同的1日龄父母代雄性Arbor Acre(AA)鸡和父母代雄性岭南黄肉雏鸡各120羽,采用相对定量RT-PCR方法,以30 d时岭南黄鸡肠道样品为模板,研究肉鸡肠道寡肽转运载体1(Peptide transporter 1,PepT1)mRNA表达的肠段差异性;以AA肉鸡和岭南黄鸡十二指肠和空肠样品为模板,研究不同品种肉鸡肠道PepT1 mRNA表达的发育性变化。结果显示:(1)岭南黄肉鸡肠道PepT1 mRNA的表达丰度从十二指肠、空肠、回肠到结直肠依次降低,其中十二指肠显著高于结直肠(P<0.05);(2)AA鸡和岭南黄肉鸡PepT1 mRNA在十二指肠及空肠中的表达具有相同的发育模式,16 d表达丰度最高,16~44 d逐渐下降,58 d略微回升;不同基因型之间PepT1 mRNA丰度比较,AA鸡和岭南黄肉鸡两品种间PepT1 mRNA的表达没有显著差异(P>0.05)。以上结果说明:(1)随着肠道空间位置的后移,岭南黄肉鸡肠道PepT1 mRNA的表达丰度逐渐降低,其中十二指肠的表达丰度显著高于结直肠(P<0.05);(2)不同品种肉鸡十二指肠及空肠PepT1 mRNA的表达具有相同的发育模式,且同日龄两品种间的表达丰度未见明显差异,表明PepT1 mRNA表达受到发育阶段的调控,但品种间具有稳定性。     

miRNAs参与肠道微生物和宿主免疫互作的调控

哺乳动物肠道微生物具有很强的宿主特异性,并在肠道健康中发挥着极其重要的作用。健康的微生物菌群有助于平衡肠道环境、维持肠上皮功能以及促进免疫系统发育,肠道微生物菌群的变化会影响免疫系统发育、新陈代谢等。在肠道微生物与宿主免疫调控中,miRNAs通过调节宿主基因表达来影响肠上皮的功能,并在先天性和适应性免疫系统的调节中起着重要作用。本文将重点阐述肠道微生物与宿主免疫的互作以及miRNAs参与下的调控机制。     

断奶应激引发仔猪肠道损伤及重建机制研究进展

肠道的发育与成熟状况是制约幼畜快速生长的关键因素。断奶是仔猪必须经历的一个应激过程,而断奶应激主要的靶点就是仔猪的肠道,特别是小肠的损伤尤为严重。因此,本文从仔猪肠道的形态和结构、肠道消化和代谢相关酶活性、肠道黏膜屏障、肠道功能基因和蛋白的表达及调控、断奶激活的肠道应激信号通路、应激蛋白家族在肠道中的差异表达等多个层面探讨断奶应激导致仔猪肠道损伤及重建的机制。为今后采用各种营养调控手段改善仔猪肠道健康、促进其快速生长提供理论基础和支持。     

miRNAs在日本血吸虫不同发育时期的表达情况研究

本研究基于前期对日本血吸虫体内miRNAs的高通量测序及免疫共沉淀研究结果,利用半定量RT-PCR技术对24个miRNAs在15、20、28 d的日本血吸虫雌雄虫体内的表达情况进行了检测,并进一步利用实时定量RT-PCR验证表达差异明显的miRNAs。结果表明bantam、miR-1989、miR-31这三个miRNAs的表达具有期特异性,且均在雌虫中高表达;miR-219在雄虫体内高表达;其余的miRNAs在各个时期均有表达,但表达情况没有明显差异。研究结果对深入理解这些miRNAs在日本血吸虫性成熟或者生殖产卵方面的功能奠定了基础。     

水牛泌乳期与非泌乳期乳腺组织miRNAs表达谱鉴定及差异表达分析

旨在鉴定分析水牛乳腺泌乳期和非泌乳期miRNA的表达谱和差异作用机制。采集水牛泌乳期和非泌乳期乳腺组织,利用Solexa测序技术构建2个时期miRNAs表达谱,鉴定前体miRNAs、成熟miRNAs和新miRNAs,分析miRNAs的第一偏好性核苷酸和染色体分布,发掘水牛泌乳期和非泌乳期高表达及差异表达miRNAs。结果显示,本研究构建了水牛泌乳期和非泌乳期乳腺组织2个miRNA表达谱,分别获得12 768 110和12 569 467条18~31nt的高质量序列。测序确认了归属259个miRNAs家族的359个成熟miRNAs和363个pre-miRNAs及5个水牛特有的miRNAs。U是19和25nt miRNAs的5′端最普遍的核苷酸。bbu-let-7b、bbu-let-7a、miR-26a和miR-21等miRNAs在2个时期均呈现高表达;bbu-miR-148a、143、200c、200a和bbu-let-7f等miRNAs在非泌乳期特异性高表达。bbu-miR-125b、29a和bbu-let-7c等miRNAs在泌乳期特异性高表达。bbu-miR-148a、143、200a、141和30a-5p等miRNAs在泌乳期的表达量下降为非泌乳期的1/2以下。而bbu-miR-26a、29a、125b、99a和bbulet-7c等miRNAs在泌乳期表达量大于或等于2倍非泌乳期丰度。本研究构建了水牛泌乳期以及非泌乳期乳腺组织2个miRNAs表达谱,测序确认了259个水牛miRNAs家族的359个成熟miRNAs和363个前体miRNAs,5个水牛特有miRNAs和10个高差异表达miRNAs,为进一步阐明奶水牛泌乳关键miRNAs作用机制奠定了基础。     

microRNAs在成年羊驼皮肤组织中的表达

本研究旨在分析成年羊驼皮肤中miRNAs的表达,探讨miRNAs在皮肤和毛囊中的调控作用.利用多物种miRNA芯片与成年羊驼皮肤组织miRNAs杂交,来分析成年羊驼皮肤组织中miRNAs的表达.结果显示有20个miRNAs信号在4个样本中表达量高,microRNAs在羊驼皮肤表达,提示它们可能参与了皮肤和毛囊的更新、生长和发育.     

新城疫病毒感染鸡胚组织miRNAs表达谱的测序及分析

为了阐明新城疫病毒(NDV)感染鸡胚后miRNAs表达谱的变化及NDV感染与宿主基因之间的相互作用,帮助寻找NDV防控的新靶点和方法。通过small RNA测序技术获得NDV强毒株(F48E9)和弱毒株(La Sota)感染的鸡胚内脏组织miRNAs表达谱。对差异表达的miRNAs进行分析发现,F48E9感染引起了33个miRNAs上调,31个miRNAs下调;La Sota感染引起36个miRNAs上调,25个miRNAs下调;La Sota与F48E9感染组比较,有27个miRNAs上调,22个miRNAs下调。选取10个差异表达miRNAs进行RT-qPCR验证,gga-miR-34a-5p、gga-miR-375、gga-miR-122-3p、gga-miR-187-3p、gga-miR-124a-3p、gga-miR-203a、gga-miR-205a、gga-miR-183、gga-miR-9-3p和gga-miR-451表达量与small RNA测序结果相似。对差异表达miRNAs进行靶基因预测和生物信息学富集分析发现,在NDV感染鸡胚时,差异表达的miRNAs主要参与调...     

绒山羊骨骼肌miRNAs及其靶基因表达谱分析

本试验选取了miR-1、miR-133、miR-24、miR-122、miR-103、miR-143、let7 7个miRNAs,旨在对其表达量及靶基因表达谱进行分析.选用4只绒山羊的背部和后腿肌肉提取RNA,反转录后,利用SYBR荧光定量PCR来检测各miRNAs的表达量,并采用靶基因指纹图谱(MTFP)技术获得各miRNAs的靶基因表达谱.结果表明,miR-NA表达量依次为:miR-1＞ miR-133＞ miR-24＞ let7＞ miR-143＞ miR-103＞ miR-122,其中miR-1和miR-133表达规律相似,且这7个miRNAs在成羊中的表达量均高于羔羊;此外,miRNAs表达量的差异还受性别影响,且miR-NA表达量与靶基因个数及其表达量之间具有相关性.对5个miRNAs的10个靶基因测序并比对,表明靶基因分别编码与信号转导、细胞周期等相关的蛋白.通过这7个miRNAs与其靶基因表达的分析,揭示了肌肉发育相关miRNAs及脂肪发育相关miRNAs在绒山羊骨骼肌中的异同,有利于绒山羊肉质基因的研究.     

大豆皂苷对吉富罗非鱼肠道菌群和肠道健康的影响

本试验旨在研究大豆皂苷对吉富罗非鱼肠道菌群和肠道健康的影响。以鱼粉为主要蛋白质源,配制粗蛋白质和粗脂肪含量分别为35%和8%的对照组饲料（G1组）;在对照组饲料中分别添加0.3%(G2组)和0.6%(G3组)的大豆皂苷（纯度为60%）,配制2种添加大豆皂苷饲料;此外,用40%的豆粕替代对照组饲料中27%的鱼粉（替代57.5%的鱼粉蛋白）（G4组）,配制1种添加豆粕饲料。4种试验饲料等氮等能,每种试验饲料饲喂3桶吉富罗非鱼,每桶放养40尾鱼,饲喂期为28 d。分别在养殖的第14天和第28天取样测定罗非鱼肠道菌群组成和肠道健康相关基因的mRNA相对表达量。结果显示：在第14天,G2、G3组的增重率（WGR）和特定生长率（SGR）显著低于G1和G4组（P<0.05）;G2、G3和G4组肠道中白细胞介素-8(IL-8)、白细胞介素-10(IL-10)、干扰素-γ(IFN-γ)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)和闭合蛋白4(CLDN4)的mRNA相对表达量与G1组相比显著上升（P<0.05）,且G2和G3组肠道中IL-8和CLDN4的mRNA相对表达量显著高于G4组（P<0.05...     

色氨酸调控生猪肠道屏障功能的研究进展

色氨酸是生猪日粮的第三限制性氨基酸，在调控采食、免疫、生长及肠道发育等方面发挥重要作用。在日粮中添加适量色氨酸，可以提高猪只的采食量、调控肠道屏障功能，也可以影响肠道氨基酸转运载体的表达。本文针对日粮色氨酸对生猪肠道屏障功能的影响进行了归纳总结。     

乳酸菌在肠道中介导MyD88特异性诱导RegⅢγ表达

为探明乳酸菌在肠道中特异性诱导RegⅢγ表达会否通过MyD88介导途经,本研究通过给SPF级Balb/c小鼠口服灌胃高、低2种剂量的混合乳酸菌,检测分析小肠与结肠MyD88、RegⅢγ表达水平及相关性。结果显示:灌胃相同剂量混合乳酸菌小鼠小肠与结肠中RegⅢγ、MyD88 mRNA表达量、蛋白水平及蛋白荧光强度基本相同,均高于对照组小鼠表达水平;灌胃不同剂量混合乳酸菌并不能引起Th17细胞增强反应,HE染色各组肠道均没有出现炎症症状。结果表明:乳酸菌能够在肠道不同区域通过MyD88途径特异性诱导RegⅢγ的产生,同时对Th17细胞起到双向调控作用以维护肠道内环境稳定。     

肠道树突状细胞的作用机制及益生菌对其影响

树突状细胞(dendritic cell,DC)是体内最大的专职性抗原提呈细胞,广泛的分布于胃肠道黏膜中,在维持肠道黏膜屏障、肠道免疫激活与耐受的平衡等方面起着重要作用。本文主要综述了益生菌对肠道DC的数量、成熟度、细胞因子表达的影响及相关信号转导通路的研究进展。